人附睾蛋白4(HE4)

HE4人附睾分泌蛋白.ppt

单一标志物
CA125 HE4 SMRP
CA72-4 Osteopontin
Activin Inhibin
良性疾病 vs 卵巢癌
ROC-AUC (95% CI)
83.6% (77.7 - 89.5) 90.8% (86.0 - 95.4) 82.4% (75.9 - 89.0) 77.5% (70.6 - 84.4) 64.8% (57.2 - 72.4) 69.1% (61.6 - 76.7)
定位在20号染色体长臂 12-13.1带该区带编码多个与肿瘤相关的 WFDC 成员。
HE4
在正常组织中表达
仅在正常人的附睾、呼吸道上皮细胞及生殖道表达。
在卵巢癌中表达
>90%浆液性卵巢癌中表达
在肺腺癌中的表达
在>60%的肺腺癌中的高表达在<10%的肺鳞癌中表达
HE4 抗原在卵巢癌中的表达
3. 某些妇科恶性肿瘤患者完全不表达CA125 临床需要更加敏感、更加特异的标志物来协助卵巢癌的早期诊断。
Human Epididymis Secretory Protein 4（HE4）的生化性质
作为人附睾特异性蛋白得以确认
Kirchhoff et al 1991
在卵巢癌中表达丰富，但在癌旁组织中不表达
HE4(人附睾分泌蛋白4) 卵巢癌的新型标志物
东方医院检验科陈芳
卵巢癌
发病率居女性生殖系统肿瘤第三位，但死亡率居第
一位；
2007年美国约22430例妇女患卵巢癌，其中15280 例死于卵巢癌，死亡率68％；
全世界每年新增病例190000，约114000例死亡。每 100,000 女性有2－15人发病。
CA125

人附睾蛋白4(HE4)评审

2）实验结果及评价：
线性验证误差（Error）3.8%<12.5%，在检测的0.0-1500.0 pmol/L范围内线性验证通过。
开展前项目性能验证——线性范围
开展前项目性能验证——参考区间
1）实验方案：
对待验证参考区间采集20份正常人血清标本，测定这些样本。每个待验证区间内的正常人测定结果中有≥90%的结果在待验证参考区间内，则验证通过。待验证区间：绝经前：0 -70.0 pmol/L 绝经后：0-140.0 pmol/L
2）实验结果及评价：
R2 =0.9653>0.95，符合要求，验证通过。
谢谢
国内应用的文献报道
陈洁晶, 吴英松, 宁云山, 等卵巢癌肿瘤标记物HE4 基因的分子克隆与蛋白表达[ J] ▪热带医学杂志, 2006, 6( 5 ) : 493- 4951
张文辉1, 吴少强，徐琦煜，等血清HE4检测在腹腔肿瘤诊断中应用价值研究▪中国卫生检验杂志2010年6月第20卷第6 期 Chinese Journal
开展前项目性能验证
1.精密度 2.线性范围 3.参考区间 4.正确度
开展前项目性能验证——精密度
1）实验方案：取2个浓度水平（一份高水平，一份低水平）的血清标本作为验证材料，将每个浓度水平的血清标本分成15个等份，-20℃冷冻保存；连续测定5天，每水平每天测定3次，每浓度水平获得15个数据。批间精密度应<1/3TEa。，该项目的 TEa是25%，精密度应<8.3% 2）实验结果及评价：低值：均值=54.53 pmol/L，CV%=4.5%，4.5%<8.3%，故验证通过
此项技术的国内准入情况
雅培HE4试剂盒于2014 年9月22日通过中国注册；

HE4(人附睾分泌蛋白4)

p-value AUC-ROC to CA125 + HE4 0.0176 0.0103 0.0019 0.0004 0.0027 0.5325 0.7472 0.5612 0.9805 0.7472 0.6869 0.8177
血清HE4 检测卵巢癌的总灵敏度
（% N=276）（对照为良性疾病）

罗氏HE4 样本用量少，检测速度快，检测范围宽和精密度高
标志物组合 CA125 HE4 SMRP CA72-4 Inhibin CA125 + HE4 CA125 + CA72-4 CA125 + HE4 + SMRP ROC-AUC 83 91 83 77 35 91 85 91 90% Specificity 59 77 61 42 7 81 61 80 95% Specificity 42 71 54 31 0 77 45 73 98% Specificity 23 62 44 23 0 68 31 70
卵巢癌风险评估
两种不同的评估方法：RMI 和 ROMA
RMI (恶性风险指数)
公式和得分 RMI = U x M x CA 125
U = 超声检查 M = 经期状态
ROMA (恶性风险计算方法）
绝经前:
PI = -12,0 + 2,38*LN[HE4] +0,0626*LN[CA125]
绝经后:
PI = -8,09 + 1,04*LN[HE4] + 0,732*LN[CA125]
CA125 + HE4 + CA72-4
CA125 + HE4 + Inhibin CA125 + HE4 + SMRP + CA72-4

HE4人附睾蛋白和CA125联合应用

• 恶性肿瘤，在卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌（腺癌）和间皮瘤表达升高 • 肿瘤的早期和晚期阶段，表达均升高
1 Bouchard D et al. Lancet Oncol 2006; 7, 167–74. 2 Hellström I et al. Cancer Res. 2003, 63, 3695–3700.
Escudero JM. Clin Chem 2011;57(11):1534-1544
HE4和CA125的联合应用
(1) HE4 + CA 125联合应用可减少生物标志物阴性卵巢癌的漏诊
CA125联合HE4可以减少30-50%单一生物标志物阴性卵巢癌的漏诊1 改善卵巢癌诊断和治疗监测的敏感性2
超过98% 表观健康女性HE4的水平< 140 pmol/L
%
90 80 70 60 50 40 30 20 10
0
0.0 - 70.0
70.1 - 140.0 140.1 - 500.0 500.1 - 1500.0
HE4 range in pmol/L
> 1500.0
Premenopausal Postmenopausal
HE4
生物学特点 1,2
乳清酸性蛋白家族(WAP家族) • 由2个乳清酸性蛋白域（WAP）和一个4-二硫中心 (WFDC2)组成 • 乳清酸性蛋白基因编码的13KDa的分泌性糖蛋白 • N-端糖基化： 20 - 25 kDa （ CA 125分子量 > 200 kDa !) 蛋白酶抑制剂家族 • 相应的底物和HE4的生物学功能未知 • 可能是抗菌、抗炎因子
• 多数卵巢癌HE4和CA125水平同时升高
• HE4和CA 125来源于不同的组织 - 某些卵巢癌，CA125显著升高 - 某些卵巢癌，HE4显著升高

人附睾分泌蛋白4在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

人附睾分泌蛋白4在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义目的：通过检测人附睾分泌蛋白4（HE4）在子宫内膜癌组织中的表达水平，观察HE4与不同临床及病理特征的相关性，探讨其在子宫内膜癌诊断、治疗及预后中的临床意义。

方法：应用即用型免疫组织化学染色两步法对32例经病理学证实为子宫内膜癌的石蜡标本进行HE4检测。

分析HE4表达与子宫内膜癌FIGO分期、病理类型、组织学分级、肌层侵犯深度、肿瘤的大小和年龄的关系等各组间的差异，分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系。

结果：（1）HE4阳性颗粒主要定位在细胞膜和细胞质上，在32例子宫内膜癌组织中的HE4的阳性表达率较高，为87.5%。

（2）HE4在组织学分级为高分化组的子宫内膜癌组织中的阳性表达率及强度均高于中低分化组（P＜0.05）。

（3）HE4蛋白在晚期子宫内膜癌组织中阳性表达率及表达强度均高于早期组（P＜0.05）。

（4）HE4蛋白在子宫内膜癌的阳性表达与年龄、病理分型、肌层侵犯深度及肿瘤大小均无关（P>0.05）；但在HE4强阳性表达程度方面，深肌层浸润者强阳性表达（61.5%）多于无深肌层浸润者（36.8%），其直径≥2 cm的肿瘤强阳性表达（61.1%）高于直径4分为阳性，>6分为强阳性。

病理切片分别由3位高年资病理医师轮流读片评定。

1.4 统计学处理运用SPSS 18.0统计学软件对HE4在不同子宫内膜癌组织中的表达差异进行相关性分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果2.1 HE4在子宫内膜癌组织中的表达HE4阳性颗粒主要定位在细胞膜及细胞浆上；着色呈棕黄色或棕褐色；视野内阳性细胞呈点、片状分布，见图1～5。

在32例癌组织中的HE4阳性13例（阳性表达率为40.6%），强阳性15例（阳性表达率为46.9%），总阳性表达率为87.5%。

2.2 HE4在不同临床病理特征的子宫内膜癌组织中的表达2.2.1 子宫内膜癌组织中HE4表达与组织学分级的关系HE4在组织学分级分别在高、中-低分化组的子宫内膜癌组织中的阳性表达率为62.5%、95.8%，两者比较差异有统计学意义（字2=8.253，P=0.004）。

人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值

人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值1. 引言1.1 研究背景慢性肾脏疾病是一种常见的慢性疾病，严重影响患者的生活质量和健康。

根据世界卫生组织的数据统计，全球有数百万人因慢性肾脏疾病而致残或死亡。

慢性肾脏疾病的发病和发展与多种因素相关，包括高血压、糖尿病、肾小球疾病等。

目前，慢性肾脏疾病的诊断和治疗仍然是一个挑战，因此需要寻找新的生物标志物来提高慢性肾脏疾病的早期诊断和有效治疗。

本文旨在系统综述HP4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值，为进一步研究和临床实践提供理论支持和参考。

1.2 研究目的本研究的目的是探讨人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值。

慢性肾脏疾病是一种常见的肾脏疾病，严重影响患者的生活质量和健康状况。

目前，传统的肾功能指标在慢性肾脏疾病的诊断和监测中存在一定的局限性，因此寻找新的生物标志物成为当前研究的热点之一。

2. 正文2.1 人附睾蛋白4的表达水平在慢性肾脏疾病中的变化HE4的表达水平在慢性肾脏疾病中的变化可能与其在肾脏病理过程中的作用有关。

一方面，HE4可能参与了肾小管损伤、间质纤维化等病理过程，从而促进了慢性肾脏疾病的发展。

HE4可能也起到了一种保护作用，通过调节细胞增殖、凋亡等生物学功能，参与了肾脏的修复与再生过程。

HE4在慢性肾脏疾病中的表达水平受到多种因素的调控，包括疾病的类型、病情的严重程度、个体差异等。

通过监测HE4的表达水平，可以为慢性肾脏疾病的诊断、治疗及预后评估提供重要参考。

未来的研究应该重点关注HE4在不同类型、不同阶段慢性肾脏疾病中的表达水平及其潜在的机制，以进一步揭示其在肾脏疾病中的作用。

2.2 人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病诊断中的应用除了在早期诊断方面的应用，人附睾蛋白4还可以用于监测慢性肾脏疾病的病情变化。

随着治疗的进行，人附睾蛋白4的表达水平也会发生变化，通过监测其变化情况，可以帮助医生评估治疗效果，指导进一步的治疗方案选择。

人附睾蛋白4课件

ppt课件.
HE4 可分泌入体液HE4是一种适宜的卵巢癌肿瘤标志物12
HE4 的临床研究结果
HE4 水平与年龄相关
表观健康女性不同年龄的HE4水平
ppt课件.
HE4 的临床研究结果
HE4 水平与年龄相关表观健康女性不
HE4的临床研究结果
健康女性HE4 水平<140 pmol/L
超过98% 表观健康女性HE4的水平< 140 pmol/L
HE4生物学特点 1,2乳清酸性蛋白家族(
HE4
生物学特点 1,2
生理情况下，在以下组织表达生殖系统上呼吸系统乳腺上皮肾脏远曲小管结肠粘膜胰腺
恶性肿瘤，在卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌（腺癌）和间皮瘤表达升高肿瘤的早期和晚期阶段，表达均升高
1 Bouchard D et al. Lancet Oncol 2006; 7, 167–74.2 Hellström I et al. Cancer Res. 2003, 63, 3695–3700.
Sens at 95% Spec AUCCA 125 43.3% 0.84 HE4 72.9% 0.91CA 125+HE4 76.4% 0.91
卵巢癌肿瘤标志物联合检测
ppt课件.
Sens at 95% Spec AUC卵巢癌肿瘤标志
HE4和CA125的联合应用
ppt课件.
内容卵巢癌26ppt课件.
HE4的临床表现
用于卵巢癌的监测
HE4与疾病状态序列配对研究 (100例患者)
HE4的水平变化
进展
未进展
合计
> 20%
29
52
81
≤ 20%
21
273
294

人附睾蛋白(HE)资料重点

%
90 80 70 60 50 40 30 20 10
0
0.0 - 70.0
70.1 - 140.0
140.1 - 500.0 500.1 - 1500.0
HE4 range in pmol/L
> 1500.0
Premenopausal Postmenopausal
HE4在良性疾病的水平
妊娠妇女HE4 < 70 pmol/L 某些非妇科疾病，主要肺部疾病，偶见HE4> 140 pmol/L
卵巢癌的生物标志物
CA 125 –不完美的 “金标准”
• 认为是卵巢癌诊断的“金标准”（联合经阴超声检查）
• 敏感性低：只有50%的 I期卵巢癌和80%的上皮性卵巢癌出现CA125的升高1
• 特异性低：妇科良性疾病和其他系统恶性疾病也可出现 CA125的升高1,2
• 某些妇科恶性肿瘤患者完全不表达CA125
22 (46.8%)
19 (41.3%)
5 (21.7%)
3 (25.0%)
7 (17.9%)
19 (19.6%)
20 (40.8%)
19 (40.4%)
20 (43.5%)
7 (30.4%)
4 (33.3%)
13 (33.3%)
34 (35.1%)
9 (18.4%)
5 (10.6%)
6 (13.0%)
•I期为局限性卵巢癌
早期如何正确的诊断卵巢癌
现存诊断流程难以作出正确诊断
盆腔肿块和/或腹水, 腹胀和/或
早期症状表现不明显或缺乏特异性，例如出血、盆腔或腹部疼痛，泌尿系统症状
• 家族史 • 腹部/盆腔检查 • CA-125 • 经阴超声检查 • CT • 胸片 • 胃肠功能评估 • 血常规 • 生化检查

he4的正常参考值范围

he4的正常参考值范围
1、he4的参考值范围
He4的正常参考值范围指的是在医学诊断中，血液中空腹清晨血清He4的含量是多少？一般来说，男性的He4的参考值范围是0.11-0.55umol/L，女性的参考值范围是0.12-0.61umol/L。

2、he4的功能
He4是一种重要的代谢物，主要由肝脏分泌，具有调节血糖、脂质代谢以及生长发育等多项功能，He4在体内具有重要的作用，它可以促进蛋白质的合成，并可以调节脂肪分解，减少脂肪在体内的沉积。

3、he4的异常情况
低He4表明有某些代谢障碍，可能会导致肝脏功能不良，也可能是由于病毒感染导致的肝炎造成的。

此外，当He4水平升高时，还可能是由于糖尿病、肾脏疾病、肝脏疾病等所致。

4、he4的检测方法
He4的检测方法主要是通过血液检测来测定。

血液检测技术主要应用于检测血清He4水平，以及血清中其他相关物质的水平，以及酶学测定等，可以更好地了解病人的病情，以便及时给予治疗。

人附睾蛋白

Escudero JM. Clin Chem 2011;57(11):1534-1544
S
8500
R
S
PD
PD
S
2300 2200 2100 2000 1900 1800 1700 1600 1500 1400 1300 1200 1100 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0
HE4与疾病状态序列配对研究 (100例患者) HE4的水平变化进展未进展合计
> 20% ≤ 20% Total
29 21 50
52 273 325
81 294 375
58.0% (29/50) H4未出现阳性变化的患者，卵巢癌未进展
与病理组织分型有关
不同病理组织分型的卵巢肿瘤的HE4水平
a b
卵巢癌组与交界性卵巢上皮肿瘤和良性卵巢上皮肿瘤比较， P<0.05, P<0.01 交界性卵巢上皮肿瘤与良性卵巢上皮肿瘤，P<0.05
陈霞等. Labeled lmmunoassays &Clin Meal, 2010
（2）用于卵巢癌的监测
卢仁泉等. 中华检验杂志，2009，第32卷，第12期
随访测定时间（月）
目录
一.卵巢癌二.HE4的临床意义三.HE4与CA125的联合
HE4优于CA125
特异性和敏感性更高
正常人群HE4的阳性率为1.1%，低于CA-125的阳性率（9.9%）仅有1.3%的卵巢良性疾病HE4增高，而CA125的阳性率为 33.2% 其它恶性肿瘤HE4也会增高，特别是肺癌，但是其阳性率大多低于CA125 不管是以所有恶性肿瘤组作为对照，还是以卵巢良性疾病作为对照，HE4诊断卵巢恶性肿瘤的准确性均优于CA125 HE4比CA125更早发现早期卵巢癌和无症状卵巢癌，监测阶段更早的发现肿瘤的复发和转移受肾功能影响的程度要稍小于CA125

人附睾蛋白4HE4试剂盒使用方法

人附睾蛋白4（HE4）试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T2 pmol/L -55pmol/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中附睾蛋白4（HE4）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人附睾蛋白4（HE4）水平。

用纯化的人附睾蛋白4（HE4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入附睾蛋白4（HE4），再与HRP 标记的附睾蛋白4（HE4）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的附睾蛋白4（HE4）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人附睾蛋白4（HE4）浓度。

试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（96 pmol/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

48 pmol/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液24 pmol/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液12 pmol/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液6 pmol/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液3 pmol/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

肿瘤标志物人附睾蛋白4HE4和CA125在卵巢癌诊断中的临床应用

肿瘤标志物人附睾蛋白4HE4和CA125在卵巢癌诊断中的临床应用目的对肿瘤标志物人附睾蛋白4（HE4）和CA125在卵巢癌诊断中的作用进行研究。

方法用化学发光法测定肿瘤标志物人附睾蛋白（HE4）和CA125在血清内的含量并比较分析，研究二者在卵巢癌诊断中的特异性和敏感度。

结果卵巢癌组HE4阳性（12/18）例，阳性率为66.7%，盆腔良性疾患组HE4阳性（6/58例），阳性率为10.3%，两组间有显著性差异（P＜0.05），卵巢癌组CA125阳性（14/18例），阳性率77.7%，盆腔良性疾患组CA125阳性（20/58例），阳性率为34.4%，两组间有显著性差异（P＜0.05），正常对照组CA125测定有2例为阳性，阳性率4%。

结论人附睾蛋白4（HE4）在卵巢癌诊断中的的特异性较高于糖原抗原CA125，若将这两个肿瘤标志物联合测定会提高卵巢癌诊断率，降低误诊率。

标签：人附睾蛋白4 ；卵巢癌；临床应用卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，其发病率在女性生殖系统肿瘤中占第3位，死亡率居妇科恶性肿瘤之首。

90%的早期卵巢癌患者能够存活5年以上，而已发生转移的晚期卵巢癌患者5年生存率往往不足30%[1]。

目前临床诊断卵巢癌仅有糖类抗原CA125检测，但CA125在其他妇科疾患如子宫内膜异位症、盆腔炎等也有高的表达，所以应用CA125诊断卵巢癌假阳性率较高。

人附睾蛋白4（HE4）是一种新的肿瘤标志物，国内外已有将血清HE4检测应用于卵巢癌诊断和治疗效果监测的研究报告。

尤其是与CAl25联合检测，能够大大提高早期卵巢癌的检出率[2-3]。

本文就HE4和CA125在卵巢癌诊断中的价值进行探讨。

1 资料与方法1.1一般资料选择我院妇产科自2010年1月～2012年12月盆腔肿物住院患者76例，年龄为25～65岁，平均年龄为43.5岁。

按病理切片结果分为：①卵巢癌组18例；②盆腔良性疾患组58例（其中子宫内膜异位症23例，盆腔炎3例，附件炎3例，妊娠5例，卵巢良性肿瘤18例）。

人附睾蛋白4HE4试剂盒使用方法

人附睾蛋白4（HE4）试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T2 pmol/L -55pmol/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中附睾蛋白4（HE4）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人附睾蛋白4（HE4）水平。

用纯化的人附睾蛋白4（HE4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入附睾蛋白4（HE4），再与HRP 标记的附睾蛋白4（HE4）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的附睾蛋白4（HE4）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人附睾蛋白4（HE4）浓度。

试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（96 pmol/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

48 pmol/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液24 pmol/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液12 pmol/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液6 pmol/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液3 pmol/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

人附睾蛋白4（he4）在恶性肿瘤中的表达与临床进展

●综述●人附睾蛋白4（HE4）在恶性肿瘤中的表达与临床进展★唐雨曦1，罗晨辉2，王瑛2，王静2*（1南华大学，湖南衡阳，421001；2湖南省肿瘤医院/中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院，湖南长沙，410013）摘要：人附睾蛋白4（human epididymis protein-4，HE4）是具有免疫保护作用的蛋白酶抑制剂家族的成员，可在血清及组织中检测到其表达，在正常组织中呈低表达，在肿瘤组织中呈高表达。

目前，国内外已有多项研究表明HE4与卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌、膀胱癌等肿瘤有关，且其敏感度与特异性均优于CA125，美国FDA已批准将其作为一个新的肿瘤标志物用于卵巢肿瘤的疗效及复发的监测。

本文主要对HE4在各种恶性肿瘤中的表达与临床应用进展进行综述。

关键词：人附睾蛋白4；卵巢癌；子宫内膜癌；肿瘤标志物中图分类号：R730.3 文献标识码：A　文章编号：2095-1264（2015）02-0087-05d oi：10.3969/j.issn.2095-1264.2015.017Expression of Human Epididymis Protein 4 in Cancerand its Clinical Progress★TANG Yuxi1, LUO Chenhui2, WANG Ying2, WANG Jing2*(1University of South China, Hengyang, Hunan, 421001, China; 2The Affiliated Cancer Hospital of XiangyaSchool of Medicine, Central South University, Changsha, Hunan, 410013, China)Abstract: Human epididymis protein 4 (HE4) is one member of the protease inhibitor family which have the immune protective effect. It can be detected in serum and tissues, presenting low expression in normal tissues but over expression in tumor tissues. Nowadays, numerous studies showed that HE4 has relationship with ovarian cancer, endometrial cancer, lung cancer and bladder cancer, etc. Besides, since it has a higher sensitivity and specificity than CA125, HE4 has been ap-proved by FDA as a new tumor marker for diagnosis of ovarian cancer in early stage. In this article, we reviewed the expres-sion patterns of HE4 in various malignant neoplasms and its clinical application progress.Key words: HE4; Ovarian cancer; Endometrial cancer; Tumor maker前言人附睾蛋白4（human epididymis gene product 4，HE4），又名WFDC2（WAP four-disulfide core protein 2），是近年来被热点研究的新型肿瘤标志物之一，已在国内外应用于临床。

人附睾蛋白测定(HE4) 项目简介

人附睾蛋白测定（HE4）项目简介
人附睾分泌蛋白4（HE4）是卵巢癌检测敏感性较高的肿瘤标志物，特别是早期无症状的I期卵巢癌，敏感性可达49%。

HE4基因在>90%浆液性卵巢癌中表达，在上皮性及透明细胞性卵巢癌中高表达，但在粘液性、生殖细胞及性索卵巢癌中几乎不表达。

临床意义：
1、作为辅助手段用来监控上皮性卵巢癌患者的疾病复发或恶化情况。

此外，HE4还可以联合CA125测定用来辅助评估存在盆腔肿块的绝经前和绝经后妇女患有上皮性卵巢癌的风险和肿块属于良性还是恶性。

2、对侵袭性上皮细胞型卵巢癌患者的治疗反应的辅助监控。

测定结果应与其他卵巢癌治疗监控的临床方法联合使用。

适检情况：
1、卵巢癌高危人群（癌症家族史等）检测
2、辅助判断盆腔肿块良恶性
3、卵巢癌病人检测，监测卵巢癌的疾病状态，疗效监测
标本采集要求：
用无菌干燥管采血后及时分离血清1.5ml，2-8℃保存，当天送检。

临床项目收费标准：。

血清人附睾蛋白4和糖类抗原125对诊断上皮性卵巢癌的比较研究

血清人附睾蛋白4和糖类抗原125对诊断上皮性卵巢癌的比较研究目的比较人附睾蛋白4（HE4）与糖类抗原125（CA-125）对诊断上皮性卵巢癌的临床应用价值。

方法分别采用酶联免疫法和电化学发光法检测32例上皮性卵巢癌和62例良性卵巢肿瘤患者（良性组）血清HE4及CA-125水平，ROC 曲线比较分析二者对上皮性卵巢癌诊断的准确性。

结果卵巢癌患者血清HE4及CA-125水平中位数显著高于良性组（P＜0.05）；良性组中卵巢子宫内膜异位症患者的CA-125水平中位数显著高于其他良性肿瘤患者（P=0.03），但HE4无明显变化（P=0.49）。

ROC曲线分析显示，HE4和CA-125对卵巢癌的最佳诊断切点分别为76.0pmol/L、37.45 U/mL；血清HE4、CA-125用于卵巢癌诊断时ROC 曲线下面积分别为0.93、0.85，两者比较有显著性差异。

结论与CA-125相比，HE4对诊断上皮性卵巢癌具有更好的准确性和可信度。

标签：附睾蛋白4；糖类抗原125；上皮性卵巢癌；比较研究卵巢癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，起病隐匿，早期临床症状不明显。

据2003～2007年我国肿瘤登记地区资料表明，城乡卵巢癌发病率和死亡率均呈上升趋势[1]。

但卵巢癌若能被早诊断和早治疗，则患者的5年生存率可升高至94%[2]。

因此，寻找有效的早期诊断卵巢癌的血清肿瘤标志物有极其重要的意义。

目前，卵巢癌术前诊断和病情监测的首选血清标志物是糖类抗原125（CA-125），但特异性低，限制了其临床应用。

人附睾蛋白4（HE4）是近年来国内外卵巢癌研究的热点，但有报道[3，4]，HE4不仅在卵巢癌组织表达，在其他肿瘤如肺腺癌、肾癌、胰腺癌等也有表达。

为了明确血清HE4对卵巢癌的诊断意义，本研究拟通过比较患者血清HE4和CA-125水平变化及二者的诊断敏感度和特异性，进而阐述HE4在卵巢癌早期诊断的临床应用价值。

1 资料与方法1.1一般资料选择2010年12月～2013年8月本院妇产科收治的卵巢疾病患者为研究对象。

肿瘤标志物HE4指标检测

肿瘤标志物HE4指标检测卵巢癌是常见的女性生殖器官恶性肿瘤，在女性恶性肿瘤中其发病率第三，然而因其发现时大多处于晚期、预后差且复发率高，其死亡率却位居首位！人附睾蛋白4（HE4）是一种新型的卵巢癌特异性肿瘤标志物，其特异性和灵敏度高于CA125。

HE4是由WFDC2基因编码的，分子量为25kD左右的分泌型糖蛋白，主要在卵巢上皮癌、子宫内膜癌中过量表达，在肺癌和胃癌中也有一定阳性率。

HE4的过量表达可促进卵巢癌细胞的增值、浸润和转移。

HE4与卵巢癌HE4的过量表达与卵巢癌细胞的增值、浸润和转移密切相关。

Moore等及Wang等的报道认为HE4与卵巢癌细胞的粘附、迁移、增殖、肿瘤的生长及化疗抗性等密切相关，可能与表皮生长因子、血管内皮生长因子及胰岛素有关。

Zhu等通过全基因组测序，也显示HE4对卵巢癌增殖和转移具有重要作用，同时提出可考虑将HE4作为新的治疗靶点。

也有个别研究得出相反结果，认为HE4在卵巢上皮癌（EOC，卵巢癌的主要形式）的发展过程中可能会起抑制细胞增殖的保护性作用。

HE4用于卵巢癌的早期诊断HE4用于卵巢癌诊断的灵敏度明显高于CA125，尤其是在早期。

卢仁泉等对2007-2009年间包括116例EOC患者、40例良性卵巢疾病患者、61例其他肿瘤患者及100名健康者血清的HE4水平进行了测定。

结果发现，EOC患者的血清HE4水平显著高于健康对照组、良性卵巢疾病组及其他肿瘤组，各组的浓度水平依次为：140.0 pmol/L、38.6 pmol/L、39.6 pmol/L以及39.9 pmol/L。

HE4对EOC诊断的灵敏度为72.4%，特异度为90.1%，准确性83.6%，阳性和阴性符合率分别为80.8%和85.0%，可见HE4完全可满足EOC辅助诊断的要求。

朱振宁等比较研究了HE4和CA125用于卵巢癌早期诊断的差异。

结果显示，在早期卵巢癌组中，HE4水平显著高于健康对照组及良性肿瘤组，具有统计学意义（P＜0.05），而CA125水平在早期卵巢癌组和良性肿瘤组中无显著差异，而此前Moore等此前也曾报道HE4是鉴别卵巢癌和良性肿瘤的最好指标。

人附睾蛋白4ppt课件

整体一致性: 80.5% (302/375)
（3）反映卵巢癌手术的效果
HE4的临床意义
（1）改善盆腔肿块诊断的敏感性
来源于不同文献盆腔肿块良性VS.卵巢癌 (所有分期) 的敏感性比较特异性= 95 % (绝经前和绝经后)
Huhtinen et al, 2008 1 Moore et al, 2008 2
HE4
1Huhtinen, 2 Moore,
K. et al. J. Cancer, 2009, 100, 1315-1319. R.G. et al. Gynecologic Oncology, 2009, 112, 40-46.
CA 125 –不完美的 “金标准”
CA 125 认为是卵巢癌诊断的“金标准”（联合经阴超声检查）
●敏感性低：只有50%的 I期卵巢癌和80%的上皮性卵巢癌出现CA125的升高1 ●特异性低：妇科良性疾病和其他系统恶性疾病也可出现CA125的升高1,2 ●某些妇科恶性肿瘤患者完全不表达CA125
早期诊断生存率大大改善
上皮性卵巢癌5年生存率%
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
Stage I
I期为局限性卵巢癌
●超过70%在确诊时已经处于晚期 ●局限性卵巢癌（病灶局限在卵巢）的5年生存率： 75 - 95%
●发生远处转移的5年生存率：10-17%
Stage II
Stage III
Stage IV
生理情况下，在以下组织表达生殖系统上呼吸系统乳腺上皮肾脏远曲小管结肠粘膜胰腺
恶性肿瘤，在卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌（腺癌）和间皮瘤表达升高肿瘤的早期和晚期阶段，表达均升高
HE4 的临床研究结果

200
500
Architect CA125II (U/mL)
HE4 EIA (pM)
100
0
0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11
S
105
MoSnths from Initial Draw
PD
105
100
100
95
95
90
90
85
85
80
80
75
75
70
70
65
65
60
60
55
55
50
50
45
45
40
40
-20.00%
-40.00%
-60.00%
-80.00%
-100.00%
-120.00%
EOC patients with sugerical therapy
手术治疗的25例EOC,手术后病情基本缓解
•血清的HE4水平出现阴转：21例，符合率为84%(21/25)，
•HE4水平降低-20%左右：3例*
HE4: 分期较早卵巢癌的早期诊断
CA125: 对晚期卵巢癌有较好的临床意义
HE4与CA125联合应用
(3) 更好的鉴别诊断子宫内膜异位症
1 Moore RG et al. Gynecologic Oncology 2008, 111, 402–408 2 Allard WJ et al. Clinical Laboratory International 2009, 3, 20-21
HE4与CA125联合应用
(2) 早期发现尚处于早期阶段的卵巢癌