槲皮素体系总结

合成的内容：

DMF中槲皮素-Al紫外光谱图

DMF中槲皮素-Al荧光光谱图

乙醇中槲皮素-Al紫外光谱图

乙醇中槲皮素-Al荧光光谱图合成的膜易碎，而且极不均匀。

DMSO 中槲皮素-Al紫外光谱图

DMSO 中槲皮素-Al 荧光光谱图

反应温度优化实验：

反应时间优化实验：

反应过程中交联剂的量的优化实验：

反应过程中溶液体积优化实验：

吸附条件：

吸附溶剂的种类：包括吸附溶剂中储备液溶剂的选择。

吸附的震荡速度：

吸附溶剂的量：

吸附的时间：

选择性和干扰的实验：选择物质：

1 引言

槲皮素(3 , 3 , 4 , 5 , 7-五羟基黄酮，Quercetin)，又名栎精，是一种具有抗氧化、抗病毒、抗肿瘤和调节免疫功能等多种生物活性的天然黄酮类化合物[]，是金银花、槐米、三七、银杏等多种常用中药材和天然产物中的有效成分之一。槲皮黄素，溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。可作为药品，具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用。用于治疗慢性支气管炎。对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

RF-5301PC荧光分光光度计(日本岛津公司)；HGC-12十二口氮吹仪(上海泉岛

公司)；NETZSCH TG-209热重分析仪(德国耐驰公司)；NICOLET AVATAR 330傅立叶红外光谱仪(美国热电公司)；Hitachi S-4300电子扫描显微镜(日本Hitachi公司)；UV-3150紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)；pH计(海精密科学仪器有限公司)；氮气(广钢集团广州气体厂有限公司)；超声波清洗器(天津市奥拓塞恩斯公司)；烘箱(天津市华北仪器有限公司)；真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；恒温水浴振荡槽(上海一恒科技有限公司)。

聚丙烯膜(上海泽涛实业有限公司，孔径0.45 μm，厚度200 μm)；分析纯甲基丙烯酸(MAA)和偶氮二异丁腈(AIBN) 购自天津大茂化学试剂厂；化学纯丙烯酰胺(AM)购自广东汕头西陇化工厂；4-乙烯基吡啶(4-Vpy，纯度≥99%)购自美国Sigma–Aldrich公司；工业用乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRIM)购自广州市千湖贸易有限公司；分析纯N,N-二甲基甲酰胺(DMF)来自广州化学试剂公司；所有水溶液均以超纯水(Millipore纯化系统制)配制；其它试剂均为分析纯；盐酸购自，分析纯氢氧化钠购于，乙酸钠水溶液的pH值以盐酸或氢氧化钠(天津大茂化学试剂厂)调节。

3.2.3 槲皮素配位印迹传感器的制备

支撑底材聚丙烯膜(PP)以无水乙醇震荡清洗1h，氮气吹干后保存于干净样品袋中待用，聚丙烯膜在制备配位印迹传感器前新鲜处理。

准确称取169.3 mg Qu、133. 3 mg无水AlCl3和0.086 mL MAA于磨口平底瓶中，加入10.00 mL DMF，充分超声溶解后于室温下放置12 h；再加入1.89 mL EGDMA 和37.8 mg AIBN，充分摇匀，然后超声脱气 5 min，得到预聚溶液。将预聚溶液置于干净培养皿中，放入一片4.5×2.0 cm2的玻璃纤维膜，浸泡60 min后取出；以两片盖玻片夹住吸附了聚合溶液的玻璃纤维膜，形成“三文治”结构，然后转移至70 mm×35 mm的平底称量瓶内；向称量瓶中通入氮气5 min，用磨口玻璃盖和密封带密封瓶口，放入烘箱中，在适当温度下热引发聚合10 h。聚合完成后，将涂布有CIP的玻璃纤维膜从称量瓶中取出，小心揭掉盖玻片后以甲醇/乙酸(v/v=9:1)、无水乙醇洗脱模板分子、金属铝、未反应的功能单体和交联剂等。在制备配位印迹膜状传感器(CIM-sensor)同时制备了用于对照的分子印迹膜状传感

器(MIM-sensor)和非印迹膜状传感器(NIM-sensor)，MIM-sensor除不加入金属铝、NIM-sensor除不加入模板分子和金属铝外，制备及处理方法与CIM-sensor相同。

2.4 槲皮素配位印迹传感器的表征

采用扫描电镜研究槲皮素CIM-sensor的表面结构及形貌特征。

洗脱干净的CIM、MIM和NIM涂层聚合物材料分别与溴化钾混合均匀，在红外灯下干燥，压片后进行红外光谱表征和对比，观察3种涂层的化学结构采用热重分析仪研究CIM、MIM和NIM涂层聚合物材料的热稳定性。温度范围为30-800℃，升温速度为10℃/min，氮气气氛下测试。

采用水、四氢呋喃、甲醇、无水乙醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、二甲亚砜DMSO、二甲基甲酰胺DMF及10％(v/v)乙酸-甲醇溶液考察水杨酸CIM-、MIM-和NIM-sensor的耐溶剂性能。在振荡频率为90 Hz 下使3种传感器浸在各种溶剂中8 h，观察是否出现开裂或脱落现象，评价3种传感器的耐溶剂性。

2.5 槲皮素配位印迹sensor-FL分析方法

固体表面荧光检测条件如下：扫描范围300-700 nm；扫描速度very fast；灵敏度High；狭缝宽度3或5 nm；激发波长Ex=442 nm，发射波长Ex=484nm。

CIM-sensor识别流程如下：将一张CIM-sensor剪成1.50×2.00 cm2的小片(每张可剪成2小片)，量取5.00 mL待测溶液加入40 mm ×25 mm的称量瓶中，使溶液浸没sensor；在机械振荡(频率100 Hz)下吸附识别40 min，取出后以无水乙醇清洗CIM-sensor表面两次；氮气吹干，然后将CIM-sensor固定在荧光仪的样品架上，与入射光源成45°角；另一边与sensor成45°的检测器接收CIM-sensor的固体表面荧光从而得到响应值。CIM-sensor吸附槲皮素或其结构类似物的量通过相应的荧光响应值来计算。

3.2.6 槲皮素配位印迹sensor的识别性能研究