细菌的分类(G+和G-)
病原微生物第三章 常见病原性细菌的整理笔记
病原微生物第三章常见病原性细菌的整理笔记球菌：球菌是细菌中的一大类，根据革兰染色可分为G+和G-两类，对人致病的球菌主要有葡萄球菌、链球菌及淋球菌，此类球菌能引起化脓性炎症，所以又称为化脓性球菌。
葡萄球菌：生物学性状：1、形态与染色：典型的葡萄球菌呈球形，直径0、4-1、2Hm，通过染色，在显微镜下可看到葡萄串样的排列。
革兰染色阳性，无鞭毛和芽孢。
2、培养特性：营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37摄氏度，最适ph为7、4左右。
3、分类：金黄色葡萄球菌(产金黄色色素，致病性较强)；表皮葡萄球菌(产生白色或柠檬色色素)。
4、抵抗力：葡萄球菌的抵抗力較强；致病性：金黄色葡萄球菌可通过伤口、裂口以及消化道而感染，其产生的毒素和酶主要有血浆凝固酶、溶血毒素、肠毒素和杀白细胞等，所致疾病有：化脓性感染；食物中毒；假膜性肠炎防治原则：加强卫生宣传教育：注意个人卫生：及时处理伤口，避免感染。
链球菌：化脓性球菌中的另一大类细菌，此类细菌种类多，型别复杂，广布于自然界和人与动物的咽腔、胃肠道等部位。
生物学性状：1、形态与染色：显微镜下观察到呈球型或卵圆形，链状排列；革兰染色阳性。
菌体无芽孢和鞭毛，有的可以形成由透明质酸组成的荚膜；2、培养特性：营养要求较高，需要在含有血清、血液的培养基上生长。
生长温度37摄氏度，最适ph为7、4左右3、分类(根据溶血能力和溶象)分为三类：甲型溶血性链球菌：乙型溶血性链球菌；丙型链球菌：4、抵抗力：抵抗力不强，60 摄氏度30min可杀死，对消毒剂敏感。
致病性：致病性链球菌课通过直接接触、飞沫吸入或皮肤、黏膜等伤口侵入机体，产生多种毒素和侵袭性酶，所致疾病有：化脓性感染：猩红热；链球菌性变态反应疾病。
防治原则：注意环境卫生，对病人和带菌者及早治疗，减少传染源。
淋病奈瑟球菌：简称淋球菌，是我国目前发病人数最多的性传播性疾病(STD, 性病) 淋病的病原体。
简述革兰氏染色机理
简述革兰氏染色机理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，通过这种方法可以将细菌分为两大类：革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）。
以下是革兰氏染色的机理：
1、脱色：革兰氏染色过程中的关键步骤之一是脱色。
在经过结晶紫初染和碘液媒染后，G+菌和G-菌都呈现深紫色。
此时，通过在酒精或其他脱色剂中短暂停留，可以将G-菌的细胞壁中的脂质成分溶解，使得脱色剂更容易进入细胞内部，将其染成无色或浅色。
而G+菌由于其细胞壁结构较为坚韧，不易被脱色剂渗透，因此保持深色。
2、复染：在脱色后，通过施加沙黄或其他染料进行复染，使所有细菌都被染上颜色。
由于G-菌已被脱色至无色或浅色，因此沙黄会使其呈现红色。
而G+菌由于未被脱色或仅被部分脱色，呈现深紫色或蓝黑色。
3、结果观察：通过显微镜观察染色后的细菌，可以看到G+菌呈蓝紫色，而G-菌呈红色。
这一差异是由于革兰氏染色过程中对细胞壁脂质成分的处理和脱色剂的渗透能力不同所致。
革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的差异，特别是脂质含量的差异。
G+菌的细胞壁富含肽聚糖，不易被脱色剂渗透，而G-菌的细胞壁中含有较多的脂质，使得脱色剂能够更好地进入细胞内部。
此外，革兰氏染色还涉及到结晶紫和碘液等染料的结合和吸附性质的不同，进一步增强了G+菌和G-菌在染色过程中的颜色差异。
总之，革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的结构和化学成分差异，通过脱色和复染等步骤，将细菌分为G+和G-两大类，为后续的细菌鉴定和分类提供重要依据。
细菌的分类及命名
细菌分类学包括分类，命名和鉴定
一．细菌分类：根据细菌各自的特征，并按照亲缘关系分类，以 不同等级编排系统。分类有两种：
1. 细菌的生理生化分类法，包括有传统分类法和数值分类法。 细菌核酸、蛋白质结构的同源程度进行分类法，称种系分类或自然分类。
细菌命名：在分类基础上，给每种细菌一个科学名
01
称，便于交流并保证所有的科研工作者给予同样名
○ 学名用拉丁文，遵循“双名法”。 ○ 每一种细菌的拉丁文名称由属名和种名两部分组成如：产气荚膜梭菌
（Clostridium perfringens） ○ 属名在前，字首字母要大写，其余小写 ○ 整个属名及种名在出版物中应排成斜体 ○ 中文译名，种名在前，属名在后
二．分类学文献中的细菌拉丁文学名， 属名和种名之后，往往还要加上首次 定名人（加括号）、现名定名人和现 名定名年份，这些均用正体排字。
○ 如 Micrococcus sp.表示微球菌属的一个种， ○ Micrococcus spp. 表示微球菌属的一些种。
如果是新种，在新种的 拉丁文学名之后还要加 上“sp.nov。”，nov 是novel的缩写。
例如Lawsonia intracellularis gen．Nov. sp . Nov.， 译为：胞内劳森菌，新 属新种。
○ 一般兽医学及医学微生物学文献中，属名和 种名之后的部分均予省略。
○ 如：Escherichia coli
例如
大肠埃希菌的学名全名是：Escherichia coli(Migula) Castellani et Chalmers l919 指的是Migula于1895年命名此菌为Bacillu coli， Castellani及Chalmers于1919年改为现名。
微生物的鉴定 基础
微生物的鉴定基础革兰氏染色初步分类一。
非苛养菌鉴定：苛养菌鉴定 真菌的鉴定革兰氏染色[原理]革兰氏染色目前有三种观点：等电点学说、化学学说和渗透学说。
[标本处理]1.有菌部位的标本，如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。
2.无菌部位的标本，如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等，应取适量标本（最高可达5-7ml）,经3000rpm 离心10min.，取沉渣涂片染色。
[报告方式]：革兰氏染色：检出G+球菌；G-球菌检出G+杆菌；G-性杆菌革兰氏染色[注意事项]1．标本涂片不能太厚，严格按操作要求进行。
2．玻片通过火焰温度不能太高。
3．若涂片较厚，应延长脱色时间，直至不在出现紫色为止。
[临床意义]通过革兰氏染色，将细菌分初步为革兰氏阳性和革兰氏阴性，便于临床治疗细菌的初步分类1、细菌的分离与纯化：自血平板挑出待检菌株的单菌落进行初步的鉴定。
如果混有杂菌，应该重新转种分纯。
2、染色与镜检：首先通过革兰氏染色确定基本的分类：（1）G+球菌（2）G-球菌（3）G-杆菌（4）G+杆菌。
此外，如果镜下发现革兰氏染色阳性、椭圆形、有芽孢状的较大菌体，可能是真菌。
临床标本中分离出较多的是G-杆菌中的肠杆菌、非发酵菌和G+球菌中的葡萄球菌、链球菌、肠球菌。
G-球菌中的奈瑟氏菌亦常分离出，尤其在泌尿生殖系统标本中常见。
细菌的初步分类1.触酶试验主要用于G+球菌的分类。
葡萄球菌属：触酶（+）链球菌属及肠球菌：触酶（-）2.氧化发酵试验（O-F试验）根据细菌在无氧环境中能否利用碳源将细菌分为非发酵菌（氧化型或产碱型）和发酵菌（兼性厌氧菌）。
G（-）杆菌中的肠杆菌O-F试验阳性，非发酵菌O-F试验阴性3.氧化酶试验主要用于G-杆菌的分类。
肠杆菌的氧化酶（-），非发酵菌多数氧化酶（+），但嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌的氧化酶（-）。
非苛养菌的鉴定：主要有G+球菌、G+杆菌、G-球菌和G-杆菌这些细菌培养的条件不苛刻，这也是标本分离常见的细菌苛养菌的鉴定也相对比较简单，只要根据初步的分类，遵循其鉴定的途径，就可以做出完整的鉴定结果G+球菌的鉴定途径1.首先根据菌落特点和革兰氏染色判断是否为G+球菌。
革兰氏染色
革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。
为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。
可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。
另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格控制。
例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。
此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。
所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。
革兰氏染色原理：G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：１）涂片固定。
(新编)革兰染色法
（新编）革兰染色法革兰染色法是一种常用的细菌分类方法，根据细菌的细胞壁成分和结构差异，将细菌分为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。
革兰染色法的原理是利用细菌细胞壁上的特异性染料——革兰染料，将细菌分为两类。
革兰阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖和磷壁酸组成，而革兰阴性菌的细胞壁则主要由外膜和脂多糖组成。
革兰染色法包括初染、媒染、脱色和复染四个步骤。
初染时，用结晶紫溶液对细菌进行染色，结晶紫能够与细菌的细胞壁结合，形成紫色的着色层。
媒染时，用碘溶液与结晶紫结合形成复合物，进一步增强着色层的颜色。
脱色时，用酒精或丙酮溶液处理细菌，去除染料和结晶紫，但不同与革兰阳性菌和革兰阴性菌的细胞壁结构和组成不同，酒精或丙酮溶液对革兰阳性菌的细胞壁影响较小，不能将其脱色，而革兰阴性菌的细胞壁则易被脱色。
最后进行复染，用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色，而革兰阴性菌则呈现红色背景。
革兰染色法的具体操作步骤如下：1.初染：用结晶紫溶液滴加到涂片上，染色3-5分钟，然后用自来水冲洗。
结晶紫能够与细菌的细胞壁结合，形成紫色的着色层。
2.媒染：用碘溶液与结晶紫结合形成复合物，加强着色层的颜色。
媒染时需要注意控制媒染时间，时间过短会使着色层颜色过浅，时间过长则会使着色层颜色过深。
3.脱色：用酒精或丙酮溶液处理涂片，去除染料和结晶紫。
革兰阳性菌的细胞壁较厚，酒精或丙酮不易渗透进去将其脱色，因此革兰阳性菌保持紫色，而革兰阴性菌的细胞壁较薄，酒精或丙酮容易渗透进去将其脱色，呈现红色背景。
4.复染：用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色，而革兰阴性菌则呈现红色背景。
复染时需要控制时间，避免出现过度染色或染色不足的情况。
革兰染色法具有较高的准确性和重复性，是细菌分类学中常用的方法之一。
通过革兰染色法可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两大类，对于临床治疗、药物选择、食品工业等领域具有重要意义。
例如在医学领域中，医生可以根据感染菌的革兰染色结果来选择合适的抗生素；在食品工业中，革兰染色法可用于检测食品中的细菌种类和数量。
细菌的分类
放线菌、酵母菌与真菌的分类与特点
• 放线菌（Actinomycetes） • 分类：属于放线菌门（Actinomycetes），放线菌纲（Actinomycetales） • 特点：具有分支状菌丝体，需用显微镜观察，具有多种代谢途径，部分放线菌具有致病性，如结核分枝杆菌（ Mycobacterium tuberculosis）
生长环境
• 厌氧细菌主要分布在缺氧环境中，如肠道、沼泽、土壤 等 • 厌氧细菌可与其他细菌共生，形成复杂的微生物生态系 统
厌氧细菌的主要类群与代表物种
梭菌科（Clostridiaceae）
• 代表物种：梭状芽孢杆菌（Clostridium）、肉毒梭菌（Clostridium botulinum） 等 • 生理特性：严格厌氧，可产生多种毒素，如肉毒毒素、破伤风毒素等
02 弧菌科（Vibrionaceae）
• 代表物种：霍乱弧菌（Vibrio cholerae）、副溶血性弧 菌（Vibrio parahaemolyticus）等 • 生理特性：好氧或兼性厌氧，代谢多样性，可产生多种 酶和毒素，部分菌种具有致病性
03 嗜血杆菌科（Haemophilusaceae）
生长繁殖方式： 革兰氏阳性细 菌主要通过二 分裂方式进行 生长繁殖，生 长速度较快
革兰氏阳性细菌的主要类群与代表物种
01 链球菌科（Streptococcaceae）
• 代表物种：链球菌（Streptococcus）、乳球菌 （Lactococcus）等 • 生理特性：嗜氧或兼性厌氧，代谢多样性，可产生多种 酶和毒素
细菌基本形态和特殊结构观察
细菌基本形态标本片
• 球菌
①
②
③
①链球菌（Streptococcus）G+ ②淋球菌（N.gonorrhoeae） G③脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis )G-
• 杆菌
④
④痢疾志贺氏（Shigella dysenteriae） G-
⑤炭疽芽孢杆菌（Bacillus anthracis） G+
⑥白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） G+
⑤
⑥
• 螺形菌
⑦
⑦水弧菌（marine vibrio）
细菌特殊结构标本片
• 荚膜
①
②
① 肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae） ② 魏氏杆菌（Clostridium perfringens）G+
• 芽孢
③ 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）
质等。 细菌的特殊结构：芽孢、荚膜、鞭毛、菌毛等。
细菌形态观察
（1）球菌： • 链球菌: G+，成对或链形分布. • 肺炎双（链）球菌： G+ ，常成双排列，菌体似矛头状。荚
膜不着色，表现为菌体周围透明环。 • 淋病奈瑟菌： G- ，常呈双排列，菌体形似一对蚕豆。 • 脑膜炎奈瑟菌： G- ，肾形，成双排列。 （2）杆菌 • 痢疾志贺菌： G- ，球杆状. • 白喉棒状杆菌： G+ ，常一端或两端膨大成棒状。 • 炭疽芽孢杆菌： G+ ，菌体呈竹节状。芽孢位于菌体中央.
可肿大呈圆珠形，呈链状排列成串珠状。
Hale Waihona Puke 三、细菌典型菌落形态观察S.e B.s 粘液 粗糙 E.a
光滑
S.e不 a-h半
抗菌药物分类及特点
常见药物及其应用
肠道易吸收：磺胺甲恶唑（SMZ）、磺胺异噁唑
（SIZ）、磺胺嘧啶（SD）、磺胺甲氧嘧（SMD）
肠道难吸收：柳氮磺吡啶（SASP）
外用药：磺胺醋酰、磺胺嘧啶银、磺胺米隆
45 第四十五页，编辑于星期日：十六点 五十分。
磺胺类特点小结
质合成。
31
第三十一页，编辑于星期日：十六点 五十分。
此类药物共同特点
1.共同的抗菌谱：主要作用于G-（因此可与抗
G+药物有较好的协同作用）
2.共同的优点：抗G-活性强，具有较强的PAE
（抗生素后效应）.
3.药物呈碱性，未灭活部分几乎全部由原型经
尿液排出，因此可碱化尿液治疗泌尿道的敏感菌
感染。
4.共同的不良反应:耳毒性，肾毒性、骨骼肌松弛
① 抗菌谱广，性质稳定，可口服。
② 结构简单，便于化学合成，大量生 产
，价格价廉。
③ 对流脑、鼠疫有显著疗效；
④ SMZ与氨苄青霉素合用治疗伤寒、副伤 寒首选
⑤ SMZ（磺胺甲恶唑）与TMP（甲氧苄啶）合用 （复方新诺明）治疗尿路感染由抑菌变为杀菌。
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第四十六页，编辑于星期日：十六点 五十分。
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3.局部刺激
注射剂已少用，口服引起恶心、呕吐、腹胀、腹泻等。
37 第三十七页，编辑于星期日：十六点 五十分。
氯霉素类
氯霉素
第三十八页，编辑于星期日：十六点 五十分。
抗菌机制：作用于敏感菌核糖体50s亚基，干扰
细菌蛋白质合成。
抗菌谱：广谱抗菌药，对G+、G-均有抑制作用，
对G-作用更强，对G+作用不及青霉素类及四环素。
G+菌 G-菌区别
G+菌G-菌为什么要来谈G+菌和G-菌，因为在后面的介绍抗菌药我们会用到，不同的细菌感染所用的抗菌药不同。
例如如，青霉素G（天然青霉素），就主要针对G+菌感染，只对G-菌部分敏感，这主要和细菌细胞壁的结构有关。
抗菌药主要是一些抗生素，抗生素滥用在中国的情况很严重，其导致的问题可能是最后细菌感染将无药可治，比如现在出现的一个名词叫“超级细菌”，其产生原因是因为人们滥用抗生素，导致某些细菌对大部分抗生素都产生耐药性，最后这些细菌感染带来的结果相当可怕。
所以现在国家开始规范抗生素使用，能不用抗生素尽量少用或者不用，对不同的病症患者使用合适的抗生素，做到不滥用，不多用。
由此我们区分不同的细菌感染将显得非常重要。
G+菌和G-菌的是通过革兰氏染色法来划分的，G+菌和G-菌细菌的细胞壁的组分和结构不同（参见我的前篇文章：细菌的细胞壁），所以染色结果不同，这样我们就把其鉴别开来了。
革兰氏染色法我们来看看什么是革兰氏染色法。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。
其一般分为四个步骤：初染，媒染，脱色，复染。
染色液结晶紫溶液结晶紫乙醇饱和溶液（取结晶紫约4~8g，溶于95%乙醇100ml 中）20ml，1%草酸铵溶80ml将上述两溶液混合，过滤。
结晶紫不可用龙胆紫代替。
前者是纯品，后者不是单一成分，易出假阳性。
结晶紫溶液放置过久会产生沉淀，不能再用。
助染剂碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水300ml将碘与碘化钾先行混合，加入少许蒸馏水，充分振荡。
待完全溶解后再加入其余的蒸馏水。
当溶液由棕黄色变为淡黄色时应弃去。
为易于储备，可将上列碘与碘化钾溶于30ml蒸馏水中，用前稀释。
脱色剂95%乙醇。
复染剂沙黄0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml将沙黄溶于乙醇中，待完全溶解后加入蒸馏水。
染色步骤1、将培养18~24h的培养物涂片，要涂得薄些。
将涂片在火焰上加温固定，待冷却后滴加结晶紫溶液，1min后水洗。
革兰氏分类法
革兰氏染色反应
革兰阴性菌
革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884年由丹麦医师Gram创立的。
革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。
细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，没有磷壁酸，其细胞壁中游肽桥、肽尾和双糖形成的网状结构较为疏松，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液(番红)的颜色，因此呈现红色。
编辑本段常见种类
革兰氏阳性细菌：金黄葡萄球菌、链球菌、肠球菌、利斯特菌……
革兰氏阴性杆菌：克雷白杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、沙门氏菌……。
生命科学导论第4章生命的多样性知识点总结
⽣命科学导论第4章⽣命的多样性知识点总结第七章微⽣物⽣命的多样性第⼀节⽣命多样性和物种⼀、⽣命多样性（⼀）⽣命多样性的概念⽣命多样性亦称⽣物多样性（biodiversity ）：指⽣命有机体的种类和变异性及其与环境形成的⽣态复合体以及与此相关的各种⽣态过程的总和。
包括动物、植物、微⽣物和它们所拥有的基因以及它们与其⽣存环境形成的复杂的⽣态系统和⾃然景观。
（⼆）⽣物多样性的类型1. 遗传多样性2. 物种多样性3. ⽣态系统多样性4. 景观多样性1. 遗传多样性（genetic diversity）⼴义的遗传多样性：指地球上所有⽣物所携带的遗传信息的总和。
狭义的遗传多样性：指⽣物种内不同群体之间或同⼀群体内不同个体之间的遗传变异的总和（世界资源研究所，WRI）。
●遗传多样性是⽣物多样性的内在形式●⽣物种内不同群体：⽣态型、变种、亚种、品种、品系等。
2. 物种多样性(⼀)概念：物种多样性是⽣物多样性在物种上的表现形式，反映了地球上⽣物有机体的复杂性，是⽣物多样性研究的核⼼内容。
(⼆)分布：10000⽶深海……硫细菌、4.5 千⽶深的地层中……细菌、74－85千⽶⾼空……微⽣物3. ⽣态系统多样性(1)包含内容：⽣物圈内物种集合的空间多样性，包括:⽣物圈⽣境多样性、⽣物群落多样性、⽣态过程的多样化、⽣态系统内⽣境差异、⽣态过程变化多样性。
(2)意义：⽣态系统多样性是维持物种多样性和遗传多样性的保证。
4. 景观多样性（landscape diversity）●景观：多种多样⽣态系统在⼀定地区内的镶嵌分布格局。
景观是⼈与环境在时间和空间上相互作⽤的产物。
●景观在结构、功能以及随时间变化（即动态）的复杂性。
⼆、物种的概念及其命名法（⼀）物种的概念和定义不同专业的⽣物学家对物种的概念有不同的理解。
现代遗传学认为：物种是⼀个具有共同基因库、与其他类群有⽣殖隔离的群体⽣物学家认为：物种是⽣物世界发展的连续性与间断性的同⼀的形式。
怎样做好细菌耐药监测和建立细菌耐药预警机制……
舒
克
巴
拉
坦
维
酸
S敏感（%）
2012全年江西省肿瘤医院耐甲氧西林金葡菌耐药趋势
I中敏（%）
R耐药（%）
100%
90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0% 万 古 霉 素
呋 喃 妥 因
利 奈 唑
奎 奴 普 丁
胺/
利 氧莫 福 氟西 平 沙沙
星星
Байду номын сангаас
氯加
霉替 素沙
星
四复 环方 素新
诺
左庆 氧大 氟霉 沙素
碳青霉烯类
使用增加 金属酶 卡巴配能酶
绿脓杆菌耐药 不动杆菌耐药
2021/7/12
GONGLU
4
一、怎样进行医院细菌耐药监测
◆微生物实验室规范处理临床标本、进行细菌培养 和药敏试验，并提供细菌监测和药敏试验原始数 据。
◆院感科对各种相关数据进行统计分析，指导临床 监控感染患者病原菌耐药变化情况，送检合格的 细菌培养标本，及时正确选用抗菌药物。
注：不推荐用真空采血器静脉血直接入瓶，不宜在静脉导管或静脉留置口采 血，不推荐血入瓶前换针头。采血间隔为，如第一次采集2～3套（4～6瓶） 血培养标本，在以后的2～5天不必采血，除心内膜炎和导管相关性败血症外。
★尿液标本
应在采集后立即送检。不管用哪种方法，都应在用药前采集。 应采集患者早晨第一次尿，标本容器不应含防腐剂和消毒剂。做 厌氧培养时，应膀胱穿刺采集尿。如暂不能送检的标本，应采用 输送培养基放置标本。
诺克 环 氟林 丙 沙霉 沙 星素 星
阿 奇 霉 素
红阿 霉莫 素西
第一章2原核微生物细菌的分类及主要类群介绍
例如 Escherichia coli
若所分离的菌株只鉴定到属，而未鉴定到种，可用sp来表示，
例如 Bacillus sp
（三）原核生物的鉴定和分类方法
生物分类的传统指标： 形态特征、 培养特征、 生理生化特征
从不同层次（细胞的、分子的），用不同学科（化学、物 理学、遗传学、免疫学、分子生物学等）的技术方法来研究和 比较不同微生物的细胞、细胞组分或代谢产物，从中发现的反 映微生物类群特征的资料。 在现代微生物分类中，任何能稳定地反映微生物种类特征的资料， 都有分类学意义，都可以作为分类鉴定的依据。
3）型（form）：常指亚种以下的细分。当同种或同亚种不同菌株 之间的性状差异，不足以分为新的亚种时，可以细分为不同的型。 例如生物型、化学型、形态型、致病型、血清型、噬菌型等。
（二）微生物的命名法
双名法：由二个拉丁字或希腊字或拉丁化了的其它文字组成， 一般用斜体表示。 学名=属名+种名加词
属名在前，一般用拉丁字名词表示，字首字母大写 种名在后，常用拉丁文形容词表示，全部小写
其分类学意义主要是作为建立新分类 单元的一项基本特征和把那些G+C含 量差别大的种类排除出某一分类单元。
G+C含量的比较主要用于分类鉴定中的否定
（2） 核酸的分子杂交
不同生物DNA碱基排列顺序的异同直接反映生物之间亲 缘关系的远近。碱基排列顺序差异越小，它们之间的亲缘关 系就越近，反之亦然。
直接分析比较DNA的碱基排列顺序 ------由于技术上的困难目前尚难以普遍地进行 核酸分子杂交（hybridization）间接比较不同微生物DNA 碱基排列顺序的相似性
数值分类的五个步骤： 1）选择菌株和待测性状 2）性状编码 3）相似性计算 4）进行簇群分析 5）分类结果的表示
细菌的分类G和G
细菌的分类（G+和G－）广义的细菌即为原核生物。
是指一大类细胞核无包裹，只存在称作区(nuclear region)(或拟核)的裸露DNA的原始，包括真细菌(eubacteria)和古生菌(archaea)两大类群。
人们通常所说的即为狭义的细菌，狭义的细菌为的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布最广、个体数量最多的，是大自然的主要参与者。
把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。
常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌、链球菌、李式杆菌属、丹毒丝菌属、肾杆菌属、芽孢杆菌属、梭菌属、分歧杆菌属、放线菌属、奴卡菌属、棒状杆菌属、红球菌属、丹毒杆菌、气肿疽杆菌、结核杆菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等；常见的革兰氏阴性菌有:伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、肺炎杆菌、布式杆菌、流感副流感杆菌、卡他杆菌、不动杆菌属、耶尔森菌属、嗜肺军团菌、绿脓杆菌、（副）百日咳杆菌、志贺菌属、巴斯德菌属、弧菌、副溶血性杆菌及双球菌等。
G+ 球菌：金黄色葡萄球菌（葡萄球菌属）、乙型溶血性链球（链球菌属）、肺炎链球菌（链球菌属）G—球菌：淋球菌、脑膜炎双球菌（奈瑟菌属）G+ 杆菌：白喉杆菌（棒状杆菌属）、结核杆菌（分歧杆菌属）抗酸菌麻风杆菌（分歧杆菌属）抗酸菌G—杆菌：大肠杆菌（埃希菌属）、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、志贺痢疾杆菌、福式痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌（志贺菌属）、百日咳杆菌（包特菌属）、肠炎杆菌（沙门菌属）、绿脓杆菌（假单胞菌属）、在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。
所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。
附：(（Actinomycete）是另一大类革兰氏阳性菌，根据DNA中(G)和(C)的含量，放线菌被称为高G+C革兰氏阳性菌，而厚壁菌被称为低G+C革兰氏阳性菌。
微生物实验思考题(南京工业大学生物和制药工程学院)
实验一细菌的简单染色和细菌形态的观察一、实验原理简单染色采用一种染料对菌体进行染色，常用结晶紫、美蓝、碳酸复红等碱性染料。
染色后，菌体与背景形成鲜明对比，在显微镜下很容易被识别。
通过简单染色方法可以观察细菌的菌体形态特征和菌体的排列方式。
观察菌体形态简单染色（只用一种染料）观察菌体排列方式染色方法革兰氏染色鉴别鉴别染色抗酸性染色（利用两种染料）芽孢染色观察特殊结构荚膜染色鞭毛染色二、实验步骤：涂片干燥固定染色水洗干燥镜检三、思考题1、制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节？答；（1）涂片：开始所加无菌水液滴不要太大，否则不易干燥；取菌量要适宜且要涂抹均匀，避免过大造成堆积，而难以看清细胞个体形态同时也应避免取菌量太少而难以在显微镜视野中找到细胞。
（2）无菌操作取菌：一定要等接种换冷却后再取菌，以免高温使菌体变形；（3）干燥固定：干燥后加热固定，可避免加热时间过长，否则细胞会破裂或变形；（4）固定：菌膜一面朝上，通过酒精灯微火三次。
注意温度不宜过高，时间不宜太长，否则菌体形态则会发生改变。
（5）水洗：倾去染色液后，用水沿着菌膜四周冲洗，注意勿使水流直接冲洗菌膜部位，水流不宜过急，过大，至流出水无色为止；2、为什么要求制片完全干燥才能用油镜观察？答：使用油镜时，物镜与标本间的介质为香柏油（N=1.515），不仅增加了透明度，而且会提高了分辨率。
若制片不完全干燥后，就用油镜观察，则N 会减小，分辨率D 也会变小。
而且还会造成油水两相不互溶，所以制片要求完全干燥后才能用油镜观察。
3、如果涂片未经加热固定，将会出现什么问题？如果加热温度过高，时间太长，又会怎样呢？答：加热固定的作用是使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上，这种加热处理还可以杀死大多数细菌而且不破坏细胞形态，而且还可增加细胞对染料亲和力。
（1）如果图涂片未经加热固定，则细胞无法固定在载玻片上，在染色水洗后会被水流冲走。
（2）如果加热温度过高，时间太长，则会使细菌形态发生变化甚至破裂。
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细菌的分类（G+和G－）
广义的细菌即为原核生物。
是指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作拟核区(nuclear region)(或拟核)的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌(eubacteria)和古生菌(archaea)两大类群。
人们通常所说的即为狭义的细菌，狭义的细菌为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。
把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。
常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌、链球菌、李式杆菌属、丹毒丝菌属、肾杆菌属、芽孢杆菌属、梭菌属、分歧杆菌属、放线菌属、奴卡菌属、棒状杆菌属、红球菌属、丹毒杆菌、气肿疽杆菌、结核杆菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等；
常见的革兰氏阴性菌有:伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、肺炎杆菌、布式杆菌、流感副流感杆菌、卡他杆菌、不动杆菌属、耶尔森菌属、嗜肺军团菌、绿脓杆菌、（副）百日咳杆菌、志贺菌属、巴斯德菌属、霍乱弧菌、副溶血性杆菌及脑膜炎双球菌等。
G+ 球菌：金黄色葡萄球菌（葡萄球菌属）、乙型溶血性链球（链球菌属）、肺炎链球菌（链球菌属）
G—球菌：淋球菌、脑膜炎双球菌（奈瑟菌属）
G+ 杆菌：白喉杆菌（棒状杆菌属）、结核杆菌（分歧杆菌属）抗酸菌
麻风杆菌（分歧杆菌属）抗酸菌
G—杆菌：大肠杆菌（埃希菌属）、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、志贺痢疾杆菌、福式痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌（志贺菌属）、百日咳杆菌（包特菌属）、
肠炎杆菌（沙门菌属）、绿脓杆菌（假单胞菌属）、
在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。
所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。
附：(放线菌（Actinomycete）是另一大类革兰氏阳性菌，根据DNA中鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的含量，放线菌被称为高G+C革兰氏阳性菌，而厚壁菌被称为低G+C革兰氏阳性菌。
如果细胞的第二层膜是衍生特征，这两类革兰氏阳性菌可能是细菌基部的分支，否则它们可能组成关系相对较近的单系群。
它们被认为可能是古细菌和真核生物的祖先，因为它们都缺乏第二层膜，并且具有一些生化上的相似性，比如含有固醇类。
此外，尽管恐球菌-栖热菌(Deinococcus-Thermus)类细菌结构上类似革兰氏阴性菌，但也可被染成革兰氏阳性)
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