贝克曼皮质醇Cortisol

结果
系统软件自动地确定病人的测试结果。通过所保存的校准数据，所测得的发光量可确定样本内 分析物的量。通过相应的界面可看到病人的测试结果。参考相应的系统操作手册和 / 或帮助系 统，获取评论样本结果的完整指南。
24 小时尿液样本的计算结果 进行已提取或未提取的 24 小时尿液皮质醇样本的计算操作时，可用以下等式中由 Access 仪器得 出的以 μg/dL 为单位的尿液皮质醇值：
3. 除去样本容器因素和系统的死体积，对于每次测定需使用二十五 (25) µL 的样本量。参考相应 的系统操作手册和 / 或帮助系统，以获取所需最少样本量的信息。
4. 样本结果计算的默认系统单位是 µg/dL。如需将样本报告单位更改为国际系统单位 (SI 单位 )， nmol/L，可参考相应的系统操作手册和 / 或帮助系统。如需将浓度值人工转换成国际系统单 位，可将 µg/dL 乘以倍增系数 27.59。
质控
质控品可模拟病人样本的诸多特性，且在监控免疫化学分析系统的表现时，显得十分重要。由 于样本的处理可在任意时刻以 “随机处理”的模式，而非 “批量”模式进行，因此需以 24 小时 为一个时间段来加入质控品。 13 加入至少包含两个分析物水平的商业质控品。在复溶及保存时， 需遵循供应商的规定。每个实验室需确立自身适用的均值和可接受的范围，以确保合适的测试 性能。若质控结果未落在可接受的范围内，表明存在无效的测试结果。对此分析物，应检查自 最近一次获得可接受质控测试点以来的所有测试结果。参考相应的系统操作手册和 / 或帮助系 统，获取有关评论质控结果的信息。
方法 参考相应的系统操作手册和 / 或帮助系统，获取有关管理样本、测试项目设置、申请测试项目和 评论测试结果的信息。
校准细节 所有的测试均需要一条实际的校准曲线。对于 Access Cortisol 分析而言，每隔 28 天需要执行校 准操作。参考相应的系统操作手册和 / 或帮助系统，获取有关校准原理、设置校准品系列、校准 品测试申请输入以及复查校准数据的信息。
© 2008 Beckman Coulter, Inc.
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产品Fra Baidu bibliotek息
Access Cortisol 试剂盒 产品目录号 33600: 100 测试， 2 个试剂盒， 50 个测试 / 盒 • 即用型。 • 2 到 10°C 冷藏保存且竖直存放。 • 至少在 2 到 10°C 环境下冷藏保存 2 小时后，才可上机使用。 • 在 2 到 10°C 环境下保存时，稳定期可持续至标签上所指明的有效期。 • 首次使用后，在 2 到 10°C 环境下保存的稳定期可维持 14 天。 • 可能存在变质情况的表现为盒子上的弹性层破损或质控值超出了范围。 • 若试剂盒受损 ( 比如，弹性层断裂 )，那么丢弃试剂盒。 • 除特别说明外，所有的抗血清均是多克隆的。
CORTISOL
33600
用途 Access Cortisol测定是一种应用Access 免疫分析系统以定量测定人血清,血浆(肝素, EDTA )和尿液 中的皮质醇水平的顺磁性微粒化学发光免疫测定。
概述和说明
皮质醇主要是糖皮质激素并由肾上腺皮质生产和分泌。其可产生的影响包括：(a) 影响蛋白质， 脂肪和碳水化合物的代谢， (b) 维持肌肉组织和心肌完整性，以及 (c) 抑制炎症和过敏性的活 动。 1
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方法的局限性
1. 在介于检测的下限和最高校准品值 [ 大约 0.4–60.0 μg/dL (11–1655 nmol/L)] 之间的分析范围内， 可进行样本的定量测定。 • 若样本含量低于测定的最低下限，那么以少于该值来报告结果 [ 如 , < 0.4 μg/dL (< 11 nmol/L)]。 • 若样本含量高于最高 Access Cortisol Calibrator (S5) 的规定值，那么以大于该值 来报告结果 [ 如 , > 60.0 µg/dL (> 1655 nmol/L)]。或者将 1 体积样本与 1 体积 Access Cortisol Calibrator S0 ( 零 ) 或 Access Cortisol Calibrator S0( 产品目录号 33606) 进行稀释。参考与之相应的系统操作手册和 / 或帮助系统，获取有关在 测试申请中输入样本稀释液的指南。这一系统报告稀释的调整结果。
所提供的材料 R1 Access Cortisol 试剂盒
所需但未提供的 材料
1. 校准品：Access Cortisol Calibrators 提供时为零以及大约 2、5、10、25 和 60 μg/dL (55、138、276、690 和 1655 nmol/L) 产品目录号 33605
2. 质控 (QC) 品：商用质控品 3. 底物液：Access Substrate
冻保存。 • 样本仅可解冻一次。
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3. 使用下列准则准备样本： • 在分析前，确保已去除了残余的纤维蛋白和细胞类物质。 • 按采血试管生产商建议的方式进行离心。
4. 每个实验室需自行判断其所使用的采血试管和血清分离产品的适用性。会由于生产商的不同 以及有时不同的批次而使这些产品存在差异。
可结合的皮质类固醇球蛋白和白蛋白与由肾上腺皮质分泌出的约 90% 的皮质醇可进行结合。经 结合的皮质醇进行机体循环时暂时处于无活性状态。而少量未经结合的皮质醇的循环水平决定 了其生理活性。 2
促肾上腺皮质激素 (ACTH) 对肾上腺皮质的合成和释放产生激活作用。垂体在由下丘脑分泌 出的促肾上腺皮质激素释放激素 (CRH) 刺激下可产生和释放 ACTH。未结合的皮质醇在垂体 和下丘脑水平下的下丘脑 - 垂体 - 肾上腺皮质轴 (HPA) 进行负反馈调节的机制。 3,4 此外，昼 夜变化和应激反应，如，热原引起的发烧，严重精神病或创伤也会对肾上腺皮质的神经内分 泌调节产生影响。 1,3,5
• 叠氮钠可能会与铅以及铜制的管件发生反应，形成具有高危爆炸性的金属叠氮物。在倾弃这 种液体时，应以大量的水进行冲洗，防止叠氮物的集结。 11
• 材料安全数据资料 (MSDS) 可按需索取。
样本的采集 和准备
1. 血清、血浆 ( 肝素， EDTA) 和尿液是所推荐使用的样本。 2. 在使用，处理和保存全血样本时，请遵循下列所推荐的方法 :12
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尿液提取样本的准备 1. 将充分混合的一个 24 小时的尿液样本 1.0 mL 吸取至一玻璃试管。 2. 加入 1.0 mL 的乙酸乙酯。将试管盖牢牢盖严。
注意：严禁用嘴吸取。 3. 高速涡旋混匀 30 秒。 4. 以 700 Xg 离心机分离 5 分钟。 5. 从玻璃试管中的乙酸乙酯层 ( 上层 ) 吸取 200 μL 至另一干净的玻璃试管中。 6. 在适宜氮气或空气通风的室温条件下蒸发直至变干。 7. 加入 200 μL 的 Access Cortisol Calibrator S0。它是经涡旋混匀的。 8. 将充分混合的样本移至样本杯并进行程序部分。
R1a: R1b:
皮质醇 - 碱性磷酸酶 ( 牛 ) 结合物和顺磁性微粒 包被着山羊抗兔 IgG 在 TRIS 缓冲盐水中，含有 表面活性剂、 BSA 基质、以及 < 0.1% 叠氮钠。
皮质醇兔抗血清在 TRIS 缓冲盐水中，含有表面活性剂、 BSA 基质、以及 < 0.1% 叠氮钠。
警告和注意点
• 供体外诊断使用。
5. 进行尿液样本操作时，采集一个 24 小时的尿液样本至含有 10 gm 硼酸作防腐剂的容器中。记录 总尿量。在充分混合的样本中取出 10 mL 作分析。若尿液样本混浊或有沉淀，以 700 Xg 分离 样本 5 分钟并采用上清液进行测定。直接进行尿液样本分析或在分析前完成提取。提取步骤 和所需材料参见程序步骤部分的 “尿液提取所需但未提供的材料”以及 “尿液提取样本的准 备”。
产品目录号 81906 4. Access、 Access 2、 SYNCHRON LX®i:
清洗缓冲液：Access Wash Buffer II，产品目录号 A16792 UniCel® DxI: 清洗缓冲液：UniCel DxI Wash Buffer II，产品目录号 A16793
尿液提取所需但未提供的材料 1. 乙酸乙酯 (HPLC 级 ) 2. 12 mm x 75 mm 玻璃试管 3. 螺旋混匀器 4. 可精确吸取 200 和 1000 μL 的吸液管 5. 离心分离机 6. 干燥器 ( 氮气或空气 )
• 按所描述的步骤进行操作，可使日常处理病人样本和血制品中所带来的风险降到最低。然 而，无论这些产品的来源、处理方式或先前获得的证明，使用这些具有潜在传染性的物品均 须按统一的注意事项和完善的实验室操作规范来进行。应使用合适的消毒剂来消除污染。遵 循当地的操作规章和导则来保存并处理这些物品以及盛放这些物品的容器。
肝脏的代谢保证了皮质醇结合蛋白。 4 血清中未结合 ( 或游离 ) 皮质醇经肝脏代谢产生多种形式 的代谢物。其中许多代谢物 ( 成对式，葡糖苷酸式及硫酸盐式 ) 是水溶性的且在尿液中很快分 解。少量 (< 100 µg/24 小时 ) 的皮质醇和其它可提取的代谢物也会排入尿液。尿液中的皮质醇可 在测试前通过可以去除提取水溶性代谢物的步骤测量到或者直接对尿液进行分析来测定。因 而，尿液皮质醇的免疫测定以及一些免疫代谢物应针对每一种免疫检测方法建立代表期望值。 尿液皮质醇的测定反映血清中未结合 ( 或游离 ) 皮质醇的数量，而且有助于肾上腺功能亢进的诊 断。尿液中皮质醇水平升高有助于诊断 Cushing 综合症 ( 肾上腺皮层机能亢进 )。 4,7,8,9,10
下丘脑，垂体或肾上腺功能失常可导致皮质醇水平的异常变化。若不接受诊断和治疗可能导致 致命的严重代谢失衡。皮质醇血清或血浆的测定 - 晨间及晚间不同水平和 / 或诸如 ACTH 刺激 或地塞米松抑制的压力测试 - 有助于对相关肾上腺疾病的诊断。同时在 Cushing 综合征 ( 肾上腺 皮质机能亢进 ) 中的皮质醇水平过高，而在 Addison 症 ( 肾上腺皮质功能不全 ) 中皮质醇水平降 低。 6
• 遵循静脉穿刺所需的常规注意点来采集所有的全血样本。 • 在进行离心操作前需让血清样本完全凝结。 • 总是保持试管塞塞紧试管口。 • 在离心操作完成后的 2 小时内，将至少 500 μL 的无细胞样本移入保存用试管内。完成后，立
即将试管口牢牢塞紧。 • 在室温 (15 至 30°C) 下，将样本保存在塞紧的试管内不得超出 8 小时。 • 若在 8 小时内无法完成测定，可将样本冷藏保存在 2 至 8°C 环境下。 • 若在 48 小时内无法完成测定，或样本需要运输，可将样本在 -20°C 或低于 -20°C 的环境下冷
方法说明
1. 参考相应的系统操作手册和 / 或帮助系统，以获取安装、启动、操作规章、系统性能特性、操 作说明、校准流程、操作限制及注意事项、危险、保养和故障排除的特定描述。
2. 将试剂盒放置上机前，轻轻地倒转试剂盒多次以混合新 ( 未刺破 ) 试剂盒内的成分。不要倒转已 打开 ( 已刺破 ) 的试剂盒。
测试原理
Access Cortisol 测定是一种竞争结合酶免法测定。将样本添加到含有皮质醇的兔抗体，皮质醇 - 碱 性磷酸酶结合物、包被着山羊抗兔捕获抗体的顺磁性微粒的反应管中。样本中的皮质醇与皮质 醇 - 碱性磷酸酶结合物争夺一定数量上抗皮质醇抗体的结合位点。产生的抗原：抗体复合物被固 相上的捕获抗体所结合。 在反应管内温育完成后，结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸 住，而未结合的物质被冲洗除去。然后，将化学发光底物 Lumi-Phos* 530 添加到反应管内，然 后由照度计对反应中所产生的光进行测量。所产生光的量与样本内皮质醇的浓度成反比。样本 内分析物的量由所储存的多点校准曲线来确定。
（尿µ液g/C2o4rt小is时ol）=
尿液 Cortisol（µg/dL） 100*
× 24- 小时总尿量（mL）
* 因素 100 由 µg/dL 转化为 µg/mL.
注意 : 在进行计算结果时，除去所需对提取率的校准，使用 HPLC 级乙酸乙酯的提取效率大于 95%。
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