植物细胞工程精华版

植物细胞工程

（名词解释2’*5=10’ 填空10’ 简答20’ 论述10’）

名词解释

1.细胞工程(cell engineering)：应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。

2.细胞全能性（cell totipotency）：一个生活细胞所具有的产生完整生物个体的潜在能力。

动植物细胞都有全能性。

3.脱分化（dedifferentiation)：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。

4.细胞分化（differentiation）：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。

5.再分化（redifferentiation）：离体条件下，细胞脱分化后，无序生长的细胞及其愈伤组织重新进入有序生长再生为个体的过程。

6.体细胞胚somatic embryo（胚状体embryoid）：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物。

7.体细胞无性系变异（Somaclonal variation）：经过组织培养循环出现的再生植株变异。

8.嵌合体(mosaic)：同一有机体中同时存在有遗传组成不同的细胞。

9.快繁（rapid propagation）或微繁（micropropagation）技术：利用组培进行快速营养繁殖的技术。

10.游离小孢子培养（isolated microspore culture），又花粉培养（pollen culture）：把小孢子从花药中分离出来，进行人工培养。

11.胚胎拯救（embryo rescue)：种间或属间杂交时，两个基因组表达不协调，多数情况下胚乳最先败育，胚仍然健康，可通过离体胚培养将杂种幼胚培养成植株，称为胚胎拯救。

12.细胞悬浮培养（cell suspension culture）：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。

13.次生代谢产物（secondary metabolito）：由初生代谢产物经过一些独特的代谢途径派生出来的小分子化合物，在保持植物抗逆性、抗病性和抗虫性及担当信号分子方面起重要作用。

14.原生质体（protoplast）：植物细胞中，除细胞壁以外的成分。

15.FDA（Fluorescein diacetate，荧光素双醋酸盐） 活体染色：FDA 能透过原生质体膜，在内酯酶作用下水解为不能排出的，累积在质膜内的荧光素。在荧光显微镜下观察时，凡发淡绿荧光的都是活的原生质体。

16.滋养培养/看护培养（nurse culture):利用能分泌生物活性物质的细胞或组织培养物作为滋养者，促进原生质体的分裂和生长。

17.植物体细胞杂交（somatic hybridization）：完全不经过有性过程，只通过体细胞融合制造杂种的方法。又称为原生质体融合（protoplast fusion），是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。

18.异核体（hetrokaryon）：不同来源原生质体融合形成的杂种原生质体。

19.胞质杂种（cybrid）：利用不对称细胞融合技术，有可能使一个亲本的原生质体和另一个亲本的细胞质结合在一起，这种具有一个亲本的细胞核和两个亲本的细胞质的体细胞杂种叫做胞质杂种。

填空

1.植物细胞工程发展：

1839，Schwann、Schleiden——细胞学说

1902，Haberlandt——植物细胞离体培养实验

White——B族维生素的应用

Skoog 和Tsui（崔澂）——腺嘌呤的发现

Miller——激动素的发现

1958，Steward——单个胡萝卜细胞形成体细胞胚

中国罗士韦——最早研究茎尖培养

Morel and Martin——将茎尖培养应用于脱毒，形成最早的植物细胞工程产业

2. 合子及早期胚胎细胞均为胚性细胞。

3. 激素是离体培养的必须条件，与植物激素相关的基因表达是启动细胞脱分化的关键。

4. 先生长素后分裂素，利于细胞分裂；反之，利于分化。

5. 植物细胞离体培养再生两条途径:器官发生、体细胞胚胎发生

6. IAA与KT比例高时利于根的形成，低时利于芽的形成；

植物多肽PSK可极大加强基本激素的作用效果。

7. 外源2,4-D效果好：细胞内高浓度的游离形式，对内源激素没有反馈抑制。

8. 分化水平高的组织产生的无性系比分生组织产生的更易变异。

9.清洗器皿的酸液（洗液）：浓硫酸加重铬酸钾

10.母液配制：配制时加一个溶解一个，最后加钙。

11. 螯合铁使得培养基pH升高至6～8时，铁离子仍保持二价，可被很好地吸收利用。

12.过滤消毒：0.45或0.22μm微孔滤膜进行过滤。

13.灭菌sterilization方法：高压灭菌、干热灭菌、过滤灭菌、药剂灭菌（0.1%升汞）、火焰灭菌、熏蒸灭菌、紫外灭菌

14. 生长素：组培中生长素添加为了促进离体细胞分裂形成愈伤组织，或诱导试管苗生根。

15.细胞分裂素：赤霉素、乙烯、脱落酸

脱落酸: 组培中主要用于胚胎或胚状体发育的后期，抑制胚胎的过早萌发，促进胚胎成熟，使胚胎长成形态正常的植株。

16. 20世纪40年代，中国罗士韦世界上最早研究茎尖培养

1952，Morel和Martin 通过茎尖培养获得无病毒大丽花

17.我国花药研究：

a.朱至清：低铵离子浓度和过滤消毒的单糖显著促进禾谷类花粉胚的发育

b.欧阳俊闻：确立单核中期的小麦花粉最适于产生花粉植株

c.卫志明：碳饥饿可大幅度提高花粉胚的产率。

d.孙敬三：发现花粉中质体DNA降解引起的质体RNA和蛋白质的匮乏是白化苗形成的原因。

18.花粉的发育时期：单核中晚期至双核早期的花粉最易形成花粉胚或花粉愈伤。

19.1934，清华的李继侗和沈同发现银杏胚乳提取物可刺激离体胚生长。

20.ABA可抑制幼胚吸水，使其脱水干燥，发育成熟。

21.悬浮细胞的同步化：分选法、饥饿法、抑制剂法、低温处理法。

22.80年代末，日本实现紫草和人参的大规模细胞培养，以获得紫草素和人参皂苷。

23.分离原生质体的方法：机械法、酶法。

24.双子叶植物的幼叶、子叶、根和下胚轴的切段通常被用来制备原生质体。

禾谷类植物，疏松易碎的愈伤或悬浮培养的细胞是制备原生质体的理想材料。

25.原生质体融合的种类:对称融合、非对称融合。

简答与论述