TK1检测项目指导手册讲解
TK1与肿瘤标志物在消化道肿瘤诊断及病理学特征的相关性
TK1与肿瘤标志物在消化道肿瘤诊断及病理学特征的相关性江蓓蕾;鲍扬漪;叶艳【摘要】目的探讨癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA199)及细胞质胸苷激酶1(TK1)水平与胃癌、结直肠癌的诊断及严重程度的相关性.方法选取胃癌、结直肠癌147例次病例.其中胃癌76例次,结直肠癌71例次,选取70例次体检人员作为对照组.采用ELISA法检测患者CEA、CA199及TK1水平,TK1、CEA和CA199联合检测在消化道肿瘤诊断中的敏感性和特异性,收集各病例的病理学特征及TNM分期信息.结果胃癌患者TK1水平为(4.0±2.0)pmol/L,明显低于结直肠癌患者(4.6±1.8)pmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05),TK1分别与CEA、CA199联合检测以及CEA和CA199联合检测结果显示,联合检测的受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积均大于0.7,三项指标联合准确性最高;淋巴结转移、浸润深度大、肿瘤直径大、胃上部及低分化胃癌患者TK1、CEA及CA199水平均明显高于无淋巴结转移、浸润深度浅、肿瘤直径小、胃中下部及高分化(P＜0.01);结直肠癌浸润深度深、存在淋巴结转移、管腺癌、肿瘤直径＞5 cm及低分化病例CEA、CA199及TK1水平均明显高于结直肠癌浸润深度浅、无淋巴结转移、粘液腺癌、肿瘤直径≤5 cm及高分化病例(P＜0.01);胃癌患者TK1水平组内随TNM分期递增,差异有统计学意义(P＜0.05);结直肠癌患者CEA、TK1随TNM分期递增,差异有统计学意义(P＜0.05),TK1各TNM分期组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CEA、CA199及TK1联合可更有效地诊断消化道肿瘤,与消化道肿瘤病理特征密切相关,TK1在判断消化道肿瘤病变部位及TNM分期中更有优势.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2018(053)011【总页数】5页(P1762-1766)【关键词】胸苷激酶1;肿瘤标志物;消化道肿瘤;病理学特征;TNM分期【作者】江蓓蕾;鲍扬漪;叶艳【作者单位】安徽医科大学第三附属医院(合肥市第一人民医院)血液肿瘤科,合肥230001;安徽医科大学第三附属医院(合肥市第一人民医院)血液肿瘤科,合肥230001;安徽医科大学免疫教研室,合肥230032【正文语种】中文【中图分类】R735癌症是当今全球严重威胁人类身心健康乃至生命的一种以细胞增殖异常为主要表现的疾病。
胸苷激酶1（TK1）相关知识百问百答——体检和临床应用
胸苷激酶1（TK1）相关知识百问百答——体检和临床应用1问：TK1是什么？反映什么？能够用来干什么？答：胸苷激酶1简称TK1；，是目前世界上首个血清学细胞增殖标志物；可用于监测体内细胞异常增殖速度。
鉴于肿瘤等恶性疾病的异常增殖特性。
TK1医学价值及应用：1 ）检测影像不可见的极小的潜伏癌进程的增殖速度。
适用于体检筛查、癌前病变评估；2 ）评估癌变进程的风险度；3 ）评估预后生存率；4 ）提前预测复发风险；5 ）监测肿瘤治疗及疗效评估，化疗药物起效评估；6 ）为临床制定个体化治疗方案提供指导依据。
2问：TK1、肿瘤相关生物学标志物和影像学之间的区别？答：TK1是目前唯一的细胞异常增殖动力学标志物，同时也是唯一的提供肿瘤增殖活性信息的指标。
增殖活性信息与肿瘤标志物提示的肿瘤代谢信息，影像学提示的位置信息均为肿瘤关键信息，它特异性提示肿瘤恶性程度及进程风险，多信息联合解读有助于早期肿瘤风险评估，患者的预后评估，治疗监控，复发预测等准确性的提高。
监测体内细胞异常增殖速度,与肿瘤细胞DNA合成呈正相关；肿瘤相关生物学标志物是体内肿瘤细胞达到一定规模后才可能会在血液，血浆，其他体液（如尿液，唾液，痰，脑脊液，或胸腔积液）和/或组织检测；TK1 , 肿瘤相关生物学标志物, 影像学之间等区别3问：TK1与目前使用的肿瘤相关生物学标志物相比，有什么优势？TK1能为临床医生提供患者体内肿瘤细胞增殖持续的、动态的变化,更早反映肿瘤细胞的增殖速率变化，,为临床制定个体化治疗方案提供指导信息.血清TK1（STK1）能够提供了肿瘤细胞的增殖变化动态信息，影像学及肿瘤相关生物学标志物提供位置.大小及肿瘤细胞的代谢和形态信息.临床上采用TK1(1 X)联合方案,为临床医生提供肿瘤不同方面的信息.4问：临床上常见肿瘤相关生物学标志物有什么？基本原理？答：肿瘤相关生物学标志物AFP-甲胎蛋白——肝癌CEA-癌胚抗原——消化道、结肠癌、胃肠道CA125-癌抗原——妇科肿瘤、卵巢CA153-癌抗原PSA-前列腺TPA-组织多肽抗原——膀胱、前列腺、乳腺、卵巢、消化道SCC-鳞状上皮抗原——子宫癌、肺、头颈部、结核、肝硬化NSE-神经元特性稀醇化酶、肝、肾目前发现的肿瘤相关标志物主要有：甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）、β－人绒毛膜促性腺激素（β－HCG）、性激素和甲状腺激素、甲状腺球蛋白（TG）、抗甲状腺球蛋白（ATG）、甲状腺结合球蛋白（TBG）、抗甲状腺过氧化物酶（ATPO）。
TK1学术培训PPT
TK1：一种新型细胞异常增殖标 志物的应用简介
主要内容
1
2
背景介绍 TK1的应用 特点及优势 小结与讨论
3 4
背景介绍
肿瘤细胞增殖标志和肿瘤标志物有重要区别
肿瘤细胞增殖标志物：肿瘤细胞只有在增殖时才出现，静止状 态下不表达。如：TK1和Ki67。 肿瘤细胞标志物：只要是肿瘤细胞无论细胞增殖与否都可能表 达。往往与肿瘤细胞增殖无关，癌细胞不增殖时也表达，此时化疗 和放疗没有效果，反而杀伤大量的正常增殖的组织细胞，导致过度 治疗性损伤。
分别为细胞质TK( TK1)和线粒
体TK ( TK2) 。
增强化学发光免疫点印迹法
生物素标记 第二抗体
亲和素标记辣 根过氧化物酶 抗TK1抗体 ECL底物发光
TK1抗原
硝酸纤维素膜
TK1的应用
体检； 监测放化性疾病，演进过程 需要10年甚至更长的时间 正常 细胞
结
论
TK1能够对肿瘤患者的治疗效果进行评估； 这对于临床上肿瘤的治疗方案的选择、调整 具有重要意义。
评估预后、预测复发风险
推荐程序 （1）评估流程：治疗后1个月的TK1水平作为基准，之后 每个月的TK1水平与基准值进行比较。 （2）评估标准：<0.78评估为肿瘤复发低风险； >0.78而 <1.08评估为肿瘤复发中度风险； >1.08评估为肿瘤复发高 风险。 这种方法预测肿瘤复发风险的准确率大于66%。
浸润癌
受到持续攻击
癌前病变
未及时干预
原位癌
迅速增殖
检测 治疗
TK1结果解读
TK1检测结果 <1pM 1-2pM 细胞异常增殖度 （癌变风险） 增殖度非常低（-） 增殖度低（-+） 结果判定 进程为恶性 肿瘤的风险很低 进程为恶性 肿瘤风险低 在8-10年内进程为 恶性肿瘤风险是健 康者的2倍 在8-10年内进程为 恶性肿瘤的风险是 健康者的4-5倍 医生建议 健康者，保持状态，建 议每年复查 TK1值在正常范围，需 保持关注，建议半年复 查 警示癌前病变，关注组 织增生、肿块、溃疡、 病毒感染，建议每3个月 复查 高度警示进入癌前病变 阶段，检查各器官是否 有组织增生、肿块、病 变、溃疡、病毒感染、 建议每月复查
血清HE4 TK1 CA199联合检测对卵巢癌的诊断价值
血清HE4 TK1 CA199联合检测对卵巢癌的诊断价值王春阳;王羽;王子龙【摘要】目的:探讨血清人附睾蛋白4(HE4)、细胞质胸苷激酶(TK1)、糖类抗原199(CA199)联合检测对卵巢癌的诊断价值.方法:选取2016年3月至2018年3月我院妇科收治的124例拟行手术治疗的盆腔肿物患者为研究对象.根据术后病理检查结果将患者分为卵巢癌组(n=64)和卵巢良性疾病组(n=60),另随机选择同时间在本院进行体检的66例健康女性为对照组.比较3组受试者血清HE4、TK1、CA199水平差异,采用受试者工作特征曲线评估3项指标单项检测及联合检测的诊断价值[灵敏度、特异度、曲线下面积(AUC)].结果:卵巢癌组血清HE4、TK1、CA199水平和单项指标阳性率均高于卵巢良性疾病组和对照组(P<0.05),卵巢良性疾病组血清HE4、TK1、CA199水平和单项指标阳性率均高于对照组(P<0.05);3项指标联合检测诊断卵巢癌灵敏度和AUC均高于单项检测(P<0.05),特异度与单项检测比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:血清HE4、TK1、CA199表达在卵巢癌、卵巢良性疾病患者以及健康人群中不同,可作为诊断卵巢癌的敏感指标,且3项指标联合检测可提高检测的诊断准确性.【期刊名称】《河北医学》【年(卷),期】2019(025)007【总页数】5页(P1081-1085)【关键词】卵巢癌;HE4;TK1;CA199【作者】王春阳;王羽;王子龙【作者单位】湖北省鄂州市鄂钢医院, 湖北鄂州 436000;湖北省鄂州市鄂钢医院,湖北鄂州 436000;湖北省鄂州市中医院, 湖北鄂州 436000【正文语种】中文卵巢癌发病机制尚不十分明确，但有研究认为与遗传、年龄、饮食习惯、内分泌、环境等多种因素有关[1]。
卵巢癌发病隐匿，早期诊断难度较高，大多患者发现时疾病已进展至中晚期，容易引发腹腔和盆腔的广泛转移，其病死率较高，严重危害患者生命健康。
胸苷激酶1项目
胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析项目说明一、 癌症已成为最主要的致死类疾病 近10年来，癌症逐渐取代心血管疾病，成为中国人首要致死类病变，防癌形势严峻（右图）。
《2012中国肿瘤登记年报》显示，国人每分钟有6人确诊为肿瘤。
以我省（湖南省）为例，截至2010年，肿瘤死亡率为143.67/10万（略高于全国肿瘤死亡率135.88/10万），每四到五个死亡者中就有一个死于肿瘤，肿瘤类型以肝癌、食道癌、胃癌、肺癌为主。
二、肿瘤发病率逐渐升高带来的高社会成本和经济压力 癌症病人医疗费用在全民医疗费用中占比极高,根据全国政协教科文卫体委员会和中国癌症基金会2006年编写的《癌症的科学与实践》，如果按照每位病人花费2万元来估算，中国每年癌症病人的医疗费用高达近千亿元，占全国医疗卫生总费用的20％以上，远图1：2009年全国死亡病因分析2006年全国医疗费用支出肿瘤其他>20%高于其他慢性病的医疗费用。
而一般以为，2万元每人的标准完全被低估了。
世界卫生组织指出：三分之一以上甚至约一半以上的癌症都是可以预防的。
而癌症预防的成本，远远低于癌症治疗的花费。
同时造成肿瘤发病率和死亡率高及费用高昂的原因有:（1）早期发现难：缺乏经济、灵敏度高的适于早期全身筛查的检测手段：肿瘤标记物增强CT PET-CT 内窥镜免疫组化是否定性否否是配合组化否灵敏度低，尤其早期高高高高特异性低低高高高发现恶变阶段早期灵敏度低，中晚期灵敏度高肿瘤早期癌巢早期，较CT早6个月癌前病变期不典型组织增生是否适合全身筛查需联合使用是是否否安全性微创或无创造影剂易产生过敏，辐射辐射微创，但易发生出血样本来源有创费用低高昂贵低低（2）中晚期治疗难原因1：治疗过程中，缺乏准确预后的方法，治疗方案评估信息不足，方案有效性评估不足；原因2：治疗恢复过程中，缺乏灵敏、准确的复发风险评估方案，无法进行动态、有效的评估。
以上原因使得难以对患者实施具有针对性的个体化治疗方案。
血清胸苷激酶（TK1）检测对结肠癌的临床诊断价值
血清胸苷激酶（TK1）检测对结肠癌的临床诊断价值彭晓飞【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2013(11)10【摘要】目的评价血清胸苷激酶（TK1）检测对结肠癌的临床诊断价值。
方法分别检测60例结肠癌组、60例结肠息肉组及60例健康对照组血清TK1水平。
比较3组间的血清TK1阳性检出率的差异以及Dukes分期后，A，B，C，D四期间的检出差异。
结果结肠癌组TK1阳性率为61.83%，显著高于结肠息肉组（8.33%）和健康对照组（6.66%）（P＜0.01）。
而结肠息肉组和健康对照组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。
Dukes分期后，A，B，C，D四期间的检出值相互两两比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。
结论 TK1对结肠癌具有较高的临床诊断价值，但与结肠癌肿瘤分期无明显相关性。
【总页数】2页(P160-161)【作者】彭晓飞【作者单位】广东省清远市人民医院胃肠外科，广东清远 511518【正文语种】中文【中图分类】R735.3+5【相关文献】1.血清胸苷激酶（TK1）对健康体检人员中进展期癌前病变风险进程的跟踪研究[J], 宋成;施玉泉2.胃结肠癌患者血清TK1的分布及诊断价值 [J], 汪圣毅;陈志武;张丹;郑立平;宋景戈;姜皖杰;刘弋3.血清胃蛋白酶原(PGI、PGⅡ)联合胸苷激酶(TK1)检测对胃癌的诊断价值 [J], 张小燕;李印宸4.血清胸苷激酶1(TK1)在乳腺疾病中的表达 [J], 吴迎;周庆华;王天翔;陆健;项明洁5.血清胸苷激酶1（TK1）在乳腺疾病中的表达 [J], 吴迎;周庆华;王天翔;陆健;项明洁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胸苷激酶1是恶性肿瘤预后判断的动态标志5
胸苷激酶1是恶性肿瘤预后判断的动态标志国内外学术界近十余年来，针对TK1作为肿瘤预后标志物方面作了大量的研究工作，小结如下：1、肿瘤的恶性行为和DNA加速合成密切有关，以满足其异常快速增值的需要。
TK1反映了肿瘤增殖时S期嘧啶补救途径合成的关键酶的活性，是有特殊价值的S期增殖标志物，能用于监测和随访肿瘤患者，当肿瘤恶化时细胞快速增殖，该酶显著升高。
2、TK1升高和肿瘤恶化的关系得到了细胞试验、动物实验和大量临床资料的验证：国内外论文都表明一致的规律：不管什么肿瘤，当血清TK1处于正常状态，意味肿瘤处于稳定期或缓解期，TK1浓度或活性升高，意味肿瘤复发，预后较差，生存期明显短于TK1活性或浓度低者，且差异有统计学意义。
这一结论已为肿瘤学术界所公认，认为有里程碑价值。
35届世界肿瘤大会经专家讨论，建议在肿瘤诊治中，将TK1作为常规检测项目，定期监测。
3、为了进一步探讨TK1在判断肿瘤预后中的价值，不少研究都做了COX比例风险回归模型分析。
本文中引用了多种肿瘤的COX报告结果，这些报告除了TK1外，比较了大量公认的影响肿瘤预后的因素，统计结果表明TK1属于风险率最高的风险率因子。
4、TK1是一个独立的动态的预后标志物。
该标志物和肿瘤类型无关，只反映肿瘤细胞增殖速度和恶化程度。
临床经验表明，TK1主要用于预后评估，令学术界倍感兴趣的是该标志物是动态的，其敏感性取决病情，恶化程度越高，敏感性越高。
TK1在恶化症状出现3个月、6个月甚至9个月前，即出现异常，可提醒临床及时采取措施。
临床试验表明，当特异性为95%时，肿瘤恶性度高时，敏感性＞70%可靠性较大。
5、TK1也是制订临床抗肿瘤治疗方案的有效依据。
世界肿瘤大会和随后出现的大量临床研究结果都表明：肿瘤术后若TK1不高，可不必使用有强毒副作用的化疗药物。
抗癌治疗时若TK1逐渐降低，说明治疗有效，TK1不降甚至升高，意味治疗无效。
综上所述，TK1对肿瘤患者的治疗效果监控和预后评估有重要的参考价值，学术界正逐渐认识，广泛应用TK1，提高临床肿瘤的诊治效率，造福肿瘤患者。
TK1（胸苷激酶1）在健康体检中的应用
TK1（胸苷激酶1）在健康体检中的应用
刊首语
该项目
于2008年被欧洲列入细胞异常增殖性疾病风险筛查
及临床治疗评估监控指标
什么是TK1 “
TK1 (细胞质胸苷激酶1)是国际公认的细胞异常增殖标记物，它对检测血清中胸苷激酶1（STK1）的水平，动态了解体内癌细胞的增殖活动信息，评估肿瘤的治疗效果，更早预示肿瘤复发风险。
” TK1的检测方法
TK1的检测方式是抽取人体血液进行检测得出相应的TK1值，根据TK1值来评估罹患肿瘤的风险。
” TK1基础值建立
“
对于健康人而言，要评估肿瘤风险，首先要取得一个TK1的基础值，一般情况下基础值是通过连续三次的TK1检测而获得，每次检测的间隔是10天，取三次的平均值即为TK1的基础值。
TK1值在1~2之间的表示细胞异常增殖度低，患癌症的风险较低，平时稍加注意即可，建议半年复检一次TK1。
” TK1检测为您提供哪些疾病风险预测
“
TK1检测可灵敏的反映细胞异常增殖性疾病的进程，如组织增生、肿块、溃疡、糜烂、病毒感染及肿瘤等慢性疾病的进程，还可发现更多的潜在病变，大幅度提高因疾病引起的细胞恶性异常增殖筛查的准确度。
” TK1 的适宜人群
“
1、对健康体检人群的普检，因为现在的食品卫生确实是问题，残余农药，食品添加剂等都是致癌物。
2、有肿瘤家族史，特别注意防范。
3、肿瘤手术后康复者，特别要注意防止复发。
4、终老人，随着年龄的增长抵抗力下降，容易诱导体内癌细胞增长和活跃。
5、长期慢性炎症人群
”。
Tk1简介
检验科新开展项目之胸苷激酶1（TK1）简介胸苷激酶1（TK1）是肿瘤细胞DNA合成关键酶之一，是S期（DNA合成期）的特殊酶。
它的表达与肿瘤细胞增殖紧密相关，因此，TK1是国际公认的检测肿瘤细胞增殖速率的优选标志物，可实现动态、连续检测和评估。
TK1的临床应用价值体现在：1、动态监控手术、放化疗效果；2、独立的肿瘤评估预后因子；3、更早评估肿瘤复发风险；4、评估各类增殖类疾病恶变风险。
另外TK1在健康体检也有一定的应用价值：1、早期发现体内的恶性增殖状况，具有早期性；2、筛查出进展期癌前病变，预防肿瘤发生，具有广谱性。
建议以下人员重点检测监控TK1：1、有肿瘤家族史人群 2、肿瘤治疗后的康复期患者 3、良性肿瘤者 4、不典型组织增生 5、年龄超过35岁的人群 6、从事特殊行业者：如采矿,石化等
TK1水平以2Pm/L 为标准，检测结果解读如下：
临床中常用的肿瘤标志物，如CEA,AFP,PSA等只能发现部分器官的临床期肿瘤。
增加TK1细胞增殖度检查，能更准确地排查病变部位的癌变风险，是肿瘤标志物不能替代
的指标，在门诊检查中，不仅比肿瘤标志物有更大的排查范围，而且能进一步提高判别肿瘤增殖速度的准确度。
肿瘤标志物是探测人的体内是否已存在癌症，是“完成时态”，而TK1检测的是人的身体目前所处的风险状况，是“进行时态”，PET-CT是检测癌细胞的“代谢”状况，几者不能相互替代，但能相互补充，相互参照，互补信息。
应临床需要，检验科及时开展了TK1的外送检测，样本要求为新鲜空腹静脉血(不含任何抗凝剂)，检测时间为每周一、周四，五个工作日出报告。
血清TK1在健康体检筛查中预测癌前疾病发生的研究
血清TK1在健康体检筛查中预测癌前疾病发生的研究JIANG Xiaorong;WANG Yu【摘要】目的探讨胸苷激酶1(TK1)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)和前列腺特异性抗原(PSA)在临界值以下,对癌前疾病的预测意义.方法测定TK1、AFP、CEA 和PSA的平均值和浓度分布.健康筛查组(n=55750),包括非肿瘤疾病、恶性肿瘤和与恶性肿瘤风险相关的疾病人群.健康无病组(n=428)作为对照.结果健康筛查组(TK1<2 pM)中,部分人群(51.6％)呈近似正常浓度分布,部分人群(43.9％)较健康无病组轻度升高.由于分布广泛,在临界值以下的人群中,TK1平均值从健康无病组的(0.38±0.30)pM显著增加到健康筛查组的(0.69±0.55)pM,2组差异有统计学意义(P=0.01).性别和年龄中TK1浓度分布差异无统计学意义(P>0.05).AFP、CEA、PSA的均值及分布在性别及年龄2组间差异无统计学意义(P>0.05).相比健康无病组,健康筛查组在临界值以下升高的TK1与肝脏及前列腺的癌前疾病和肿瘤风险发展相关,而AFP、CEA和PSA无此相关性.结论 TK1是一种潜在的生物增殖标志物,可用于早期发现具有潜在或已经具有恶性肿瘤风险相关的癌前疾病或恶性肿瘤风险的人群.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2019(041)013【总页数】6页(P2049-2054)【关键词】胸苷激酶1;甲胎蛋白;癌胚抗原;前列腺特异性抗原;癌前病变【作者】JIANG Xiaorong;WANG Yu【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R195癌症是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，由于癌基因被激活，抑癌基因被抑制，是全世界人口死亡的主要原因，2015年WHO调查显示，约有4 000万人死于非传染性疾病(NCDs)，占总死亡人数(5 600万)的70%[1]。
TK1检测项目指导手册
TK1检测项目指导手册1. 概述TK1检测项目指导手册旨在提供有关TK1检测项目的详细信息和操作指南，确保检测工作的准确性和一致性。
本手册适用于所有参与TK1检测项目的人员，包括项目经理、技术人员和实验室工作人员。
2. 检测项目简介2.1 检测目的TK1检测项目的主要目的是确定目标物质是否存在以及其浓度水平。
通过检测结果，可以评估样本的质量、安全性和合规性。
2.2 检测原理TK1检测项目基于XX原理进行，主要包括样本准备、实验操作和数据分析等步骤。
详细操作流程将在本手册的后续章节中描述。
3. 检测设备和试剂3.1 设备清单- 仪器A：用于XX检测的仪器，型号XXX- 仪器B：用于XX测量的仪器，型号XXX3.2 试剂清单- 试剂A：用于样本预处理的试剂，成分及用量详见附录A- 试剂B：用于数据分析的试剂，成分及用量详见附录B4. 检测流程4.1 样本收集与准备- 收集样本，并按照规定方法进行样本制备，确保样本的完整性和代表性。
- 对样本进行必要的预处理，如提取、浓缩、稀释等，以获得可靠的检测结果。
4.2 实验操作4.2.1 样本处理- 将样本转移至适当的实验容器中，按照相关操作指南进行样品处理。
- 添加适量的试剂A，混匀并满足反应条件。
4.2.2 仪器操作- 打开仪器A，按照设备说明书操作进行初始化和校准。
- 安装样本，设置相关参数，并启动检测程序。
4.3 数据分析和结果解读- 通过仪器B获取检测数据。
- 使用试剂B对数据进行分析和解读，确定目标物质的浓度水平。
- 根据设定的标准，判断检测结果的合格性，并生成检测报告。
5. 质量控制5.1 样品质控- 同时进行阴性对照和阳性对照的检测，以验证方法的准确性和可靠性。
- 重复检测一部分样品，以检查方法的复现性和一致性。
5.2 仪器质控- 按照仪器操作手册进行日常维护和校准，确保仪器的正常运行。
- 定期进行性能验证，检查仪器的准确性和灵敏度。
6. 安全事项6.1 实验室安全- 在实验室进行操作时，必须按照实验室安全操作规程进行，包括戴手套、穿实验服、戴护目镜等。
胸苷酸激酶1(TK1)是恶性肿瘤预后判断的动态标志
什么是胸苷激酶1 (TK1)？
a、胸苷激酶1(TK1) 是目前发现用于临床检测的唯一细胞增 殖性标志物。 b、TK1的生物化学特征：TK1是一特殊激酶，催化胸苷 (TdR)为1-磷酸胸苷酸 (TMP)，是癌变细胞DNA合成必需的 前体物，在细胞增殖期活性大大提高。
胸苷激酶1(TK1) :
与肿ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ细胞增殖速度密切相关，并与肿瘤疾病的轻重进程 程度有关;
血清TK1是一种优选的动态预测恶性肿瘤风险进程及评估 预后的方法，能够用于疗效评估和预后观察。
应用现状
国际上广泛开展TK1监测，以评估肿瘤疾病进程 和判断预后。
国内近年来刚刚开始引进。 目前省内仅一家三甲医院开展TK1检测，具有非 常广泛的应用前景和临床意义。
TK1检测原理及步骤
血清样品 TK1抗原
300 250 200 150 100 50 0 患癌 286人 22% 181人
13%
每10 万人
概率
患癌死亡
如何防治肿瘤
细胞恶性增殖是组织恶性病变 （癌变）的警号！
1、准确判断疾病进程，早期治疗及良好的预后评估是征服肿 瘤的关键！ 2、肿瘤的恶性程度、疾病进程和预后与癌细胞的增殖速度密 切相关。 用什么办法能有效治疗肿瘤？手术和病理可回答部分结果，但 无法无创地反映即时的动态变化。
高通量、更经济。
血清TK1含量检 测原理示意图 LBSA-ECL(标记 亲和素链霉素-增 强化学免疫)联合 检测系统 举例：含有TK1的肿瘤患者血清， 3 微升点样 到NC膜
抗TK1IgY抗体
生物素IgY二抗 辣根过氧化物酶 标记链霉亲和素 (SA-HRP) 底物(1, 2) 增强化学发光ECL
血管内皮生长因子与热休克蛋白90α和胸苷激酶1在肝恶性肿瘤临床诊断中的应用价值探讨
血管内皮生长因子与热休克蛋白90α和胸苷激酶1在肝恶性肿瘤临床诊断中的应用价值探讨陈丹1陈博2陈涌泉31中国人民解放军陆军第七十三集团军医院检验科，厦门361003；2安徽医科大学附属巢湖医院检验科，合肥238000；3福建医科大学附属厦门弘爱医院医学检验中心361006通信作者：陈涌泉，Email：【摘要】目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、热休克蛋白90α（heat shock protein90α，HSP90α）和胸苷激酶1（thymidine kinase1，TK1）在肝恶性肿瘤临床诊断中的应用价值。
方法选取2018年7月至2020年6月安徽医科大学附属巢湖医院收治的肝恶性肿瘤患者［32例，男性23例，女性9例，年龄（47.80±11.78）岁］、肝良性疾病患者［32例，男性21例，女性11例，年龄（49.24±13.22）岁］和同时期体检健康人［32例，男性22例，女性10例，年龄（48.32±12.65）岁］作为研究对象，检测所有研究对象初诊血清样本的VEGF、HSP90α和TK1水平，分析其在肝恶性肿瘤、肝良性疾病患者和健康人群血清中的表达情况及其鉴别诊断效能。
结果肝恶性肿瘤组VEGF、HSP90α和TK1水平分别为284.58（78.40，604.37）pg/ml、122.03（88.76，197.16）μg/ml和2.21（0.89，3.60）pmol/L，肝良性疾病组VEGF、HSP90α和TK1水平分别为120.58（67.64，196.38）pg/ml、77.32（53.43，103.65）μg/ml和0.71（0.23，1.84）pmol/L，健康对照组VEGF、HSP90α和TK1水平分别为122.54（63.52，183.43）pg/ml、65.38（49.86，98.57）μg/ml和0.81（0.29，1.78）pmol/L。
CD24和MMP-2及TK1在不同病理类型结直肠息肉恶变筛查中的价值
·临床论著·Clinical Article·CD24和MMP-2及TK1在不同病理类型结直肠息肉恶变筛查中的价值庞念德1陆晓伟1陈丕绩2杨丽萍3广东省深圳市盐田区人民医院1急诊科2检验科3内镜中心（广东深圳518000）[基金项目]深圳市科技研发资金(JCYJ20160427112917896)[作者简介]庞念德(1971-10~),男,山东临沂人,硕士,副主任医师,研究方向:大肠癌的早期防治研究。
E-mail:****************结直肠息肉是临床一种常见的消化道疾病,多项研究显示,腺瘤性息肉是结直肠癌的癌前病变[1-2]。
有效的早期筛查能够及时发现癌前病变,从而达到防治的目的[3]。
目前临床对于结直肠癌的早期筛查主要通过传统方法进行,如大便潜血试验、结肠镜等,虽然有一定效果,但存在较多的局限性,且特异度及敏感度较低,同时还存在高侵入性及高风险性。
临床已证实,腺瘤性息肉的病理类型、增生程度、大小及数量均是导致其癌变的重要因素。
研究发现,簇分化抗原24(CD24)、基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及胸苷激酶(thymidine kinase,TK1)在恶性肿瘤及癌前病变中均呈高表达[4],因此,了解机体内癌细胞的增殖活动,具有重要的临床意义。
对此,本研究通过探讨CD24、MMP-2及TK1在不同病理类型结直肠息肉及血清中的表达,分析其与结直肠息肉的临床病理因素的关系,评价三者在不同病理类型结直肠息肉恶变筛查中的临床价值。
1资料与方法1.1一般资料选择2018年6月—2019年2月在广东省深圳市盐田区人民医院接受治疗的120例息肉患者,男82例,女38例;年龄22~68岁,平均(54.47±5.28)岁,其中炎性息肉30例、管状腺瘤30例、绒毛管状腺瘤30例、绒毛状腺瘤30例。
其增生程度分别为无增生、轻度增生、中度增生、重度增生。
剪切波弹性成像参数联合血清中期因子、胸苷激酶1、促甲状腺素与甲状腺球蛋白比值鉴别诊断甲状腺结节的临床
·临床研究·剪切波弹性成像参数联合血清中期因子、胸苷激酶1、促甲状腺素与甲状腺球蛋白比值鉴别诊断甲状腺结节的临床价值柯淑丽胡兵车鹏飞王凡向小蔚胡莉莉摘要目的探讨剪切波弹性成像（SWE）参数联合血清中期因子（MK）、胸苷激酶1（TK1）、促甲状腺素与甲状腺球蛋白比值（TSH/Tg）鉴别诊断甲状腺结节良恶性的临床价值。
方法选取我院经术后病理结果或穿刺结果证实的甲状腺结节患者129例，均为单发病灶，其中良性组98例，恶性组31例，均行SWE检查及血清MK、TK1、TSH、Tg检测，比较两组SWE参数［杨氏模量最小值（Emin）、最大值（Emax）、平均值（Emean）］，以及血清MK、TK1、TSH/Tg的差异。
应用Logistic回归分析建立SWE参数联合血清MK、TK1、TSH/Tg的诊断模型；绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析该模型鉴别甲状腺结节良恶性的诊断效能。
结果与良性组比较，恶性组Emax、Emin、Emean及血清MK、TK1、TSH/Tg均升高，差异均有统计学意义（均P<0.05）。
应用Logistic回归分析建立SWE参数联合血清MK、TK1、TSH/Tg的诊断模型为：Logit（P）=-0.069+0.101×Emean+0.353×血清MK+0.328×血清TK1+0.882×血清TSH/Tg；ROC曲线分析显示，该模型鉴别诊断甲状腺结节良恶性的曲线下面积（AUC）、灵敏度、特异度分别为0.864、83.87%、85.71%，其鉴别诊断甲状腺结节良恶性的AUC高于各指标单独使用（0.756、0.719、0.709、0.732），差异均有统计学意义（均P<0.05）。
结论SWE参数联合血清MK、TK1、TSH/Tg在鉴别诊断甲状腺结节良恶性中有一定的临床价值。
关键词剪切波弹性成像；甲状腺结节，良恶性；血清中期因子；血清胸苷激酶1；促甲状腺素与甲状腺球蛋白比值［中图法分类号］R445.1；R736.1［文献标识码］AClinical value of shear wave elastography combined with serum midkine，thymidine kinase1，ratio of thyrotropin and thyroglobulin in thedifferential diagnosis of thyroid nodulesKE Shuli，HU Bing，CHE Pengfei，WANG Fan，XIANG Xiaowei，HU LiliDepartment of Ultrasound，Renhe Hospital Affiliated to Three Gorges University，Hubei443001，ChinaABSTRACT Objective To investigate the clinical value of shear wave elastography（SWE）combined with serum midkine（MK），thymidine kinase1（TK1），ratio of thyrotropin and thyroglobulin（TSH/Tg）in the differential diagnosis of benign and malignant thyroid nodules.Methods A total of129patients with thyroid nodules confirmed by postoperative pathological or puncture results in our hospital were selected，all of whom were single lesions.Among them，98cases were in the benign group and31cases in the malignant group，all of whom underwent SWE examination and serum MK，TK1，TSH and Tg detection.SWE parameters［minimum Young’s modulus（Emin），maximum Young’s modulus（Emax）and average Young’s modulus（Emean）］，and the serum MK，TK1and TSH/Tg were compared between the two groups.Logistic regression analysis was used to establish a diagnostic model of SWE parameter and serum MK，TK1，TSH/Tg.Receiver operating characteristic（ROC）curve was drawn to analyze the differential diagnosis value of the model for benign and malignant thyroid nodules.Results The Emax，Emin，Emean and the serum MK，TK1，TSH/Tg in the malignant group were significantly increased compared with the benign group，the difference were statistically significant（all P<0.05）.Diagnosis model of SWE parameters combined with serum MK，TK1，TSH/Tg established by Logistics regression analysis was：Logit（P）=-0.069+0.101×Emean+0.353×MK+0.328×TK1+0.882×TSH/Tg.ROC基金项目：湖北省卫生健康委2019年度第三批联合基金立项项目（WJ2019H541）作者单位：443001湖北省宜昌市，三峡大学附属仁和医院超声科甲状腺结节为内分泌系统常见病，触诊检出率仅4%~8%，常规超声检查检出率可达68%［1］。
基于血清PG、G-17和TK1对早期胃癌诊断的相关性研究
基于血清PG、G-17和TK1对早期胃癌诊断的相关性研究作者：谭翠莲黄云妍周敏霞郑少娟来源：《医学食疗与健康》2021年第17期[摘要]目的：研究早期胃癌患者采用血清胃蛋白酶原、胃泌素17、胸苷激酶三项指标联合检测方式对病情进行诊断的临床价值。
方法：选择在我院接受治疗的早期胃癌、其他消化系统肿瘤疾病、慢性萎缩性胃炎患者各30例，再抽取同期接受健康体检的同年龄段健康人群30例，分别将其定义为研究1组、研究2组、研究3组、对照组。
采用ELISA法和化学发光法对四组研究对象的血清胃蛋白酶原、胃泌素17、胸苷激酶三项指标水平进行测定，对比各项检测结果及检测结果阳性率。
结果：研究1组研究对象血清胃蛋白酶原I水平均低于研究2组，组间有统计学意义（P<0.05）;研究2组低于研究3组，组间有统计学意义（P<0.05）;研究3组低于对照组，组间有统计学意义（P<0.05）。
研究1组研究对象血清胃蛋白酶原II、胃泌素17、胸苷激酶水平均高于研究2组，组间有统计学意义（P<0.05）;研究2组高于研究3组，组间有统计学意义（P<0.05）;研究3组高于对照组，组间有统计学意义（P<0.05）。
研究1组血清胃蛋白酶原、胃泌素17、胸苷激酶检测结果阳性率高于研究2组，组间有统计学意义（P<0.05）;研究2组高于研究3组，组间有统计学意义（P<0.05）;研究3组高于对照组，组间有统计学意义（P<0.05）。
结论：早期胃癌患者的血清胃蛋白酶原、胃泌素17、胸苷激酶三项指标水平会明显异于胃部良性病变和其他消化系统肿瘤疾病患者，以及正常健康人群，临床上可以将上述三项指标，作为早期胃癌患者病情筛查和诊断的重要参考依据，提高诊断速度和准确性，为患者争取更多的有效治疗时间，使其转归更加理想。
[关键词]早期;胃癌;胃蛋白酶原;胃泌素;胸苷激酶;诊断[中图分类号]R735.2[文献标识码]A[文章编号]2096-5249（2021）17-0078-02早期胃癌具体指的是癌变组织发生在胃黏膜层及黏膜下层位置，不论其分部范围的大小和是否存在淋巴结转移[1-2]。
胸苷酸激酶(Thymidine Kinase 1,TK1)是恶性肿瘤
癌症最基本的特征是由癌基 因突变所致的细胞生长失控，异 常增殖。肿瘤的恶性行为和特殊 的代谢密切有关，当肿瘤细胞快 速增殖时，异常的嘧啶啶合成以 补救途径为主，胸苷激酶TK1是 该途径的关键酶，
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人TK1 空间结构图。P 环和套索闭环，N 和C 端位置显示在人TK1 单体结构图A 黄 色示镁原子，灰色示锌原子。
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瑞典的Carlsson等在2009年发表 了评估乳腺癌的TK1作用的专题 论。他们研究认为手术后四周 TK1的AUC为0.56,当复发转移时 的TK1的AUC为0.73 (95% CI 0.65-0.80，P=0.0001))。复发 转移病人TK1大大高于术后未见 复发转移者。
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Her-2阳性、雌激素受体阴性、孕酮受体阴 性都是公认的乳腺癌预后差的因素，伴有 上述因子的病人TK1相对较高，特别需要指 出的是上述因子只能通过病理检验才能确 定，而TK1是由血清测得，无创、方便、价 格低廉，可以动态监测，更适宜临床应用。
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检测方法：目前，临床应用的血清非同位素 TK1的检测有三种方法： ①DiviTum 由瑞典 Biovica公司提供的高敏试剂 ELISA药盒；TK1活性对照组值2.0～7.5U/L,平均 4.3 U/L，cut-off值8 U/L，有的用国际单位IU/L 表示，为了强调血清TK1常用STK1表示; ②由意大利DiaSorin公司提供的可在Liaison全自 动分析仪用的血清TK1活性检测免疫化学药盒药盒。 对照组值4～114DU/L, 平均43 DU/L; ③瑞典最近开发一种灵敏度和特异性高的血清学检 测方法即点印迹/免疫增强发光检测系统(ECL dot blot )， 血清TK1浓度正常范围﹤2pM。灵敏度高。
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CLA存活模式图，纵座标为存活率，蓝色曲线代表TK1〈26.5U/L(45例)平均存活29 个月,金黄色线代表TK1〉26.5U/L(47例)平均存活14.7个月（P〈0.001〉
TK1说明书
胸苷激酶1(TK1)测定试剂盒（酶联免疫法）使用说明书【产品名称】通用名称：胸苷激酶1（TK1）测定试剂盒（酶联免疫法）【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】本试剂盒用于定量检测人血清/血浆中胸苷激酶1(TK1)的浓度，不得用于肿瘤的辅助诊断。
胸苷激酶1（简称TK1）是评估细胞增殖的重要标志物，是细胞周期S期依赖酶。
它参与细胞增殖过程中S期DNA合成，与细胞增殖密切相关。
通过对血液中TK1浓度的检测，能提供人体细胞增殖的动态变化信息。
【检验原理】本实验采用双抗体夹心法测定TK1的浓度水平。
用TK1单克隆抗体包被微孔板制成固相抗体。
在包被微孔板中加入含有TK1的校准品/质控品/待测样本、TK1结合抗体及TK1酶结合物，温育后即形成一个抗体/抗原/抗体/酶标二抗的复合物，充分洗涤后加入显色剂显色，一段时间后终止反应，在450nm处测OD.值，OD.值随标本中TK1浓度的增加而升高，根据校准品绘制的校准曲线即可算出标本中TK1的含量。
【主要组成成份】1、TK1包被板：包被TK1单克隆抗体的微孔板。
48孔/96孔板2、TK1校准品1套A-F：来源于人血清，浓度0，1，2，5，10，20pM，可溯源至制造商选定的测量程序。
1×0.5ml3、TK1结合抗体：兔抗人TK1多抗。
1×2.5ml/1×5.0ml4、TK1酶结合物：HRP标记的羊抗兔IgG。
1×5.0ml/2×5.0ml5、TK1质控品：来源于人血清，质控范围为15pM±2.4PM。
1×0.5ml6、显色剂A：主要成分为过氧化脲素。
1×5.0ml7、显色剂B：主要成份为3，3，，5，5，－四甲基联苯胺盐酸盐（TMB·2HCl）。
1×5.0ml8、浓缩洗涤液（25×）：浓缩的磷酸缓冲液，使用前按1：24稀释。
1×20.0ml9、终止液：2mol/L硫酸溶液。
TK1检测项目指导手册
第一部分项目运行意义概述胸苷激酶1简称TK1，是一种国际公认的细胞增殖特异性标志物；它参与DNA补救合成途径,是DNA合成的特殊标志酶。
临床上,可用于监测和评估体细胞的异常增殖速度。
健康人细胞多处于静止状态（非增殖细胞），血清中的TK1酶含量极微，而随着增殖类疾病的发生，尤其是肿瘤、组织异常增生类疾病，细胞发生过度增殖，血清中TK1酶的含量出现显著升高，超过健康人平均水平2倍甚至100倍以上。
所以，通过检测血清中TK1浓度水平的变化，能够敏感地发现细胞增殖异常，动态评估细胞增殖发展趋势，为提前干预治疗高风险癌前病变，遏制肿瘤进程提供重要信息。
在瑞典卡罗琳斯卡大学(诺贝尔医学和生理学奖评审机构)二十多年的研发基础上,华瑞同康生物技术（）与瑞典Karolinska大学TK1研究团队共同研制出高灵敏度的胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析试剂盒及CIS系列化学发光数字成像仪，该系统是世界上唯一用于临床检验血清中TK1浓度的产品，其特异性高于95%,对各类增殖性疾病的综合检测灵敏度高于70%。
该系统已在多临床领域得到较为广泛地应用：1、独立的肿瘤预后因子：多国家，多机构的研究表明，TK1是优选的预后评估指标，可作为独立的肿瘤预后因子；2、动态评估手术、放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考；3、更早评估肿瘤复发风险：对肿瘤康复期患者进行动态跟踪，较影像学更早提示肿瘤复发或转移风险信号；4、评估各类增殖类疾病恶变风险：处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。
基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地通过TK1的浓度变化，发现恶性增殖风险，为肿瘤的癌前干预提供了更有效率，更有价值的信息，适用于无疾病人群的恶性增殖风险筛查。
第二部分项目运行准备一.项目环境1、环境参数温度： 24-25℃；湿度：小于65%；实验用水：（1）双蒸水；（2）去离子水；2、实验室设置要求：（1）项目最小占地约8-9平方米；（2）工作区域可放置两1.5m×0.8m或一3m×1m工作台；（3）控温设备：30立方米左右的独立空间，可选用2匹的挂式空调进行控温,或选用恒温摇床，如下图：二、项目所需设备1、实验用设备2、实验工具及耗材三、实验样本处理要求及保存样本种类：血清采集要求：1、必须使用无任何添加剂的真空采血管；2、取静脉血2ml（室温）；3、建议空腹采血；4、脂血、溶血样本可能造成实验结果的偏差，不建议使用；样本处理：1、采血完成后，室温下静置或37℃水浴至凝固后离心使用；2、离心转速：4000r/min，离心时间：5min；注：室温放置时间不宜超过3h；样本保存：1、离心后的血清如非即时使用，应立即分装，推荐血清分装量100-200μl/管，放置于-20℃保存；2、-20℃保存时间以不超过7天为佳；3、如需长时间保存，建议提高分装量（1.5ml），并放置于-80℃（可保存3年左右）；样本运输：1、样本如需外送检验（本市围或行程小于3小时），建议采血后先放置于2-8℃静置，到检验点后取出离心，处理要求同上；2、样本如需外送检验（外省市），建议离心后分装至分装管中，血清分装量 1.5ml/管，运输介质建议使用保温箱+化学冰+干冰，干冰用量 2公斤/24小时（根据路程耗费时间增量）；样本复融：1、血清使用前需充分振荡混匀；2、冷冻保存的血清样本，需放置于室温完全解冻后使用；3、反复冻融的血清样本严禁使用。
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胸苷激酶1（TK1）项目指导手册第一部分项目运行意义概述胸苷激酶1简称TK1，是一种国际公认的细胞增殖特异性标志物；它参与DNA补救合成途径,是DNA合成的特殊标志酶。
临床上,可用于监测和评估体内细胞的异常增殖速度。
健康人细胞多处于静止状态（非增殖细胞），血清中的TK1酶含量极微，而随着增殖类疾病的发生，尤其是肿瘤、组织异常增生类疾病，细胞发生过度增殖，血清中TK1酶的含量出现显著升高，超过健康人平均水平2倍甚至100倍以上。
所以，通过检测血清中TK1浓度水平的变化，能够敏感地发现细胞增殖异常，动态评估细胞增殖发展趋势，为提前干预治疗高风险癌前病变，遏制肿瘤进程提供重要信息。
在瑞典卡罗琳斯卡大学(诺贝尔医学和生理学奖评审机构)二十多年的研发基础上,华瑞同康生物技术（深圳）有限公司与瑞典Karolinska大学TK1研究团队共同研制出高灵敏度的胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析试剂盒及CIS系列化学发光数字成像仪，该系统是世界上唯一用于临床检验血清中TK1浓度的产品，其特异性高于95%,对各类增殖性疾病的综合检测灵敏度高于70%。
该系统已在多临床领域得到较为广泛地应用：1、独立的肿瘤预后因子：多国家，多机构的研究表明，TK1是优选的预后评估指标，可作为独立的肿瘤预后因子；2、动态评估手术、放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考；3、更早评估肿瘤复发风险：对肿瘤康复期患者进行动态跟踪，较影像学更早提示肿瘤复发或转移风险信号；4、评估各类增殖类疾病恶变风险：处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。
基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地通过TK1的浓度变化，发现恶性增殖风险，为肿瘤的癌前干预提供了更有效率，更有价值的信息，适用于无疾病人群的恶性增殖风险筛查。
第二部分项目运行准备胸苷激酶1（TK1）项目指导手册一.项目环境1、环境参数温度： 24-25℃；湿度：小于65%；实验用水：（1）双蒸水；（2）去离子水；2、实验室设置要求：（1）项目最小占地约8-9平方米；（2）工作区域可放置两张1.5m×0.8m或一张3m×1m工作台；（3）控温设备：30立方米左右的独立空间，可选用2匹的挂式空调进行控温,或选用恒温摇床，如下图：二、项目所需设备1、实验用设备胸苷激酶1（TK1）项目指导手册胸苷激酶1（TK1）项目指导手册三、实验样本处理要求及保存样本种类：血清采集要求：1、必须使用无任何添加剂的真空采血管；2、取静脉血2ml（室温）；3、建议空腹采血；4、脂血、溶血样本可能造成实验结果的偏差，不建议使用；样本处理：1、采血完成后，室温下静置或37℃水浴至凝固后离心使用；2、离心转速：4000r/min，离心时间：5min；注：室温放置时间不宜超过3h；样本保存：1、离心后的血清如非即时使用，应立即分装，推荐血清分装量100-200μl/管，放置于-20℃保存；2、-20℃保存时间以不超过7天为佳；3、如需长时间保存，建议提高分装量（1.5ml），并放置于-80℃（可保存3年左右）；样本运输：1、样本如需外送检验（本市范围内或行程小于3小时），建议采血后先放置于2-8℃静置，到检验点后取出离心，处理要求同上；胸苷激酶1（TK1）项目指导手册2、样本如需外送检验（外省市），建议离心后分装至分装管中，血清分装量 1.5ml/管，运输介质建议使用保温箱+化学冰+干冰，干冰用量 2公斤/24小时（根据路程耗费时间增量）；样本复融：1、血清使用前需充分振荡混匀；2、冷冻保存的血清样本，需放置于室温完全解冻后使用；3、反复冻融的血清样本严禁使用。
第三部分项目核心产品简介一、胸苷激酶1细胞周期分析试剂盒注册号：粤食药监械（准）字2014第2400369号规格：24人份、48人份、96人份储存条件：2-8℃有效期：6个月（具体日期见试剂盒标签）使用要求：开封后一次性使用实验用时：单次实验用时5-6h（根据样本数量有所差别）；工作通量：300-400人份/天图1胸苷激酶1（TK1）项目指导手册主要组成成份：试剂盒由校准品、抗TK1-IgY、生物素化抗IgY二抗、SA-HRP、ECL1、ECL2、浓缩稀释液、浓缩洗涤液、封闭剂、硝酸纤维素膜主要成分组成。
组分名称、装量详见产品说明书，并以产品说明书为主。
二、CIS系列化学发光数字成像分析仪注册号：粤食药监械（准）字2011第2400879号1、设备性能参数●系统偏差：±5%●成像灰度等级：12bit(212)●分辨率：1392（H）×1040（L）●光学镜头：几何形变率小于1%●拍摄范围： 12cm×9cm可调●工作环境温度：10-30℃●单次批处理能力：96人份/次●读出噪音：≤7 e-rms@20MHz●降噪能力：专业级高效半导体制冷CCD，集成噪音软处理功能2、主要结构部件CIS-2化学发光数字成像分析仪、免疫点印迹分析软件、加密狗、Lenovo一体机。
胸苷激酶1（TK1）项目指导手册图2第四部分项目实验操作一、项目原理概述1、TK1检测：先将含有TK1抗原血清吸附在硝酸纤维素膜固相载体上，用抗人TK1-IgY抗体识别抗原（A），生物素化抗IgY二抗识别抗原-抗人TK1-IgY抗体并进行信号放大（B），亲和素化辣根过氧化物酶与生物素连接（C），在加入发光底物后，亲和素化辣根过氧化物酶催化底物发光，发出的光信号强弱光信号（D），必须通过CCD的信号采集设备进行采集和分析。
（如图3）胸苷激酶1（TK1）项目指导手册图32、实验结果分析：将反应完毕的样本载体，放入暗室（避免外界光的干扰），通过精密的制冷CCD长时间曝光将化学发光强弱信号转变为数字信号，保存后得到样本发光图片，通过校准品固定浓度与亮度的关系，绘制标准曲线，进而计算出其他样本TK1的浓度。
二、实验操作流程1、实验准备部分：1.1血清准备：请参照《实验样本处理要求及保存》章节；1.2 试剂工作的最佳温度为25-26℃，请使用空调和恒温水浴锅等保证实验工作液温度达到该标准；1.3 实验前需仔细清洗玻璃器皿：洗涤液清洗→清水冲洗→实验用水润洗1.4 检测实验用设备和工具是否都处于正常工作状态（包括化学发光数字成像分析仪），对于发现的异常情况进行及时排除；1.5 按照说明书要求配制实验所需的稀释液和洗涤液，保证配制好胸苷激酶1（TK1）项目指导手册后的pH值在7.2-7.8之间；2、实验操作控制1、点样：取出点样板，为防止污染在点样板下放一张白纸，样本上样量为3μl；a.取样后，枪头贴壁2-3次；b.加样枪垂直；c.扶稳加样枪，枪头固定于孔中央；d.保证样本打出后直接被膜吸附；2、晾干：将膜从点样板中取出，揭掉背面蓝色保护膜，放置于温度28-30℃，湿度小于65%的环境进行晾干，时间为30min；3、漂洗：待膜晾干完毕，将膜放入反应盒，倒入双蒸水或去离子水，使膜浸没于水中，以60-70r/min的转速洗涤2次，每次1min;4、封闭：封闭剂使用稀释液配制（3g封闭剂+50ml稀释液）；使用磁力搅拌器混匀5min（或用手快速搅匀10-15min），至没有封闭剂颗粒和沉淀为止；将晾干后的膜放入反应盒中，倒入封闭剂；以35-45r/min 的转速摇动，时间为30min；5、抗TK1-IgY抗体反应：将封闭液摇匀（盒底无沉淀）后倒出，然后加一抗反应液（一抗稀释浓度见试剂盒内说明书），并以400μl封闭剂/10ml反应液的比例添加封闭剂；以35-45r/min；反应2h；反应液温度控制在25℃左右；6、洗涤：倒去一抗反应液，先用洗涤液迅速漂洗两次，再倒入洗涤液以60-70r/min的转速洗涤3次，每次5min；7、生物素化抗IgY二抗：胸苷激酶1（TK1）项目指导手册按说明书稀释倍数进行稀释，35-45r/min反应40min；反应液温度控制在25℃左右；8、洗涤同69、SA-HRP：按说明书稀释倍数进行稀释， 35-45r/min反应60min；反应液温度控制在25℃左右，10、洗涤同611、ECL发光：取出洗涤好的膜，在吸水纸上控干后放在发光盒中，将ECL1、2液混合后均匀倒在膜上，计时反应1min，反应完成后，立即开始倒计时5min，将膜夹入压膜片中，用滚筒压平，放入化学发光仪中调整位置（十字交叉中心），关闭暗箱门，5min倒计时结束后进行拍摄。
三、实验结果分析1、工作前准备：1.1连接好电源，启动设备（可在拍摄前5min启动）；1.2运行免疫点印迹分析软件；在登录界面输入用户、密码后，进入软件操作页面（异常情况1）。
2、实验结果获取流程2.1预拍将实验膜片放入化学发光仪中调整位置（十字交叉中心），关闭样本台；点击工具栏“系统”——选择“读取CCD”，或者点击快捷按钮——单击“预拍”。
2.2 实验图像的获取：预拍结束后点击“读取图像”，即开始读取图像，读取完毕后会弹出“实验图片拍摄完毕，请取出模板”的提醒（异常情况2），取出膜片后，重新关闭样本台，点击“读取背景图像”，倒计时结束胸苷激酶1（TK1）项目指导手册后点击“应用”；2.3实验图像的处理点击“应用”，软件即会对图像自动进行背景扣除并自动压缩显示范围，生成结果图像，点击“关闭”关闭CCD对话框。
2.4实验图像的保存点击“图像”——“另存待分析图像（pwk）”，或快捷按钮，选择保存位置保存待分析图像后关闭图像，所保存的文件后缀名为“pwk”，保存后关闭分析仪电源。
建议：每天的实验结果建议保存在独立的文件夹，文件夹命名规则：实验时间+试剂批号，例如：20131212-NT1131101A图43、图像分析操作方法3.1新建实验和工作图像的获取点击“实验”——“新建实验”，或快捷按钮，打开新建实验对话框，填写实验名称、报告人、审核人等，点击“确定”；点击“实验”——“导入数据”——“打开待分析图像”，或直接点击快捷按钮，在弹出的对话框中找到2.4中保存的pwk文件，点击打开即可进入分析。
3.2工作图像的分析“图像”——“反视”，或直接点击快捷按钮——根据斑点数的胸苷激酶1（TK1）项目指导手册多少，点击上下箭头选取合适的模板如4×6，再点击右侧的“显示模板”按钮，如需不同尺寸的模板框可选择“其它…”,在弹出的“自定义模板尺寸”对话框中选择合适的“行数”“列数”，然后点击“保存，打开模板后利用上下左右箭头移动(快速移动同时按下“ctrl+方向键”) 使得所有斑点刚好都在选框内，框好点击快捷按钮“计算” ,在弹出对话框中选“yes”，软件将自动进行计算，计算结束按下图样式将原始图像、工作图像、线性图和数据四个图表显示。