血液病试验室流程SOP

血液病房实验室工作流程SOP文件

一、样本采集

1.1 医生开具患者的实验室检查申请单，患者持单到实验室进行相关检查。

1.2 实验室人员核对申请单的有关项目是否齐全、患者姓名、年龄、性别，住院ID、

床号、检查项目以及申请单上是否具明相关检验结果。

1.3 实验室人员进行标本采集操作：

1．3.1 患者准备

患者侧卧位、屈髋位，取髂骨后棘，消毒准备。

1．3.2 器材准备

骨穿包、消毒设备、麻醉药品、玻片7张、推片、采血针以及消毒纱布等

1．3.3 消毒备皮骨髓穿刺吸取0.2ml髓液涂片5张以上，要求有髓小粒、油滴

如有活检取骨组织1cm左右，红白相间有红随、骨质，固定于Bouin固定液或甲醛

液中。

1. 3.4 采指血涂片2张以上与髓片对照。

1. 3.5 交待医嘱于患者：伤口3天不要沾水，以防感染。

二、标本编号

2.1 样本采集后涂片后，在病房制片室进行编号，登记本、申请单、标本袋、标本

四者上编号一致。

2.2 新患者登记本上编新号，老患者编以前号以及第几次做此检查。

2.3 标本袋上应标明姓名、床号以及日期，以便以后复查检验。

2.4 骨髓组织活检编号同骨髓细胞形态学涂片。

三、标本制备

3.1 骨髓细胞形态学涂片制备

3.1.1 两张髓片、一张血片进行瑞氏染色10min，染色时间视髓片厚薄情况、实

验室温度，可以适当延长或者缩短。

3.1.2 对于临床诊断贫血、MDS、临床申请单开具、血常规的血红蛋白减少较多的

样本进行铁染色

3.2 骨髓组织活检标本制备

3.2.1 固定：取出的骨髓活组织块在Bouin固定液中30～60min，如组织块较大，

或CGL/CML等增生极度活跃之标本，可适当延长固定时间，但不宜 > 3 h 。

3.2.2 脱水：以浓度为60％、70％、80％、95％、100％、100％乙醇先后浸泡，

每瓶15min，不时摇荡进行脱水（末次乙醇处理后，组织块吸水纸吸干）。

3.2.3 包埋：Hemapun865普通塑料包埋，H865甲液2 ml模具中1~2h，然后4~6

滴乙液20 min。

3.2.4 切片：普通轮转式切片机切片5～8张，2um厚可供HGF、MGG、HE染色，

5um厚者可作Gomori、Masson和铁染色，一般切片5um ，一张玻片3张切片。

3.2.5 染色：常规做HGF染色，对于怀疑MF加做Gomori网硬蛋白纤维染色、Masson

胶原纤维三色染色。

附注：各种染色原理、步骤见相关操作SOP文件

四、标本检验

4.1 骨髓细胞形态学标本检验

4.1.1 BP片显微镜油镜×100计数100个有核细胞，观察WBC多少、无核RBC形

态、PLT是否易见以及其他情况。

4.1.2 BM片显微镜×10下，观察涂片、染色情况、骨髓增生分级并分类、计数巨

核细胞。

4.1.3 BM片显微镜油镜×100在厚薄均匀，染色良好部位分类计数有核细胞200

个，对于增生极度活跃标本应计数500个。

4.1.4 对于形态学上鉴别较难的疾病加以其他辅助染色、免疫组化进一步明确

4.1.4.1 红系异常增生： PAS 贫血：铁染色

WBC升高： NAP AL诊断：POX

4.1.4.2 AL进行免疫分型B-ALL、T-ALL

4.1.4.3 在形态学上较难辨认的M0、M1、M7与M5与L1/L2加作NAE-NaF

4.2 骨髓活检组织病理检验

4.2.1 骨髓增生程度、造血细胞比例、粒红细胞与巨核细胞形态与定位情况

4.2.2 骨小梁、脂肪细胞、血管系统、蛋白纤维情况

五、检验结果报告

5.1 骨髓细胞形态学报告

5.1.1 原始检验报告单上数据输入电脑，核对姓名、性别、床号、ID以及临床诊

断等

5.1.2 显微镜图像采集，找些典型、异常、真实表现BM情况的图像

5.1.3 BM、BP中观察，判断骨髓情况，就形态、比例、有无畸形、异常表现进行

描述。

5.1.4 附上辅助染色结果，

5.1.5 整体考虑，结合其他检验结果，立足BM客观、科学给出诊断

5.2 骨髓组织活检病理报告

5.2.1 骨髓组织活检结果报告同骨髓细胞形态学报告。

5.3 报告打印由实验室主管技师、审核员签字后生效。

5.4 病房报告投放到医生办公室指定地点，门诊报告实验室管理，患者本人或家属

自取。

六、检验资料、标本保存

6.1 检验资料按照日期顺序建档保存

6.2 检验标本脱油保存，白血病未作处理的标本保留，其余的未处理的标本丢弃，

保存同检验资料一同建档，以备复查。

2007年1月