植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定

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绿色食品植物蛋白饮料标准

绿色食品植物蛋白饮料标准

绿色食品植物蛋白饮料标准标准类别:NY/T行业推荐标准,关键词:绿色食品植物蛋白饮料,标准号:NY/T 433—2000,标准名称:中华人民共和国农业行业标准,绿色食品植物蛋白饮料,标准分类:无公害/绿色/有机食品标准,实施日期:2000-1-1。

NY/T 433—2000,绿色食品植物蛋白饮料1 范围本标准规定了绿色食品植物蛋白饮料的定义、要求、试验方法、检验规则、标志、标签、包装、运输及贮存。

本标准适用于A级绿色食品植物蛋白饮料的生产和流通。

2 引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。

本标准出版时,所示版本均为有效。

所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB 317—1998 白砂糖GB 2760—1996 食品添加剂使用卫生标准GB 4789.2—1994 食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3—1994 食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB 4789.4—1994 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.5一1994 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验GB 4789.10—1994 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.11—1994 食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验GB 4789.15—1994 食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数GB 4789.26—1994 食品卫生微生物学检验罐头食品商业无菌的检验GB/T 5009.11—1996 食品中总砷的测定方法GB/T 5009,12—1996 食品中铅的测定方法GB/T 5009.13—1996 食品中铜的测定方法GB/T 5009.16—1996 食品中锡的测定方法GB/T 5009.17—1996 食品中总汞的测定方法GB/T 5009.18—1996 食品中氟的测定方法GB/T 5009.19—1996 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法GB/T 5009.22—1996 食品中黄曲霉毒素B1的测定方法GB/T 5009.28—1996 食品中糖精钠的测定方法GB/T 5009.29—1996 食品中山梨酸、苯甲酸的测定方法GB/T 5009.36—1996 粮食卫生标准的分析方法GB 7718—1994 食品标签通用标准GB/T 10220—1988 感官分析方法总论GB/T 10790—1989 软饮料的检验规则、标志、包装、运输、贮存GB/T 10791—1989 软饮料原辅材料的要求GB/T 12143.1—1989 软饮料中可溶性固形物的测定方法折光计法GB/T 14771—1993 食品中蛋白质的测定方法GB/T 14962—1994 食品中铬的测定方法GB 16322—1996 植物蛋白饮料卫生标准NY/T 391—2000 绿色食品产地环境技术条件NY/T 392—2000 绿色食品食品添加剂使用准则3 定义本标准采用下列定义。

气相色谱-质谱法测定植物蛋白饮料中植物甾醇和胆固醇

气相色谱-质谱法测定植物蛋白饮料中植物甾醇和胆固醇

气相色谱-质谱法测定植物蛋白饮料中植物B醇和胆固醇周蕾("京市朝阳'食品药品安全监控中心京100123)摘要:该研究建立了气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)同时测定植物蛋白饮料中谷當醇、豆當醇、菜籽當醇、菜油當醇、豆當烷醇5种植物及含量的方优化升温程序、柱流速等仪器条件础上,对比确定了样品取样、皂化液度及的衍生化条件。

样品经皂化、提取、浓缩并衍生化后用定容,经GC-MS子(SIM分,5a-标定量。

经方法学验证,各當醇组分方法检出限为0.032〜0.058m.kg,定量限为0.104〜0.190m^kg,标准曲线线性关系良好«2!0.9999),在0.304〜21.3mgkg质量浓度范围内,加标回收率为90.6%〜101.2%,相对标准偏差(RSD)"5.3%。

关键词:植物蛋白饮料;植物;皂化;气相色谱-质谱中图分类号:0657.7文章编号:0254-5071(2021)05-0177-05doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2021.05.033引文格式:周蕾.气相色谱-质谱定植物蛋白饮料中植物當醇和胆固醇[J].中国酿造,2021,40(5):177-181.Simultaneous determination of p hytosterol and cholesterol in vegetable protein drinks by GC-MSZHOU Lei(Chaoyang District Food and Drug Safety Monitoring Center,Beijing100123,Chin:)Abstract:A method for the simultaneous determination of5phytosterols and cholesterol(p-sitosterol,stigmastol,rapesesterol,rapesesterol,stigmastanol)in vegetable protein drinks was developed by GC-MS.On the basis of optimized temperature programming,column flow rate and other instrument conditions, the sample amount,saponification alkali concentration and derivatization conditions were improved.After saponification,extraction,concentration and derivatization,the samples were measured by n-hexane,analyzed by GC-MS in selective ion monitor(SIM)and quantified by5a-cholestane as internal standard.The results showed that the detection limit of sterols was0.032-0.058mg/kg,and the limit of quantification was0.104-0.190mg/kg,the standard curves had good linearity(R2!0.9999).Within the range of0.304-21.3mg/kg,the standard recovery was90.6%-101.2%,and the relative standard devia­tion(RSD)was less than5.3%.Key words:vegetable protein drinks;phytosterol;saponification;GC-MS植物蛋白饮料是以一种或多种含有一定蛋白质的植物果实、种子或种仁等为原料,经加工或发酵制成的一类饮品!1#,其保留了原料中所富含的营养素、生物活性物质和植物化学物质,不仅可部分替代动物奶,以满足奶制品过敏者及乳糖不耐受者对蛋白质的需求,还可作为植物源蛋白饮食中的组成部分来减少疾病和肥胖的发生㈣,因此年来受者的,对植物蛋白饮料的发多集中于生产工叫产品稳定性!6]、理化指标冏和掺假定方!7#等,对其生物活性成分的少,其缺植物蛋白饮料中植物含的定和分植物是一类以多为、类的植物活性物质,以、化糖等植物源食物中,以植物、果和类中含量最高,其植物笛醇总量分别可达1055mg/100 g(米糠油)、158mg/100g(腰果)、135mg/100g(豌豆)㈣。

植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究进展

植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究进展

植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究进展植物蛋白饮料是指以豆类、谷物、坚果等植物为原料,经过加工制成的蛋白质饮料。

由于其健康、营养、环保的特点,植物蛋白饮料在市场上越来越受欢迎。

然而,由于利益驱动,市场上出现了一些掺假、冒充、仿制等现象,给消费者的判断和选择带来了困难。

因此,开展植物蛋白饮料掺假鉴别技术的研究至关重要。

目前,植物蛋白饮料掺假鉴别技术的研究进展主要体现在以下几个方面:首先,传统的分析方法得到了发展和完善。

例如,传统的物理化学分析方法可以通过检测掺假样品中的蛋白质含量、游离氨基酸、总氮等指标来判断其真伪。

这些方法虽然简单易行,但是对样品处理时间较长,且需要专业的仪器设备支持。

其次,基于色谱技术的鉴别方法逐渐应用于植物蛋白饮料的掺假检测中。

高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)等色谱分析技术可以通过检测样品中特定的标志物来鉴别植物蛋白饮料的真伪。

例如,通过检测掺假样品中的亚油酸、亚麻酸等特定脂肪酸的含量来进行鉴别。

第三,利用分子生物学技术进行植物蛋白饮料掺假鉴别的研究也取得了较大的进展。

例如,通过PCR扩增和测序技术可以对植物蛋白饮料中的基因序列进行分析,实现不同品种原料的鉴别。

另外,应用基因芯片技术也可以对多个基因进行同时检测,提高鉴别效率。

最后,近年来,新兴的先进分析方法,如红外光谱、质谱和电化学分析等也被应用于植物蛋白饮料的掺假鉴别研究中。

例如,通过红外光谱技术可以通过鉴别样品内部的化学结构差异来判断样品真伪。

质谱技术可以分析样品中的特征离子,从而进行鉴别。

电化学分析技术则可以通过检测样品中的电流和电压等参数来进行鉴别。

总的来说,植物蛋白饮料掺假鉴别技术的研究已经取得了一定的进展。

传统的分析方法得到了拓展和完善,同时新兴的先进分析方法也被引入到研究中。

然而,由于植物蛋白饮料的种类繁多、成分复杂,且掺假者的手法不断更新,因此,对于植物蛋白饮料掺假鉴别技术的研究还需要进一步加强和深化,以满足市场需求,保障消费者权益。

植物蛋白饮料产品标准

植物蛋白饮料产品标准

植物蛋白饮料产品标准植物蛋白饮料是一种以植物蛋白为主要原料,经过一定工艺制成的饮料,具有丰富的营养成分和良好的口感,受到越来越多消费者的青睐。

为了保障植物蛋白饮料的质量和安全,制定相应的产品标准是非常必要的。

一、原料选用。

植物蛋白饮料的原料应选择优质的植物蛋白粉,如大豆蛋白、豌豆蛋白等,不得使用含有有害物质的原料。

同时,应避免使用转基因原料,确保产品的安全性和健康性。

二、生产工艺。

植物蛋白饮料的生产工艺应符合相关法律法规的要求,严格控制生产过程中的温度、压力、时间等参数,确保产品的卫生安全和营养成分的完整性。

生产设备应定期进行清洁消毒,避免交叉污染。

三、添加剂使用。

植物蛋白饮料在生产过程中可以适量添加一些食品添加剂,如甜味剂、稳定剂等,但添加剂的使用应符合国家食品安全标准,不得超过规定的最大使用量,严禁使用禁用的添加剂。

四、产品包装。

植物蛋白饮料的包装应符合食品包装的相关标准,选用符合食品卫生要求的包装材料,包装过程中应保持卫生,防止二次污染。

包装上应标明产品的生产日期、保质期、生产企业信息等必要信息。

五、质量检验。

植物蛋白饮料的质量检验应包括原料的检验、生产过程的自检、互检和专业检测机构的抽检等环节,确保产品的质量稳定性和安全性。

检验包括外观检查、理化指标检测、微生物指标检测等内容。

六、贮存运输。

植物蛋白饮料在贮存和运输过程中应避免阳光直射、高温、潮湿等环境,防止产品变质。

在运输过程中应避免碰撞,防止包装破损导致品质下降。

七、食用安全。

植物蛋白饮料的食用安全是最重要的,产品中不得含有有害物质,不得超过国家标准规定的限量。

产品的食用说明应明确指导消费者正确的食用方法和注意事项。

总之,制定植物蛋白饮料产品标准是为了保障产品的质量和安全,促进植物蛋白饮料行业的健康发展。

希望生产企业和监管部门共同遵守和执行相关标准,为消费者提供更加安全、健康的植物蛋白饮料产品。

植物蛋白饮料

植物蛋白饮料

四、豆乳饮料的生产工艺
(一)生产工艺流程
原料精选→浸泡→清洗→脱皮→灭酶 →加水磨浆→分离脱臭→豆乳调制→ 杀菌→真空脱臭→均质→冷却→包装 →出厂
(二)工艺操作 1.原料 2.精选
3.清洗、浸泡 将要清洗的大豆以1份大豆3份水的比例 浸泡入水溶液中,根据季节温度的变化,控 制浸泡时间为8~12h。以水面上有少量泡沫, 豆皮平滑涨紧,将豆粒搓成两瓣后,子叶表 面平滑,中心部位与边缘色泽一致,沿横向 剖面易于断开为准。
Байду номын сангаас
第三节
一、杏仁露
其他植物蛋白饮料
(一)杏仁营养成分及其加工特性 苦杏仁是山杏的种子,是制造杏仁露的 主要原料。杏仁中的营养成分丰富,蛋白质 含量为25%左右,主要是杏仁球蛋白和酪蛋 白。杏仁中的脂肪高达50%,主要是油酸, 此外杏仁中还含有糖、丰富的矿物质和维生
素。
(二)生产工艺流程
脱皮→脱苦→磨浆→浆渣分离→配料→均质
→真空脱气→灌装→封口→灭菌→冷却→ 包装→成品
(三)工艺要求和操作 1. 原料的要求及处理方法 ⑴ 原料的要求 ⑵ 浸泡脱皮

化学法 机械法
⑶ 脱苦
2. 磨浆
3. 浆渣分离
4. 配料
(1)配方
(2)配料方法
5.均质 6.真空脱气 7.装罐、杀菌
二、花生乳 (一)花生的营养成分与加工特性 (二)生产工艺 花生仁→烘烤→冷却 →脱皮→浸泡→磨浆 →离心分离→花生浆→调配→脱气→均质 →杀菌→灌装→封口→二次杀菌→冷却→ 检验→花生乳
3. 皂素 皂素广泛分布于植物界的配糖体,能使 水溶液显著发泡,有使油类乳化的作用。大 豆约含5%皂素。皂素与硬脂酸三甘油酯、醇 类、酚类起反应,形成难溶性高分子化合物。 大豆皂素不被肠吸收而被排出体外。

食品检验项目表

食品检验项目表
抽检项目
限核桃露(乳)且执行标准为GB/T31325-2014
亚油酸/总脂肪酸
GB/T31325-2014《植物蛋白饮料核桃露(乳)》附录A
GB/T31325-2014《植物蛋白
饮料核桃露(乳)》
抽检项目
限核桃露(乳)且执行标准为GB/T31325-2014
亚麻酸/总脂肪酸
GB/T31324-2014《植物蛋白饮料杏仁露》附录A
GB/T31324-2014《植物蛋白
饮料杏仁露》
抽检项目
限杏仁露且执行标准为GB/T31324-2014
亚麻酸/总脂肪酸
GB/T31325-2014《植物蛋白饮料核桃露(乳)》附录A
GB/T31325-2014《植物蛋白饮料核桃露(乳)》
抽检项目
限核桃露(乳)且执行标准为GB/T31325-2014
(花生酸+山前酸)/总脂肪酸
GB/T31325-2014《植物蛋白饮料核桃露(乳)》附录A
GB/T31325-2014《植物蛋白饮料核桃露(乳)》
抽检项目
限核桃露(乳)且执行标准为GB/T31325-2014
花生酸/总脂肪酸
GB/T31324-2014《植物蛋白饮料杏仁露》附录A
GB/T31324-2014《植物蛋白
整顿办函(2011)1号《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂
品种名单(第五批)》
抽检项目
/
苏丹红Iv
GB/T19681-2005《食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》
整顿办函(2011)1号《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂
品种名单(第五批)》
抽检项目
/
类别
检验项目

植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究进展

植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究进展

植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究进展植物蛋白飲料是以植物果仁、果肉及大豆为原料(如花生、杏仁、核桃仁和椰子等),经加工、调配后,再经高压杀菌和无菌包装制得的乳状饮料,其不含或含较少的胆固醇,富含蛋白质、氨基酸及适量的不饱和脂肪酸,营养成分较全面,深受消费者欢迎,已成为饮料市场上不可或缺的产品[1]。

统计数据显示,2007年以来各饮料子行业增速最快的是植物蛋白饮料,2016年植物蛋白饮料行业收入为1 217.2亿元,2020年植物蛋白饮料市场高速发展,增速高达800%,购买人数上升900%,销量增速远超其他饮料品类,在饮料市场中成长贡献15.5%,排名第3。

随着植物蛋白质饮料原料价格的上涨,部分生产企业为降低生产成本,在饮料中掺入廉价的植物蛋白粉,或掺入成本低廉的非产品标识的植物原料,如央视在2018年“3·15”晚会中,曝光了多家企业在生产核桃露时未使用核桃浆,而使用成本远低于核桃浆的花生酱或核桃香精代替,上述行为严重扰乱社会市场秩序,损害消费者的合法权益。

目前,植物蛋白饮料市场掺杂使假情况比较严重,群众关注度高,有研究表明市场上35%蛋白质饮料标识的植物源性成分未检出,存在与产品标识成分及含量严重不符的情况[2]。

因此,对于植物蛋白饮料掺假鉴别技术研究有重要的实际意义。

1 检测技术目前,植物蛋白饮料检测的相关标准落后及不全面,采用定性检测的方法无法对植物蛋白饮料的成分进行高通量快速鉴定及品质的准确定量,监管部门不能准确、快速认定产品是否具有掺假行为,给人们的生活质量和安全带来不稳定的因素。

目前,针对植物蛋白饮料中源性成分鉴伪的研究相对较少,主要集中于酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)、色谱和质谱技术、电泳技术以及分子生物学技术。

1.1 ELISA检测技术赖心田等[3]用间接竞争ELISA检测方法实现了对核桃制品中核桃含量的测定。

植物蛋白饮料简介演示

植物蛋白饮料简介演示

05
植物蛋白饮料的推荐品牌和口 味
豆奶
总结词
豆奶是一种由大豆制成的植物蛋白饮料,具有丰富的营养成分,如蛋白质、纤维 和矿物质。
详细描述
豆奶是一种低脂、低糖、高蛋白的饮料,适合素食者和乳糖不耐症患者饮用。它 含有大量的植物性蛋白质、纤维和矿物质,如钙、铁和维生素E,有助于维持身 体健康。豆奶的口味清淡,可以作为早餐饮品或搭配其他食物食用。
椰子奶
总结词
椰子奶是一种由椰子肉制成的植物蛋白饮料,具有丰富的营养成分和独特的口感。
详细描述
椰子奶是一种富含蛋白质、纤维和矿物质的饮料,同时具有椰子的独特口感和香味。它含有大量的植物性蛋白质 、纤维和矿物质,如钙、铁和维生素C,有助于维持身体健康。椰子奶适合素食者和乳糖不耐症患者饮用,可以 作为早餐饮品或搭配其他食物食用。
燕麦奶
总结词
燕麦奶是一种由燕麦制成的植物蛋白饮料, 具有丰富的营养成分和独特的口感。
详细描述
燕麦奶是一种富含蛋白质、纤维和矿物质的 饮料,同时具有燕麦的独特口感和香味。它 含有大量的植物性蛋白质、纤维和矿物质, 如钙、铁和维生素B,有助于维持身体健康 。燕麦奶适合素食者和乳糖不耐症患者饮用 ,可以作为早餐饮品或搭配其他食物食用。
适量摄入植物蛋白饮料,结合 合理的饮食和运动,有助于减 轻体重和改善肥胖症状。
降低胆固醇和血压
植物蛋白饮料中的植物甾醇和 纤维能够降低胆固醇水平,减
少心血管疾病的风险。
植物蛋白饮料中的钾和其他 矿物质能够降低血压,预防
高血压和心血管疾病。
适量摄入植物蛋白饮料,结合 健康的生活方式,有助于维护
心血管健康。
为了控制糖分摄入,部分植物蛋 白饮料使用低糖或无糖的甜味剂

植物蛋白饮料

植物蛋白饮料
5、过胶体磨和均匀:
可以多次循环。
6、灌装:
用漏斗装至离饮料瓶口部2-3cm即可,注意趁热装瓶,趁热密封。
7、杀菌:
高温高压杀菌(温度105-121℃压强1.0-1.18kg/cm2)。时间:到达这个温度到达这个压强,排出冷空气排出冷凝水的前提下小包装20分钟左右,大包装20-30分钟。
8、冷却:
降压后分段冷却,80℃、60℃、40℃各冷却5分钟。
(二)国内外研究现状
1994年,陈宗道等人对大豆分离蛋白流变学特性进行了研究,研究表明大豆分离蛋白的等电点在pH4.2~4.6范围内。在该范围内大豆分离蛋白的溶解性、粘度、起泡性及泡沫稳定性、乳化性及持水性最弱;在该范围的两侧,随酸度或碱度增加,这些特性逐渐增强。大豆分离蛋白的粘度随浓度增加而增大,并通过建立数学模型来证明其表现为非牛顿假塑型流体的特性。
我国植物蛋白质资源十分丰富,如大豆、生、杏仁、椰子等。据联合国统计,目前世界的蛋白质供应量中植物蛋白占70%。植物蛋白饮含有丰富的蛋白质、必需氨基酸、维生素、矿物质等,是一种营养健康的饮品,并且它的风味独特,饮用方便,深受广大消费者的欢迎。特别以豆乳为主的植物蛋白饮料,保留了大豆中大部分的可溶性营养成分,其蛋白质含量高于牛奶且含有丰富的矿物质;有些人有乳糖不耐症,喝牛奶过敏,可以用豆奶代替牛奶;豆乳中含有大量的亚油酸和亚麻酸,长期食用不会造成血管壁胆固醇的沉积,对于那些有心脑血管疾病的人来说,喝豆奶还有降低胆固醇的作用。植物蛋白相对地容易被人体吸收,同时与动物蛋白相比在氨基酸组成上具有互补的作用,有利于改善我国人民的食物结构,解决我国食品结构中蛋白质含量偏低和奶源缺乏的问题,因此,大力发展植物蛋白饮料,具有重要的意义。
(三)主要参考文献
1.蔺毅峰.软饮料加工工艺与配方.北京:化学工业出版社,2006

植物蛋白饮料的定义与分类

植物蛋白饮料的定义与分类
件下活性降低,至pH9.0时失活。 在大豆浸泡时选用碱液浸泡,有助于抑制脂肪氧化酶
活性,并有利于大豆组织结构软化,使蛋白质的提取率 提高。
? Ⅲ高频电场处理:大豆中的脂肪氧化酶受高频电子效应、分子内热
效应以及蛋白偶极子定向排列并重新有序化的影响,活性受到钝化。
高频电场中不同处理时间对大豆腥味的影响
4.凝血素
? 是一种糖蛋白质,等电点6.1,分子质量89000~ 105000u,有凝固动物体的红血球的作用。 ? 该物质在蛋白水解酶的作用下容易失活,在加热条件下 也容易受到破坏。
5.豆皂甙
? 大豆中含有约0.56%皂甙。 ? 大豆皂甙有溶血作用,能溶解人体的血栓,可将其提取 出来用于治疗心血管病。 ? 大豆皂甙有一定毒性,一般认为人的食用量在低于 50mg/kg 体重时是安全的。
吡哆醇/μg/g
6.4
6.大豆异黄酮
? 大豆中含有1200~4200μg/g 异黄酮。 ? 具有抗肿瘤、抗溶血、抗氧化、抑制真菌活性等作用,
但其生理机制还有待进一步研究。但大豆异黄酮化合物 具有苦味和收敛性,如果含量过高,会产生使人不愉快 的味感。
二、大豆的酶类与抗营养因子
1.脂肪氧化酶 P151
关。豆乳的粒子密度、介质密度一般变化不大,近似为常 量。粒子半径和介质黏度决定粒子的沉降速度。 ? 在豆乳加工中 ,添加适量的增稠剂以增加黏度,改进技 术和设备以降低粒子半径,都可以提高豆乳的稳定性。
2.化学因素
? 豆乳的pH值对蛋白质的水化作用、溶解度有显著的影响。 ? 在等电点附近,蛋白质水化作用最弱,溶解度最小。 ? 大豆蛋白的等电点在4.1~4.6,为了保证豆乳的稳定性,
2.脂肪
豆油中所含的脂肪酸
饱和脂肪酸/%

食品中植物活性成分的分离与鉴定

食品中植物活性成分的分离与鉴定

食品中植物活性成分的分离与鉴定食物是我们生活的必需品,而植物活性成分则是食物中的重要组成部分。

众所周知,很多植物都具有丰富的活性成分,这些成分对人体健康和疾病的预防具有积极的作用。

因此,分离和鉴定食品中的植物活性成分变得尤为重要。

一、植物活性成分的定义和分类植物活性成分是指植物中具有一定的功效,可以对人体产生积极影响的化学物质。

根据其化学性质和作用方式,植物活性成分可以分为多种类型,如酚类化合物、多糖类化合物、生物碱类化合物等。

二、分离植物活性成分的方法分离食品中的植物活性成分需要使用一系列的实验方法,这些方法包括萃取、色谱层析、质谱分析等。

首先,研究人员会选择适当的溶剂对食品进行萃取,以提取出植物中的有益成分。

然后,通过色谱层析的方法,将提取物中的复杂化合物进行分离,得到纯度较高的目标成分。

最后,通过质谱分析等技术手段,对目标成分进行定性和定量分析,以确定其种类和含量。

三、鉴定植物活性成分的技术手段鉴定食品中的植物活性成分是一个复杂而精细的过程。

在分析过程中,技术手段的选择非常关键。

常见的鉴定技术包括红外光谱分析、核磁共振分析、质谱分析等。

红外光谱分析是一种常用的快速鉴定方法,它通过检测样品中吸收和发射的红外辐射来确定样品的分子结构。

这种分析方法不需要对样品进行破坏性处理,能够快速获得准确的结果。

核磁共振分析是一种准确性较高的鉴定方法,它通过检测样品中原子核的共振信号来获得样品的分子结构和组成。

这种分析方法对样品的要求较高,需要非常纯净的样品才能得到可靠的结果。

质谱分析是一种灵敏度较高的鉴定方法,它通过测量样品中各种化合物的质荷比来确定样品的分子结构和组成。

这种分析方法可以对样品进行定量分析,可以得到非常详细的样品信息。

四、植物活性成分的应用前景食品中的植物活性成分具有广泛的应用前景。

随着人们生活水平的提高和健康意识的增强,越来越多的人开始关注食品中的功能成分。

植物活性成分作为食品中的重要组成部分,可以提高食品的营养价值,并对人体产生积极影响。

BJS201707植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定.doc

BJS201707植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定.doc

附件植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定BJS 2017071 范围本方法规定了食品核桃源性成分、花生源性成分、杏仁源性成分、芝麻源性成分、榛子源性成分、大豆源性成分鉴定的实时荧光PCR方法。

本方法适用于核桃露(乳)、杏仁露、果仁露等复合植物蛋白饮料中标识含有核桃源性成分、花生源性成分、杏仁源性成分、芝麻源性成分、榛子源性成分、大豆源性成分的检测及鉴定。

2 原理提取试样中基因组DNA,以DNA为模板,利用物种特异性引物及探针进行实时荧光PCR 扩增检测,同时设置阳性、阴性及空白对照。

根据扩增的Ct值,判定试样中是否含有该源性成分。

3试剂和材料除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂。

实验用水符合GB 6682的要求。

所有试剂均用无DNA酶污染的容器分装。

3.1核桃源性成分Jugr2基因检测用引物对序列为:核桃5’端引物:5’-CGCGCAGAGAAAGCAGAG-3’核桃3’端引物:5’-GACTCATGTCTCGACCTAATGCT-3’核桃探针:5’-FAM-TTGTGCCTCTGTTGCTCCTCTTCCC-TAMRA-3’3.2花生源性成分Ara b2基因检测用引物(对)序列为:花生5’端引物:5’-GCAACAGGAGCAACAGTTCAAG-3’花生3’端引物:5’-CGCTGTGGTGCCCTAAGG-3’花生探针:5’-FAM-AGCTCAGGAACTTGCCTCAACAGTGCG-Eclipse-3’3.3 杏仁源性成分Prudul基因检测用引物(对)序列为:杏仁5’端引物:5’-TTTGGTTGAAGGAGATGCTC-3’杏仁3’端引物:5’-TAGTTGCTGGTGCTCTTTATG-3’杏仁探针:5’-FAM-TCCATCAGCAGATGCCACCAAC- Eclipse-3’3.4芝麻源性成分2S albumim mRNA基因检测用引物(对)序列为:芝麻5’端引物:5’-CCAGAGGGCTAGGGACCTTC-3’芝麻3’端引物:5’-CTCGGAATTGGCATTGCTG-3’芝麻探针:5’-FAM-TCGCAGGTGCAACATGCGACC- TAMRA-3’3.5榛子源性成分oleosin基因检测用引物(对)序列为:榛子5’端引物:5’-CCCCGCTGTTTGTGATAT-3’榛子3’端引物:5’-ATGATAATAAGCGATACTGTGAT-3’榛子探针:5’-FAM-TCCCGTTCTCGTCCCTGCGGT- Eclipse-3’3.6大豆源性成分Lectin基因检测用引物(对)序列为:大豆5’端引物:5’-GCCCTCTACTCCACCCCCA-3’大豆3’端引物:5’-GCCCATCTGCAAGCCTTTTT-3’大豆探针:5’-FAM-AGCTTCGCCGCTTCCTTCAACTTCAC- TAMRA-3’3.7真核生物18SrRNA内参照检测用引物(对)序列为:内参照5’端引物: 5’-TCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTA-3’内参照3’端引物: 5’-AATTTGCGCGCCTGCTGCCTTCCTT-3’内参照探针:5’-FAM-CCGTTTCTCAGGCTCCCTCTCCGGAATCGAAC- TAMRA-3’3.8 CTAB缓冲液:55 mmol/L CTAB,1400mmol/L NaCl,20 mmol/L EDTA,100 mmol/L Tris,用10%盐酸调节pH 至8.0,121℃高压灭菌20 min, 备用。

蛋白饮料加工的关键工艺原理、

蛋白饮料加工的关键工艺原理、

蛋白饮料加工的关键工艺原理、工艺要点与产品配方原则摘要:全世界蛋白质饮料的供给来源,植物蛋白占70%以上,目前植物蛋白饮料主要是利用大豆、椰子、杏仁、花生、核桃、葵花子等为原料,它们由于含有大量脂肪、蛋白质、维生素、矿物质等,是人体不可缺少的物质,特别是它们不含胆固醇,而含大量的亚油酸的亚麻酸,长期食用不仅不会造成血管壁上胆固醇沉积,而且还对血管壁上的沉积胆固醇具有溶解作用。

一、加工的关键工艺原理植物蛋白饮料的生产主要根据原料蛋白质的营养价值与功能特性来进行,一般要经过浸泡、破碎、磨浆、均质、杀菌等加工工序,避开蛋白质等电点及通过加入各种乳化稳定剂,使之成为均质的乳浊液。

二、工艺要点(一)选料及原料的预处理植物蛋白原料的质量直接影响饮料的品质。

大豆、杏仁、花生、椰子、瓜子等富含蛋白质、脂肪、其含量手成熟度的影响,在贮存过程中,还易受黄曲霉菌的污染。

因此应选择新鲜、无霉烂变质、成熟度较高的原料。

(二)浸泡、磨浆经过预处理的植物籽仁一般都先经浸泡工序。

经过浸泡的植物籽仁,细胞结构软化、组织疏松,这样可以降低磨浆能耗和设备磨损,提高胶体的分散程度和悬浮性,蛋白质的提取率也可增加。

(三)浆渣分离原料经过粗、细磨后,采用离心分离机分离得到汁液,作为生产植物蛋白饮料的主要基料。

(四)加热调制经分离得到的汁液按各种配方要求进行调制,将余下的30%~50%水量用于溶解乳化剂、增稠剂、白砂糖、甜味剂等。

为使其与分离汁液混合均匀,可用胶体磨磨制,以改善饮料的口感和细腻感。

(五)真空脱臭料液经过脱臭可将大量带异味的挥发性物质在低温下抽出。

(六)均质植物蛋白饮料的均质效果由以下三个因素决定:⑴均质压力。

压力越高,效果越好,但受设备性能限制。

⑵均质温度。

温度高,均质效果好,但受机械设备限制。

⑶均质次数。

增加均质次数也可提高效果。

(七)灌装杀菌植物蛋白饮料富含蛋白质、脂肪,很易变质,需以一定包装形式供应消费者。

对于当日饮用的可采用巴氏杀菌,以减少设备投资和能耗;而市场零售后的可采用高压杀菌器杀菌,杀菌条件因种类不同而异,但均应采用高压杀菌。

植物蛋白饮料名词解释

植物蛋白饮料名词解释

植物蛋白饮料名词解释
植物蛋白饮料是以植物果仁、果肉及大豆为原料(如大豆、花生、杏仁、核桃仁、椰子等),经加工、调配后,再经高压或无菌包装制得的乳状饮料。

由于使用的原料不同,各种植物蛋白饮料的营养价值也不同。

从功能的角度来讲,核桃汁饮料因含有磷脂而具有健脑作用,杏仁饮料则具有润肺作用,而采用椰子为原料的椰汁,则适宜男女老少的营养补充需求。

植物果仁普遍具有较高的脂肪含量,如核桃仁脂肪含量在60%以上,杏仁的脂肪含量也在50%左右。

研究发现,原料中的脂肪含量直接影响产品的脂肪上浮量,原料中脂肪含量高或原料添加量较多,如国家植物蛋白标准要求核桃露饮料用核桃仁量比杏仁露用杏仁量要高30%左右,都会一定程度的导致脂肪上浮量增加。

另外,产品加工过程中因均质、等工艺不同,也会对植物蛋白饮料成分体系的稳定性存在一定影响。

专家建议,脂肪上浮产品在保质期内可正常饮用,不会对人体造成危害,且其营养价值并未改变,甚至从某种角度讲饮用、营养价值更高。

但如果产品包装因搬移、运输等原因出现异常,如涨盖、漏气等,饮料会出现明显分层、豆腐脑状、酸臭等,则说明产品已变质,不能饮用。

黑龙江省食品药品监督管理局关于印发食品专项抽检监测工作方案的通知

黑龙江省食品药品监督管理局关于印发食品专项抽检监测工作方案的通知

黑龙江省食品药品监督管理局关于印发食品专项抽检监测工作方案的通知文章属性•【制定机关】黑龙江省食品药品监督管理局•【公布日期】2018.04.13•【字号】黑食药监办应急〔2018〕30号•【施行日期】2018.04.13•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】食品安全正文黑龙江省食品药品监督管理局关于印发食品专项抽检监测工作方案的通知黑食药监办应急〔2018〕30号哈尔滨市、大庆市、绥化市食品药品监督管理局,相关检验检测机构:为落实《食品药品监管总局办公厅关于印发食品保健食品专项抽检监测工作方案的通知》(食药监办食监三〔2018〕41号)的工作部署,加大对重点食品品种抽检监测力度,省局制定了《食品专项抽检监测工作方案》,请认真组织实施。

黑龙江省食品药品监督管理局2018年4月13日食品专项抽检监测工作方案一、工作内容(一)抽检品种。

植物蛋白饮料和方便食品两个类别食品(含进口食品)。

植物蛋白饮料包括豆奶(乳)饮料、豆浆、核桃露(乳)、杏仁露、花生露等含植物蛋白成分的饮料。

方便食品包括方便面、调味面制品(辣条)等。

(二)检验项目。

重点抽检植物蛋白饮料中的植物源成分的鉴定、非食用物质,方便食品中的非食用物质、食品添加剂等。

检验项目和检验方法见附件1。

(三)抽样区域。

集中在哈尔滨、大庆和绥化市所辖县级以下区域的乡镇、村屯及城乡结合部等组织开展抽样。

(四)抽样环节。

抽样工作在流通环节进行。

重点抽取批发市场、超市、食杂店等实体经营单位存在“傍名牌”、山寨、仿冒等情况的植物蛋白饮料和方便食品。

(五)抽样要求。

抽样应履行监督抽检程序,并有地方食品药品监管部门执法人员陪同。

对于抽样中发现涉嫌销售假冒伪劣产品等违法违规情况,应当立即采取风险防范措施,依法处置,并填写《食品安全抽样异常情况报送表》(附件2)。

二、抽检任务及进度安排(一)抽检数量。

黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心负责抽检植物蛋白饮料20批次,其中:哈尔滨和绥化市各7批次、大庆市6批次;黑龙江谱尼测试科技有限公司负责抽检方便食品30批次,哈尔滨、大庆、绥化市各10批次。

植物蛋白饮料卫生标准 - 食品标准参照模板

植物蛋白饮料卫生标准 - 食品标准参照模板
A3.4 取上述滤液2mL分别加入二支出25mL具塞纳氏比色管(配套管)中,再按下述步骤操作。
A3.4.1 各加水15mL后再加入2%酒石酸钾钠1mL。
A3.4.2 各加入钠氏试剂2mL后再加水至25mL刻度。
A3.5 摇匀后观察结果。
A3.2
向上两管中的甲管(样品管)中加入尿素溶液1mL,再向乙管(空白对照管)中加入1mL水,将甲、乙两管摇匀置于40℃水浴中保温20min。
A3.3 从水浴中取出二管后,各加4mL水,摇匀再加10%钨酸钠溶液1mL,摇匀,再加5%硫酸1mL,摇匀过滤备用。
2 引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB 2760-86 食品添加剂使用卫生标准
GB 4789.2-94 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定
GB 4789.3-94 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定
GB 4789.4-94 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验
GB 4789.5-94 食品卫生微生物学检验 志贺氏菌检验
GB 4789.10-94 食品卫生微生物学检验 葡萄球菌检验
GB 4789.11-94 食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验
GB 4789.15-94 食品卫生微生物学检验 莓菌和酵母菌总数测定
GB 4789.26-94 食品卫生微生物学检验 罐头食品商业无菌的检验
3.2 理化指标
理化指标应符合表1的规定。
3.3 微生物指标
罐装植物蛋白饮料微生物指标应符合商业无菌,其他包装应符合表2的规定。

植物蛋白饮料稳定性及其分析方法研究进展

植物蛋白饮料稳定性及其分析方法研究进展

植物蛋白饮料稳定性及其分析方法研究进展一、本文概述植物蛋白饮料作为一种营养丰富、健康绿色的饮品,近年来在全球范围内受到越来越多的关注和喜爱。

然而,植物蛋白饮料的稳定性问题一直是制约其产业发展的关键因素。

本文旨在对植物蛋白饮料稳定性的研究进展及其分析方法进行综述,以期为相关领域的科研工作者和从业者提供参考。

本文将首先介绍植物蛋白饮料的基本概念、种类及其营养价值,阐述稳定性在植物蛋白饮料中的重要性。

接着,将重点分析影响植物蛋白饮料稳定性的主要因素,包括原料种类、加工工艺、储存条件等。

在此基础上,本文将综述近年来植物蛋白饮料稳定性研究的最新进展,包括新型稳定剂的研发、加工技术的改进以及新型分析方法的建立等。

本文将探讨现有分析方法在植物蛋白饮料稳定性评估中的应用及其优缺点,以期为植物蛋白饮料的稳定性研究提供新的思路和方法。

通过本文的综述,我们期望能够为植物蛋白饮料的稳定性研究提供全面的视角和深入的理解,推动该领域的科研进展和产业发展。

二、植物蛋白饮料稳定性的影响因素植物蛋白饮料的稳定性受多种因素影响,这些因素包括原料特性、加工工艺、环境因素以及产品的储存和运输条件等。

原料特性:植物蛋白的来源和种类对饮料的稳定性具有显著影响。

例如,不同种类的豆类含有不同的蛋白质和脂肪含量,这将影响饮料的乳化和稳定性。

原料的新鲜度、成熟度以及存储条件等也会对植物蛋白饮料的稳定性产生影响。

加工工艺:加工过程中各个环节的操作参数,如浸泡、磨浆、均质、杀菌等,都会对植物蛋白饮料的稳定性产生影响。

例如,浸泡时间和温度会影响原料中蛋白质的溶解度和提取率;磨浆过程中的加水量和磨浆时间会影响蛋白质的分散度和乳液的稳定性;均质处理可以改善植物蛋白饮料的口感和稳定性,但过度的均质处理可能导致蛋白质变性,影响稳定性;杀菌温度和时间对蛋白质的变性程度以及微生物的稳定性有重要影响。

环境因素:环境因素如温度、光照、氧气等也会影响植物蛋白饮料的稳定性。

动物蛋白和植物蛋白的鉴定方法标准

动物蛋白和植物蛋白的鉴定方法标准

动物蛋白和植物蛋白的鉴定方法标准1. 蛋白质电泳法:通过蛋白质在电场中的运动速度和大小分离动植物蛋白质。

2. 蒸煮试验:观察样品在高温下的变化,动植物蛋白质的反应不同。

3. 酸碱试验:通过样品在酸碱溶液中的溶解度和凝固情况判断动植物蛋白质。

4. 亲水性测定法:利用样品与水的亲和力比较,鉴定动植物蛋白质。

5. 过氧化值测定法:根据样品蛋白质氧化程度的不同来判定动植物蛋白质。

6. 检测蛋白质结构:利用红外光谱或核磁共振等方法测定蛋白质的分子结构,以鉴定动植物蛋白质。

7. 差示扫描量热法:通过测定样品的热反应,判断动植物蛋白质的差异。

8. 转化酶联免疫吸附测定法:通过测定特定酶标记物在动植物蛋白质上的结合情况,进行鉴定。

9. PCR技术:通过检测样品中特定基因片段的存在与否,判断动植物蛋白质的来源。

10. 质谱分析法:利用质谱仪测定样品中的蛋白质分子量和结构,以区分动植物蛋白质。

11. 基因测序法:通过测定样品中的DNA序列,确认动植物蛋白质的基因来源。

12. 酶活性测定法:根据不同蛋白质的酶活性差异,进行鉴定动植物蛋白质。

13. 酸(碱)水解法:通过在酸性或碱性条件下加热分解样品,并测试产物的氨基酸组成来判定动植物蛋白质。

14. 测试组织特异性:通过检测蛋白质在特定动植物组织中的表达情况来鉴定。

15. 转基因检测:通过 PCR 或其他分子生物学方法检测样品是否存在基因改造,以鉴定动植物蛋白质。

16. 生态分布检测法:通过分析样品出现在何种生态环境中来鉴定动植物蛋白质来源。

17. 磷酸测定法:通过测定样品中磷酸的含量来判断动植物蛋白质。

18. 氧化还原法:通过样品的氧化还原反应来鉴定动植物蛋白质。

19. 糖分析法:通过测定样品中的糖含量和类型,来判定动植物蛋白质。

20. 细胞免疫化学染色法:利用特定抗体与样品中的特定蛋白质结合,通过观察免疫染色结果来鉴定动植物蛋白质。

21. 核酸杂交法:通过特定核酸探针与样品中蛋白质的互补配对,进行鉴定。

植物蛋白饮料卫生标准(国标)

植物蛋白饮料卫生标准(国标)

植物蛋白饮料卫生标准GB 16322-2003国家标准局批准 2004-05-01实施前言本标准为全文强制。

本标准代替GB16322-1996《植物蛋白饮料卫生标准》。

本标准与GB16322-1996相比主要修改如下:——按照GB/T1.1-2000对标准文本格式进行了修改;——对原标准结构进行了修改,增加了原辅料、食品添加剂、生产加工过程的卫生要求、包装、标识、贮存及运输要求;——本标准中参照GB10789《软饮料分类》增加了各类产品的定义;——增加了蛋白质指标;——删除原标准附录A《脲酶定性测定方法》;——引用标准增加了GB/T 5009.183《植物蛋白饮料中脲酶的定性测定》。

本标准自实施之日起,GB16322-1996同时废止。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。

本标准起草单位:辽宁省卫生监督所、北京市食品卫生监督检验所、天津市卫生局公共卫生监督所、杭州娃哈哈集团有限公司。

本标准主要起草人:王旭太、徐继康、崔春明、余挺、杨玉芝、徐留发、陆守政。

本标准于1996年首次发布。

本次为第一次修订。

1 范围本标准规定了植物蛋白饮料的指标要求、食品添加剂、生产加工过程的卫生要求、包装、标识、贮存、运输要求和检验方法。

本标准适用于以植物果仁、果肉及大豆为原料(如大豆、花生、杏仁、核桃仁、椰子等),经加工、调配后,再经高压杀菌或无菌包装制得的乳状饮料。

2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

GB2760食品添加剂使用卫生标准GB/T4789.21食品卫生微生物学检验冷冻饮品、饮料检验GB/T4789.26食品卫生微生物学检验罐头食品商业无菌的检验GB/T5009.5食品中蛋白质的测定GB/T5009.11食品中总砷及无机砷的测定GB/T5009.12食品中铅的测定GB/T5009.13食品中铜的测定GB/T5009.48蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法GB/T5009.183植物蛋白饮料中尿酶的定性测定GB12695饮料企业良好生产规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

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附件
植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定
BJS201707
1范围
本方法规定了食品核桃源性成分、花生源性成分、杏仁源性成分、芝麻源性成分、榛子源性成分、大豆源性成分鉴定的实时荧光PCR方法。

本方法适用于核桃露(乳)、杏仁露、果仁露等复合植物蛋白饮料中标识含有核桃源性成分、花生源性成分、杏仁源性成分、芝麻源性成分、榛子源性成分、大豆源性成分的检测及鉴定。

2原理
提取试样中基因组DNA,以DNA为模板,利用物种特异性引物及探针进行实时荧光PCR扩增检测,同时设置阳性、阴性及空白对照。

根据扩增的Ct值,判定试样中是否含有该源性成分。

3试剂和材料
除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂。

实验用水符合GB6682的要求。

所有试剂均用无DNA酶污染的容器分装。

3.1核桃源性成分Jugr2基因检测用引物对序列为:
核桃5’端引物:5’-CGCGCAGAGAAAGCAGAG-3’
核桃3’端引物:5’-GACTCATGTCTCGACCTAATGCT-3’
核桃探针:5’-FAM-TTGTGCCTCTGTTGCTCCTCTTCCC-TAMRA-3’
3.2花生源性成分Ara b2基因检测用引物(对)序列为:
花生5’端引物:5’-GCAACAGGAGCAACAGTTCAAG-3’
花生3’端引物:5’-CGCTGTGGTGCCCTAAGG-3’
花生探针:5’-FAM-AGCTCAGGAACTTGCCTCAACAGTGCG-Eclipse-3’
3.3杏仁源性成分Prudul基因检测用引物(对)序列为:
杏仁5’端引物:5’-TTTGGTTGAAGGAGATGCTC-3’
杏仁3’端引物:5’-TAGTTGCTGGTGCTCTTTATG-3’
杏仁探针:5’-FAM-TCCATCAGCAGATGCCACCAAC-Eclipse-3’
3.4芝麻源性成分2S albumim mRNA基因检测用引物(对)序列为:
芝麻5’端引物:5’-CCAGAGGGCTAGGGACCTTC-3’
芝麻3’端引物:5’-CTCGGAATTGGCATTGCTG-3’
芝麻探针:5’-FAM-TCGCAGGTGCAACATGCGACC-TAMRA-3’
3.5榛子源性成分oleosin基因检测用引物(对)序列为:
榛子5’端引物:5’-CCCCGCTGTTTGTGATAT-3’
榛子3’端引物:5’-ATGATAATAAGCGATACTGTGAT-3’
榛子探针:5’-FAM-TCCCGTTCTCGTCCCTGCGGT-Eclipse-3’
3.6大豆源性成分Lectin基因检测用引物(对)序列为:
大豆5’端引物:5’-GCCCTCTACTCCACCCCCA-3’
大豆3’端引物:5’-GCCCATCTGCAAGCCTTTTT-3’
大豆探针:5’-FAM-AGCTTCGCCGCTTCCTTCAACTTCAC-TAMRA-3’
3.7真核生物18SrRNA内参照检测用引物(对)序列为:
内参照5’端引物:5’-TCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTA-3’
内参照3’端引物:5’-AATTTGCGCGCCTGCTGCCTTCCTT-3’
内参照探针:5’-FAM-CCGTTTCTCAGGCTCCCTCTCCGGAATCGAAC-TAMRA-3’
3.8CTAB缓冲液:55mmol/L CTAB,1400mmol/L NaCl,20mmol/L EDTA,100mmol/L Tris,用10%盐酸调节pH至8.0,121℃高压灭菌20min,备用。

3.9蛋白酶K:20mg/mL。

3.10苯酚:氯仿:异戊醇(体积比:25:24:1)。

3.11异丙醇。

3.1270%乙醇。

3.13Taq DNA聚合酶。

3.14dNTP混合液。

3.15TE缓冲液(Tris-HCl、EDTA缓冲液):10mmol/L Tris-HCl(pH8.0),1mmol/L EDTA(pH8.0)。

3.1610×PCR缓冲液:200mmol/L KCl,15mmol/L MgCl2,200mmol/L Tris-HCl(pH8.8)。

4仪器和设备
4.1组织研磨器。

4.2核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计。

4.3恒温水浴锅。

4.4离心机:离心力12,000g。

4.5微量移液器(0.5μL~10μL,10μL~100μL,10μL~200μL,100μL~1000μL)。

4.6实时荧光PCR仪。

4.7涡旋振荡器。

4.8天平:感量0.01g。

5分析步骤
5.1试样总DNA的提取
固体样品:将样品粉碎后称取0.3~0.6g,按下列方法提取DNA。

也可用等效商品化DNA提取试剂盒提取DNA。

液体样品:取1mL样品于Eppordorf管中,加入1倍体积的异丙醇,混合均匀,室温下沉淀5 min,室温下以12,500rpm离心5min,弃去上清液。

重复此操作一次。

所得的沉淀用于提取DNA。

可按下列方法提取DNA,也可用等效商品化DNA提取试剂盒提取DNA。

(1)将处理后的样品加入2mL离心管中,加入600μL CTAB缓冲液和40μL蛋白酶K溶液,振荡混匀,65℃孵育1h(过夜孵育更好),期间每隔10min振荡混匀;
(2)加入500μL的苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),振荡抽提10min,室温下以12,500rpm离心10min;
(3)小心吸取上清液,加入等体积的异丙醇,振荡均匀,12,500rpm离心10min;
(4)弃去上清液,用65℃预热的TE缓冲液溶解DNA;
(5)小心吸取上清,加入200μL氯仿:异戊醇(24:1),振荡抽提,室温下以12500rpm离心15min;
(6)小心吸取上清液,加入等体积的异丙醇,振荡均匀,12,500rpm离心10min;
(7)弃去上清液,沉淀用70%乙醇洗涤,离心1min,晾干,溶于50μLTE缓冲液中。

5.2DNA浓度和纯度的测定
取1μL DNA溶液,使用核酸蛋白分析仪检测其浓度及质量,OD260/280值应在1.7~1.9之间时,适宜于PCR扩增。

5.3实时荧光PCR扩增
反应体系总体积为25μL,其中10×PCR缓冲液5μL,正反向引物(10μmol/L)各1μL,探针(10μmol/L)1μL,dNTPs(10μmol/L)2μL,Taq DNA聚合酶(2.5U)0.2μL,DNA模板(10-100ng/μL)2μL,用灭菌去离子水补足至总体积25μL。

真核生物内参照的反应体系同上,仅替换相应的引物和探针。

也可使用相应的商品化扩增试剂盒。

反应参数:50℃2min;95℃15min;95℃15s,60℃1min,40个循环。

5.4实验对照
检验过程分别设阳性对照、阴性对照、空白对照。

以相应植物源物种提取的DNA为阳性对照,以已知不含该植物源的物种DNA为阴性对照,以灭菌水为空白对照。

样品、内参照和对照设置两个平行的反应体系。

6结果判断与表述
6.1质量控制
以下条件有一条不满足时,结果视为无效:
(a)空白对照:无FAM荧光信号检出;
(b)阴性对照:无FAM荧光信号检出;
(c)阳性对照:有FAM荧光信号检出,且FAM通道出现典型的扩增曲线,Ct值≤35.0;
(d)内参对照:有荧光对数增长,且荧光通道出现典型的扩增曲线,相应的Ct值<30.0。

6.2结果判定
(a)如Ct值≤35.0,则判定为被检样品阳性;
(b)如Ct值≥40.0,则判定为被检样品阴性;
(c)如35.0<Ct值<40.0,则重复试验一次。

如再次扩增后Ct值仍为35.0<Ct值<40.0,则判定被检样品可疑。

6.3结果表述
结果为阳性者,结合产品标识,表述为“检出XX源性成分”。

结果为阴性者,结合产品标识,表述为“未检出XX源性成分”。

结果为可疑者,结合产品标识,表述为“XX源性成分可疑”。

7防污染措施
检测过程中放置交叉污染的措施按照GB/T27403中的规定执行。

本方法负责起草单位:河北省食品检验研究院。

验证单位:中国食品药品检验研究院、北京市食品安全监控和风险评估中心、湖北省食品质量安全监督检验研究院、武汉食品化妆品检验所、河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心、中国肉类食品综合研究中心。

主要起草人:周巍、王爽、章晶晶、崔生辉、李永波、孙勇。

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