常用生物化学检验技术

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第一节 自动分析仪的类型
自动生化分析仪的分类方法有多种。常见
的有:①按反应装置的结构可分为管道式、离
心式、分立式和干片式四类。②按自动化程度
可分为全自动和半自动型。③按同时可测定项
目可分为单通道和多通道两类。④按仪器的复
杂程度及功能可分为小型、中型和大型三类。
一、管道式自动生化分析仪 管道式分析仪主要由样品盘、比例泵、 混合器、透析器、恒温器和检查记录仪等部 件组成。第一代(1957年问世)。 管道式分析仪的特点是测定项目相同的 各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一 管道流动的过程中完成。因此,也称为连续 流动式分析仪。
第六章 自动生化分析 技术
第一节 自动生化分析 的仪类型 第二节 自动生化分析 方法 第三节 自动生化分析 仪的参数设置 第四节 自动生化分析 仪的性能评价
掌握各类型自动生化分析仪的主要特点及 分立式自动生化分析仪的基本结构,自动生化 分析仪分析方法的类型及特点,双波长法和双 试剂法的优点。 熟悉自动生化分析仪的参数设置及其意义, 自动生化分析仪的性能评价。 了解自动生化分析仪的质量保证体系。
四、干片式分析仪 干片式分析仪的核心技术是干化学分析,相 对于需要液体试剂 “湿化学”分析而言,它抛
弃了液体试剂在试管中反应的传统检测过程。
干化学分析是将各种有关试剂分层铺在一透 明薄膜上,一张试纸一个项目,特别适用于急诊 和门诊,无污染。
样品扩散层 反射层 辅助试剂层 试剂层 透明支持层
入射光
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三、分立式自动生化分析仪
分立式自动分析仪是目前应用最多的一 类自动生化分析仪,其特点是模仿手工操作 的方式编程,用加样探针将标本加入各自的 反应杯中,试剂探针按一定的时间自动定量 加入试剂,经搅拌器混合后,在一定的条件 下反应。反应杯同时作为比色杯进行比色测 定,比色杯依次通过光路,在不同时间内记 录吸光度变化而进行测定。样品和试剂在各 自的反应杯中起反应。
比例泵是这类分析仪的特殊结构,泵 的作用好比心脏的收缩和舒张,通过它吸 入样品,试剂和空气,推动液流向前流动, 混合管:为一螺旋玻管,让比重不同液体 充分混合。透析器:去蛋白。
透析器的结构示意图
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二、离心式自动生化分析仪
离心式分析仪是将样品和试剂放在特制
的圆盘内,圆盘放在离心机上,当离心机开
动后,圆盘内的样品和试剂受离心力的作用,
自动生化分析技术是将生化分析过程中 的取样、加试剂、去干扰、混合、保温、检 测、结果计算、数据处理和打印报告,以及 实验后的清洗等步骤完全由模仿并代替手工 操作的仪器来完成。这不仅提高了工作效率, 而且减少了主观误差,稳定了检验质量。完 成这一分析过程的仪器称为自动生化分析仪。 这类仪器一般都具有灵敏、准确、快速、节 约和标准化等优点。
检测器
第二节 自动生化分析方法
一、分析方法的种类 (一)终点法 根据反应达到平衡时反应产物的吸收光 谱特征及其吸光度大小,对物质进行定量分 析的方法。此时反应的底物与产物处于动态 平衡,不再有量的改变,故又称为平衡法。 1. 一点终点法 是指在反应达到终点后 选择一个时间点测定吸光度值,从而求得待 测物浓度或活性的方法。
管道式自动生化分析仪可分为空气分段 系统式和非分段系统式。空气分段系统式自 动生化分析仪是在吸入管道的每一个标本、 试剂以及混合后的反应液之间,均由一小段 空气间隔开。非分段系统式自动生化分析仪 是靠试剂空白或缓冲液间隔每个标本反应液, 这样,在管道中连续流动的液体不被分段。
管道式自动生化分析仪结构示意图
(二)速率法 又称连续监测法,在单位时间内连续读取 吸光度值,并根据吸光度值的变化(ΔA/min) 自动选择零级反应期计算结果的方法。 二、自动生化分析仪的校准方法 自动生化分析仪的校准也称定标,是为计 算结果时提供比对依据。 校准的方法包括一点校准(水定标)、两 点校准(水和已知浓度的校准品)和多点校准 (多个呈浓度梯度的校准品)。
一点终点法使用简便,易于操作,但容 易受试剂颜色和标本自身情况干扰(如黄疸、 溶血和脂血等)。 2. 两点终点法 在加入触发实质性反应 发生的试剂前,读取一次吸光度值(A1), 加入触发实质性反应发生的试剂后,达到平 衡再读取第二次吸光度值(A2),根据两次 吸光度值之差计算结果。 能有效地消除试剂颜色和标本颜色及内 源性干扰物带来的影响。
分立式自动生化分析仪基本结构包括操 作和测定两大部分。操作部分主要由计算机 及操作软件组成。测定部分包括: 1.样品加载单元 由样品盘和加样探针组 成。 2.试剂加载单元 由试剂仓和试剂探针组 成。 3.反应单元 由反应杯、搅拌装置和恒温 装置组成。反应杯同时可作为比色杯进行比 色。
4. 光学检测单元 主要由光源(卤钨灯或 氙灯)、分光装置(干涉滤光片或光栅)和信 号检测器(光电管或光电倍增管)3部分组成。 5. 清洗单元 主要完成对加样针、试剂针、 搅拌棒(动作完成后停留在指定位置立即清洗) 和反应杯(由仪器的清洗站完成)的清洗。 6. 计算机单元 是仪器的控制中心、信号 接收中心和数据处理中心。
自动生化分析仪能自动完成样本的加载、 试剂分配、搅拌、清洗等机械动作,执行这些 动作的程序已由厂家储存于计算机中用户无权 修改。下面讨论的参数设置是指检测项目的试 验参数。如波长、反应温度、分析方法、样本 量与试剂量等。这些参数设置的正确与否可直 接影响实验结果的准确性。有的仪器要求使用 配套试剂,相应参数已储存于计算机中,用户 不能更改,称为“封闭通道”,用户能根据需 要自由更改的称为“开放通道”。
相互混合发生反应,反应液最后流入圆盘外 圈的比色槽内,通过比色计进行检测。
离心式自动生化分析仪结构示意图
离心式自动生化分析仪的特点是: (1) 在整个分析过程中,各样品与试剂的混合、 反应和检测等每一步骤几乎都是同时完成的, 不同于连续流动式自动生化分析仪和分立式 自动生化分析仪的“顺序分析”,而是基于 “同步分析”的原理; (2) 标本和试剂用量 更少;(3)分析快速;(4)每次只能完成 相同项目的测定。
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