磷脂组成的分析方法
植物油中磷含量的检测分析文献综述
植物油中磷含量的检测分析——文献综述XXX(环境与生物工程学院指导教师:XXX)油脂中的磷含量是衡量油脂质量的一个重要指标。
目前,在我国国家标准中[1],对植物油中磷脂控制指标采用钼蓝比色法和重量法,钼蓝比色法法简单、快速,这种方法已经较为成熟;重量法利用磷脂吸水膨胀,密度增大,易于与油分离的特性,可粗略定量磷脂含量(包含不溶于丙酮的类脂)[2]。
国标钼蓝比色法虽可定量检测,但在实际工作中发现,该方法可准确检测精炼油中的磷含量,而对磷脂含量高的油脂,尤其是毛油,则会随着称样量的不同检测结果有很大差别。
国家标准、专业标准和国际通用的AOCS方法中对于称样量的规定也存在很大差别[3],这就给贸易和企业的质量控制增加了难度。
为此国内外研究者在检测方法方面做了不少的研究。
1 研究背景及动态1.1 磷脂在植物油中的分布及其对油品的影响磷脂组成生物膜的主要成分,分为甘油磷脂与鞘磷脂两大类,分别由甘油和鞘氨醇构成。
磷脂为两性分子,一端为亲水的含氮或磷的头,另一端为疏水(亲油)的长烃基链。
因此,磷脂分子常与蛋白质、糖脂、胆固醇等其它分子共同构成脂双分子层,即细胞膜的结构[4]。
植物磷脂主要存在于油料种子,且大部分存在于胶体相内,并与蛋白质、糖类、脂肪酸、菌醇、维生素等物质以结合状态存在,是一类重要的油脂伴随物[5]。
磷脂主要来源于植物油脂,如大豆毛油中磷脂含量约为0.1%-1.8%。
植物油中磷脂的含量从加工工艺上来讲,会增加脱酸环节中性油的损失及脱色白土的用量,而且还容易引起加氢催化剂的中毒。
精炼油中磷脂含量过高容易氧化影响产品色泽。
所以这是不利的。
在植物油储藏的方面,磷脂是导致油脂反色的原因之一;也会导致有些油脂(比如大豆油)的回味;所以磷脂不易于植物油的储藏[6]。
在烹饪方面,在煎炸食品的过程中会形成泡沫,若煎炸的食品水分含量较高,则会使泡沫迅速上升,引起溢锅,极易造成烫伤事故与火灾。
磷脂的不饱和性及易被氧化等性质,起着载运氧气的作用,使得油的耐煎炸程度大幅度降低,油很快变深、变黑。
磷脂脂肪酸分析方法及其在土壤微生物多样性研究中的应用_颜慧
*土壤与农业可持续发展国家重点实验室基金(055122)资助通讯作者,E -mai l:zhongwenhui@作者简介:颜 慧(1982~),女,汉族,江苏淮安人,硕士研究生,主要从事土壤微生物学和生物化学研究。
E -mail:hui xiaoyan@hotmai l.c om 收稿日期:2005-10-31;收到修改稿日期:2006-03-22磷脂脂肪酸分析方法及其在土壤微生物多样性研究中的应用*颜 慧1 蔡祖聪2 钟文辉1,2(1南京师范大学化学与环境科学学院,南京 210097)(2土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所),南京 210008)摘 要 磷脂脂肪酸(PLFA)是活体微生物细胞膜的重要组分,不同类群的微生物可通过不同的生化途径合成不同的PLFA 。
一些PLFA 可作为分析微生物量和微生物群落结构变化的/生物标记0。
在土壤微生物分析中,越来越多地采用了PLFA 方法。
本文介绍了表征微生物的一些PLFA 、从土壤中提取PLFA 的方法以及用GC -MS 分析PLFA 的原理。
本文还将常用的研究微生物多样性的几种方法进行了比较。
传统的分析土壤微生物群落的方法依赖于培养技术,只能培养和分离出一小部分微生物群落;Biolog 方法可用于研究土壤微生物群落生理多样性,即可反映微生物群落如何利用各种碳源底物,但对快速生长和适合在Biolog 实验条件下生长的小部分群落成员有强烈的选择性;核酸分析方法的主要缺点是不能对土壤微生物进行定量分析;而PLFA 方法相对于上述几种方法有诸多优势。
本文通过一些实例证明PLFA 方法的特色或独到之处,也分析了其缺点。
采用PLFA 方法并结合其他方法有助于获取土壤微生物群落多样性的更多和更全面而完整的信息。
关键词 土壤微生物;磷脂脂肪酸;生物量;群落结构;GC -MS(气相色谱-质谱);多样性中图分类号 X172 文献标识码 A土壤微生物参数很可能最早被用于表征土壤质量[1]。
卵磷脂的柱层析与TLC分析
硅胶柱层析展开剂的配制:将氯仿、甲醇及水按65:25:4的比例配制摇匀,配置展开剂时要严格按比例进行,否则很容易三相溶解不完全而出现分层现象,由于试剂容易挥发,每次使用都要重新配制。
将硅胶G板在105℃下活化至少半个小时。
取出密闭冷却,然后在距离底端约1cm的同一水平上,点上样品溶液和大豆卵磷脂标样溶液,放进展开缸中进行展开,层析缸里的展开剂用量不得超过点样点。
展开至距顶端约1cm处,爬板结束,取出晾干,放在碘缸中显色,磷脂成分会显示为黄色圆点。
根据显色结果,可以判断样品中是否含有PC。
而且如果有其他磷脂标样,还可以由不同磷脂成分的比移值,来判断样品中是否含有其他磷脂杂质。
磷脂酸胆碱的定性分析1. 薄板的制备称量硅胶G6g溶解于0. 5%梭甲基纤维素钠溶液18ml,调匀并经超声波震荡2min以赶走气泡,倒在洁净的20x7cm玻璃板上,使之涂布均匀。
薄层厚度控制在0.2~0.25mm。
自然晾干后,放在105℃烘箱内活化30min,置于干燥器中备用。
2. 样品的制备称取10mg样品,加氯仿一甲醇溶液(1:1)1 ml充分溶解。
3. 点样用微量进样器量取50ul标准品或样品溶液点在薄层板距板的边缘2cm处,两边各留1.5cm(防止边缘效应),各个点样点之间保持一定的距离,点样面积不超过5mm。
4. 展开展开剂为氯仿:甲醇:水(体积比65:25:4)待溶剂挥发后,放入盛有展开剂的层析缸中,展开至顶端scm时取出薄板。
5. 显色及定位将挥发尽溶剂的薄板放入碘缸内,盖好。
升华的碘遇磷脂发生加成反应,而使磷脂的斑点呈现黄色。
硅胶柱层析可以去除PE、LPC等杂质磷脂,而PI及另外两种微量杂质必须通过其他方法除去。
当层析柱规格为φ20mm×700mm时大豆磷脂分离最佳的工艺条件为:采用的硅胶为80-120目粗孔2号硅胶,洗脱液为石油醚;石油醚:异丙醇:水=1:1:0.175,流速为1.1BV/h,上样量为0.5g大豆水化油脚/g硅胶,柱温为室温。
大豆磷脂的提取及分析
大豆磷脂的提取及分析.d o c.d e f l a t e.d o c.g z i p(总4页)-本页仅作为预览文档封面,使用时请删除本页-实训二大豆磷脂的提取、分析及卵磷脂咀嚼片的的制备与检验大豆磷脂的提取及含量测定一、试剂与仪器1、试剂⑴氯化锌溶液:精确称取氯化锌,定容于500ml容量瓶中。
⑵大豆市售⑶无水乙醇------10瓶⑷磁力搅拌器⑸对苯二酚溶液:取对苯二酚,加水适量使溶解,加硫酸1滴,加水稀释成100ml。
⑹钼酸铵硫酸试液:取钼酸铵,加硫酸15ml,加水使溶解成100ml,即得。
本液配制后两周即不适用。
⑺亚硫酸钠试液:取无水亚硫酸钠20g,加水100ml使溶解,即得。
本液应临用新制。
⑻磷酸二氢钾⑼浓硫酸⑽过氧化氢⑾石油醚、⑿氯仿、甲醇、冰乙酸⒀ 20%硫酸铵⒁羧甲基纤维素钠⒂硅胶GF254⒃载玻片2、仪器凯氏烧瓶,恒温水浴锅,滤纸;电热恒温鼓风干燥箱;电热套,天平,分光光度计,刻度比色管,硅胶G板,抽滤装置二、实验操作㈠、大豆磷脂的提取及含量测定1、5斤大豆用粉碎机粉碎得大豆粉2、卵磷脂的提取⑴称取一定质量的大豆粉末,加入一定体积95%的乙醇,置于不同温度的水浴锅内,一定时间后取出,减压过滤。
见下表料液比提取时间提取温度氯化锌1:2035101:2040151:154051:15235151:1545101:1045151:103551:2024551:1024010(2) 试验步骤:将溶有卵磷脂的乙醇溶液置于磁力搅拌器下,一边搅拌一边加入一定量ZnCl2溶液,继续搅拌20min;取出,减压过滤,并将滤液置于蒸发皿上蒸干;取出产品进行定性检测。
㈡磷含量测定标准溶液的制备:取105℃干燥至恒重的磷酸二氢钾约,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,精密量取10ml置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,每1ml中含磷(P)约为30ug。
样品溶液的制备:取本品约,精密称定,置凯氏烧瓶中,加硫酸20ml与硝酸50ml,缓缓加热至溶液呈淡黄色,小心滴加过氧化氢溶液,使溶液褪色,继续加热30分钟,冷却后,转移至100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
三种海洋源副产物磷脂提取与新型脂质组学方法分析
三种海洋源副产物磷脂提取与新型脂质组学方法分析摘要磷脂是生物体膜的组成成分之一,在生命活动中扮演着重要的角色。
海洋源副产物可以作为磷脂的新型来源。
本文分别介绍了海洋源副产物中磷脂的三种提取方式,并介绍了新型脂质组学方法的应用,对提取的磷脂进行分析。
研究表明,三种提取方式均能提取到磷脂,而pH调节-无机盐共析法提取出的磷脂量最多。
新型脂质组学方法可以用于海洋源副产物中磷脂的定性、定量和构型分析,为进一步研究海洋源磷脂提供了重要的技术支持。
关键词:海洋源副产物、磷脂、提取、脂质组学方法AbstractPhospholipids are one of the components of biological membranes and play an important role in life activities. Marine by-products can be used as a new source of phospholipids. This paper introduces three methods for extracting phospholipids from marine by-products and introduces the application of new lipidomics methods to analyze the extracted phospholipids. The study showed thatall three extraction methods could extract phospholipids, with pH adjustment - inorganic salt co-precipitation method extracting the most phospholipids. The new lipidomics method can be used for qualitative, quantitative, and conformational analysis of phospholipids in marine by-products, providing important technical support for further research on marine phospholipids.Keywords: Marine by-products, phospholipids, extraction,lipidomics method1.引言海洋生物是一种重要的生物资源,其中不仅有食用海产品,还包括一些副产物,如残骸、鱼皮、贝壳等。
磷脂 ir鉴定方法
磷脂 ir鉴定方法磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于细胞膜中,参与细胞组成、信息传递和能量代谢等生物过程。
为了研究磷脂的结构和功能,需要进行磷脂的鉴定和分析。
本文将介绍常见的磷脂鉴定方法,包括色谱、质谱和核磁共振等技术。
一、色谱技术色谱技术是一种分离和分析化合物的常用方法,包括薄层色谱、高效液相色谱、气相色谱等。
这些方法可以用于磷脂的分离和纯化,并且可以得到磷脂的相对含量。
1.1 薄层色谱薄层色谱是一种相对简单、快速的色谱技术,通常用于磷脂样品的初步分离和纯化。
其原理是利用不同化合物在吸附剂上的亲和力不同,从而使它们在薄层上运动的速度和方向不同,从而达到分离的目的。
在磷脂的鉴定中,可以用磷酸化的酯酶切割磷酸基,使磷脂分解成甘油3-磷酸酯和脂肪酸,用正相或反相薄层色谱分离。
1.2 高效液相色谱高效液相色谱是一种分离并纯化化合物的方法,它利用液相固定相互作用对样品进行分离,可以有效地分离一些极性化合物和不同结构的磷脂。
常见的固定相为C8、C18等碳链,分离柱为正相分离柱、反相分离柱等。
气相色谱是一种将挥发性有机物分离和定量的技术。
它主要用于分析和定量非极性化合物和低极性化合物。
在磷脂的鉴定中,气相色谱可以用于脂肪酸的分离和定量。
质谱技术是一种鉴定物质分子量、化学结构的方法,通过高分辨率、高灵敏度的检测系统,可以快速、准确地确定化合物的化学式和结构。
在磷脂的鉴定中,质谱技术主要包括质谱、飞行时间质谱和磁共振质谱等。
质谱是一种将分子分解成离子的技术,并将它们按质量和数量进行分离和检测的方法。
在磷脂的鉴定中,可以使用飞行时间质谱或质量分析仪对磷脂进行分析。
通常,磷脂会转化为负离子化物,然后进行质谱分析。
根据离子的质量比和相对强度,可以确定磷脂的组成。
2.2 飞行时间质谱飞行时间质谱是一种将离子加速到高能状态,然后通过电子荧光屏幕进行检测的技术。
在磷脂的鉴定中,飞行时间质谱可以用于测定磷脂的质量和相对含量。
血脂各个项目的不同测定方法
血脂各个项目的不同测定方法血浆中的脂类包含胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂与非酯化脂肪酸等。
目前,对有关脂类代谢疾患的诊断与治疗过程,均务必检测血浆(清)中的脂类,通过其含量的变化,对临床疾患提供协助诊断的根据。
有关医学科研工作,脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。
1.胆固醇测定血浆中胆固醇及其酯的含量检测,从方法学上可分为两大类:一类是化学法包含抽提法与直接测定法,这类方法目前仍在沿用;另一类是酶法测定,方法敏感特异快速,并能自动化分析,已常规应用。
化学测定法种类多,由于显色反应的特异性不一致,其结果有一定的差异。
目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B 反应)法。
另外,三氯化铁-硫酸反应法(Zak法)具有显色稳固法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法,胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点,缺点是特异性差,干扰因素比L-B法多,如冰醋酸中含有的乙醛酸,血清样品中的血红蛋白,胆红素与硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性,Zak法更适合于科研使用。
酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛使用,国产试剂已能满足临床的需要。
胆固醇测定用的标准品,按美国国家标准局(NBS)出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物,国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品,已供临床检测血清胆固醇使用。
2.甘油三酯测定血浆甘油三酯的测定,目前多以化学法与酶法定量。
化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性,水解成甘油,并以甘油为计算根据。
酶法是以特异酶水解甘油三酯,除去脂肪酸,再测定甘油,方法特异,准确而快速,临床广为应用。
目前甘油三酯测定的方法要紧以定量甘油为根据,然而血清样品中存在有游离甘油,如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油,多年来一直在研究讨论这一问题。
若不减去,其测定值将会高于血清样品中的真值,假如要减去,就务必先测出血清样品中的游离甘油,甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤,实际工作中难以做到。
鸡蛋黄中磷脂的提取及分析
三、仪器和药品 仪器:研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花 药品:熟鸡蛋黄 20%NaOH 溶液 10%Pb(AC)2
丙酮 碘化铋钾溶液
1%CuSO4 溶液
硫酸 95%乙醇 氯仿
四、实验步骤 1.卵磷脂的提取 (1)取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入 10ml 95%乙醇研磨,再加入 10ml 95%
乙醇充分研磨,减压过滤,布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移入研钵中,再加 10ml 95% 乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并二次滤液,如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发 皿内。
六.思考题: 1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理? 2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作何解释? 3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么? 4.为什么实验中要进行减压过滤?操作时应注意哪些地方?
脂肪酸的检查:取棉花上沉淀(滤饼)少许,加 1 滴 20%氢氧化钠溶液与 5ml 水,用玻棒搅 拌使其溶解,在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄清液,以硝酸酸化后加入 10%醋酸铅 2 滴,观察 溶液的变化 甘油的检查:取试管一支,加入 1%硫酸铜溶液 1ml(二十滴),2 滴 20%氢氧化钠溶液,振 摇,有氢氧化铜沉淀生成,再加入 1ml 水解液振摇,观察所得结果。 胆碱的检查:取水解液 1ml,滴加硫酸使其酸化(以 pH 试纸试之)加入 1 滴碘化铋钾溶液, 有砖红色沉淀生成。
(2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油状物。 (3)冷却后,加入 5ml 氯仿,搅拌使油状物完全溶解。 (4)在搅拌下慢慢加入 15ml 丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其尽量析出(溶液倒入回收瓶 内)。 2.卵磷脂的水解及其组成分析 (1)水解:取一支干燥大试管,加入提取的一半量的卵磷脂,并加入 5ml 20%氢氧化钠溶 液,放入沸水浴中加热 10 分钟,并用玻棒加以搅拌,使卵磷脂水解,冷却后,在玻璃漏斗中 用棉花过滤。滤液供下面检查用。 (2)检查
磷脂脂肪酸(PLFAs)谱图分析技术
微生物生态学的研究方法——磷脂脂肪酸分析(PLFA)【内容摘要】定量描述微生物群落是微生物生态学的难题之一。
应用传统的微生物培养方法和显微技术, 需要在选择性培养基上培养微生物, 即首先从环境样品中分离出纯菌株, 再对该菌株进行一系列的生理生化分析。
文章综述了磷脂脂肪酸谱图分析法在微生物生态研究中的应用,包括估算微生物生物量、确定群落结构、指示特定微生物,指示生理和营养状况等,并指出此种方法存在的问题及改进方法。
【关键词】磷酸脂肪酸微生物生态学应用及发展一、引言:环境中微生物的种类和数量是及其丰富的[1],微生物能把有机质作为营养源转化为组成物质和能量,它们在环境治理过程中扮演着极其重要的作用。
分离和鉴定处理系统中的优势菌,了解特定环境下微生物群落的种群分布、遗传多样性及其动态变化规律和认识微生物群落的稳定性及功能菌的作用,是环境微生物学研究的重要内容。
传统的微生物鉴定和群分析方法建立在微生物纯种培养分离基础上,但自然环境中有 99%以上的微生物还不能通过人工培养,在微生物的分析和研究工作中具有很大的局限性。
二、正文:1.磷脂脂肪酸(PLFAs)谱图分析技术概述1.1 PLFA 概念、分类和命名磷脂是含有磷酸基团的脂质,目前已发现了1000多种磷脂类物质。
磷脂作为微生物细胞膜主要成分,是甘油分子的第3位羟基被磷酸或其他羟基所酯化形成的。
其结构特点是:具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobictail)。
PLFAs(磷脂脂肪酸,phosphohpids fattyacids)谱图分析方法的原理是基于磷脂——几乎是所有生物细胞膜的重要组成部分,细胞中磷脂的含量在自然条件下(正常的生理条件下)恒定[ 2 ],其长链脂肪酸的形式——磷脂脂肪酸PLFAs 可作为微生物群落的标记物。
此外,磷脂不能作为细胞的贮存物质,在细胞死亡后将很快降解(厌氧条件下约需2d,而好氧条件下约需12—16d)m,可代表微生物群落中“存活”的那部分群体阁。
鸡蛋中卵磷脂提取鉴定
卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效:保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性:无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围:护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景:随着消费者对健康和环保的关注度提高, 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
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鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性:卵磷脂在油脂中 的溶解度较高,因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化:提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质,需要进行纯化 处理,常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
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卵磷脂的提取方法:通常采用有机 溶剂萃取法,将鸡蛋中的油脂溶解 后,再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同,将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性:卵磷脂难溶于水,易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性:卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值:卵磷脂具有皂化特性
酸碱度:卵磷脂在酸性条件下 稳定,在碱性条件下易水解
红外光谱:卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法:鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法:鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取:使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离:通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理:去除蛋壳,收集蛋 黄
鉴定:通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定:通过光谱、色谱等技 术,对卵磷脂进行鉴定
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《基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用》
《基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用》一、引言随着科技的发展,质谱技术以其高灵敏度、高分辨率和高通量的特点,在生物分析领域中发挥着越来越重要的作用。
其中,基于质谱技术的脂质组学方法在研究生物体中脂质组成及变化规律方面具有显著优势。
本文将探讨基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用。
二、豆类脂质分析豆类作为重要的食物来源,其脂质组成对于了解其营养价值和健康功效具有重要意义。
利用质谱技术进行豆类脂质分析,可以有效地揭示其脂质组成及含量。
首先,通过提取豆类样品中的脂质,利用适当的化学方法进行衍生化处理,使脂质分子带上电荷,便于后续的质谱分析。
然后,通过液态或气态质谱技术对样品进行检测,得到详细的脂质组成信息。
最后,通过数据分析软件对数据进行处理和分析,得到豆类中各类脂质的含量和比例。
三、蛋类脂质分析蛋类是人们日常饮食中的重要组成部分,其脂质组成对于了解蛋类的营养价值和品质具有重要意义。
利用质谱技术对蛋类脂质进行分析,可以为食品加工和营养学研究提供有力支持。
与豆类类似,蛋类样品中的脂质也需要进行提取和衍生化处理。
然后,通过质谱技术对样品进行检测和分析,可以得到蛋类中各类脂质的详细组成和含量信息。
这些信息有助于了解蛋类的营养价值和品质特点,为食品加工提供指导。
四、野生真菌脂质分析野生真菌作为一种重要的生物资源,其脂质组成具有独特的生物学和医学价值。
利用质谱技术对野生真菌的脂质进行分析,有助于揭示其生物活性和药用价值。
在野生真菌脂质分析中,同样需要进行样品的提取和衍生化处理。
然后,通过高分辨率的质谱技术对样品进行检测和分析,可以得到野生真菌中各类脂质的详细信息。
这些信息对于研究野生真菌的生物活性和药用价值具有重要意义。
五、结论基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中具有广泛的应用前景。
通过这种方法,我们可以有效地了解这些生物样品中的脂质组成及含量,为食品营养学、生物医学等领域的研究提供有力支持。
磷脂类判断依据
磷脂类判断依据全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:磷脂类是指一类具有磷酰胆碱或磷脂酯结构的脂质物质,是细胞膜的主要组成成分之一,具有重要的生理功能。
在生物体内,磷脂类主要存在于细胞膜中,并参与调节细胞的信号传导、细胞膜的形成和保护等生物学过程。
磷脂类的代谢异常与多种疾病的发生和发展密切相关,因此对磷脂类进行准确判断至关重要。
磷脂类的判断依据主要包括以下几个方面:一、磷脂类的分子结构:磷脂类具有磷酰胆碱或磷脂酯结构,通常由一个疏水脂肪酸分子和一个疏水磷酰胆碱或磷脂酯分子组成。
通过分析磷脂类的分子结构可以确定其是否属于磷脂类物质。
二、磷脂类的理化性质:磷脂类具有明显的理化性质,如在水中形成胶束结构、具有表面活性、易被酶水解等。
通过检测磷脂类的理化性质可以确定其性质和功能。
三、磷脂类的生物学功能:磷脂类在细胞膜中起着非常重要的生物学功能,如维持细胞膜的完整性、调节细胞信号传导、参与细胞分化等。
通过研究磷脂类在生物学过程中的作用可以确定其在生物体内的位置和功能。
四、磷脂类的代谢途径:磷脂类的代谢途径包括合成、降解和转运等过程,这些过程受到多种因素的调控。
通过研究磷脂类的代谢途径可以确定其在生物体内的代谢状态和功能。
通过以上几个方面的判断依据,我们可以对磷脂类进行准确的判断和研究,为深入了解其在生物体内的作用和机制提供重要的参考和依据。
在未来的研究中,我们可以进一步探讨磷脂类与疾病发生和发展之间的关系,为临床诊断和治疗提供新的思路和方法。
【2000字】第二篇示例:磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于细胞膜中。
磷脂类化合物具有不同的结构和功能,在生物体内起着重要的作用。
磷脂属于脂质类化合物,是细胞膜的主要组成成分之一。
关于磷脂类的判断依据有很多,主要可以从以下几个方面进行判断:1. 分子结构:磷脂类化合物主要由一个甘油酯基与两个脂肪酸残基以及一个磷酸残基组成。
根据脂肪酸残基的不同,可以将磷脂分为磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘氨酸等不同种类。
南极磷虾油中磷脂的检测方法与制作流程
本技术公开了一种南极磷虾油中磷脂的检测方法,属于水产品检测技术领域。
采用氨基固相萃取柱对南极磷虾油进行净化并富集磷脂,利用高效液相色谱蒸发光散射检测器(HPLC ELSD),选用正相硅整体胶柱,正己烷异丙醇乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,该方法操作简单、准确度高,可以对南极磷虾油中磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)三种主要磷脂的进行准确定性和定量分析。
权利要求书1.一种南极磷虾油中磷脂的检测方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)样品溶解:准确称取50mg磷虾油,加入3ml色谱纯氯仿,涡旋混合。
(2)样品净化:取氨基固相萃取柱(1000 mg/6 ml)先用5ml氯仿活化,然后将溶解后的磷虾油试样移入固相萃取柱中上样,依次用15ml的氯仿-异丙醇溶液(2:1),10ml乙醚-乙酸溶液(72:1),15ml甲醇溶液洗脱,收集甲醇洗脱液,洗脱液用旋转蒸发在35℃条件下浓缩近干,然后加入正己烷-异丙醇(2:3)溶解定容至10 mL,10000 r/min 离心5分钟后过0.45μm有机滤膜用于色谱分析。
(3)液相色谱-蒸发光检测器测定:在优化的色谱条件下,将三种磷脂的混合标准溶液和样品待测液进样依次测定,根据标准品的保留时间确定样品中的磷脂组分,以标准溶液中各组分色谱峰面积为横坐标,各组分的质量浓度为纵坐标进行回归分析,将样品溶液的峰面积代入乘幂回归方程,从而获得样品中目标物的含量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(2)取氨基固相萃取柱用氯仿活化上样后,依次用15ml的氯仿-异丙醇溶液(2:1),10ml乙醚-乙酸溶液(72:1),15ml甲醇溶液洗脱,收集甲醇洗脱液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(2)中对洗脱液进行浓缩时旋转蒸发温度为35℃。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(3)中优化的色谱条件为:Chromolith Performance-Si正相整体硅胶色谱柱4.6 mm×100mm;柱温:25℃;流速:1.5mL/min;载气压力:40 psi;漂移管温度:55 ℃;进样量:10 µL;流动相:A为正己烷(含0.04%三乙胺),B为异丙醇C 为13%乙酸水溶液;洗脱梯度:0~0.5min,40% A, 57%B, 3%C;0.5~8.0min,40% A, 50%B, 10%C;8.0~12.0 min,40% A, 50%B, 10%C。
[精选化工]磷脂的分离
第三章细胞磷脂的制备第一节引言第二节细胞磷脂的分离2.1 动物细胞磷脂的制备工艺2.2 植物细胞磷脂的制备工艺2.2.1 植物混合磷脂的制备2.2.2 磷脂酰胆碱的分离2.2.3 肌醇磷脂的分离2.2.4 磷脂酰乙醇胺的分离第三节磷脂的分离鉴定3.1 磷脂中磷含量的定量分析3.2 薄层色谱法分离鉴定磷脂经典的TLC技术用于分离磷脂的各组分,优点在于设备简单,操作方便,分离条件易于掌握,而且结果直观。
可以用于定性地分析磷脂中各主要组分,亦可以进行少量产品的提纯。
但成本较高。
一般的TLC分离方法是在距底部1.0cm 处点样,然后将薄板放置在用展开剂饱和的展开槽中,溶剂的高度距底部0.5cm,展开至顶端1~2cm处,在通风橱中干燥后显色。
如用荧光硅胶铺板展开,亦可在紫外灯下观察。
上述过程称作单向二维展开。
在双向二维展开过程中,点样位置与单向二维展开不同。
样品点在距底部和左边各1cm处。
首先将板放在展开槽中展开。
一般展开剂为中性溶剂,展开距顶端1cm处,将板取出,放在通风厨中干燥。
然后将板转90o放入第二个展开槽中,展开剂一般为酸性展开剂,展开至顶点1cm 处。
将板取出,放入通风厨中干燥[8]。
磷脂对于紫外灯的灵敏度较低,故薄板的显色除可用荧光板的紫外显色外,还可用显色剂显色。
J.Dittmer 成功地制备了磷脂类显色剂[23]。
由于磷脂中有些物质对普通的显色剂不显色,J.Dittmer 用MoO3或茚三酮、或若丹铭制成显色剂对磷脂的各组分进行显色。
制备方法是将H2SO4加入MoO3沸腾,然后加入钼粉,制成磷脂类专用试剂Dittmer 试剂。
J.Dittmer 等人同时对蛋黄磷脂中磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺对各种显色剂的敏感度进行了分析。
薄层色谱法分离磷脂混合物主要用于定性分析。
D.Medh 和H.W eigel[24]用两步单向二维TLC展开法分离了PC、PE、PI、PA的4,5—二磷酸酯和4—单磷酸酯。
食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定
食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定1 范围本标准规定了高效液相色谱法同时测定大豆磷脂、大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三种组分含量的方法。
本标准适用于含油大豆磷脂、脱油大豆磷脂、大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油中磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)的测定。
本标准不适用于大豆溶血磷脂酰胆碱及大豆溶血磷脂乙醇胺的测定。
2 原理大豆磷脂样品经流动相溶解后,磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇通过高效液相色谱分离。
若油脂试样则事先氯仿溶解提取,旋蒸后用正己烷-异丙醇混合溶液定容,进行高效液相色谱分离。
外标法定量。
3 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯。
3.1 试剂3.1.1 乙腈(CH3CN):色谱纯。
3.1.2 甲醇(CH3OH):色谱纯。
3.1.3 磷酸(H3PO4):85%,色谱纯。
3.1.4 正己烷[CH3(CH2)4CH3]:色谱纯。
3.1.5 异丙醇[(CH3)2CHOH]:色谱纯。
3.1.6 氯仿(CHCl3)。
3.1.7 乙酸(CH3COOH):色谱纯。
3.1.8 水(H2O):色谱纯。
3.2 试剂配制3.2.1 流动相:乙腈-甲醇-磷酸混合溶液(100+10+0.6=V+V+V),取乙腈(3.1.1)、甲醇(3.1.2)和磷酸(3.1.3)混合。
3.2.2 正己烷-异丙醇混合溶液(3+1=V+V):取正己烷(3.1.4),异丙醇(3.1.5)混合。
3.2.3 1%冰醋酸溶液:1mL冰醋酸(3.1.7)用色谱纯水(3.1.8)定容至100mL。
3.2.4 正己烷-异丙醇-1%冰醋酸混合溶液(8+8+1=V+V+V):取正己烷(3.1.4),异丙醇(3.1.5),1%冰醋酸溶液(3.2.4)3.3 标准品3.3.1 磷脂酰胆碱:纯度>95%。
3.3.2 磷脂酰乙醇胺:纯度>95%。
3.3.3 磷脂酰肌醇:纯度>95%。
人乳的磷脂组成与脂肪球结构
人乳的磷脂组成与脂肪球结构杨洁;杨丹;张雪;韦伟;黄健花;金青哲;王兴国【摘要】采用核磁共振磷谱(31P-NMR)测定不同泌乳期、不同胎龄的人乳磷脂组成,结果显示足月儿和早产儿人乳中,磷脂的主要组成均为鞘磷脂(SM)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰乙醇胺缩醛磷脂(EPLAS)、磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰丝氨酸(Ps),其中SM含量最高,其次为PC和PE,PS和PI含量最低.总磷脂含量在相同胎龄不同泌乳期以及相同泌乳期不同胎龄间均无显著性差异.在磷脂组成上,足月儿人乳中PI在初乳和过渡乳中的含量分别为(4.14±0.42)%和(3.66±0.66)%,显著高于成熟乳中的(2.79±0.09)%;早产儿人乳中PC在初乳和过渡乳中的含量分别为(30.74±2.03)%和(29.40±2.37)%,显著高于成熟乳的(27.55±2.42)%,此外EPLAS含量随泌乳期的延长逐渐降低,PE含量逐渐升高,PE+ EPLAS在不同的泌乳期无显著性差异.另外,足月儿和早产儿的脂肪球结构无明显差异,磷脂构成的膜包裹体积平均粒径约为5μm的脂肪球.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2018(043)010【总页数】6页(P134-139)【关键词】磷谱核磁;磷脂;人乳脂肪球;泌乳期;胎龄【作者】杨洁;杨丹;张雪;韦伟;黄健花;金青哲;王兴国【作者单位】江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡214122;中粮营养健康研究院营养健康与食品安全北京市重点实验室,北京102209;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】TS252.1;TQ641人乳是婴儿最理想的食物,含有3%~5%的脂肪,0.8%~0.9%的蛋白质,6.9%~7.2%的碳水化合物(主要是乳糖),0.2%的矿物质,以及其他生物活性物质等。
大豆磷脂的提取与分析
大豆磷脂的提取与分析摘要:以新鲜的油脚为原料, 经丙酮脱油, 正己烷萃取, 并以以维生素C为抗氧化剂,制得粉状大豆磷脂。
产品的各项指标不仅符合食品添加剂的标准, 而且其色泽也有所改善。
关键词:大豆磷脂萃取1.引言大豆磷脂是脂肪酸、磷酸及其衍化物的多元醇醋弱极性化合物, 其外观为淡黄色的粉状。
大豆磷脂是天然的乳化剂和营养剂。
由于其固有的乳化特性、润湿特性、分散特性、抗氧化特性, 以及生理活性等性能, 已引起世界广泛的兴趣和重视〔1〕, 并在食品、医药、轻工、化学、电子等行业中得到应用。
我国的大豆磷脂生产起步较晚,一直处于落后状态, 开发和利用大豆磷脂的生产是目前当务之急。
大豆磷脂在大豆油脚中含量较高。
油脚是提取大豆油后的残渣, 往往作为饲料或弃去, 造成极大浪费。
从大豆油脚中提取大豆磷脂既合理地利用了资源, 又加强了对大豆磷脂的开发研究。
我们从新鲜油脚出发, 考察了脱油温度、脱油用量、萃取温度和萃取剂用量等对产率的影响, 从而确定了不同于文献〔2〕的工艺条件, 并解决了提取过程中磷脂发粘、结团的问题。
此外, 用维生素作为抗氧化剂也使产品色泽得到了一定的改善。
2.实验部分2.1实验材料三口瓶 1000ml 2000ml水浴锅冷凝管滴液漏斗500ml JB50-D型电动搅拌器668型真空千燥箱 LXJ64一01型离心分离器ir一435型红外光谱仪200度烘箱2.2实验试剂丙酮分析纯沈阳试剂厂乙醇分析纯沈阳试剂厂正已烷分析纯沈阳宏伟化学试剂厂石油醚分析纯丹东化学试剂厂乙醚分析纯丹东化学试剂厂2.3实验过程1.脱油本油脚经过水化, 可直接脱油。
第一次脱油取一定量的油脚, 按油脚中油:丙酮=1:3~4(重量), 加入丙酮。
30℃下搅拌30一40分钟, 静置分层, 除去母液第二次脱油将与第一次脱油相同的丙酮量, 加入已处理的油脚中,20 ℃下搅拌30一40分钟, 静置分层, 除去母液第三次及以后的脱油与第二次脱油方法相同, 如果母液的含油量超过0.06%(重量), 要一直脱到粘壁为止。
磷脂 ir鉴定方法
磷脂 ir鉴定方法磷脂是一类含有磷酸酯键的生物大分子,广泛存在于细胞膜中,是细胞膜的主要组成成分之一。
磷脂分子的结构复杂多样,其鉴定方法也因此多种多样。
本文将介绍一种常用的磷脂鉴定方法——红外光谱法。
红外光谱法是一种基于分子振动的分析方法,通过测量物质在红外光区域的吸收光谱来判断其分子结构。
在红外光谱法中,磷脂样品首先需要进行样品制备。
常见的样品制备方法包括将磷脂样品溶解于溶剂中,然后通过蒸发溶剂或者冻干的方式得到固态样品。
制备好的样品可以直接进行红外光谱测量。
在红外光谱仪中,样品会被照射红外光,红外光会与样品中的原子或者分子振动相互作用,导致红外光的吸收或者散射。
红外光谱仪会记录下样品在红外光区域的吸收光谱。
磷脂的红外光谱主要集中在1400-1750 cm-1的波数范围内,称为磷脂骨架吸收带。
磷脂的红外光谱中,主要的吸收峰包括磷酸酯基团的振动峰、烃基的振动峰和甘油基团的振动峰。
磷酸酯基团的振动峰通常出现在1200-1250 cm-1的波数范围内,可以通过其吸收强度来判断磷脂的含量。
烃基的振动峰通常出现在2850-3000 cm-1的波数范围内,可以通过其峰形来判断脂肪酸的饱和度。
甘油基团的振动峰通常出现在1050-1150 cm-1的波数范围内,可以通过其峰形来判断甘油的结构。
除了上述常见的吸收峰外,磷脂的红外光谱还可能出现其他吸收峰,这些吸收峰可以帮助进一步鉴定磷脂的具体结构。
例如,磷脂中的脂肪酸链长度和双键位置会影响红外光谱中烃基的吸收峰位置和强度。
磷脂中的磷酸酯基团的取代基也会导致红外光谱中磷酸酯基团的吸收峰位置和强度的变化。
红外光谱法作为一种非破坏性、快速、准确的分析方法,广泛应用于磷脂的鉴定和定量分析。
与其他方法相比,红外光谱法具有操作简便、样品制备简单、分析速度快的优点。
此外,红外光谱法还可以结合化学计量学和统计学方法,对大量样品进行高通量分析。
总结起来,红外光谱法是一种常用的磷脂鉴定方法。
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磷脂组成的分析方法
1 适用范围
本方法适用于含油磷脂,脱油磷脂,磷脂组分中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定。
本方法不适合溶血磷脂酰胆碱及溶血磷脂酰乙醇胺的测定。
2 主要内容
本方法采用高效液相色谱法同时测定磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三种组分的含量。
3 原理
根据磷脂中不同组分与硅胶材料的结合能力差异,用多元流动相进行等度洗脱,紫外检测器在线检测,与标准系列比较定量。
4 试剂
4.1 丙酮:分析纯。
4.2 正己烷:色谱纯。
4.3 异丙醇:色谱纯。
4.4 水:色谱纯。
4.5 冰醋酸:色谱纯。
4.6 1%冰醋酸溶液:1mL冰醋酸用色谱纯水定容到100mL。
4.7 磷脂酰胆碱:标准物质,纯度≥99%。
4.8 磷脂酰乙醇胺:标准物质,纯度≈99%。
4.9 磷脂酰肌醇:标准物质,纯度≥98%。
4.10 流动相:正己烷/异丙醇/1%冰醋酸溶液(8:8:1,V/V/V)。
5 仪器与设备
实验室常用仪器及下述特殊设备:
5.1 分析天平:精度为0.001 g。
5.2 旋涡振荡器。
5.3 台式离心机。
5.4 充了氮气的氮气瓶。
5.5 刻度吸管:0.1mL,0.5mL。
5.6 容量瓶:5mL,10mL,100mL。
5.7 10mL带塞刻度试管。
5.8 液相色谱仪,带进样系统、紫外检测器和数据处理器。
5.9 液相色谱柱:Si-60柱子,填料粒度为5μm。
长度200-250mm,直径4-4.6mm。
6 分析步骤
6.1 液相系统的平衡
进样分析前,用流动相平衡液相系统,控制流速为 0.2mL/min ,保证基线平稳,样品的保留时间稳定。
6.2 标准溶液的配制
准确取20mg 磷脂酰胆碱、20mg 磷脂酰乙醇胺与10mg 磷脂酰肌醇,用正己烷/异丙醇/1%冰醋酸溶液(8:8:1,V/V/V)溶解并定容到10mL ,配制磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的混合标准溶液,使溶液中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇浓度分别的2mg/mL 、2mg/mL 、1mg/mL 。
准确吸取此溶液0.25、1.25、2.50、3.75、5.00mL ,并用正己烷/异丙醇/1%冰醋酸溶液(8:8:1,V/V/V)定容到5mL ,使溶液中磷脂酰胆碱的最终浓度为0.1~2.0mg/mL ,磷脂酰乙醇胺的最终浓度为0.1~2.0mg/mL ,磷脂酰肌醇的最终浓度为0.05~1.0mg/mL 。
-20℃保存备用,保存时注意容器口的密封。
注:假如标样为氯仿或甲醇的溶液,必须将其中的溶剂用氮气小心吹干,再用流动相溶解定容。
6.3 标准曲线的制作
以微量注射器分别取不同浓度的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇混合标准溶液10μL 注入液相色谱中。
以样品各组分浓度为横坐标,各组分峰面积为纵坐标,分别绘制磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三种组分的标准工作曲线。
6.4 样品前处理
测试样品应放在密闭和防潮的容器内。
取样后剩余样品应储存在同样的容器中,以备下次测试时再取。
样品在使用前需充分混匀。
准确称取样品30 mg (称量精确至0.001 g)于10mL 带塞刻度离心管中,加入丙酮8mL ,旋涡振荡2min ,3000r/min 离心10min ,使不溶于丙酮的磷脂组分完全沉淀。
小心倾出上层液体,并用氮气吹干剩余残液,用正己烷/异丙醇/1%冰醋酸溶液(8:8:1,V/V/V)溶解并定容到5mL 。
-20℃保存备用,保存时注意容器口的密封。
6.5 测定
6.5.1 色谱条件:Lichrosorb Si-60柱子(250×4.6mm i.d.),填充物粒度5μm 。
流动相流速 1mL/min ,柱温35℃,紫外检测波长205nm 。
不同系统、不同型号柱子调整流速,达到最佳工作条件。
6.5.2 进样:准确取10μL 测定液,注入液相色谱仪,取试样的面积与工作曲线比较定量。
对同一样品至少进行两次测定。
7 结果计算
试样中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的含量以各组分的质量与试样原有质量的质量百分比表示,其计算公式为:
X (%)=
式中:X 是样品中磷脂酰胆碱(或磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇)的含量;
C 是由磷脂酰胆碱(或磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇)工作曲线上查出的试样测定
液中磷脂酰胆碱(或磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇)的浓度,单位为mg/ mL ;
5是样品的体积,单位为mL ;
m 是样品的总质量,单位为mg 。
如果两次测定的结果符合8.1中给定的重复性要求,则取两次测定的算术平均值作为结果。
如果不符合重复性要求,需对同一样品重新进行两次测定。
C×5 m ×100%
8 精密度与回收率
8.1 重复性
同一个分析者使用同样的方法在同一个实验室内使用同样仪器设备对同一试样同时或
连续进行两次测定的结果相对偏差不得大于5%。
8.2 再现性
不同的分析者使用同样的方法在不同的实验室内使用不同的仪器设备对同样的样品进
行两次测定的结果之差应不超过10%。
8.3 回收率实验
定量移取PC标样10μL于刻度试管中,N2吹干后加入1mg PI 标样与1mg PE标样,然后定
量加入已处理完毕并已知PC、PE、PI浓度的样品2.5mL,用正己烷/异丙醇/1%冰醋酸溶液(8:8:1,V/V/V)定容到5mL。
混匀后在相同的色谱条件下进样10μL,测定PC、PE、PI的回收率。
测定的PC(或PE、PI)的质量
回收率(%)= ×100% 已知的原样中PC(或PE、PI)的质量+加入的PC(或PE、PI)的质量。