土壤微生物生物量的测定方法汇总
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土壤微生物生物量的测定方法汇总
操作步骤:
1.准备工作:采集土壤样品,并将土壤样品分为适量的小样品。
2.氯仿熏蒸:将一定量的小样品放入氯仿熏蒸瓶中,然后加入适量的氯仿,并快速将瓶口封紧。
3.震荡:用震荡器对氯仿与土壤样品进行充分的混合震荡,使氯仿充分与土壤样品接触。
4.放置:将瓶子放置在室温下静置一段时间,一般为24小时,使土壤样品中的微生物充分溶解到氯仿中。
5.分液:将上清液和沉淀物分离。上清液中含有溶解在氯仿中的微生物细胞,沉淀物中含有没有溶解的土壤颗粒和其他杂质。
6.校验:对上清液进行校验,可以采用PFLA(没有悬浮杂质时的上清液)或PFLA-Na2CO3(有悬浮杂质时的上清液)校验液。
7.测定:将校验液填入比色皿中,使用分光光度计对比色皿中的液体进行测定,并记录吸光度值。
原理:
氯仿熏蒸法通过将土壤样品与氯仿混合,可以将土壤中的微生物细胞全部溶解到氯仿中。通过将溶解在氯仿中的微生物细胞与校验液比色,在分光光度计上测定吸光度值,从而确定土壤中微生物的生物量。
氯仿熏蒸法的优点:
1.操作简单,不需要复杂的设备和技术支持。
2.适用于各种类型的土壤,包括砂土、壤土、黏土等。
3.测定结果可靠,具有较高的重复性和准确性。
氯仿熏蒸法的缺点:
1.只能测定细菌和放线菌等氧气需氧微生物,不能测定厌氧微生物的生物量。
2.氯仿对环境和人体有一定的毒性和危险性,操作时需要注意安全。总结:
氯仿熏蒸法是一种常用的测定土壤微生物生物量的方法。通过将土壤样品与氯仿混合,将微生物细胞溶解到氯仿中,然后通过比色法测定吸光度值,从而确定土壤中微生物的生物量。氯仿熏蒸法操作简单,适用于各种类型的土壤,且结果可靠。但需要注意操作时的安全性。除了氯仿熏蒸法外,还有其他一些方法也可用于测定土壤微生物生物量,如酚酸法、磷酸化氧化法等,可以根据实际需求选择合适的方法进行测定。