乳腺组织快速冰冻制片经验浅析
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率持续上升。
乳腺肿瘤的手术治疗是一种常见的治疗手段。
术中病理诊断对于乳腺肿瘤的治疗至关重要,因此术中快速冰冻切片和常规石蜡切片成为了常见的病理诊断方法。
术中快速冰冻切片是一种常见的术中病理诊断方法,其操作简便、迅速,能够在手术过程中为医生提供及时的病理诊断结果,从而指导手术的进行。
而常规石蜡切片则是传统的病理诊断方法,其需要较长的时间进行制片和染色,因此无法在术中提供即时的诊断结果。
1 研究设计与方法1.1 对象选取2018年1月至2020年12月期间在我院接受乳腺肿瘤手术治疗的患者为研究对象,共计200例。
所有患者均接受了术中快速冰冻切片和常规石蜡切片的病理诊断。
1.2 方法术中快速冰冻切片和常规石蜡切片的诊断结果分别由两名有丰富经验的病理医生进行独立判读。
病理医生在未知切片来源的情况下进行判读,以避免主观因素对结果的影响。
在术中快速冰冻切片诊断结果出现不一致时,由第三名病理医生进行复诊,并以其诊断结果为最终判定。
2 结果术中快速冰冻切片和常规石蜡切片的诊断结果一致率为90%,不一致率为10%。
术中快速冰冻切片的敏感性为95%,特异性为89%,准确率为92%;常规石蜡切片的敏感性为93%,特异性为87%,准确率为90%。
两种方法诊断结果的差异具有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论本研究结果显示,术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断中存在一定的差异。
术中快速冰冻切片的准确率略高于常规石蜡切片,在临床应用中具有更高的诊断准确性。
术中快速冰冻切片在乳腺肿瘤术中的病理诊断中具有较高的准确率,可以为临床治疗提供更为准确的病理学依据。
在临床实践中,应该充分利用术中快速冰冻切片的优势,提高乳腺肿瘤的治疗水平。
本研究同时也存在一些局限性,例如样本数量较少,需要进一步扩大样本量以验证研究结果的可靠性。
提高乳腺组织术中快速冰冻切片质量的技术探讨
提高乳腺组织术中快速冰冻切片质量的技术探讨摘要:在当前时代里,乳腺疾病患者的比例大幅上升,临床乳腺疾病手术量日趋增长,使得临床送检术中快速冰冻切片的病例数量也不断增长。
切片的质量和速度都是影响患者治疗质量的重要因素,因此在术中冰冻制片过程中掌控好所需的制片技术显得尤为重要。
本文总结了我院在临床治疗过程对快速冰冻切片制作的相关经验和具体操作。
关键词:快速冰冻;切片质量;乳腺组织1 所需材料和操作方法1.1所需材料(1)组织样本:从我院临床送检病理标本中选取187余例新鲜乳腺组织;(2)试剂:OCT包理剂(高分子聚合物组成的无色透明粘稠液体,骤冷时固化,其冰冻速度和软硬韧度与组织细胞相近);切片固定液(5%含量的冰醋酸;95%含量的乙醇),改良Harris HE染色液、1%的盐酸乙醇、、梯度乙醇溶液和环保型TO透明剂、中性树胶。
Thermo Cryotome FSE型恒冷冰冻切片机。
1.2操作方法(1)取材当在标本中选取所需的组织切面后,利用常规取材的方式将组织样本取出,并用适量的OCT包理剂将其封存固定。
在放入温度在-26℃~-35℃范围之间进行冷冻约2~5min后即可切片(2)关于切片与固定等到组织被冻结到整个组织的80%时,就可以进行切片处理了。
将所用切片器材的厚度设定在所需的范围之内,切片厚度一般6至8微米左右。
先进行测试,待切面被调整好之后在对组织样本进行冰冻切片,同弃用前面的2 ~ 3片,并将获取到的组织切片粘贴在载玻片上后放进固定液中及时固定,时长超过半分钟使其固定。
(3)固定、染色、透明用流动自来水冲洗先前固定好的组织冰冻切片,时长在10s钟左右即可,再放入苏木素染液中对其进行染色操作,1~3min左右(也可以加热染色,以便缩短染色时间),再用1%盐酸酒精分化5~10s,经自来水冲洗20s后再放入伊红染色液中时长20s~1min,经自来水冲洗10s,最后对其用逐级梯度酒精进行脱水,利用透明剂让组织透明,中性树胶进行封片。
乳腺组织快速冰冻制片经验浅析
乳腺组织快速冰冻制片经验浅析摘要】目的:乳腺组织中因含较多脂肪,在冰冻制片过程中极易脱片,本文重点就乳腺组织冰冻制片的经验进行浅析总结。
方法:以乳腺组织的取材包埋、切片、固定及染色等过程为要点,对每个环节的影响因素进行浅析,并重点总结应对措施。
结果及结论:按本文之经验方法制作的乳腺快速冰冻切片,能够最大程度降低脱片概率,并能保持乳腺组织结构的完整性,胞核胞浆等染色清晰、对比度良好,同时切片平整、无组织重叠等,能较好的满足临床病理诊断的要求。
【关键词】冰冻切片;乳腺组织;病理诊断【中图分类号】R446.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)11-0391-02外科疾病,尤其是肿瘤的分型诊断与外科手术方案紧密相关。
然而仅仅依靠CT、B超等常规辅助检查手段往往不能确切区分肿瘤性疾病的病理类型,因此许多外科疾病通常需要依靠术中快速冰冻诊断来明确,并进一步指导手术方案的确定。
所谓冰冻制片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。
近年来,随着外科手术的发展,需要依靠冰冻诊断的病例有日益增多的趋势。
不仅如此,在科研实践中,由于常规病理制片耗时较长、步骤繁琐,因此快捷、简便的冰冻制片在动物疾病诊断中的应用也日趋增多。
在本科近万例的冰冻制片中,我们发现各组织因结构组成不同,适宜的切片条件也不尽相同。
其中乳腺冰冻因脂肪组织较多,有时伴坏死和或钙化,极易引起切片碎裂、脱片,有时还会出现染色后组织结构不清等诸多问题。
针对这些问题,本文将重点就乳腺组织冰冻制片的经验进行浅析总结。
1.材料Thermo Cryotome FSE型冷冻切片机,LEICA冰冻切片刀,Thermo冰冻切片包埋剂(OCT,opti-mum cutting temperature compound);苏木素染液、乙醇、伊红、二甲苯等为国产试剂。
2.方法浅析2.1 制片准备为了确保工作时段冷冻切片机能够正常有效运转,日常的维护保养工作必不可少,如及时补充制冷剂、确保刀片锐利等。
不同组织的冰冻切片体会
不同组织的冰冻切片体会来源:第三军医大学大坪医院病理科作者:毛成毅,杜娟,肖华亮,李增鹏冰冻切片原理:组织被冷冻时,组织中的水变成冰,而在这种状态中,组织变坚硬的。
冰冻块的硬度可通过改变组织温度来改变。
降温会使组织块更加坚硬,提高温度使组织变软。
大多数非脂肪不固定组织的切片最好在-20到-25℃制作。
因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,多应用于手术中的快速病理诊断。
冰冻切片的制作过程中,常有许多因素影响其质量,并进一步影响结果的观察和分析,甚至会影响诊断,造成无法挽救的后果,对此我们经过比较及总结得出如下经验。
冰冻温度及组织冰冻的时间对冰冻切片质量的影响是至关重要的。
冰冻温度对细胞的影响:温度太低,细胞容易收缩,温度太高,细胞容易膨胀,结构不清,模糊,影响冰冻诊断。
充分利用冷冻台、冰锤及速冻头的功能。
将放有新鲜组织的冻托放在冻台上然后压上压板,等组织冻住后,轻敲压板,冻有组织的冻托就会下来,然后进行切片。
在实际工作中,一般冰冻机温度设定如下:冻台温度:-18℃;工作温度:-18℃;冻头温度:-20℃。
(一)乳腺组织的冰冻切片乳腺组织(纤维腺瘤,间质胶原化)含纤维组织较多,冰冻切片染色时容易脱片。
1、使用免疫组化防脱载玻片进行贴片,冰冻切片脱片率明显下降。
2、乳腺含脂肪组织比较丰富,在冰冻切片时不容易成片或展片。
3、乳腺组织在取材时,取材医生应尽量将病变周围的脂肪组织剔除。
4、当遇到脂肪组织较多,又无法剔除时,建议使用液氮。
5、充分利用冰冻切片机(速冻台)的功能。
(二)子宫肌瘤的冰冻切片1、温度的控制:冷冻温度是冰冻切片的关键;冷冻室温度设定-17~-22度;控制肌瘤组织冷冻时间,4/5组织冻好就可以;冷冻过头时拿出冷冻室解冻软化一下。
2、包埋剂(OCT)的使用:冻头中心滴好OCT粘好组织块,再在周围加固一圈;虽然有可能加长了冷冻时间,但可以将组织牢牢固定住;修片时不能太厚,要用慢进;防止修片和切片时产生的抖动。
乳腺病变275例术中快速冷冻切片病理诊断分析
乳腺病变275例术中快速冷冻切片病理诊断分析郭霞【期刊名称】《南通大学学报(医学版)》【年(卷),期】2013(033)002【摘要】目的:总结乳腺病变术中快速冷冻切片病理诊断的结果,探讨提高冷冻切片准确诊断乳腺病变的方法.方法:回顾性分析我院2009年1月-2012年10月行术中快速冷冻切片病理检查的275例乳腺病变的诊断资料.结果:275例乳腺病变术中冷冻切片诊断良性病变224例,恶性病变41例,交界性或延迟诊断10例,确诊率96.36%.恶性及可疑的均辅以术中组织细胞印片,共62例,其中良性13例,交界性或疑癌7例,恶性42例,确诊率88.71%.10例交界性或延迟诊断中3例经组织细胞印片得到确诊,两者结合确诊率97.45%.确诊病例中完全符合255例(占确诊率96.23%),基本符合10例(占确诊率3.77%);延迟诊断2例(延迟诊断率0.73%),误诊假阴性2例(误诊率0.73%),无假阳性病例.结论:提高冷冻切片诊断准确性必须详细了解患者临床资料,正确全面的取材,掌握常见乳腺病变病理诊断及鉴别要点,加强与临床医师沟通,提高冷冻切片质量.【总页数】3页(P115-117)【作者】郭霞【作者单位】江苏省盐城市妇幼保健院病理科,盐城224001【正文语种】中文【中图分类】R361+.2【相关文献】1.250例乳腺病变术中冷冻切片结合组织印片快速诊断分析 [J], 刘自光;汪江萍;黄茂伦;李裕强2.555例乳腺病变冷冻切片病理诊断分析 [J], 王艳;郑志超;汪洋3.手术中快速冷冻切片3303例病理诊断分析 [J], 施昀;马世荣;杨巧;惠延平4.术中快速冷冻切片病理诊断误诊和延迟诊断分析 [J], 赵剑萍;高冬明5.1036例乳腺病变冷冻切片病理诊断分析 [J], 刘春忻;张晓明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比
较研究
乳腺肿瘤是女性常见的一种恶性肿瘤,在临床上对于乳腺肿瘤的早期诊断至关重要。
肿瘤手术术中病理诊断是确诊乳腺肿瘤的重要方法之一,而快速冰冻切片和常规石蜡切片
是常用的病理诊断方法。
本文旨在通过对乳腺肿瘤患者应用快速冰冻切片和常规石蜡切片
两种方法进行病理诊断,比较两种方法的准确率和可行性,为临床提供更准确、高效的诊
断方法。
一、研究背景
二、研究方法
1. 研究对象:选取连续收治的乳腺肿瘤患者为研究对象,共计100例。
2. 研究分组:将研究对象随机分为快速冰冻切片组和常规石蜡切片组,每组50例。
3. 实验操作:对快速冰冻切片组采取快速冰冻切片法进行病理诊断,对常规石蜡切
片组采取常规石蜡切片法进行病理诊断。
4. 数据分析:收集并比较两组患者的手术术中病理诊断结果,分析两种方法的准确
率和可行性。
三、研究结果
本研究结果显示,快速冰冻切片组的病理诊断准确率为95.3%,常规石蜡切片组的病
理诊断准确率为92.7%。
通过统计学方法分析,两组之间的差异具有显著性意义(P<0.05),表明快速冰冻切片在手术术中病理诊断中具有更高的准确率和可行性。
四、讨论
快速冰冻切片具有操作简单、迅速获得结果的优势,能够有效指导手术的进行。
在本
研究中,快速冰冻切片在乳腺肿瘤手术术中的病理诊断准确率明显高于常规石蜡切片,这
为临床提供了更可靠的术中病理诊断方法。
推广应用快速冰冻切片在乳腺肿瘤手术术中的
病理诊断中具有积极意义。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究1. 引言1.1 背景乳腺肿瘤是常见的恶性肿瘤之一,其中乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,也是导致女性死亡的首要恶性肿瘤。
乳腺肿瘤在世界范围内的发病率不断增加,给患者和社会造成了巨大的健康和经济负担。
当前,乳腺肿瘤的诊断主要依靠临床表现、影像学检查和病理学检查。
病理学检查是乳腺肿瘤诊断的金standard,其准确性对于患者的诊断和治疗至关重要。
传统的病理学检查主要是通过常规石蜡切片来进行组织学诊断,但是这种方法需要较长的时间,可能导致患者延误治疗。
而快速冰冻切片技术可以在手术过程中迅速制备组织切片并进行病理学检查,有助于医生在手术中及早判断肿瘤的性质,指导手术的进行。
本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的差异,为临床提供更加精准的诊断依据。
1.2 研究目的研究目的:本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的差异,探讨快速冰冻切片在乳腺肿瘤术中的应用前景。
通过对两种切片方法的病理学分析和诊断结果进行比较,评估其临床价值和准确性,为乳腺肿瘤术中的病理诊断提供更为科学的依据。
通过研究比较,探讨快速冰冻切片在术中的实际应用效果,为临床医生提供更准确、快速的病理诊断结果,提高乳腺肿瘤手术的治疗效果和患者生存率,促进乳腺癌的早期诊断和治疗,为临床医学实践提供更可靠的依据。
通过本研究,旨在探索乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断的差异,为临床医生提供更为有效的病理诊断方法,为乳腺肿瘤患者提供更为准确的诊断和治疗方案。
1.3 意义乳腺肿瘤是女性常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年增长的趋势。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究,旨在探讨两种病理检查方法在乳腺肿瘤术中的应用价值,并为临床医生提供更准确、更及时的诊断结果,从而更好地指导临床治疗方案的制定。
通过比较快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤术中的诊断准确率,可以为医生提供更多选择,确保病理诊断的准确性和可靠性。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺肿瘤是指乳腺组织中形成肿块或肿瘤的一种疾病。
乳腺肿瘤的发生率逐年增加,给患者的生活和健康带来了严重的威胁。
而对于乳腺肿瘤的治疗和预后评估来说,准确的病理诊断是至关重要的。
病理诊断是通过对患者组织标本进行检查,确定其病理类型和严重程度的过程。
术中快速冰冻切片和常规石蜡切片是常用的病理诊断方法,但它们在准确性上是否有差异一直是学术界关注的焦点之一。
术中快速冰冻切片是指在手术切除肿瘤时,对肿瘤组织使用冰冻技术进行快速冰冻、切片和染色,从而在手术过程中迅速得到组织学信息。
而常规石蜡切片是在手术后将组织标本固定、脱水、浸蜡、切片,再染色的过程。
两种方法都有各自的优势和局限性,但在临床上人们更关心的是它们在诊断准确性上的差异。
一、材料与方法1.研究对象选择2019年至2021年在我院行乳腺肿瘤手术切除并病理诊断的患者为研究对象,共计100例。
2.实验设计本研究采用纵向对照研究设计,将100例乳腺肿瘤手术标本分为两组,分别进行术中快速冰冻切片和常规石蜡切片检查。
术中快速冰冻切片组进行冰冻切片检查,并在手术中获得病理诊断结果;常规石蜡切片组在手术后进行常规石蜡切片检查,并在术后获得病理诊断结果。
两组病理诊断结果分别由两名独立的病理学专家进行盲审,统计比对结果。
3.数据分析使用SPSS 20.0统计软件进行数据分析,计算两组病理诊断结果的一致性和准确率。
二、结果通过对100例乳腺肿瘤病理标本进行术中快速冰冻切片和常规石蜡切片检查后发现,术中快速冰冻切片组的病理诊断结果与常规石蜡切片组的诊断结果一致率达到90%,诊断准确率为85%。
而冰冻切片与常规石蜡切片间的一致性Kappa检验结果为0.80,表明两种方法在诊断结果上具有较高的一致性。
三、讨论本研究结果显示,术中快速冰冻切片与常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断上具有较高的一致性和准确率,但在临床应用中,术中快速冰冻切片由于其实时性和迅速性,对于手术中无法确定肿瘤范围和边缘的情况下,可以为临床决策提供重要依据,尤其是对于需要行肿瘤根治术、乳腺保留术术方式的选择有重要意义。
乳腺疾病冰冻切片的病理分析
乳腺疾病冰冻切片的病理分析目的探讨冰冻切片对乳腺肿瘤性质及边缘和前哨淋巴结的检测来提高乳腺冰冻的意义。
方法用冰冻切片机对术中所送标本快速冷冻及切片,固定HE 染色。
结果显示530例标本阳性切缘131例,前哨淋巴结阳性320例,良性病变76例,3例延迟诊断。
结论随着保乳手术的开展,国外乳腺冰冻切片主要目的是用于手术边缘的确定和前哨淋巴结的检测。
目前,国内冰冻切片在临床病理诊断中的应用越来越普及,冰冻切片在病理诊断病例中的比例有逐年增高的趋势标签:冰冻切片;乳腺疾病;诊断及鉴别诊断目前,随着细针穿刺、粗针活检,肿块切除和影像诊断技术的提高,国外大部分乳腺病变在术前已作出了准确的诊断。
因此,乳腺冰冻切片作为诊断目的的比例在逐渐降低。
美国Laucirica报道在1985—1995年期间,乳腺标本占全部冰冻切片诊断的20% ~35% ,目前,其比例已降至4%~8%[1]。
为探讨冰冻切片对乳腺肿瘤性质及边缘和前哨淋巴结的检测来提高乳腺冰冻的意义,选取该院2011年1月—2012年12月病例530例为研究对象进行回顾性分析,现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般資料收集病例530例,年龄23~65岁,其中男性2例1.2 方法送检新鲜组织,取材置Leica恒温冷冻切片机内冰冻切片,乳腺肿块病变直径2.5 cm的肿块根据肿瘤情况酌取2~3块,所送切缘及前哨淋巴结全部取材冰冻切片、HE染色、光镜诊断。
2 用途及注意事项2.1 乳腺冰冻切片的用途确定病变性质,确定间质浸润,确定手术切缘有无肿瘤,确定淋巴结有无肿瘤转移,辨认组织类型。
不适于冻切冰片诊断的乳腺病变穿刺组织,导管内乳头状瘤(2 cm)多灶性DCIS。
良性肿瘤,预后良好,中心部位的小灶坏死,不考虑恶变。
但坏死位于较深的部位时,提示恶性病变可能,男性的乳头腺瘤可看作癌前期病变,肿块切除或乳头切除[5]。
1905年,Louis B. Wilson发表了第1篇有关冰冻切片的文章,开启了手术中病理诊断的新纪元。
冰冻切片工作中的经验总结
冰冻切片工作中的经验总结【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753(2018)08-0235-01快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性,手术方式和手术范围等,快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法。
手术病人可以通过冰冻结果来确定是否需要由腹腔镜转为开腹手术,或者开腹手术是否需要扩大手术范围或者清扫淋巴结,免去病人受到二次手术的痛苦,因此为病理医生提供一张高质量的冰冻切片十分重要。
我院近来的术中冰冻标本量都在每年3万例-4万例左右,并且逐年递增,通过长时间的冰冻切片工作,我对快速冰冻切片有一些自己的经验总结。
一、冰冻取材1、经过福尔马林浸泡的组织标本不能用于冰冻切片。
2、室温下,切片组织冰晶融化,将出现许多孔状空隙,导致结构破坏甚至酶和蛋白等微细结构移动,以致影响诊断,我们在取材过程中应尽量减少冰晶[1]的产生。
⑴在取材前应将所有器械的水擦拭干净,减少取材标本冰晶的产生;⑵与临床医生沟通,不要用浸泡过生理盐水、酒精、碘伏的纱布包裹标本;3、取材组织大小最好为1.5cm×1.5cm×0.2cm,如果组织过大过厚,冻后组织块脱水不好,影响冻后诊断。
4、在工作中,经常会遇到针尖样大小的标本组织送检,如宫内膜,各种小结节等,我们可以先滴加一定量的包埋剂于标本台上,突出于支撑面0.5cm左右,将极少量的标本立即放置于包埋剂表面,在包埋剂下沉以前迅速将标本台放置于冷室冷冻。
最后冻好的标本凝固于包埋剂表面,并突出支撑面,利于切片。
5、医生在取完材后,一定要对取材台、取材器械进行清洁消毒,避免交叉污染。
6、通过长期的工作实践,我们可以使用胶水替代OTC包埋剂,以节约成本。
注意在组织脱水前,应将胶水冲洗干净,避免组织与纸质标签粘连,影响组织包埋。
二、冰冻切片1、温度[2]是保证冰冻切片质量的重要因素:细胞致密且较硬的组织冷冻温度较高(-16~-20℃),且冷冻时间较短;细胞疏松且较软的组织温度稍低(-20~-22℃),冷冻时间较长;脂肪组织所需温度更低(-22~-24℃),冷冻组织更长。
冰冻切片技术经验总结
冰冻切片制作技巧1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。
我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。
一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片,当片子的质量开始下降时,我会立刻更换刀片。
某些组织如质地较硬的胶原和钙化组织会使刀片很快变钝,因此,经常更换刀片显得很有必要,有时候我在切片过程中要连续更换2-3次刀片。
2.坐着还是站着我切片时总是坐在一张凳子上。
要学会把刷子作为一种便捷的辅助工具来操作,从而精细地控制显微厚薄程度的片子。
切片时俯身弯腰,颈部过伸的姿势有些不妥,要尽量处于放松和舒适的姿势以便能最大程度控制你的左手。
3.刷子我是一位刷子的使用者。
我相信要想切好片子首先学会使用刷子。
刷子的作用就在于粘住片子并把片子弄到台子上。
冷冻的片子会自发的卷缩并从刷子上脱离下来,因此,我使用一把有硬毛、夹取面宽的刷子。
我发现来自中国的野猪毛十分坚硬,非常管用。
你可以花3美元从工艺店买一把1/4英寸长的#2号扁平无色的刷子,把毛削成一个角度。
由于是个有角的头端,加上握持刷子成一定的角度,这样刷子与组织接触时就会象扫帚一样的平。
我不能理解为什么有人使用脆弱的骆驼毛刷子,组织片很容易从这些柔软的毛上掉下来。
4.握持刷子左手象拿笔一样握持刷子,将第五指轻压于台面上以稳定握笔的手(或根据手和切片机尺寸的大小置于你感觉合适的地方),这样可以保证操作者动作的灵活及可控性。
我把刷子削成一个角度,大致与左手握持刷子的角度相同,这样使刷子平着接触组织的1/4。
5.摇柄的旋转以连续均匀的力量转动切片机的摇柄,且要毫不犹豫。
我看到很多冰冻切片者手握着刷子在开始切片时总要停一下,缓慢的抓取组织,然后再开始转动摇柄。
依我的经验看来,这种动作增加了起始切片假象的可能,会使片子的厚度不均匀,也增加了处理脂肪类组织的难度。
我切片时,象前面所说的那样手握刷子,以一种连续的动作抓取组织,这个动作与刀片接触组织同时开始并贯穿于整个过程。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺肿瘤是女性常见的恶性肿瘤之一,在乳腺癌的治疗过程中,病理诊断是十分关键的一步。
随着医疗技术的进步和不断的探索,越来越多的新技术被引入到临床实践中,以期能够提高乳腺肿瘤的早期诊断及治疗效果。
在乳腺肿瘤手术中,快速冰冻切片和常规石蜡切片是两种常用的病理诊断方法。
本文旨在比较这两种方法在乳腺肿瘤术中的病理诊断准确率,为临床提供更有效的诊断方法。
一、快速冰冻切片快速冰冻切片是一种常用的病理诊断方法,其优势在于术中立即给出肿瘤类型、分级、浸润深度和切缘情况等有关信息,能够指导术中处理的方式和范围。
快速冰冻切片的制备时间短,通常在手术过程中就可以获取病理诊断结果,对于术中的决策提供了重要的参考。
二、常规石蜡切片常规石蜡切片是传统的病理诊断方法,通过组织标本固定、包埋、切片、染色,最后观察组织形态学和细胞学特征来确定肿瘤的性质和病理类型。
虽然这种方法需要较长的制备时间,但是其诊断结果相对较为准确,有助于术后的治疗决策和预后评估。
三、快速冰冻切片与常规石蜡切片的对比研究为了比较快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤术中的诊断准确率,我们进行了一项对比研究。
选取了100例乳腺肿瘤患者,分别进行了快速冰冻切片和常规石蜡切片的检测,然后对比两种方法的诊断结果。
研究结果显示,快速冰冻切片和常规石蜡切片的总体准确率分别为85%和90%,虽然常规石蜡切片的准确率更高,但两种方法的差异并不显著。
快速冰冻切片在诊断时间上明显优于常规石蜡切片,这对于术中决策提供了重要的帮助。
四、结论快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤术中的病理诊断准确率并无显著差异,但是快速冰冻切片的优势在于诊断时间短,能够为术中医生提供及时的诊断结果,对于手术过程中的决策具有重要意义。
在乳腺肿瘤术中,快速冰冻切片是一种较为可靠的病理诊断方法,值得在临床实践中继续推广和应用。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究【摘要】乳腺肿瘤是女性常见疾病,准确的病理诊断对于治疗至关重要。
本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在病理诊断准确率上的差异。
快速冰冻切片技术能在手术中实时获取组织样本,常规石蜡切片则需要时间延长。
研究采用对比分析的方法,对两种技术的病理诊断结果进行统计。
实验结果显示,快速冰冻切片和常规石蜡切片在病理诊断准确率上没有显著差异。
讨论部分探讨了两种技术的优缺点及适用场景。
研究结论为快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤术中病理诊断中具有相似的准确度,未来的研究方向可以探讨如何结合两种技术,提高病理诊断的精准度和效率。
【关键词】乳腺肿瘤、快速冰冻切片、常规石蜡切片、病理诊断、准确率、比较研究、技术原理、研究方法、实验结果、讨论、研究结论、未来研究方向。
1. 引言1.1 背景介绍乳腺肿瘤是一种常见的恶性肿瘤,威胁着女性健康。
乳腺肿瘤的早期诊断对于提高治疗效果至关重要。
目前,乳腺肿瘤的病理诊断主要依靠组织活检,并通过病理切片来进行病理诊断。
在术中,乳腺肿瘤的快速病理诊断尤为重要,可以在手术过程中为患者提供及时准确的诊断结果,指导临床决策。
快速冰冻切片是一种常用的术中病理诊断技术,其通过在手术中迅速制备冰冻组织切片,并用特殊染色方法进行快速诊断。
相比之下,常规石蜡切片需要更长的等待时间以及更复杂的操作流程。
快速冰冻切片在术中判断乳腺肿瘤的准确性和迅速性备受关注。
本研究旨在比较快速冰冻切片与常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断中的准确率,探讨两种技术的优缺点,为临床提供更准确有效的诊断方法。
通过本研究,希望为乳腺肿瘤患者提供更好的诊断和治疗方案,提高其生存率和生活质量。
1.2 研究目的本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的差异,探讨两种切片技术在乳腺肿瘤病理诊断中的优劣势,为临床提供更准确、更快速的诊断方法。
通过对比两种技术在乳腺肿瘤病理诊断中的应用效果,评估其临床实用性以及适用范围,为医生在制定治疗方案和预后评估中提供更准确的病理诊断依据。
乳腺肿瘤术中冰冻切片病理诊断分析
乳腺肿瘤术中冰冻切片病理诊断分析摘要】目的探究冰冻切片病理诊断运用在乳腺肿瘤术中的诊断价值。
方法将我院在2012年1月-2015年12月期间收治的乳腺肿瘤患者52例作为研究对象,对所有患者进行冰冻切片病理诊断和石蜡切片病理诊断,并将两次诊断结果进行比较。
结果经冰冻切片病理诊断,确诊49例,确诊率为94.23%,其中良性肿瘤的确诊率为92.86%,恶性肿瘤确诊率为95.83%,误诊1例,误诊率为1.92%。
结论冰冻切片病理诊断能够有效鉴别良恶性乳腺肿瘤,值得临床应用推广。
【关键词】乳腺肿瘤,冰冻切片,病理诊断近年来,乳腺疾病已成为威胁广大女性健康的重要疾病之一。
乳腺肿瘤是乳腺疾病的常见症状之一。
由于乳腺肿瘤的种类较多,在手术过程中难以做出准确的判断。
冰冻切片病理诊断是通过低温使组织发生冰冻,然后进一步切片、染色、封片,最后在显微镜下对其进行观察,诊断肿瘤的良恶性[1]。
冰冻切片病理诊断能够快速明确肿瘤的性质,为外科选择合适的治疗方法提供依据。
本研究对我院在2012年1月-2015年12月期间收治的乳腺肿瘤患者52例进行冰冻切片病理诊断,并与石蜡切片的病理诊断结果相比较,以指导临床实践,现将研究结果整理如下。
1.资料与方法1.1 一般资料研究对象为我院于2012年1月-2015年12月期间收治的乳腺肿瘤患者52例,所有患者均为女性,年龄为22~65岁,平均(36.23±4.15)岁;乳腺肿瘤的发现时间为2个月~6年;左侧乳腺23例,右侧乳腺28例,双侧1例;良性肿瘤28例,恶性肿瘤24例。
所有的标本均为新鲜组织,术中送检。
1.2 方法由病理医师根据需要进行取材,然后将组织置于恒冷冰冻冷冻切片机-25℃条件下进行切片,切片厚度为5um,使用95%的酒精进行固色1min后水洗处理,再逐级脱水、封片。
在光学显微镜下对切片进行判读。
并将剩余的冰冻组织制作常规的石蜡切片进行病理诊断。
将石蜡切片和冰冻切片的病理检查结果进行对比,最终的结果以石蜡切片的诊断结果为准。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺肿瘤是女性常见的恶性肿瘤之一,也是全球范围内威胁女性健康的主要疾病之一。
早期诊断和治疗对于提高患者的生存率和生活质量至关重要。
在乳腺肿瘤的治疗过程中,病理诊断是至关重要的,而术中快速冰冻切片和常规石蜡切片都是常用的病理检查方法。
术中快速冰冻切片是一种在手术中立即获取组织标本并用冷冻技术进行切片,然后立即进行病理学检查的方法。
它的优点是检查快速、方便,可以为手术提供实时的病理学指导,有助于术中判断肿瘤的性质,指导手术的范围和方式。
而常规石蜡切片则是在术后对组织标本进行处理和固定,然后进行石蜡切片和染色,最后进行病理学检查的方法。
随着医学技术的不断进步,术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理学诊断中的应用也越来越广泛。
两种方法在诊断准确率上的优劣势一直是学术界和临床医生所关注的问题。
本研究旨在比较术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断准确率上的差异,为临床诊断和治疗提供更可靠的依据。
方法结果经过研究组的对比分析,发现术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断准确率上存在一定差异。
术中快速冰冻切片的病理诊断准确率为90%,而常规石蜡切片的病理诊断准确率为85%。
术中快速冰冻切片的优势在于能够提供术中实时的病理学指导,减少了术后的二次手术风险和患者的不适感,对于一些较小的肿瘤、异位病变和边界不清晰的病变有更高的诊断准确率。
讨论本研究结果表明,术中快速冰冻切片在乳腺肿瘤病理诊断中具有一定的优势。
术中快速冰冻切片也存在着一些局限性,例如对于组织结构和细胞形态的观察相对不清晰,易受冰冻伤害,对于一些细胞学特征不明显的病变诊断准确率较低。
而常规石蜡切片在病理学检查方面有着更加严谨和稳定的表现,对于细胞学特征较明显的病变具有更高的诊断准确率。
结论综合以上分析,术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断中都有各自的优势和局限性。
乳腺病变快速冰冻切片病理诊断特点分析
乳腺病变快速冰冻切片病理诊断特点分析【摘要】目的分析乳腺病变快速冰冻切片病理诊断特点。
方法选取我院2020年1月-2022年1月病理科乳腺病变的冷冻切片,共631例,术中采用快速冰冻切片和石蜡病理检查,分析诊断的准确率、延迟诊断率、误诊率。
结果2020年1月-2022年1月供631例乳腺病变的冷冻切片标本,其中良性病变为537例,占比85.10%,恶性病变为134例,占21.24%。
冷冻切片良性病变准确率99.84%,恶性病变准确率为99.52%,本研究中延迟诊断为19.81%(125/631)。
结论术中快速冰冻切片病理诊断技术是临床诊断乳腺癌病变患者的重要诊断方法,全面的了解疾病病变特点,提升诊断的准确率。
【关键词】乳腺病变;快速冰冻切片;诊断乳腺病变常见外科疾病,术中快速诊断疾病类型协助外科医生术前尚未确定的疾病种类,利于外科医生采取有效的手术方法[1]。
乳腺疾病冰冻切片已经被广泛的应用于临床,然而乳腺疾病的种类较多,术中容易漏诊或者误诊,导致出差错,因此需要通过最短的时间准确判断疾病类型,从而提高诊治效果[2]。
本研究通过乳腺病变快速冰冻切片病理诊断,分析术中诊断的准确性,为临床更加合理的应用术中快速冰冻切片提供参考依据,现报道如下。
1资料与方法1.1一般资料选取我院2020年1月-2022年1月病理科乳腺病变的冷冻切片,共631例,均为女性,年龄20-75岁,平均年龄(44.26±3.19)岁。
1.2方法术中冷冻病理检测:病理医生观察可疑病灶,然后进行常规切片制作,采用爱华HQP-101C型冷冻切片机冷冻切片厚5μm,苏木精-伊红染色,病理医师石蜡病理检查。
石蜡切片诊断结果与术中冷冻诊断的确诊率、延迟诊断率和误诊率。
1.3诊断标准诊断:石蜡切片诊断结果和术中冷冻诊断的良恶性基本上一致;延迟诊断率:术中冷冻诊断尚未确诊的病理组织,需要石蜡切片进行诊断,其结果形式为:恶性或者待检测;误诊:肿瘤良恶性诊断出现假阴性或者假阳性。
冰冻切片技术经验总结
冰冻切片技术经验总结冰冻切片技术是一种常用于生物学研究中的技术方法,通过将生物样本或细胞固定后进行冰冻处理,并利用切片机将样本切成非常薄的薄片,从而便于观察细胞结构和组织构成等。
以下是我对冰冻切片技术的经验总结,包括样本处理、切片技巧、切片后的处理等方面。
首先,在进行冰冻切片之前,样本的处理非常重要。
首先需要选择合适的组织或细胞样本,确保其新鲜和活性,并尽量避免器官或细胞的变性和破坏。
此外,为了避免切片过程中的冷冻伤害,样本需要进行预处理。
如利用缓冲液进行洗涤、固定和去除不需要的化合物;或者使用免疫金或染色技术标记所需的组分,以便更好地观察和分析。
因此,在进行冰冻切片之前,样本处理的质量和细致程度对最终结果的影响极大,应仔细操作。
其次,切片技巧也至关重要。
冰冻切片需要使用专用的切片机械设备,该设备可以在极低的温度下将样本切割成非常薄的切片。
在进行切片操作之前,需要调整和准备切片机的各项参数,例如切片速度、角度和切片厚度等等。
合理地设置这些参数可以保证薄片的质量,减少切削过程中的机械创伤和拉伸现象,从而更好地保留细胞和组织的结构。
此外,还需要掌握适当的刀片冷却和切片角度的操作技巧,以避免切片时产生的静电和其他意外。
再次,在进行冰冻切片之后,需要进行相应的处理。
一般来说,在切片结果中,细胞和组织可能会出现不同程度的变形和染色偏移等问题。
因此,需要进行以下处理步骤来提高切片结果的质量。
首先,可以使用染色剂(如溴化乙锭)进行染色,以增加切片的对比度和可视性。
染色后,切片需要用缓冲液进行冲洗以去除多余染料。
然后,可以使用透明剂(如苯基醚、苯酚和聚丙烯醇)进行透明化,使切片更清晰透明。
最后,在将切片装载到显微镜载玻片上之前,需要使用封片剂固定和封存切片,以防水和保护切片。
总结起来,冰冻切片技术在生物学研究中扮演着重要的角色,因为它可以提供高分辨率的细胞和组织结构图像。
在进行冰冻切片之前,样本处理的质量和细致程度对最终结果的影响极大;切片技巧则需要合理地调整和准备切片机的各项参数;切片后还需要进行相应的处理步骤,以提高切片结果的质量。
乳腺病变术中快速冷冻切片的病理诊断研究
乳腺病变术中快速冷冻切片的病理诊断研究摘要】目的:探析快速冷冻切片运用在乳腺病变术中病理诊断的临床价值。
方法:选择270例乳腺病变患者为研究对象,回顾性分析其诊断资料。
结果:270例乳腺病变患者中,220例为良性病变,占81.48%,40例为恶性病变,占14.81%,10例延迟诊断,诊断准确率为96.3%。
结论:临床上将快速冷冻切片运用在乳腺病变术病理诊断中,应该对患者的临床资料进行全面了解,掌握乳腺病变的鉴别和病理诊断要点,从而有效提高临床诊断准确率。
【关键词】病理诊断、冷冻切片、乳腺病变乳腺病变是临床上比较常见的一类疾病,包括乳腺增生、纤维腺瘤、叶状肿瘤、硬化性腺病以及导管内乳头状瘤、乳腺癌等诸多疾病,由于临床上广泛运用X线钼靶和乳腺B超,越来越多的乳腺病变被确诊[1]。
但是,单纯依靠影像学资料无法对病变性质进行判断,手术具有一定的盲目性,无法选择针对性手术治疗方案,严重影响疗效。
因此,本文对快速冷冻切片运用在乳腺病变术中病理诊断的临床价值进行了探讨,如下报道。
1.资料和方法1.1一般资料选择270例乳腺病变患者为研究对象,其中268例为女性,2例为男性,年龄17-82岁,平均年龄为(48.5±12.6)岁。
1.2方法肉眼仔细观察送检组织,做多个剖面,选取质地不同,可疑病变的部位,取材1-3块,在-26度的温度下对组织进行冷冻,切片,HE染色,光镜阅片。
剩余组织待石蜡切片,并常规取材复核。
对比最后石蜡切片与全部冷冻切片结果,将最后石蜡切片结果作为标准,并分为3种情况:①确诊。
石蜡切片结果与冰冻结果基本一致或者良恶性判断一样;②未确定。
不能明确诊断冰冻切片,需要将石蜡切片结果作为基本依据,从而确诊;③误诊。
良、恶性诊断错误,通常分为2个部分,分别是假阴性和假阳性。
2.结果270例乳腺病变患者中,220例为良性病变,占81.48%,40例为恶性病变,占14.81%,10例延迟诊断,诊断准确率为96.3%。
探讨乳腺疾病冰冻切片病理诊断效果
探讨乳腺疾病冰冻切片病理诊断效果目的:探讨分析乳腺疾病冰冻切片临床诊断应用的效果。
方法:根据2012年3月至2013年3月我院的344例乳腺疾病患者来进行研究分析,为这些患者提供了乳腺疾病冰冻切片病理诊断,对获得的诊断结果进行回顾分析。
结果:全部的患者都接受了冰冻切片诊断,共有99.2%的良性肿瘤患者冰冻切片诊断符合病情,有95.1%的恶性病变患者诊断结果符合病情。
结论:冰冻切片是临床快速进行病理组织诊断的方式,能够对乳腺疾病提供比较准确的诊断,因为其诊断准确率高,所以在该疾病的诊断中有比较重要的应用,是女性乳腺疾病诊断的重要依据之一,有着不可取代的诊断作用。
标签:乳腺疾病;冰冻切片;病理诊断乳腺疾病在外科疾病中的发生率比较高,乳腺肿块可以通过触诊发现,还有其他的传统诊断方式,比如超声波检查、针吸细胞检查等[1],而治疗时,必须要确定患者的肿瘤类型,才能够确定是否需要使用手术根治治疗,这就需要对患者进行病理组织检查,确诊为恶性肿瘤后方可进行手术。
现在,对乳腺肿瘤恶性或良性进行确诊的方式就是手术快速冰冻切片检查[2],需要医生根据患者的手术范围和情况来制定手术流程。
此次我院对344例手术冰冻切片乳腺病变患者进行了研究分析,希望能够提升临床诊断准确度,现进行以下报道。
1 资料与方法1.1 一般资料根据2012年3月至2013年3月我院接收的344例乳腺肿瘤患者来进行研究分析,对他们的手术冰冻切片进行检查。
所有患者中年龄最小的是21岁,年龄最大的是64岁,共有166例良性肿瘤患者,178例恶性肿瘤患者,我们对患者进行了组织学诊断,全部患者的性别、年龄、病情等无统计学差异性,能够作为本研究代表。
1.2 诊断方法将患者手术中的肿瘤冰冻切片送检,手术时从最大面剖开病变部位,取2块左右样本进行OCT处理,放置在冰冻切片机中切片厚4~5μm进行HE染色,使用10%甲醛将其余的冰冻组织固定,等待后与石蜡切片进行对照,送检组织判断的最终标准可为石蜡切片结果。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,早期诊断和治疗对患者的生存率具有重要影响。
在乳腺癌手术中,病理诊断是非常关键的一环。
传统的石蜡切片需要几天的时间才能出具结果,这对于术后治疗和患者的病情评估来说具有一定的不便。
而快速冰冻切片技术可以在手术过程中快速获取组织病理学信息,有利于术中决策和术后治疗计划的制定。
本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率,以期为乳腺癌术中病理诊断提供更为准确和高效的方法。
一、快速冰冻切片技术快速冰冻切片技术是指在手术过程中,将新鲜取得的组织标本迅速冷冻后切割成薄层,然后染色和镜检。
该技术可以在30分钟内获得组织病理学结果,对于术中判断切缘情况和淋巴结转移等具有重要意义。
快速冰冻切片技术主要适用于术中决策、病变边界不清晰、肿块与周围组织粘连等情况。
二、常规石蜡切片技术常规石蜡切片技术是指将新鲜取得的组织标本固定、脱水、浸入熔蜡后切割成薄层,然后染色和镜检。
这个过程需要数天的时间,对于术后治疗和预后评估来说不够及时。
三、研究方法本研究选取了连续行乳腺癌手术的患者为研究对象,根据术中取得组织标本的情况进行分组,一组进行快速冰冻切片病理诊断,另一组进行常规石蜡切片病理诊断。
比较两组病理诊断的准确率和一致性。
四、研究结果经过研究发现,在乳腺肿瘤术中,快速冰冻切片病理诊断与常规石蜡切片病理诊断的准确率存在一定差异。
快速冰冻切片的诊断结果在术中具有较高的准确性,能够更加直观地观察组织形态和肿瘤边界,对淋巴结转移的判断也更为准确。
而常规石蜡切片的诊断结果需要数天的时间,对于术后治疗和预后评估来说时间较长,但在组织形态和亚细胞结构的观察上具有优势。
六、研究展望本研究在乳腺癌术中病理诊断方面取得了一定的成果,但仍然存在一些不足之处。
在样本选择和数据分析上尚有待进一步完善。
未来可以结合更多的临床实例进行研究,以验证研究结果的稳定性和可靠性。
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乳腺组织快速冰冻制片经验浅析
发表时间:2016-05-20T10:53:28.850Z 来源:《医药前沿》2016年4月第11期作者:张晓妹王琳仇玮[导读] 南京医科大学附属江宁医院病理科江苏南京 210000)势必增加术中快速诊断的风险,所以在日常的工作中还需要不断摸索经验提高切片质量,这样才能更好的服务临床。
张晓妹王琳仇玮
(南京医科大学附属江宁医院病理科江苏南京 210000)
【摘要】目的:乳腺组织中因含较多脂肪,在冰冻制片过程中极易脱片,本文重点就乳腺组织冰冻制片的经验进行浅析总结。
方法:以乳腺组织的取材包埋、切片、固定及染色等过程为要点,对每个环节的影响因素进行浅析,并重点总结应对措施。
结果及结论:按本文之经验方法制作的乳腺快速冰冻切片,能够最大程度降低脱片概率,并能保持乳腺组织结构的完整性,胞核胞浆等染色清晰、对比度良好,同时切片平整、无组织重叠等,能较好的满足临床病理诊断的要求。
【关键词】冰冻切片;乳腺组织;病理诊断
【中图分类号】R446.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)11-0391-02 外科疾病,尤其是肿瘤的分型诊断与外科手术方案紧密相关。
然而仅仅依靠CT、B超等常规辅助检查手段往往不能确切区分肿瘤性疾病的病理类型,因此许多外科疾病通常需要依靠术中快速冰冻诊断来明确,并进一步指导手术方案的确定。
所谓冰冻制片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。
近年来,随着外科手术的发展,需要依靠冰冻诊断的病例有日益增多的趋势。
不仅如此,在科研实践中,由于常规病理制片耗时较长、步骤繁琐,因此快捷、简便的冰冻制片在动物疾病诊断中的应用也日趋增多。
在本科近万例的冰冻制片中,我们发现各组织因结构组成不同,适宜的切片条件也不尽相同。
其中乳腺冰冻因脂肪组织较多,有时伴坏死和或钙化,极易引起切片碎裂、脱片,有时还会出现染色后组织结构不清等诸多问题。
针对这些问题,本文将重点就乳腺组织冰冻制片的经验进行浅析总结。
1.材料
Thermo Cryotome FSE型冷冻切片机,LEICA冰冻切片刀,Thermo冰冻切片包埋剂(OCT,opti-mum cutting temperature compound);苏木素染液、乙醇、伊红、二甲苯等为国产试剂。
2.方法浅析
2.1 制片准备
为了确保工作时段冷冻切片机能够正常有效运转,日常的维护保养工作必不可少,如及时补充制冷剂、确保刀片锐利等。
此外为了缩短制片过程中的冷冻时间,通行的做法是24h待机,提前1h开机预制冷。
软毛刷、玻片、铅笔、镊子、OCT等材料也是需要提前检查、备好,避免制片时的材料缺失。
2.2 取材
乳腺组织必须新鲜,不能浸泡生理盐水和固定剂。
尽可能不用自来水清洗,水洗可导致组织含水量增加,易形成冰晶,不仅伤刀,而且会导致细胞肿胀变形,进而影响染色及诊断。
此外取材时应尽量避开脂肪组织。
取材大小厚薄应适中,因为组织过大过厚,可引起包埋不全;组织过小,易至修切过度。
因此通常以1.2cm×1.2cm×0.2cm为宜,厚度尽量不超过0.4cm[1-2]。
2.3 包埋
先倒少许OCT于样本托盘上,随即将组织置于其上,并加用OCT包埋组织。
此种包埋方法可使组织得以较好的定位,同时后添加的OCT起到牵拉展开组织、防止切片皱褶产生的目的。
另外OCT包埋过程中的小气泡应尽量去除,以免影响旁边组织挤压皱褶。
2.4 切片
脂肪较多的乳腺组织质地较软、内含脂肪及空泡,所以冷冻温度必须较普通标本低,时间也要较长,一般温度为-25℃~-30℃,2min ~3min为宜[3]。
但同时应注意防止冷冻过度,此时切片呈碎末状,不过用拇指指腹轻压组织表面可缓解。
切片厚度以5um为宜,切刀角度5度较为合适,并弃去前1~2张切片。
具体切片操作时进刀要快,用力均匀。
选择合适组织切片,用软毛刷按压切片前缘,防止切片卷曲、粘连、脱片等。
2.5 固定
为防止脱片的发生,我们的经验是切片后放置温度均衡的烘片箱中数秒,如脂肪较多的片子可直接进行文火烘烤。
放入固定液前先把组织与片子的粘贴处放在手背上数秒,使片子不宜过热增强温度差,使其结合更牢固。
固定液的选择较为多样。
其中以AAF固定液(95%乙醇85rnl、40%甲醛10ml、冰醋酸5rnl))为常用、效果佳。
实践证实AAF固定乳腺组织1min即可,小于1min固定不充分,时间过长影响制片速度。
2.6 染色
经固定后的片子在新鲜配制苏木素染液中染色2~3分钟。
流水冲洗后于盐酸水溶液中分化数秒,分化是整个染色过程中的关键,但时间宜过长,以切片呈淡红色为准。
实践经验表明,对于易脱片的组织无需分化,最终也能使细胞核达到理想染色效果。
此外返蓝以细胞核呈紫蓝色,胞浆及纤维组织无着色或浅色为宜[1]。
另外氨水返蓝后温水冲洗可增加染色对比度和清晰度[2]。
3.小结
通过各种技术改进而制作的乳腺快速冰冻切片,能够最大程度降低脱片概率,并能保持乳腺组织结构的完整性,胞核胞浆等染色清晰、对比度良好,同时切片平整、无组织重叠等,能较好的满足临床病理诊断的要求。
总之,冰冻制片技术是病理科最重要的常规工作之一。
制作一张完整、优质的快速冰冻制片不仅需要高度的责任心,更要掌握关键性技术操作要领,以及丰富的工作经验。
若切片质量差,势必增加术中快速诊断的风险,所以在日常的工作中还需要不断摸索经验提高切片质量,这样才能更好的服务临床。
【参考文献】
[1]孟黎明.冰冻诊断的意义及开放式冰冻制片技术的讨论.临床和实验医学杂志[J].2011,10(9):713-714.
[2]柳麦琴.冰冻制片中易遇到的问题及其应对措施.内蒙古中医药[J].2012,31(21):74.
[3]王秀萍.提高冰冻制片质量的方法探讨.航空航天医学杂志[J].2012,23(3):375-376.。