冰冻切片工作中的经验总结
快速冷冻切片技术的经验总结
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经 验 交 流
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快 速冷 冻切 片技 术 的经 验 总结
赵 曼曼 ， 新新 张
【 关键词 】 切 片技术 ； 冷冻诊 断
【 中图分类号 】 Ｒ３１２ 【 ６． 文献标识码 】 Ｂ 【 文章编号】 １７ ３９ （００ ０ ０３ — １ ６４— ２６ ２１）７— ０２ ０
冷冻诊断技术 由 Ｐｅ ｒｅＲｅ ｒ于 １ １ ｉｔ ｄ ｉ ｅ ｍｅ ８８年首创 ， 助低 借 温使手术 中的新鲜 标本 快速 冷冻 ， 到一定 的硬度 后进 行切 达 间也不宜 过长 ， 则会使组织变硬 ； 于脂肪组织冷冻 时间则 否 对
１ 取 材 与 包埋
３ １ 影 响因素 影 响切 片质 量 的因素有很 多 ， ． 简单归结 为 ：
（） １ 切片不全 或不能切片 ；２ 切片皱缩或卷曲 ；３ 切片脱落 ； （） （） （ ） 结 晶水” ４“ 现象 ； ５ 组织块 脱落。 （）
３ ２ 固定 固定 时选择混合 性 固定 液 （５ 乙醇 ８ ｍ ， ． ９％ ５ ｌ 甲醛 １ｍ ， ０ ｌ冰醋酸 ５ １ ， ｍ ） 组织 贴于 片上立 即 固定 。在切 片过程 中 ，
及血液系统居多 占 ４ ． ％。本 资料的肺外症状 以消化道症 状 ８８ 多见 ， 还累及神经系统 、 心血管系统 、 皮肤黏膜等 。故对不典型 Ａ Ｊ 肺炎合并肺外表现以肺外表现为首 发症 时 ， ，Ｌ 应及早进行支 原体抗体检测或冷凝集试验 ， 以便早诊早治 。 支原体是原核生物界 中最 小 的微 生物 ， 因缺乏细胞 壁 ， 对
参 考 文献
１ 李立新 ， 李增宝 ， 洪虹 ， ． 等 白云地 区小 儿支原体肺 炎 １８例临床分 ２ 析 ［ ］ 中国妇幼保健 ，０ ４ １ （５ ：６ Ｊ． ２ ０ ，９ １ ） ５ ．
冷冻切片制作工作经验分析
ＤＯＩ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ０ ２ ５ ３ — ９ ９ ２ ６ ． ２ ０ １ ６ ． ２ ２ ． ０ １ ４
首先 我们 要 了解 固定 对组 织 切 片 的重 要 性 ， 固
组 织切 好后 用 载玻片 贴 片速 度要 快 ， 避免 再 次 产生 冰 晶 。防脱 片 ， 我 们 可 以采 用 蛋 清 ：甘 油 ＝ ＝ ＝ １：１ 配 置好 ， 涂抹 于 载玻片 上 即可 。 冷 冻切 片过 程 中会 产 生 静 电 ， 静 电生成后 ， 技 术 员 在 粘 片过 程 中极 易 造成 组 织 薄 片 重 叠 、 皱褶 ， 从 而影 响切 片质量 。 目前 消 除 、 减 轻静 电影 响 的方
以替代 ＯＣ Ｔ 胶水 。 。 ］ 。
３ 制 片
的脂 类 、 酶 、 糖 、 抗原 等 化学 成 分不会 受 到影 响 而 得 以保存 ， 因此 广 泛 应 用 于 科 学研 究 及 临 床诊 断 。 至今 国内外 手 术 中仍 普 遍 应 用 病 理 冷 冻 切 片 决定
冷 冻温 度与 切片 技巧 的掌握 是 制片 的关键 。 标 本冷 冻应 尽 可能 迅 速 ， 因为在冷冻过程 中， 水分 形 成冰 晶会使 切 片 出现大 量 冰 晶孔 隙 ， 所 以在 制 片时必 须根 据 不 同组 织 的形 态 结 构 和 组 成 成 分 不同， 调 整 到适 合 的温 度 ， 使 组 织 在 极 短 的 时 间 内
成， 细胞 变形 。取材 中尽 量避 免 骨 组织 、 钙 化 组织 、 坏死 组织 和脂 肪组 织 ， 避 免 软硬 不 一而 不好 切 片 以 及组 织切 片脱 落 。
２ 包 埋
据 不 同 的组 织 而 定 ， 原 则 上 是 细 胞 密集 的薄 切 ， 纤
不同组织的冰冻切片体会
不同组织的冰冻切片体会来源：第三军医大学大坪医院病理科作者：毛成毅，杜娟，肖华亮，李增鹏冰冻切片原理：组织被冷冻时，组织中的水变成冰，而在这种状态中，组织变坚硬的。
冰冻块的硬度可通过改变组织温度来改变。
降温会使组织块更加坚硬，提高温度使组织变软。
大多数非脂肪不固定组织的切片最好在-20到-25℃制作。
因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，多应用于手术中的快速病理诊断。
冰冻切片的制作过程中，常有许多因素影响其质量，并进一步影响结果的观察和分析，甚至会影响诊断，造成无法挽救的后果，对此我们经过比较及总结得出如下经验。
冰冻温度及组织冰冻的时间对冰冻切片质量的影响是至关重要的。
冰冻温度对细胞的影响：温度太低，细胞容易收缩，温度太高，细胞容易膨胀，结构不清，模糊，影响冰冻诊断。
充分利用冷冻台、冰锤及速冻头的功能。
将放有新鲜组织的冻托放在冻台上然后压上压板，等组织冻住后，轻敲压板，冻有组织的冻托就会下来，然后进行切片。
在实际工作中，一般冰冻机温度设定如下：冻台温度：-18℃；工作温度：-18℃；冻头温度：-20℃。
（一）乳腺组织的冰冻切片乳腺组织（纤维腺瘤，间质胶原化）含纤维组织较多，冰冻切片染色时容易脱片。
1、使用免疫组化防脱载玻片进行贴片，冰冻切片脱片率明显下降。
2、乳腺含脂肪组织比较丰富，在冰冻切片时不容易成片或展片。
3、乳腺组织在取材时，取材医生应尽量将病变周围的脂肪组织剔除。
4、当遇到脂肪组织较多，又无法剔除时，建议使用液氮。
5、充分利用冰冻切片机（速冻台）的功能。
（二）子宫肌瘤的冰冻切片1、温度的控制：冷冻温度是冰冻切片的关键；冷冻室温度设定-17~-22度；控制肌瘤组织冷冻时间，4/5组织冻好就可以；冷冻过头时拿出冷冻室解冻软化一下。
2、包埋剂(OCT)的使用：冻头中心滴好OCT粘好组织块，再在周围加固一圈；虽然有可能加长了冷冻时间，但可以将组织牢牢固定住；修片时不能太厚，要用慢进；防止修片和切片时产生的抖动。
冰冻切片技术经验总结
冰冻切片制作技巧1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。
我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。
一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片，当片子的质量开始下降时，我会立刻更换刀片。
某些组织如质地较硬的胶原和钙化组织会使刀片很快变钝，因此，经常更换刀片显得很有必要，有时候我在切片过程中要连续更换2-3次刀片。
2.坐着还是站着我切片时总是坐在一张凳子上。
要学会把刷子作为一种便捷的辅助工具来操作，从而精细地控制显微厚薄程度的片子。
切片时俯身弯腰，颈部过伸的姿势有些不妥，要尽量处于放松和舒适的姿势以便能最大程度控制你的左手。
3.刷子我是一位刷子的使用者。
我相信要想切好片子首先学会使用刷子。
刷子的作用就在于粘住片子并把片子弄到台子上。
冷冻的片子会自发的卷缩并从刷子上脱离下来，因此，我使用一把有硬毛、夹取面宽的刷子。
我发现来自中国的野猪毛十分坚硬，非常管用。
你可以花3美元从工艺店买一把1/4英寸长的#2号扁平无色的刷子，把毛削成一个角度。
由于是个有角的头端，加上握持刷子成一定的角度，这样刷子与组织接触时就会象扫帚一样的平。
我不能理解为什么有人使用脆弱的骆驼毛刷子，组织片很容易从这些柔软的毛上掉下来。
4.握持刷子左手象拿笔一样握持刷子，将第五指轻压于台面上以稳定握笔的手(或根据手和切片机尺寸的大小置于你感觉合适的地方)，这样可以保证操作者动作的灵活及可控性。
我把刷子削成一个角度，大致与左手握持刷子的角度相同，这样使刷子平着接触组织的1/4。
5.摇柄的旋转以连续均匀的力量转动切片机的摇柄，且要毫不犹豫。
我看到很多冰冻切片者手握着刷子在开始切片时总要停一下，缓慢的抓取组织，然后再开始转动摇柄。
依我的经验看来，这种动作增加了起始切片假象的可能，会使片子的厚度不均匀，也增加了处理脂肪类组织的难度。
我切片时，象前面所说的那样手握刷子，以一种连续的动作抓取组织，这个动作与刀片接触组织同时开始并贯穿于整个过程。
6、冰冻切片的制作有感
在工作中努力学习
我们病理科在长期工作中不断总结经验 教训，摸索了一些有效避免制片细节上容易 发生问题的方法，达到比较满意制片效果。 我在这几年的工作中，在各位老师的悉心指 导下，通过细心观察体会与实际操作，逐步 掌握了这些操作技巧，并总结出自己的经验。
冰冻切片的制作
在冰冻切片制片时，区别对待不同的组织标本，例 如： 1.子宫肌瘤：特点是质硬韧，切片时冷冻时间不宜 过长，组织将要冻好时迅速切片，合适的温度在 -15℃左右。切片厚度是一个非常关键环节，一般 5μm为宜。 2.脑组织：送检时一般为新鲜的小组织，为了避免 冰晶的产生，应快速冷冻，冻好即切，尽量用新 鲜的AF液固定或95%乙醇(固定时间大于30秒)。切 片厚度大约在4-5μm。
3.脂肪组织：由于质软，切片具一定难度。应 当控制好冷台和冰头的温度，一般在-28℃以 下，冷冻时间相对较长一些。切片厚度大约在 5-8μm左右。 4.肝组织：由于质脆，冻好即切，控制温度大 约为-10℃左右。如果切片时组织出现裂隙， 用手掌在冰头上轻轻按压几下，由此提高冰头 温度。这样切出来的片子既无裂隙又很平整。 切片厚度大约在5μm左右。
谢谢大家！
冰冻切片的制作有感
尊敬的各位专家、老师、同仁们
大家好！ 我是中日友好医院病理科的杨磊，首先感 谢技术学组举办冰冻比赛，给了我展示制作冰 冻切片的机会。我能取得如此的成绩，非常激 动！通过比赛向同行们学习了不少有益的经验， 同时，也暴露出了我技术中的不足，找到了今 后的努力方向。下面谈一下我在工作中对冰冻 切片的几点认识：
• 5淋巴结：因淋巴结中细胞较丰富，纤维成 分少，冰冻时温度不宜过低，否则切片碎 裂，温度大约-10 ℃左右，厚度3-4 μm。 • 6甲状腺：该组织脆，并含有腺泡、胶质、 钙化等，冰冻切片时易出现破碎，裂隙或 空洞现象，需要切片温度不宜过低，我控 制在-15 ℃以内，组织不宜冷冻时间过长， 最好是在组织没有完全冻好时，及时切片。
制作冰冻切片的几点体会
２ｍｉ ｎ。
１２４ 染色 ．．
切 片做 快 速 ＨＥ染 色 ， 固 定 液 中 取 出 ， 从 自来
水 稍 洗 后 ， 用 电 吹风 吹 干 ， 预 先 加 热 到 ３ 再 于 ７℃ 温 Ｈａｒ ｒｉ ｓ氏
硬 ， 仅 损 刀 而 且 组 织 片 会 出 现 裂 痕 ； 于脂 肪 组 织 ， 冻 时 不 对 冰 间则 要 长 些 。另 外 ， 片 机 及 切 片 刀 在 非 工 作 状 态 下 维 持 温 切
在 同 一 标 本 托 上放 大小 两块 组 织 时 ， 尽 量 冻 成 一 个 平 面 ， 应 与
１１ 材料 ，
德 国 Ｌ Ｉ Ａ 公 司产 的 Ｃ １０ ＥＣ Ｍ ９ ０型 恒 温 冷 冻 切 片
机 、 型 电 动 吹 风 机 、 次 性 刀 片 、 鲜 组 织 、 通 胶 水 、 定 小 一 新 普 固 液 、 ｒｉ氏 苏 木 精 染 液 、 ． 盐 酸 酒 精 分 化 液 、 ％ 氨 水 溶 Ｈａｒ ｓ ０５ １
水 覆 盖 组 织 面 ， 冻 器 速 冻 ， 表 面 出 现 白色 时 ， 可 切 片 。 速 当 即 作 者 的经 验 是 防 卷 板 与 切 片 刀 的 角 度 为 ５左 右 较 理 想 。 接 。 下 来 ， 可 以 进 行 组 织 的修 整 ， 就 当修 到 组 织 最 大 面后 即 可 切 出 完 整 的片 子 了 ， 下 的 切 片 快 速 粘 贴 在 于净 的 载 玻 片 上 。 切 切 片 厚 度 一 般 为 ３ ｍ， 电 吹 风 吹 干 后 立 即 置 于 固定 液 中 １ ～５ｇ 用
度 在 一２ Ｏ℃为 最 佳 。
一
１ ２ １ 取 材 冰 冻 切 片 的标 本 取 材 要 求 平 整 ， 薄 均 匀 ， ．． 厚 一
制作冰冻切片的体会
制作冰冻切片的体会无论是在组织胚胎学等医学基础课中，还是在临床检验工作中，冰冻切片都有着举足轻重的作用，冰冻切片被广泛的运用在科研、教学和临床诊断中。
所谓冰冻切片就是组织在低温状态下在很短的时间内变硬并进行切片。
在临床外科手术中常常需要进行快速病理诊断，而冰冻切片就是一个很好的方法。
标签：冰冻切片；制作；体会冰冻切片是一种在低温的条件下使组织快速冷冻到一定的硬度然后进行切片的方法。
其制作过程简单方便快捷，在手术中快速进行病理诊断从而为手术在中快速确定组织性质，对医生的手术方案具有指导意义。
冰冻切片的组织在送检前不需要进行处理，其组织没有发生变化，使得原来的生活形态得以保持，特别是在免疫组织化学染色中，组织中的糖、酶、抗原、脂类等成分由于没有受到干扰而存在，组织中的细胞抗原的免疫性也得到了保存，对于需要检测糖、酶、抗原、脂类的不会受到影响。
但是，冰冻切片的制作过程要比普通的蜡切片难度大、要求高，而且组织冰冻的程度不好把握，在切片的过程中组织较易破碎，很难切成符合要求的薄片，在染色的过程中很容易脱片，所有以上这些因素都会影响到切片的质量，从而影响到了检测结果。
对于如何能有效快速高质量的制作符合要求的冰冻切片一直使我们面对的问题。
1材料和方法1.1 材料：恒冷切片机，切片刀，固定液，胶水，实验用用的新鲜组织如肝、肾、脾、皮肤、食管、胃、淋巴结、心肌、脑、卵巢、小肠等组织。
1.2 方法：采用新鲜的实验用的新鲜组织，取一块大小为1.5cm×1.5cm×3cm 的新鲜实验用组织，去除组织中的脂肪组织，在取组织的时候要注意保持干燥以免引起组织细胞发生变性和变化，把组织放在低温液氮中快速冷冻放置于冰冻台上。
在切片机内快速冰冻2分钟之后待切。
如果组织的体积较大冰冻时间相应延长，如果所取组织体积较小则相应的缩短冰冻时间，切片刀的温度控制在零下25℃-零下30℃之间。
在开始切片之前要对切片刀和防卷板之间的角度进行调整以防切出来的组织薄片卷曲。
切片工工作总结
切片工工作总结
作为一名切片工，我深知这项工作的重要性和挑战性。
在过去的一段时间里，我积累了丰富的经验，并且对这个行业有了更深入的了解。
在这篇文章中，我将对我的工作进行总结，分享我的心得体会和工作经验。
首先，作为一名切片工，我需要具备一定的技术和操作能力。
我需要熟练掌握切片机的使用方法，了解不同材料的切割特点，以及如何进行精准的切割。
在工作中，我时刻保持警惕，严格按照操作规程进行操作，确保切片的质量和精度。
其次，作为一名切片工，我需要具备团队合作精神和沟通能力。
在工作中，我经常需要与其他部门的同事进行协作，比如与设计师沟通切片要求，与质检人员协商切片质量等。
我学会了如何与他人有效沟通，协调工作，共同完成任务。
另外，作为一名切片工，我还需要具备一定的责任心和细心。
在工作中，我时刻关注切片机的运行状态，确保设备正常运转，及时发现并解决问题。
我还需要仔细检查每一块切片的质量，确保没有任何瑕疵，以满足客户的要求。
总的来说，作为一名切片工，我需要具备技术能力、团队合作精神、责任心和细心。
通过不断的学习和实践，我相信我会在这个岗位上不断成长，为企业创造更大的价值。
希望我的总结能够对其他切片工有所帮助，也希望能够得到领导和同事的指导和支持，共同进步，共同发展。
冰冻切片工作中的经验总结
冰冻切片工作中的经验总结【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）08-0235-01快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性，手术方式和手术范围等，快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法。
手术病人可以通过冰冻结果来确定是否需要由腹腔镜转为开腹手术，或者开腹手术是否需要扩大手术范围或者清扫淋巴结，免去病人受到二次手术的痛苦，因此为病理医生提供一张高质量的冰冻切片十分重要。
我院近来的术中冰冻标本量都在每年3万例-4万例左右，并且逐年递增，通过长时间的冰冻切片工作，我对快速冰冻切片有一些自己的经验总结。
一、冰冻取材1、经过福尔马林浸泡的组织标本不能用于冰冻切片。
2、室温下，切片组织冰晶融化，将出现许多孔状空隙，导致结构破坏甚至酶和蛋白等微细结构移动，以致影响诊断，我们在取材过程中应尽量减少冰晶[1]的产生。
⑴在取材前应将所有器械的水擦拭干净，减少取材标本冰晶的产生；⑵与临床医生沟通，不要用浸泡过生理盐水、酒精、碘伏的纱布包裹标本；3、取材组织大小最好为1.5cm×1.5cm×0.2cm，如果组织过大过厚，冻后组织块脱水不好，影响冻后诊断。
4、在工作中，经常会遇到针尖样大小的标本组织送检，如宫内膜，各种小结节等，我们可以先滴加一定量的包埋剂于标本台上，突出于支撑面0.5cm左右，将极少量的标本立即放置于包埋剂表面，在包埋剂下沉以前迅速将标本台放置于冷室冷冻。
最后冻好的标本凝固于包埋剂表面，并突出支撑面，利于切片。
5、医生在取完材后，一定要对取材台、取材器械进行清洁消毒，避免交叉污染。
6、通过长期的工作实践，我们可以使用胶水替代OTC包埋剂，以节约成本。
注意在组织脱水前，应将胶水冲洗干净，避免组织与纸质标签粘连，影响组织包埋。
二、冰冻切片1、温度[2]是保证冰冻切片质量的重要因素：细胞致密且较硬的组织冷冻温度较高（-16～-20℃），且冷冻时间较短；细胞疏松且较软的组织温度稍低（-20～-22℃），冷冻时间较长；脂肪组织所需温度更低（-22～-24℃），冷冻组织更长。
冰冻切片制作的细节要点总结
剂的稳定性达标，才可用于血液筛查工作。
检出限是可检测出的最低分析物的浓度，本室采用将弱阳性质量控制物倍比稀释的方法进行验证。
这种验证方法只能说明在对样本进行稀释状态下的最低检出限，并不代表最低检出限低的试剂其检出能力就一定好于最低检出限高的试剂[2]。
同时，CNAS ⁃CL02⁃A004：2018建议，弱阳性质量控制物作为外对照监控实验的有效性，浓度宜在2~4倍临界值左右。
对ELISA 试剂的检出限进行测定后，可以此为依据，对弱阳性质量控制物浓度进行调整，有利于室内质量控制。
符合率的验证可采用国家标准血清盘或临床诊断明确的阴阳性样本[2]，因血清盘一般不易获得，且价格昂贵，故在进行符合率验证时选择了往年国家卫生健康委员会临床检验中心对室间质量评价。
酶联免疫吸附试剂的敏感度和特异性亦是需要重点考察的指标，可以有效防止弱阳性标本漏检和阴性标本误判为阳性[3]。
依据CNAS ⁃CL02⁃A004：2018文件要求，当采用手工操作或同一项目使用2套及以上检测系统时，应进行实验室内部比对，包括人员和不同检测系统间的比对。
因此，当实验室有1套以上全自动加样仪、1套以上全自动酶免分析仪进行ELISA 检测时，应进行全自动加样仪比对、全自动酶免分析仪比对。
倘若某仪器不能正常运行时，可将该项目检测转移至其他自动加样仪或全自动酶免分析仪中，其结果亦可信。
人员比对验证表明，在全自动加样仪或全自动酶免分析仪运行发生故障时，不同工作人员手工操作ELISA 后续步骤的结果与仪器操作时结果相一致。
此外，CNAS ⁃CL02⁃A004：2018对实验室设备故障修复后，如果影响了方法学性能，应进行合适的方式进行相关的验证，我们结合文件要求与本室工作实际，也进行了相应的验证，以确保设备维修前、后试验结果的一致性。
自2016年以来，我室通过以上方法验证酶联免疫试剂共15次，调整弱阳性质量控制浓度4次，保证了试剂的品质和室内质量控制水平。
快速冰冻切片的几点体会(精)
对照组为健康体检者 100例 , 其中男性 56例 , 女性 44例 , 年龄为 42岁 ~70岁 , 平均 (51. 36±6. 6 岁。
1. 2方法所有病例均于入院第 2日早晨空腹采血 , 测定甘油三酯 (T G 、胆固醇 (CHO 、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL 2C 、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL 2C 、载脂蛋白 A 1(A poA 1 、载脂蛋白 B (A poB 及脂蛋白 [a (L p 2a ]。
血脂使用日本日立公司生产的 7170A 生化仪 , 试剂购买于和光公司 ; 流变学使用北京世帝公司生产的 R 80自动流变仪。
统计学使用 t 检验。
2结果110例脑梗死患者的 T G 、 A poB 、 LDL 2C 、 L p (a 、血浆黏度、全血还原比黏度及 CHO 显著高于对照组 (P <0. 05 , HDL 2C 、 A poA 1则明显低于对照组(P <0. 01 。
结果见表 1。
表 1脑梗死患者血脂及血黏度结果比较 (xθ±s组别例数 TG CHO ApoA 1ApoB HDL 2C LDL 2C Lp (a 血浆黏度还原比黏度病例组 1101. 67±1. 0834. 13±0. 8231. 22±0. 30. 87±0. 3230. 89±0. 26#2. 99±0. 713256. 9±205. 831. 76±0. 11317. 9±4. 273对照组 1001. 13±0. 333. 79±0. 571. 24±0. 150. 71±0. 251. 00±0. 292. 57±0. 61122. 1±74. 41. 69±0. 04513. 0±1. 4注 :与对照组比较 , #P <0. 01; 3P <0. 05。
冷冻切片制作体会
冷冻切片制作体会冷冻切片是借助在低温的条件下，使组织迅速冻结达到一定硬度进行切片的一种方法。
冷冻切片技术距今已近有100多年的历史，主要在外科手术中确定病变性质，了解肿瘤的扩散情况，包括肿瘤是否浸润相邻组织，有无区域淋巴结转移等及手术切缘有无肿瘤组织残留。
因此，制作一套高质量的冷冻切片对于确保病理诊断的科学性、可靠性是极其重要的。
如今，绝大多数的医院都有国产或国外的冷冻切片机，冷冻切片已经成为病理科的日常工作，成为病理科不可缺少的一部分。
资料与方法一般资料：2004年4月～2010年12月将我院手术中的各种送检活体组织标本，使用仪器德国莱卡-3050s型冷冻切片机制作病理冷冻切片。
方法：冷冻温度一般在-21～-25℃之间，使用OCT包埋剂。
细小组织全部取材，大组织的取材大小为1cm×1cm×0.5cm，在包埋冻头上加少量冷冻包埋剂，在包埋剂未完全冻结之前放上组织，然后在示组织大小加适量包埋剂。
冻好的组织先粗刨修，暴露组织最大切片后再进行切片。
冷冻切片厚度以5～8μm为宜，将组织切片展平贴于载玻片上。
冷冻切片在95%酒精内固定1～2分钟，自来水充分浸洗，哈瑞士苏木素染色1～2分钟，水洗，1%盐酸酒精分化3～10秒，水洗，0.1%氨水蓝化3～5秒，水洗，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封片。
注意事项手术送检的标本要新鲜、干燥、完整，未进行过固定。
太小组织如肝穿、肾穿等组织可以放在用生理盐水浸湿的纱布上。
取材时在不影响病理诊断的前提下，标本取材尽量小一点，组织厚度不＜3mm，这样有利于组织的快速冻结。
应尽量避开坏死及有钙化的区域，对于乳腺组织及淋巴结的取材，应尽量将多余脂肪剔除。
含骨的组织不建议做冷冻切片。
要剔除手术中残留的线头、细小铁丝、钢钉等杂物。
用干净的滤纸充分吸干组织中多余的水分，能有效的减少冰晶的产生。
冷冻组织含游离水分过多，组织未吸干水分就直接包埋，切片中冰晶形成的区域无细胞组织结构，呈结晶样或不规则空隙，周围组织因为冰晶影响，组织结构不同程度破坏，细胞收缩，细胞核明显变小，不利于诊断。
冰冻切片的制作体会
冰冻切片的制作体会目的：探讨在冰冻切片过程中针对不同组织样本采取的相应对策，以达到最佳的切片效果。
方法：回顾分析我院自2011年以来148例术中快速冰冻切片的制作方法。
针对不同的组织样本，选择的冰冻温度与时间不同，包埋与切片的也方法不同。
结果：切片厚薄均匀完整，无皱褶，核染色清晰，细胞形态完整，核浆对比鲜明。
结论：冰冻温度与时间、组织包埋、切片方法等是制作高质量冰冻切片的关键。
标签：冰冻切片；样本；制作；效果术中快速冰冻切片检查是病理科的一项常规工作，但同时又是一项非常重要和高风险的检查。
它是在低温情况下将新鲜组织冷冻到一定硬度，然后再进行切片的一种方法【1】。
它能对临床治疗提供积极的指导意义，为手术医生决定手术方式和范围提供依据。
而高质量的冰冻切片又是这项检查的首要条件。
所以，能否制作一张优质的冰冻切片就显得尤为重要。
我科自2011年引进英国珊顿冰冻切片机以来，我共完成制作冰冻切片148例。
1 材料与方法1.1材料临床送检的各类手术中新鲜组织，不加任何固定液，直接送至病理科。
其中甲状腺25例、子宫肿瘤24例、卵巢肿瘤22例、乳腺肿瘤51例、肺肿瘤4例、胃肠道肿瘤5例、其它17例。
1.2方法采用手术切除后新鲜标本，取一块1.5*1.5*0.3cm左右【2】的有病变组织块，去除多余的脂肪组织、钙化物、坏死组织和骨组织。
取材速度要快，避免取材器械和取材台上有水接触，用干纱布把组织上的血液和液体吸干，避免冰冻切片出现过多的冰晶现象【3】。
然后直接放在冷冻托盘上，滴加OCT（聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物）或普通胶水。
根据要切片的组织类型设定冰冻温度和冰冻时间。
切片厚度以5微米为佳，然后迅速粘片，投入AF液（40%甲醛与95%酒精1：4的混合液）中固定1min左右。
苏木素染色，水洗，分化，返蓝，伊红，梯度酒精（从低浓度到高浓度）脱水，透明，封固。
2. 结果切片质量较好，厚薄均匀完整，无皱褶，核染色清晰，细胞形态完整，核浆对比明显，符合冰冻诊断要求。
冰冻切片制作体会及常见问题对策
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冰冻切片技术经验总结
冰冻切片技术经验总结冰冻切片技术是一种常用于生物学研究中的技术方法，通过将生物样本或细胞固定后进行冰冻处理，并利用切片机将样本切成非常薄的薄片，从而便于观察细胞结构和组织构成等。
以下是我对冰冻切片技术的经验总结，包括样本处理、切片技巧、切片后的处理等方面。
首先，在进行冰冻切片之前，样本的处理非常重要。
首先需要选择合适的组织或细胞样本，确保其新鲜和活性，并尽量避免器官或细胞的变性和破坏。
此外，为了避免切片过程中的冷冻伤害，样本需要进行预处理。
如利用缓冲液进行洗涤、固定和去除不需要的化合物；或者使用免疫金或染色技术标记所需的组分，以便更好地观察和分析。
因此，在进行冰冻切片之前，样本处理的质量和细致程度对最终结果的影响极大，应仔细操作。
其次，切片技巧也至关重要。
冰冻切片需要使用专用的切片机械设备，该设备可以在极低的温度下将样本切割成非常薄的切片。
在进行切片操作之前，需要调整和准备切片机的各项参数，例如切片速度、角度和切片厚度等等。
合理地设置这些参数可以保证薄片的质量，减少切削过程中的机械创伤和拉伸现象，从而更好地保留细胞和组织的结构。
此外，还需要掌握适当的刀片冷却和切片角度的操作技巧，以避免切片时产生的静电和其他意外。
再次，在进行冰冻切片之后，需要进行相应的处理。
一般来说，在切片结果中，细胞和组织可能会出现不同程度的变形和染色偏移等问题。
因此，需要进行以下处理步骤来提高切片结果的质量。
首先，可以使用染色剂（如溴化乙锭）进行染色，以增加切片的对比度和可视性。
染色后，切片需要用缓冲液进行冲洗以去除多余染料。
然后，可以使用透明剂（如苯基醚、苯酚和聚丙烯醇）进行透明化，使切片更清晰透明。
最后，在将切片装载到显微镜载玻片上之前，需要使用封片剂固定和封存切片，以防水和保护切片。
总结起来，冰冻切片技术在生物学研究中扮演着重要的角色，因为它可以提供高分辨率的细胞和组织结构图像。
在进行冰冻切片之前，样本处理的质量和细致程度对最终结果的影响极大；切片技巧则需要合理地调整和准备切片机的各项参数；切片后还需要进行相应的处理步骤，以提高切片结果的质量。
冰冻切片快速病理诊断30年总结
冰冻切片快速病理诊疗30 年总结秦皇岛市肿瘤医院病理科康文喜谢芳芳王小聪李英邮编： 066001 术中冰冻切片快速病理诊疗是 1818 年由 PieterdeRiemer 第一创建发明的， 1891 年Halsted 和 Accarty 将冰冻切片技术列为正式诊疗方法。
当前国内外已将此项技术广泛应用于临床，解决手术中的病理诊疗问题。
并日趋遇到外科医生和患者的欢迎和必定。
跟着冰冻切片技术和临床外科手术的发展，要求做冰冻的病例逐年增加，截止到2012 年 10 月份，本院病理科展开快速冰冻病理诊疗30 余年，共达成冰冻快速病理诊疗1476 例，累积了必定的经验和教训，为了更进一步提升冰冻快速病理诊疗水平，提升冰冻诊疗正确率，降低误诊率，作者将 30 年来全部冰冻切片快速病理诊疗病例进行总结剖析以下。
1资料和方法1.1 一般资料本组 1476 例大多数来自本院住院病人，小部分来自其余医院。
此中男 897 例，女 579 例，年纪最大 81 岁，最小 5 个月。
1.2 病变部位乳腺 1052 例，软组织 42 例，胃 33 例，淋奉承 33 例，骨 12 例，腹膜 9 例，睾丸及附睾 8 例，甲状腺 47 例，小肠 15 例，大肠 25 例，膀胱 5 例，脊椎 5 例，阑尾 10 例，胆道 14 例，阴茎 19 例，卵巢 53 例，脑及脑膜 3 例，前列腺 3 例，肝 12 例，肾 26 例，脊髓 2 例，喉 2 例，子宫 42 例，精索 1 例，纵隔 1 例，腹膜后 1 例，眼 1 例。
1.3 方法本组 1476 例均采纳德国入口莱卡冰冻切片机切片， HE染色，一般光学显微镜察看。
1.4 结果 1476 例中，恶性肿瘤 687 例，良性肿瘤 388 例，瘤样病变 170 例，炎症 202 例，结核 29 例，确诊 1457 例，未能确诊 15 例，误诊 4 例。
2.议论冰冻切片质量差，最先好多有名的病理学家如 Ewing、Brewer、Simpson等以前思疑冰冻切片的正确性， 1960 年 Cryostat 冰冻切片机正式应用于临床后，冰冻切片质量有了很大提升，但和白腊切片对比仍很逊色，瞄正确的冰冻病理1 / 3诊疗带来必定困难，特别对年青的病理科医生来说难度较大，缺少经验的病理科医生难以胜任此项工作，下边依据自己个人的经验发布一点见解。
冰冻切片小结
冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。
因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，并对组织变化不大等优点。
在科研等领域广泛应用。
在本研究中，我们取用甘肃高山细毛羊胚胎性皮肤，根据配种时间，分别采取：87d、90d、93d、96d、99d、102d、105d、108d、111d、114d、117d、120d、123d、126d、129 d、132 d、135d、138d、141 d、144 d、147d胚胎性皮肤，在头顶、颈侧、髻甲、颈上缘、肩脚、体侧、背部、荐部、股部、腹部10个部位分别取2cm2的皮样，用DEPC处理PBS缓冲液冲洗处理后投入液氮后，带入实验室-80 ℃冰箱保存备用。
步骤：1.冰冻切片组织的制备:固定将组织置于4%多聚甲醛固定液中，4℃摇床过夜。
漂洗将固定后的标本用1X PBS漂洗三次，每次15分钟。
脱水将组织置于30%蔗糖溶液中，4℃摇床过夜。
第二天观察是否脱水完全，判断的标准是，当管竖直时，组织是否沉到蔗糖溶液的底部，若组织已完全沉降到蔗糖溶液的底部，平放或震荡后仍能沉降，则可判断组织已脱水完全。
包埋将组织倒入培养皿中，用眼科刀将脑和脊髓根据切片切面的需要在不同的部位切开，并做好头尾端的标记。
之后将组织置于包埋盒中，用滤纸吸干组织周围多余的蔗糖溶液，滴加OCT（optimal cutting temperature compound）到包埋盒中，用移液枪头小心的将组织周围的O.C.T混匀，切忌起气泡，静止10分钟，以防切片时脱片。
重新取一个包埋盒，将组织移入到包埋盒中，倒入OCT，再次用移液枪头将组织与O.C.T混匀，将组织按切片需要方向摆放于包埋盒的底部，迅速置于干冰与酒精的混合物中。
在包埋盒上做好标记，用保鲜膜和锡纸包好后放入-80℃冰箱贮藏待切。
2.切片：切片前先将切片机的箱体温度及刀头温度均设为-20℃，把包埋盒从-80℃冰箱取出置于切片机中平衡半小时左右。
关于制作优质冰冻切片的体会
关于制作优质冰冻切片的体会冰冻切片的种类有很多，随着科技的发展，许多方法已经被时代遗忘。
如今，低温恒冷箱冰冻切片法被普遍采纳，服务于病理科的急诊工作。
冰冻切片利用物理降温的原理，将新鲜的组织在低温恒冷切片机冷冻后变硬马上进行切片，适用于快速切片法。
在对患者实施手术过程中，临床医师取出的病变组织需要病理医师快速诊断从而来确定病变性质，可为决定手术方案、范围及治疗方法提供指导。
因此，只有高质量的冰冻切片，才能保证病理诊断的准确性，现将其制作体会介绍如下。
1取材及包埋手术中的新鲜组织应不加固定液，送到病理科后立即取材。
所取的组织应有针对性，尽量保持组织的原有形态，避开坏死组织、脂肪、骨组织，并且缝线、钙化区要剔除。
取材过程中组织不能接触水，当组织中含水量高时，用干纱布吸干后再进行冷冻，以防冰晶形成，~，~。
将取好的组织块立即放在冷冻托上，加胶水覆盖组织块。
当组织较小或较薄时，可先在冷冻托上做一小冻台，将组织放在冷冻托的中央位置，再加少量胶水于组织上，稍冻后用冷冻锤压平，再进行切片，这样方能切出完整的片子。
2切片我科用的是LeicaCm1950冰冻切片机，平常工作中，冰冻切片机长期处于待机备用状态，可将箱体温度、冻头温度设定为-20℃左右。
当然，不同的组织要求的温度也不同，要根据情况区别对待，随时调整。
例如细胞多的组织及肿瘤，温度就要求是-20℃;含脂肪较多的组织则要-35℃冷冻，并且要冷冻2min~3min，直到看到包埋剂发白变硬后再进行切片用羽毛牌C-35一次性刀片，只用于冰冻切片机。
切片的准备工作应提前做好，可以节省时问。
一切准备就绪，开始切片，首先进行组织的粗修，粗修的厚度是45m~50m，粗修到暴露组织的最大平面。
值得注意的是，修片时要观察重点病变的微小病灶，防止因为没有切到位而发生漏诊。
粗修后要用毛笔清除机头标本托及切片机上的组织碎屑，防止交叉污染。
然后再以转动大轮推进的方式进行切片，切片时用力要均匀，动作要轻柔，切成厚度是4m，完整、平坦、无褶的薄片，直接附贴在干净的载玻片上。
切片生产工作总结范文(3篇)
第1篇一、前言时光荏苒，转眼间，本年度的切片生产工作已圆满落下帷幕。
在过去的一年里，我们全体切片生产团队在公司领导的正确指引下，紧密围绕公司发展战略，以提高产品质量、降低生产成本、优化生产流程为目标，取得了显著的成绩。
现将本年度切片生产工作总结如下：一、工作回顾1. 产品质量方面（1）严格按照国家标准和生产工艺进行生产，确保产品质量稳定。
（2）针对客户反馈的问题，及时调整生产工艺，提高产品合格率。
（3）加强员工质量意识教育，提高员工对产品质量的重视程度。
2. 生产效率方面（1）优化生产流程，提高生产效率，缩短生产周期。
（2）合理调配生产资源，确保生产计划的顺利完成。
（3）加强设备维护与保养，降低设备故障率，提高设备利用率。
3. 成本控制方面（1）严格控制原材料采购成本，降低生产成本。
（2）加强生产过程管理，降低能耗，提高资源利用率。
（3）合理制定生产计划，避免生产过程中的浪费。
4. 安全生产方面（1）严格执行安全生产规章制度，确保生产过程安全。
（2）加强员工安全教育培训，提高员工安全意识。
（3）定期开展安全隐患排查，及时消除安全隐患。
二、工作亮点1. 技术创新（1）成功研发新型切片设备，提高生产效率。
（2）优化生产工艺，降低生产成本。
2. 人才培养（1）加强员工培训，提高员工技能水平。
（2）选拔优秀人才，充实生产团队。
3. 团队协作（1）各部门之间紧密配合，共同推进生产工作。
（2）员工之间相互支持，形成良好的团队氛围。
三、存在的问题1. 生产设备老化，部分设备故障率较高。
2. 部分员工技能水平不足，影响生产效率。
3. 原材料采购渠道单一，成本控制存在一定压力。
四、改进措施1. 加大设备更新改造力度，提高设备性能。
2. 加强员工培训，提高员工技能水平。
3. 拓展原材料采购渠道，降低采购成本。
4. 优化生产流程，提高生产效率。
五、展望未来在新的一年里，我们将继续以公司发展战略为指导，紧紧围绕提高产品质量、降低生产成本、优化生产流程的目标，努力做好以下工作：1. 深入推进技术创新，提高生产效率。
切片工作总结
切片工作总结
切片工作是一种高效的工作方式，它将工作任务分解成多个小的切片，然后逐
个完成，从而提高工作效率和质量。
在过去的一段时间里，我有幸参与了一些切片工作，通过这些经历，我对切片工作有了更深刻的理解和体会。
首先，切片工作让我更加专注和高效。
在过去，我常常会被一大堆任务所压倒，感觉无从下手。
但是通过切片工作，我可以将任务分解成小的部分，然后逐个完成。
这样一来，我可以更加专注于每一个小任务，不会被其他任务所干扰，从而提高了工作效率。
其次，切片工作让我更加有条理和计划。
在切片工作中，我会将任务按照优先
级和时间分配进行规划，然后逐个完成。
这样一来，我可以更加有条理地完成工作，不会出现漏掉任务或者拖延的情况，提高了工作质量。
另外，切片工作也让我更加有成就感和动力。
在完成每一个小任务的时候，我
都会有一种成就感，觉得自己在不断地进步和成长。
这种成就感也会激发我的工作动力，让我更加有信心和决心去完成接下来的任务。
总的来说，切片工作是一种非常有效的工作方式，它让我更加专注、有条理和
有成就感。
通过切片工作，我不仅提高了工作效率和质量，也提升了自己的工作能力和动力。
我相信，在未来的工作中，我会继续运用切片工作的方式，不断提高自己的工作水平。
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冰冻切片工作中的经验总结
发表时间：2018-09-21T16:48:28.870Z 来源：《中国医学人文》2018年第8期作者：代洁王巍
[导读] 快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性，手术方式和手术范围等，快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法
（四川大学华西第二医院；四川成都 610000）
【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-9753（2018）08-0235-01
快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性，手术方式和手术范围等，快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法。
手术病人可以通过冰冻结果来确定是否需要由腹腔镜转为开腹手术，或者开腹手术是否需要扩大手术范围或者清扫淋巴结，免去病人受到二次手术的痛苦，因此为病理医生提供一张高质量的冰冻切片十分重要。
我院近来的术中冰冻标本量都在每年3万例-4万例左右，并且逐年递增，通过长时间的冰冻切片工作，我对快速冰冻切片有一些自己的经验总结。
一、冰冻取材
1、经过福尔马林浸泡的组织标本不能用于冰冻切片。
2、室温下，切片组织冰晶融化，将出现许多孔状空隙，导致结构破坏甚至酶和蛋白等微细结构移动，以致影响诊断，我们在取材过程中应尽量减少冰晶[1]的产生。
⑴在取材前应将所有器械的水擦拭干净，减少取材标本冰晶的产生；
⑵与临床医生沟通，不要用浸泡过生理盐水、酒精、碘伏的纱布包裹标本；
3、取材组织大小最好为1.5cm×1.5cm×0.2cm，如果组织过大过厚，冻后组织块脱水不好，影响冻后诊断。
4、在工作中，经常会遇到针尖样大小的标本组织送检，如宫内膜，各种小结节等，我们可以先滴加一定量的包埋剂于标本台上，突出于支撑面0.5cm左右，将极少量的标本立即放置于包埋剂表面，在包埋剂下沉以前迅速将标本台放置于冷室冷冻。
最后冻好的标本凝固于包埋剂表面，并突出支撑面，利于切片。
5、医生在取完材后，一定要对取材台、取材器械进行清洁消毒，避免交叉污染。
6、通过长期的工作实践，我们可以使用胶水替代OTC包埋剂，以节约成本。
注意在组织脱水前，应将胶水冲洗干净，避免组织与纸质标签粘连，影响组织包埋。
二、冰冻切片
1、温度[2]是保证冰冻切片质量的重要因素：细胞致密且较硬的组织冷冻温度较高（-16～-20℃），且冷冻时间较短；细胞疏松且较软的组织温度稍低（-20～-22℃），冷冻时间较长；脂肪组织所需温度更低（-22～-24℃），冷冻组织更长。
2、切片厚度：细胞密集且细胞体积较小的组织薄切；纤维多细胞稀少且细胞体积较大的组织厚切。
3、保证切片质量的关键：
⑴在上标本台夹时选好角度，保证组织切面完整；
⑵切片厚薄均匀，遇到较硬的组织（如宫颈、肌瘤等），可以利用大拇指的体温将组织进行软化后再进行切片；
⑶在HE染色时应勤换染色试剂，不要节约，保证核浆对比清晰，染色漂亮。
三、冰冻收块
1、及时收块
一旦病理诊断结束，应将剩余组织及时固定。
2、4℃冰箱甲醛固定
低温组织迅速复温至室温，极有可能破坏组织生物膜系统，直接影响冻后石蜡切片质量及后续的病理诊断，可将收好的组织块放置于4℃冰箱的福尔马林中固定。
四、冰冻切片机的维护与保养
随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展，要求送检冰冻切片的病例越来越多，冰冻切片机的使用频率就越来越高，我们应该正确的使用低温恒冷冰冻切片机，对其进行日常保养，尽量预防和减少故障的发生率。
1、及时清洁冷室内组织碎屑，保证设备内外清洁，特别注意清扫碎屑的方式，往废物槽清扫，尽量不要扫入装有标本台夹头的转轮缝隙里，如果组织碎屑长期积累，会影响右侧转轮的使用，转动转轮会非常费力，影响冰冻切片的速度和质量。
2、定期清洁切片机的主要功能部件，特别是刀架和标本台。
3、定期消毒，特别是切过携带传染病标本后，可采用喷雾式84消毒液。
4、定期给机械系统加润滑剂，请工程师进行专业维护保养。
5、每次切完切片要及时关闭照明开关，按下锁机开关，保证人机安全。
作为一名合格的病理技术员，不仅仅是要干好自己的本职工作，更需要从日常工作中总结经验、发现问题、解决问题，时刻严格要求自己，能够为诊断医生提供一张完美的切片。
参考文献：
[1] 包翠芬,刘霞,穆长征,李淑玲. 比较三种防冰晶法对切片保存效果的影响[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2007 (01)
[2] 陈芳,李海. 提高病理冰冻切片质量的探讨[J]. 中国医药指南. 2013 (06)。