08-09基因工程试卷(A)

安徽农业大学2008―2009学年第一学

期《基因工程原理》试卷（A卷）

考试形式: 闭卷，2小时，总分100分

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1.1970 年,Smith和Wilcox从流感嗜血杆菌中分离到第一个

Ⅱ类限制性内切核酸酶，这个酶后来被命名为HindⅡ；而第一

个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是EcoRⅠ。

2.Ⅱ类限制性内切核酸酶仅有内切核酸酶活性，而没有甲基化酶

活性，作用时需要Mg2+ 作为辅助因子。

3.原核生物主要有两种类型的DNA连接酶：DNA

连接酶和T4 DNA 连接酶。正常情况下只有

T4 DNA接平末端的双链DNA。

4.受体细胞的感受态是接受外源DNA的生理状态，诱导处理通

常采用的化学试剂是CaCl2。

5.两个天然质粒pSC101和ColE1分别是严紧型和

松弛型个作为重组DNA载体的质粒是PSC101

6.:

7.pBR322质粒具有四环素和氨苄青霉素两种抗

性基因，而pUC系列的载体仅有氨苄青霉素抗性基因。

8.在分离提取DNA的过程中，通常使用金属离子螯合剂EDTA，其目

的是螯合Mg2+离子，抑制核酸酶的活性；，而使用异戊

醇的作用是减少气泡，促进分相

9.在Southern印迹中，DNA转移的速度主要取决于DNA片段大小

和琼脂糖凝胶浓度。

'

1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是（ A ）。（a）P．Berg （b）W．Gilbert （c）A．Kormberg （d）B．McClintock

2. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（B ）不太恰当。

（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成

（b）这一系统中的核酸酶都是Ⅱ型限制性内切核酸酶

（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰【

（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

3. 限制性内切核酸酶可以特异性地识别和切割（B ）。

（a）双链DNA的特异碱基对（b）双链DNA的特异碱基序列

（c）特定的三联密码（d）以上都正确

4. 限制性内切核酸酶的星号活性是指（ A ）。

（a）在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性

（b）活性大大提高

（c）切割速度大大加快（d）识别序列与原来的完全不…

5. 下列限制性内切核酸酶中，选用（ B ）时要考虑连接后外源DNA 的插入方向。

（a）Eco RⅠ（b）Eco RⅡ（c）Bam HⅠ（d）PstⅠ6. 下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性（ B ）

（a）S1核酸酶（b）Bal 31核酸酶

（c）末端转移酶（d）碱性磷酸酶

7. 用碱法分离质粒DNA时，因为（ C ）所以可以被除去。

（a）染色体DNA断成了碎片

（b）染色体DNA分子量大，而不能释放

（

（c）染色体DNA变性后来不及复性

（d）染色体末同蛋白质分开而沉淀

8. DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（ A ）。

（a）将双链DNA中的5′-P同3′-OH末端重新形成磷酸二脂键

（b）作用时不消耗能量

（c）需要Mn2+等二价辅助离子

（d）也可以连接RNA分子

9. 关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确（ B ）

~

（a）在不同的宿主中具有不同的复制机制

（b）在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点

（c）在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶

（d）在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度

10.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确（ C ）

（a）噬菌斑颜色的变化（b）cI基因失活造成噬菌斑的变化（c）对IPTG的分解能力（d）对Xgal的分解与否

11.在利用lacZ失活的显色反应筛选中，IPTG的作用是（A）。

]

（a）诱导宿主的α肽的合成（b）诱导宿主的ω肽的合成

（c）作为酶的作用底物（d）作为显色反应的指示剂12.在切口移位标记DNA探针时只能使用（B）。

（a）Klenow酶（b）DNA聚合酶Ⅰ

（c）T4 DNA聚合酶（d）T7 DNA聚合酶

13.用下列方法进行重组体的筛选，只有（ C ）说明外源基因进行了

表达。

（a）Southern印迹杂交（b）Northern印迹杂交

（c）Western印迹杂交（d）原位菌落杂交

|

14.用免疫化学法筛选重组体的原理是（ D ）。

（a）根据mRNA同DNA的杂交（b）根据DNA同DNA的杂交

（c）根据载体基因的表达（d）根据外源基因的表达15. 限制性内切核酸酶Eco RⅠ、Bam HⅠ和Hin dⅢ在野生型的λ噬菌体

DNA中有多个酶切位点，删除这些酶切位点的数量，主要通过（ A ）。

（a）体内突变（b）完全酶切后连接

（c）部分酶切（d）先用甲基化酶修饰后再酶切

1.D NA多态性就是限制性片段长度多态性。（错）

2.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化

了，其他的限制酶就不能切割了。（错）

3.DNA连接酶和T4 DNA连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助

因子。（错）

4.—

5.用产生不同黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源

DNA片段，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。（错）

6.通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的

外源基因是否表达。（对）

7.限制性内切核酸酶的切割频率理论值应该是1/4n。（对）

8.甘油是导致限制酶星活性的主要原因之一，防止的办法是在酶切反

应体系中，将甘油的浓度控制在5%以下。（对）

9.在反转录过程中，使用AMV比使用M-MLV可得到较多的产物。

（错）

10.ColE1天然质粒载体具有四环素抗性标记，因而很容易选择。（错）

11.只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制

子不能进行独立复制。（对）

12.松弛型质粒pUC载体系列的拷贝数很高，达到500~700，因此不必

进行氯霉素扩增。（对）

13.)

14.基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。（错）

15.不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。（对）

16.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。

（错）

17.外源基因（或DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因

不再有任何功能。（错）

18.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。（错）

19.突出或凹缺的3，末端都可以用Klenow酶进行末端标记。（错）