浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方教学内容
马铃薯脱毒及脱毒种薯繁殖技术-精品文档
马铃薯脱毒及脱毒种薯繁殖技术一、脱毒马铃薯的增产效果及特点1、增产效果同样的品种，经过脱毒和隔离繁殖后，其结果明显不同。
脱毒后的品种植株生长健壮，产量显著增加，其增加幅度要比脱毒前至少增产30%～50%，甚至成倍增产。
退化越严重的品种，脱毒后增产效果越明显。
2、增产的原因脱毒后的马铃薯，摆脱了病毒对植株机体各种生理活动的干扰，恢复了该品种原有的生长发育特性，同时也恢复了其增产潜力，因而植株生长旺盛。
据测定，脱毒后的马铃薯，其植株叶绿素含量比退化植株增加33.4%，并且光合生产率提高14%-41.9%，植株高度增加50%以上。
3、脱毒马铃薯的特点脱毒马铃薯只是将已经侵染进植株体内的病毒脱除，但不能避免病毒的再侵染。
也就是说在繁殖和生产过程中脱毒马铃薯仍会遭到各种病毒的再侵染而重新退化。
因此，要采取有效措施防止或延缓病毒的再侵染。
脱毒马铃薯是有“有效期”的，过了有效期就应淘汰。
马铃薯繁殖、生产代数越高，再退化的就越严重。
二、脱毒技术1、茎尖剥离方法幼苗材料经过消毒处理后，将其置于解剖镜的承物台上，用左手拿镊子夹住植株，右手用解剖针剥离掉植株生长点的小叶片和叶原基，最后只保留一个生长点，这个生长点是带一个叶原基的，大小约为O.1～0.2mm。
然后用解剖针把生长点“切”下来放在培养基上，封严瓶口放于培养室内培养。
2、茎尖培养方法采用Ms基本培养基，每升添加6-BA 2mg NAA 0.5mg，盐酸吡哆素0.5mg，甘氨酸2mg，盐酸硫胺素0.4mg，烟酸0.5mg，生物素0.05mg，肌醇100mg。
温度和湿度是茎尖的主要培养条件，温度23～25℃，光照强度是3000～4000勒克斯，且光照时间为每天16小时左右。
经过30～40天的培养茎尖便有明显的增长。
大约3～4个月后就能长成小植株。
3、病毒检测病毒检测的目的，是鉴定所获得的试管苗是否将所有病毒完全脱除。
病毒检测方法有生物学和血清学两种。
目前，血清学方法应用比较普遍的是“酶联免疫吸附技术（ELISA）”。
脱毒马铃薯高产栽培管理技术
脱毒马铃薯高产栽培管理技术脱毒马铃薯高产栽培管理技术是指利用脱毒苗种植和科学管理的方法，提高马铃薯的产量和质量。
下面将介绍脱毒马铃薯高产栽培管理技术的具体措施和步骤。
一、脱毒马铃薯的选种和繁殖1.选择健康无病、无害虫的优良母株作为种薯，并进行分疪、脱毒处理。
分疪是指将母株切割成多份，每份保留一个芽眼，然后在消毒后的培养基上进行培养，以繁殖出健康的薯苗。
脱毒则是利用化学消毒剂或热处理法使薯苗免受病毒和其他病原体的感染。
二、脱毒马铃薯的育苗和定植1.选用营养成分丰富的育苗基质，如稻谷壳、藻饼等。
将分疪并脱毒处理过的马铃薯母薯放入育苗床中，将种植密度控制在每亩5000株左右，保持相对湿润的环境，适时给予适量的光照和温度。
2.脱毒马铃薯的定植要选用适当的日期和地点。
一般在秋季或春季早期进行定植。
选用肥沃的土壤进行种植，土壤PH值在6.0-7.0之间，土壤深厚，有良好的排水条件。
三、脱毒马铃薯的管理1.施肥：脱毒马铃薯在生长过程中对肥料的需求较高。
一般在定植前进行底肥施用，根据土壤肥力进行施肥量的调整，一般每亩施用有机肥2000-3000公斤，磷肥10-15公斤，钾肥10-15公斤。
根据植株的生长情况和需求适量进行追肥。
2.灌溉：脱毒马铃薯的灌溉要注重时机和水量的掌握。
定植后的早期生长阶段，要保持土壤湿润，但不可积水；中后期则要控制灌溉的频率和水量，避免过度湿润。
3.病虫害的防治：定期进行病虫害的监测，一旦发现病虫害，采取及时的防治措施。
如利用生物防治、化学药剂等进行病虫害的防治，同时注意除草和清除病虫害源。
四、脱毒马铃薯的收获和储存1.脱毒马铃薯的收获要在植株生长合适的时候进行，一般以植株叶片凋萎70%以上为宜。
收获时要避免刺伤或损伤薯块，以减少病原体侵入和感染。
2.收获后应及时进行薯块的清理、晾晒和分类。
将有病害或损伤的薯块进行淘汰，清洗后放置在通风、阴凉干燥的地方晾晒。
3.储存时要选择通风良好、温度适宜、湿度适中的地方进行储存，避免薯块受潮或过热。
马铃薯茎尖脱毒及脱毒苗快繁技术操作规程
目录1 茎尖脱毒技术操作规程 (1)1.1 设备条件 (1)1.1.1 试剂配置室 (1)1.1.2 洗涤及灭菌室 (2)1.1.3 无菌室 (2)1.1.4 培养室 (2)1.2 材料的选择 (2)1.3 类病毒和病毒的检测 (2)1.3. 1 类病毒的检测 (2)1.3.2 病毒检测 (9)1.3.3 脱毒材料热处理 (13)1.4 培养基的制备 (13)1.4.1 培养基母液配制 (13)1.4.2 培养基配制 (15)1.5 外植体灭菌 (17)1.6 茎尖剥离前消毒 (17)1.7 茎尖剥离与接种 (17)1.8 培养 (17)1.9病毒检测筛选脱毒苗 (17)1.10 品种典型性鉴定 (18)2 脱毒苗快繁技术操作规程 (18)2.1 茎切段培养基繁殖 (19)2.1.1 扩繁前的准备工作 (19)2.1.2 茎切段和接种 (19)2.1.3 培养 (19)2.2 扦插苗扩繁 (21)2.2.1 培养基础苗 (21)2.2.2 基础苗移栽 (21)2.2.3 基础苗剪切 (21)2.2.4 基础苗切段后的管理 (22)2.2.5 扦插苗 (22)2.2.6 扦插苗管理 (23)马铃薯茎尖脱毒及脱毒苗快繁技术操作规程1 马铃薯茎尖脱毒技术操作规程马铃薯健康种薯的生产方法主要有利用茎尖脱毒快繁技术生产无病毒种薯、田间系选生产良种和实生种子生产无毒实生薯等，其中植物茎尖分生组织培养脱毒技术（即茎尖脱毒）在实际的农业生产中应用最为广泛并取得了巨大成功。
茎尖脱毒技术是根据病毒在植物体内分布不均和茎尖分生组织带毒少的原理，结合使用钝化病毒的热处理方法，通过剥离茎尖分生组织进行培养获得脱毒植株。
这一技术具有周期短、效率高、能与组织培养快速繁殖相结合等特点。
目前除一些类病毒外，绝大多数植株病毒都可以通过茎尖脱毒技术进行脱除。
经茎尖分生组织培养获得的植株经病毒检测并确认其不带病毒后可进一步利用，对仍带有病毒的株系进行淘汰或再脱毒。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯脱毒试管苗快繁技术是近年来在马铃薯生产中得到广泛应用的一项先进技术，通过试管苗快速繁殖可以大幅提高马铃薯的繁殖效率和质量，有效地避免了病毒和病菌的传播，提高了马铃薯的产量和品质。
本文将从马铃薯脱毒试管苗原理、技术流程、应用前景等方面进行介绍。
一、马铃薯脱毒试管苗原理马铃薯脱毒试管苗技术是通过将健康的组织培养在无菌的培养基中，通过适宜的营养和生长条件，使其快速生长和分化为幼苗，然后继续培养和繁殖，最终获得大量无病害的苗种。
其原理主要包括以下几点：1. 选择健康组织：选择健康的马铃薯组织，如叶片、茎芽等，进行无菌处理，去除表面的病菌和病毒。
2. 建立培养基：根据马铃薯生长的特点和营养需求，配置适宜的无菌培养基，提供充足的营养和生长因子。
3. 培养和繁殖：将经过无菌处理的马铃薯组织培养在无菌培养基中，控制适宜的温度、光照和湿度，促进组织的生长和分化为幼苗，然后进行继代培养和繁殖。
通过以上原理，可以有效地实现马铃薯的脱毒繁殖，得到大量无病害的试管苗，为马铃薯生产提供了可靠的种苗资源。
马铃薯脱毒试管苗技术的流程主要包括组织培养、无菌处理、培养基配置、培养和繁殖等步骤，下面将对其具体流程进行介绍。
2. 无菌处理：将经过消毒处理的组织放入无菌工作台中，进行进一步的无菌处理，包括盆栽、割取等操作，确保组织的无菌状态。
3. 培养基配置：按照配方将无菌培养基配置好，包括营养盐、植物生长激素、碳源等成分，确保提供足够的营养和生长因子。
马铃薯脱毒试管苗技术在马铃薯生产中具有广阔的应用前景，主要体现在以下几个方面：1. 提高繁殖效率：传统的马铃薯繁殖方式存在生长周期长、繁殖效率低的问题，而通过试管苗快速繁殖技术可以大大提高繁殖效率，节约时间和成本。
2. 避免病毒传播：马铃薯作为病毒携带者，传统繁殖方式易导致病毒的传播，而试管苗繁殖可以避免病毒的传播，有效保证马铃薯的健康和质量。
3. 提高产量和品质：无病害的试管苗具有较高的生长力和抗逆性，可以提高马铃薯的产量和品质，为种植户带来更好的经济效益。
马铃薯快速繁殖(实验结果)
一．实验设计方案度，再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等，制备成符合要求的培养基。
培养基配方设计：（1）根据培养的目的选择一种培养基为基本培养基。
（2）确定培养基中各种激素的浓度及相对比例。
本实验中马铃薯试管苗快速繁殖培养基为MS培养基。
诱导培养基的配方如下：MS培养基+5mg/L 6-BA+8%蔗糖。
2、实验流程（1）实验总体流程（2）母液配制流程（3）马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制流程（三）实验设备及材料1、实验设备果酱瓶、500mL搪瓷杯、三角瓶、烧杯、容量瓶、玻璃棒、25mL量筒、1mL 和5mL移液管、洗耳球、PH试纸、封口膜、扎口用棉线、药勺、称量纸、普通电子天平、酒精棉球、小块纱布、灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台、冰箱、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉、记号笔。
2、药品和试剂（1）母液配制：硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾、碘化钾、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆素、烟酸、肌醇、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、NAA（α-萘乙酸）、 6-BA （ 6-苄基腺嘌呤）、浓盐酸、氢氧化钠、95%酒精、蒸馏水等。
（2）马铃薯快速繁殖培养基及诱导培养基的配制：事先配好的MS基本培养基母液、琼脂、蔗糖、生长调节物质、蒸馏水、1mol·L-1HCl、1mol·L-1NaOH等。
（3）其他：75% 酒精等。
3、实验材料马铃薯脱毒苗（四）实验方法步骤1、MS培养基母液和常用试剂的配制（1）大量元素母液的配制▪母液最好在2～4℃的冰箱中保存。
尤其对生长调节物质与有机类物质要求较严。
▪贮存时间不宜过长，如发现有霉菌和沉淀结晶产生，就不能再使用。
▪（1）玻璃器皿的洗涤▪（2）天平的使用▪（3）配制大量元素时溶液的混合▪（4）铁盐的配制▪（5）洗液的配制原理：（2）确定培养基中各种激素的浓度及相对比例。
马铃薯脱毒与快繁技术
67《农机市场》 2024年第2期马铃薯是泸水市片马镇的主要粮食作物之一。
2023年，全镇马铃薯种植面积813.3亩，占全镇粮食作物播种面积4435.59亩的18%，实现总产886700 kg，平均单产1090.3 kg/亩。
主要种植品种是中甸红、合作88。
为实现马铃薯高产稳产，增加马铃薯种植收益，近年来，片马镇积极推行马铃薯的脱毒与快繁技术，以促进当地马铃薯种植产业的良好可持续健康发展。
1. 马铃薯脱毒技术1.1 建立无菌体系1.1.1 材料选择与处理马铃薯外植体材料的来源可分为三种；一是将大田中处于生长季节的马铃薯植株移植至温室内，并将新生长出的嫩芽收集为外植体。
二是从大田中的马铃薯植株上切取一部分的茎段，扦插于营养液中培植一段时间后，将新生长出的嫩芽收集为外植体备用。
三是将马铃薯块茎放置在室内使其自然发芽，在收集嫩芽为外植体时先将室内温度提升至38℃处理15d后再进行。
马铃薯脱毒与快繁技术胡伍军云南省泸水市片马镇人民政府农业农村综合服务中心，云南 泸水 673207作者简介：胡伍军（1977—），男，汉族，云南泸水人，本科，高级农艺师，研究方向：农业技术推广。
在培养外植体时，可使用72%多菌灵可湿性粉剂2000倍液、农用链霉素1500倍液混合均匀喷施外植体，可起到杀菌效果。
当外植体植株上携带有病毒，可采取热处理或茎尖培养的方式进行消毒。
马铃薯外植体新芽多为2cm左右，收集后用清水冲洗干净后，运用75%酒精对外植体表面灭菌处理30～60s。
随后使用0.1%升汞灭菌5～8min，最后使用无菌水冲洗3～10次，单次冲洗时间为5min，完成处理 [1]。
1.1.2 茎尖剥离与接种马铃薯外植体茎尖较小，将茎尖组织灭菌后，放置在10～40倍解剖镜下使用专用镊子剥离嫩叶组织，裸露出半圆形生长点。
保留1～2个马铃薯叶原基，并接种至空白培养基。
1.1.3 初代培养茎尖初代培养以液体培养基为主，配方为MS+IAA0.1mg/L+GA30.1mg/L，pH值为5.8。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是一种重要的作物，全球范围内都有大量的种植。
由于土壤中存在的病毒和细菌的侵害，马铃薯的产量和质量往往受到一定的影响。
为了解决这一问题，马铃薯脱毒试管苗快繁技术应运而生。
本文将为大家介绍马铃薯脱毒试管苗快繁技术的原理、方法和应用前景。
一、原理马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种利用组织培养和生物技术手段快速产生无病毒的马铃薯试管苗的技术。
它的原理主要是通过选择健康无病毒的马铃薯组织，将其进行无菌培养，促进组织再生和植株生长，最终获得大量的无病毒马铃薯试管苗。
二、方法1. 选择健康的母株：首先需要选择健康的母株作为试管苗快繁的材料。
这些母株应该是没有明显的病害和病毒感染的，以保证脱毒后的试管苗是健康的。
2. 组织培养：将选取的健康组织（例如茎、叶或芽）进行消毒处理，然后进行无菌培养。
在无菌条件下，利用培养基和植物生长调节剂促进组织再生和植株生长。
3. 病毒检测：在组织培养过程中，需要对脱毒后的试管苗进行病毒检测，确保其无病毒。
通常采用ELISA法和PCR法等技术进行检测。
4. 试管苗生根：经过病毒检测合格的试管苗，可以进行生根处理，促进其根系的形成和长成。
5. 扩繁：经过生根的试管苗可以进行扩繁，通过分株或离体再生等方法，迅速繁殖大量的无病毒试管苗。
三、应用前景马铃薯脱毒试管苗快繁技术在马铃薯种植中有着广阔的应用前景。
通过脱毒试管苗快繁技术，可以及时有效地消除马铃薯中的病毒和细菌，保证种子的健康。
这样不仅可以提高马铃薯的产量和质量，还可以减少农药的使用，对环境保护具有积极意义。
脱毒试管苗快繁技术可以加快马铃薯种苗的繁殖速度，满足市场需求。
传统的种苗繁殖需要时间较长，而脱毒试管苗快繁技术可以大大减少这一时间，提高种苗的产量和质量。
脱毒试管苗快繁技术还可以为育种工作提供良好的材料。
利用这一技术，可以快速繁殖无病毒的马铃薯试验材料，为马铃薯新品种的选育提供更多可能。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种十分重要的新技术，它将对马铃薯生产和种植起到重要的促进作用。
教案4马铃薯的脱毒与快繁技术
4.无病毒苗的鉴定（略）
三、快速繁殖技术
1、直接移栽利用块茎繁殖
情感目标：引导学生勤动脑、勤思考，学思结合，挖掘潜能，培养自主学习意识。
教学重点、难点：
重点：茎尖培养脱毒方法和技术。
难点：茎尖培养脱毒方法和技术。
教学方法及师生互动设计：
主要以讲授法、讨论法、演示法为主，结合组培实验室进行讲解。
1、导入新课；新知识讲解；课堂小结，布置思考题；
2、让学员以小组为单位，通过课件、课上亲自动手进行茎尖剥离等手段增加学生兴趣，进行合作学习，培养学员相互协作解决问题的意识。
3、组织培养切段繁殖
此法繁殖速度快，并且完全避免了所有病源再侵染的可能。具体的方法是：将无病毒植株切段，每段带一个叶片，将切段放在培养基上，在培养间里继续培养，5d左右就能长出新根，接着从叶腋内长出新芽。
四、微型薯生产技术
1、试管生产微型薯
植株长到4-5cm时转入MS+香豆素50-100mg/L+BA3-5mg/L+蔗糖8%+活性炭0.5%的固体培养基上。温度22℃，黑暗条件下即可诱导出微型种薯。
课堂练习、作业：
1、脱毒马铃薯如何培育？
课后小结：
植物脱毒的意义；植物脱毒的方法、热处理脱毒与茎尖培养脱毒的技术（重点）；
教学内容（讲稿）
备注（包括：教学手段、时间分配、临时更改等）
新课导入：
植物脱毒的病毒病仅次于真菌类病害，对农业生产造成了巨大的损失，如何通过一些技术手段来达到去除植物体内病毒，恢复种性或进行生产，这就是植物脱毒技术。
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广1、选择优良基质脱毒马铃薯种植的第一步就是要选用优良的基质。
合适的基质能够让种薯生长良好，同时也能够减少病菌的侵染。
一般来说，种植脱毒马铃薯的基质要求发育成熟，细腻、透气性好、保水力强、肥力高、无病虫害、无杂草等特点。
2、采用无毒水处理法在种植脱毒马铃薯的过程中，为了防止病毒的感染，需要对种薯进行处理。
目前采用最广泛的方法是采用无毒水处理法。
水处理法可以将病毒从种薯的表面去除，并能够破坏病毒的DNA链。
通过此方法处理后的种薯无论是质量还是抗病性都会得到提高。
3、在适宜的季节种植脱毒马铃薯的种植最好选择在适宜的季节进行，这样季节的条件能够满足其生存的需要。
同时，在种植过程中还需要注意气温、湿度等天气因素，避免过高或者过低的气温对生长产生不良影响。
4、严格实施轮作轮作是一种非常有效的防治马铃薯病毒的方法。
在轮作中能够对土壤进行充分的杀菌消毒，避免不同季节的马铃薯病毒横行，从而获得较为优质的马铃薯品质。
二、脱毒马铃薯的推广现状在国内，脱毒马铃薯种植技术逐渐得到了广泛的应用。
由于脱毒马铃薯不仅质量安全，而且口感好、营养健康，深受广大消费者的喜爱。
在推广脱毒的过程中，需要加大宣传力度，提高消费者对健康食品的认识，从而切实推动脱毒马铃薯的市场化。
同时，政府也应该逐步完善相关政策，加大对脱毒马铃薯的支持力度，将其逐渐推广到更多的农户中，并引导农户转型种植脱毒马铃薯，在农业结构调整和提高农产品质量的同时，为消费者提供更为健康的食品选择。
总之，脱毒马铃薯的种植技术和推广已经成为了当前农业发展的重要议题。
在政府和农业生产者的共同努力下，相信不久的将来，脱毒马铃薯将成为一种常见的健康食品，为人们提供更为健康、放心的膳食保障。
马铃薯脱毒原原种的生产流程
马铃薯脱毒原原种的生产流程
马铃薯脱毒原原种的生产流程主要包括以下几个步骤：
1. 选择优良种薯：从健康无病虫害的田间种薯中选择高产、品质好、抗病虫能力强的马铃薯品种作为原原种。
2. 繁殖种薯：选取健康的马铃薯种薯，经过表面清洗和消毒处理，然后进行切割或整个种植。
在温室或培养箱中进行繁殖，以获得足够的数量的种薯。
3. 无菌培养：将选好的马铃薯种薯进行无菌处理，通常是通过在无菌培养基上进行培养。
培养基中包含有机和无机营养物质，以提供马铃薯生长所需的养分。
4. 病毒检测：在马铃薯无菌培养的过程中，定期进行病毒检测，以确保无菌苗的无病毒性。
5. 提取繁殖无菌苗：选取无菌苗，将其进行定植或进一步繁殖。
6. 壮苗培养：经过一段时间的培养后，获得合格的马铃薯无菌苗。
这些苗具有良好的生长状态，包括根系健壮、叶片齐整和抗病虫害的特性。
7. 繁殖和扩大种薯：将这些无菌苗进行繁殖和扩大，以获得足够的数量的马铃薯无菌种薯用于生产。
8. 焯水处理：为了增加种薯的保存期限和提高种薯的萌芽率，
还可以对种薯进行焯水处理，将种薯放入60-70°C 的水中烫一段时间，然后进行快速冷却。
9. 包装和贮存：最后，将经过脱毒的马铃薯种薯进行包装，并在低温、干燥、通风良好的条件下进行贮存，以确保其质量和萌芽性。
以上是马铃薯脱毒原原种的生产流程的基本步骤，这样可以确保种薯的健康和无病毒性，为后续的马铃薯种植提供高质量的种材。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是一种重要的农作物，在全球范围内广泛种植。
由于马铃薯易受到病毒感染，其产量和质量往往受到严重影响。
为了解决这个问题，研究人员开发了马铃薯试管苗快繁技术，能够快速繁殖健康、无病毒的马铃薯苗。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种通过离体培养的方法，利用马铃薯的无菌组织进行繁殖。
从健康的马铃薯植株中取得组织样品，将其表面进行消毒处理，以去除可能带有病毒的污染物。
然后，将组织样品切割成小块，将其置于含有适宜培养基的试管中。
培养基是一种含有营养物质和激素的液体或凝胶介质，能够提供细胞生长所需的营养物质和环境条件。
马铃薯试管苗通常使用的培养基是含有葡萄糖、氨基酸和维生素的MS培养基。
在培养基中，马铃薯组织样品会开始不断分裂和增殖，形成新的细胞。
在试管苗的培养过程中，需要注意控制温度、光照和湿度等环境条件，以促进马铃薯组织的生长和发育。
通常情况下，温度保持在20-25摄氏度，光照强度为3000-5000勒克斯，湿度保持在60-70%左右。
经过一段时间的培养，马铃薯组织样品会形成白色的愈伤组织，然后再通过再生诱导、分化和生根等步骤，最终形成健康的无菌试管苗。
在试管苗生长发育良好后，可以将其转移到土壤中进行实验室外的进一步繁殖。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的优点在于，它能够快速繁殖大量的无病毒马铃薯苗。
相比传统的马铃薯繁殖方法，试管苗技术更加高效和可靠，并且能够避免病毒的传播。
这对于提高马铃薯产量和质量，减少病毒病害的发生具有重要意义。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种重要的马铃薯繁殖方法，能够快速繁殖健康、无病毒的马铃薯苗。
随着这项技术的进一步发展和应用，相信可以为马铃薯产业的发展做出更大的贡献。
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁工作流程
【】李 浚 明． 物 组 织培 养 教 程 【 ４ 植 Ｍ】． 京 ： 中 国农 业 大 学 北
出版 社 ，１ ９ ９ １，２ ．
ＮＡ Ａ， 增 殖 系 数 为 ９—１ 。通 过 组 培 扩 繁 可 以获 得 大量 的 组 ２
０ ４ ０ 河 北 省 邢 台学 院 生 物 ・ 学 系 石 晓 云 ５０１ 化 王僧虎 张雪 辉 唐
培苗壮苗数量 是效益 的保 障。马铃薯 种植逐步走 向规模化 、
标 准 化 、 区域 化 。各 科研 单位 与 企 业 要 摸 索 创 立 出 一 套合 适 的 可规 范化 生产 马铃 薯种 薯 的 工 艺 流程 ，提 高 繁 殖 效 率 ，简
酶联 免疫 吸 附检 测 病 毒 是 根 据 病 毒 颗 粒 能 够 与 它 们 的 特 异 性 抗 体 在 离 体 情 况 下相 互 反 应 ，并 用 酶 检 测 放 大 这 个 反 应 ，最 后 测 得 病 毒 的有 无 。它 是 鉴 定 马 铃 薯 病 毒 的 比较 便捷 的方 法 ，可 以检 测 Ｐ Ｘ、Ｐ Ｙ、Ｐ Ｓ Ｖ 、Ｐ Ｒ 等 常 见 Ｖ Ｖ Ｖ 、Ｐ Ｍ ＬＶ 病 毒 ， 比较 适 合 样 品 数 量 多 时 的 病 毒 检测 。 另 外还 可 以 用指
４周 后 组 培 苗茎 芽 长 高 ，茎 变 粗 、 叶 片 增 大 、 叶 色 浓 绿 ，茎 叶表 面 有 明 显 的 细 毛 。 加 入 ２５ｇｔＰ ． ／ ＶＡ 可 以一 定 程 度 上 防 ． 止 组 培 苗 玻 璃 化 ，增 加 壮 苗 率 。 马铃 薯 是 喜 光 作 物 ，在 培 养 室 内也 要 给 予 其 充 足 的 光 照 条 件 ，光 照 强 度 为 ２０ ０～ ０ ０ ４０ ０ ｌ ｘ的条 件 下 生 长 较 好 。一 般 认 为 组 培 苗健 壮 与 否 也 与 继 代 次 数 有 很 大 的 关 系 ，增 殖 时 间 长 ， 生 长 势 下 降 ， 生 活 力 较 弱 ，
马铃薯脱毒苗的生产流程
马铃薯脱毒苗的生产流程
马铃薯脱毒苗的生产流程如下：
1. 选择优质母本：从健康无病害的马铃薯植株中选取健壮的、无病害的优质品种作为母本。
2. 母本繁殖：将选定的优质母本进行繁殖。
通常采用无性繁殖方法，如块茎切割繁殖或体细胞培养。
3. 初步扩繁：从母本中培育出一批块茎，进行初步扩繁。
块茎可以放在适当的培养基中进行培养，以促进块茎分裂和繁殖。
4. 病原鉴定：对初步扩繁的块茎进行病原鉴定，以排除潜在的病原体。
通常采用生物学检测、分子生物学检测和组织培养等方法来确定是否存在病原体。
5. 脱毒处理：若初步扩繁的块茎存在病原物，则进行脱毒处理。
脱毒处理方法包括化学处理、热处理和组织培养等。
通过这些方法，可以去除病原体并保证块茎的健康。
6. 继续扩繁：经过脱毒处理的块茎进行进一步扩繁，以获得更多的健康块茎。
通常采用组织培养方法进行扩繁，可以通过培养基中的激素等物质来促进植物生长和繁殖。
7. 苗期管理：对扩繁得到的马铃薯脱毒苗进行管理。
包括合理的浇水、施肥、防虫害等，以确保苗期的健康和生长。
8. 苗期检测：对苗期的马铃薯进行定期检测，以确保苗期无病害。
包括病原鉴定、生长状况监测等。
9. 种植移栽：当马铃薯脱毒苗长到一定阶段时，可以进行种植。
将苗期马铃薯移栽到田间地块中进行生长。
10. 收获与销售：经过一段时间的生长后，马铃薯可以正常收获。
收获的马铃薯可以作为种薯继续繁殖，或者作为食品销售。
马铃薯的脱毒培养快繁
马铃薯的脱毒试管苗
再将其转入生长箱中，每天光照16 h， 光照强度3000-4000 lx。2 周后去掉顶芽， 以促进腋芽的生长。当腋芽长到1-2 cm时， 折下腋生枝，用于消毒、接种。
（2）消毒： 水洗干净，无菌条件下先用70%的酒精
浸组织15-20 s，再用2%次氯酸钠溶液浸泡 4-5 min，然后用无菌水冲洗3 次。
2、影响脱毒效果的因素
（1）外植体大小：0.2-0.3 mm，带1-2个原基为好
（2）茎尖所处部位：块茎脐部休眠芽的生长点、 块茎顶部的粗壮芽、植株主茎的生长点
（3）病毒种类及复合感染（脱毒更困难）
PSTV（条纹病毒）、PVS（S病毒）、PVX （X病毒）、PVM（M病毒）、PAMV（丛矮病 毒）、PVY（Y病毒）、PVA（A病毒）、PVRV （卷叶病毒）
茎尖成活）。加入调节物质6-BA 0.5 mg/L， NAA 0.1-1.0 mg/L。 培养条件：温度25±2 ℃，光照16 h/d
当新梢长至2-3 cm时，转至生根培养基 （MS培养基中加入0.3 mg/L的NAA）
（5）病毒鉴定（指示植物法）： 马铃薯的病毒指示植物：苋科的千日红、
藜科的杖藜、茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。 从被检植株上取下叶片，置于等容积的
当小植株4-5 cm时，进行第二步培养。
（2）微型薯诱导： 要求：有一定量的植物生长物质，暗培养 培养基：MS+50-100 mg/L香豆素的液体 或固体培养基
2、微型薯温室多层架盘工厂化生产
➢4-6 层架进行培养，育苗盘规格60 cm×25 cm×4-6 cm，育苗基质为蛭石或马粪。
➢三角瓶繁殖的脱毒苗以单茎节或双茎节扦 插，在人工调控的温度、光照下，经过6090 d即可收获。
马铃薯怎么脱毒马铃薯脱毒方法
防止病毒病的传播和再感染
病毒病传播
马铃薯病毒病是一种常见的病害，它可以 通过蚜虫、机械损伤等途径传播。如果未 使用脱毒马铃薯种薯，病毒病会继续在马 铃薯种植区传播，对马铃薯的生长和发育 造成严重影响。
再感染风险
使用未脱毒的马铃薯种薯可能会导致病毒 病的再感染。由于病毒病的传播途径广泛 ，如果未采取有效的防治措施，病毒病很 容易在马铃薯种植区再次传播，导致马铃 薯的生长和发育受阻。
06
相关案例介绍
案例一：某地区马铃薯脱毒种薯繁育基地建设
目的
提高马铃薯种薯质量，控制病毒病的发生，提高马铃薯 产量和品质。
方法
采用热处理结合茎尖培养的方法进行脱毒处理，将马铃 薯种子置于37℃恒温箱中培养，每隔一周进行一次茎尖 剥离培养，获得无病毒的试管苗。
结果
成功获得了无病毒的试管苗，并建立了完整的马铃薯脱 毒种薯繁育体系。
马铃薯怎么脱毒马铃薯脱毒 方法
2023-11-06
目录
• 马铃薯脱毒概述 • 马铃薯脱毒的方法 • 马铃薯脱毒的流程 • 马铃薯脱毒的效果和影响 • 马铃薯脱毒的未来展望 • 相关案例介绍
01
马铃薯脱毒概述
马铃薯病毒对马铃薯的影响
病毒症状
马铃薯感染病毒后，叶片、花朵和果实上会出现明 显的症状，如花叶、卷叶、坏死和畸形等。
方法
通过细胞生物学、分子 生物学等方法研究马铃 薯病毒病的发病机制和 传播途径，同时开展脱 毒技术的研发和应用。
结果
成功研发出多种马铃薯 脱毒技术，包括热处理 、茎尖培养、抗病毒基 因工程等，并广泛应用 于生产实践。
感谢您的观看
TH种子的某些基因进行敲除或改造，使其无法支持病毒
复制，然后进行无菌种植。
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浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方马铃薯：(Solanumtuberosum)为茄科茄属作物．是全球重要的粮菜兼用作物。
马铃薯具有生长期短、产量高、适应性强、营养丰富、耐储运的特点，因此深受生产和消费者的喜爱。
但在马铃薯生产中普遍存在种性退化的问题，而病毒侵染是马铃薯退化的根源。
由于马铃薯是无性繁殖作物，所以病毒侵染后会世代相传，危害逐年加重。
目前，世界上公认的解决马铃薯病毒危害，防止品种退化的有效途径是茎尖离体培养。
通过茎尖离体培养培育脱毒基础苗，再通过建立合理的良种繁育体系生产优良种薯是马铃薯高产、稳产、优质的可靠保证。
一脱毒种薯繁育工艺流程
马铃薯脱毒种薯繁育工艺流程如图所示。
二脱毒技术
2.1 脱毒方法
2.1.1 外植体选择及处理
外植体的选择途径一般有3条：①在生长季节从田间挖取植株种植在无菌的盆土中，温室内栽培，取其新长成枝条的芽；②从田间切取枝条，插入营养液中生长，取新抽生枝条上的芽；③块茎在室内发芽，芽经热处理(38℃)2周后再取芽。
另外，定期给植株喷施内吸杀菌剂，如0.1％多菌灵和0.1％链霉素的混合液，可以有效提高灭菌效果。
经过上述处理之后，要比直接取自田间枝条污染少得多。
再加上茎尖分生组织又被彼此重叠的叶原基保护．只要仔细剥取，无须再进行消毒，就能得到无菌的外植体。
但为保险起见，在切取外植体之前，可以先进行简单的表面消毒，一般在5％次氯酸钠中处理8～10min即可。
虽然顶芽和腋芽都能作为外植体，但顶芽的茎尖生长要比腋芽的快，成活率也高，所以一般取顶芽作为外植体。
2.1.2 剥离茎尖和接种
在超净台上的解剖镜(8～40倍)下进行茎尖剥离。
解剖时必须注意使茎尖暴露的时间越短越好．以免超净台的气流风干茎尖。
在材料下垫上一块湿润的无菌滤纸也可达到保持茎尖新鲜的目的。
在解剖镜下用解剖针将叶片和叶原基剥掉，直到露出圆亮的茎尖生长点。
将带有l～2个叶原基的茎尖切下．接种到培养基上。
要注意防止交叉污染，尤其是当芽未曾进行过表面灭菌时更要谨慎。
2.1.3 培养
对马铃薯茎尖培养来说，MS和white基本培养基都是较好的培养基，而且附加少量(0.1～0.5 mg／L)的NAA或BA或二者都加，培养效果更好。
只有生长点的
极小茎尖的培养最好采用液体培养，多放在滤纸桥上培养。
茎尖培养初期的最适光照强度为1000lx，4周后增加到2000 lx，6周后增加到4000lx。
培养温度21～25℃，光照时间以16h／d为宜。
1个月左右茎尖再生成有可见小叶的小植株，保存部分原苗，准备扩繁用；另一部分用于病毒检测。
茎尖培养时需要注意以下3个问题：①茎尖接种后基部无明显膨大，茎尖变绿，成绿色小点，这是激素浓度或温度偏低造成的；②接种后茎尖明显膨大，3～5d可见淡绿色愈伤组织，这是由于激素浓度或温度偏高，光照偏弱造成的。
③培养基添加0.8 mg／L的GA有利于茎尖的成活和促长，但不要浓度过高或作用时间过长，否则会使茎尖不易转绿，导致叶原基迅速伸长，生长点并不生长，整个茎尖变褐而死。
2.2 脱毒效果检测
马铃薯经过茎尖培养脱毒后，只有部分植株是脱病毒植株。
因此，在用作脱病毒原种苗之前，必须进行病毒检测证明无病毒后才能推广。
在繁殖中还要不断重复检测，以防重新感染。
常用的病毒鉴定方法有指示植物测定法、血清学方法和电
子显微镜法。
三脱毒苗快繁技术
3.1 继代培殖与生根培养
将经鉴定无毒的马铃薯脱毒苗，采用固体与液体培养基相结合的方法进行继代增殖培养效果好。
取试管苗单节切段扦插在MS固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右便可发育成5～10cm高的小植株，然后进行切段繁殖。
此法速度快，每月可繁殖5～8倍。
如果多茎节的试管苗接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养，则比固体培养基生根快，长得粗壮。
便于栽植，同时省去大量琼脂，降低了生产成本，同时提高了试管苗成活率。
培养基可选用MS培养基，其中的烟酸、肌醇都可以减去，琼脂浓度也可降低。
在25～28℃、光照强度3000~4000lx、连续光照的条件下，切段繁殖速度很快，一般每月能增加7～8倍。
另外，也可将1～2cm高的苗转人MS、IAA 0.1～0.5 mg／L，活性炭0.1～0.2g ／L的生根培养基中培养，7～10d生根。
3.2 驯化移栽
为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进行光、温锻炼。
具体方法是：移植前7d左右，将长有3～5片叶、高2～3cm的试管苗瓶摆放在温室内的驯化畦内，畦内浇上水，畦上方半遮阳进行驯化，以防止强光、高温灼伤试管苗和维持试管苗周围的温度。
移至温室的试管苗，尽管仍处于封口的瓶内，但由于封口膜透气性好，瓶内的湿度下降，使试管苗的茎叶变硬，加上光照增强，茎秆变粗，叶片肥厚浓绿，有效地抑制了徒长和真菌的侵染，从而提高了试管苗的抗逆性和对环境条件变化的适应能力，提高了移栽成活率。
炼苗期温室内的温度一般要求白天23～27℃，夜间不低于10℃。
移栽方法采用单芽茎段或双芽茎段扦插式移栽。
边剪取边扦插。
扦插基质可采用灭过菌的珍珠岩或疏松土壤。
扦插成活后每隔2~3d喷1次营养液（表4-5），后期每隔10d喷一次，以促进扦插苗健壮和顺利结薯。
四微型薯生产技术
由试管苗生产的重l～30g的微小马铃薯称为微型薯。
虽然温室或实验室内都可以诱导产生微型薯，但以实验室内诱导生产为主，为马铃薯的种质保存、交换以及脱毒种薯的繁育和运输提供了一种便利的途径，也便于马铃薯种薯的大面积推广。
4.1 实验室生产微型薯
组织培养生产微型薯要求条件较严格，费用较高，但产品的质量好，整齐度高，粒重一般只有1～5g，由于是在三角瓶中或试管中培养，因此可作为不带病原菌的原种使用，或作为基础研究材料和病原鉴定的实验材料。
实验室微型薯生产(图
4—12)一般分单茎段扩大繁殖和微型薯诱导两个阶段。
4.1.1 单茎节扩大繁殖
从试管苗中获得茎切段，每个切段上带有1～2个叶片和腋芽。
每个三角瓶中接4～5个茎段进行培养。
培养条件是温度22℃、光照16h／d、光照强度1000lx。
所采用培养基：①节段培养基，MS、3％蔗糖、0.8％琼脂；②液体振荡培养基，MS、2％蔗糖；③微型种薯诱导培养基，MS、香豆素50～100 rag／L；④离体保存培养基，MS、3％蔗糖、4％甘露醇、0.8％琼脂。
在此条件下，由腋芽形成的小植株生长很快，当小植株长到4～5 cm时，就可以进行第二步培养。
4.1.2 微型薯诱导
微型薯要求有一定量的激素，并且要在黑暗条件下培养。
采用廉价的香豆素代替CCC和BAP，用食用白糖代替蔗糖，同样结薯很好。
采用MS、香豆素50～100 mg／L的液体或固体培养基。
培养基的液固状态和光照条件对微型薯诱导有很大作用。
与单茎节扩大繁殖不同，微型薯的诱导必须在黑暗条件下进行，否则只
有植株生长，而没有小薯形成。
培养温度22℃。
4.2 温室生产微型薯
一般采用脱毒苗切繁方法进行。
为了节约土地，充分利用空间，有人专门设计了温室多层架盘工厂化生产微型薯的方法。
具体方法是：在温室4～6层育苗架上放育苗盘，基质可以是蛭石、珍珠岩等。
将脱毒试管苗以单茎段或双芽芽茎段扦插，然后在人工调控的温光条件下经60～90d即可收获微型薯。
扦插时用GA3mg ／L、NAA5mg／I。
的混合液浸泡茎段，扦插成活率达98％。
五原种种薯和生产种薯生产技术
在实验室或温室生产的微型薯(原原种)，可进一步通过大田或塑料大棚在春秋两季扩大繁殖，生产原种种薯。
利用原种种薯切块播种，生产出生产种薯，用于马铃薯栽培用种。
原种和生产种的种薯生产要求在保护地设施内进行，以下介绍原
种生产技术。
选3～4年未种过马铃薯的土地，精细整地后搭棚。
拱棚可采用30m×50m或25m×8m的规格或直接在温室内生产。
播种前浇水，施有机肥4000～5000 kg ／亩，并用过磷酸钙20～25kg或硫酸钾15～20kg／亩的一半作基肥，另一半留在马铃薯现蕾期结合培土施用。
微型薯原原种在播种前须用湿沙埋住，在室内散射光下催芽。
由于休眠的影响，必须等芽萌动后才能播种，这是保全苗的关键。
微型薯大小不一致时分级播种。
原种生产要求高密度播种(行株距：50cm×10cm 或60cm×10cm)，要求单株结薯多，以5～10g的单薯重为宜。
春季防治早疫病，秋季防治晚疫病，在温室或拱棚内扣防虫网室，防止蚜虫传播病毒。
在整个生长期要注意拔除杂草和菌株。
预防病害传播，以提高种薯纯度和质量。
秋季播种时要对晚熟品种进行打破休眠处理(早熟品种可自行通过休眠)。
具体方法是在播前10～15d进行切块，晾干后喷10～50mg／L的GA溶液，并用湿麻袋或塑料薄膜保湿，以打破休眠。
另外，温室生产种薯要注意早收。
采收后及时晾晒，
待表皮干燥后再进行窖藏。
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