生物制药知识点总结(HPU)

生物制药知识点总结(HPU)

1、生物技术药物：采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物。

2、干扰素：人体细胞分泌的一种具有广泛抗病毒，抗肿瘤和免疫调节活性的活性蛋白质。

3、高密度发酵：是应用一定的培养技术和设备来提高菌体生物量和目标产物时空产率的发酵技术。是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200gDCW/L、

4、植物细胞全能性：指植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。

5、细胞分化：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程。

6、脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下恢复细胞分裂能力,失去原有分化状态的过程。

7、继代培养：由最初的外植体上切下的新增殖的组织，培养一段时间而称之为第一代培养。连续多代培养即为继代培养。

8、固定化酶：是指经过物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。

9、抗体酶：具催化能力的免疫球蛋白，具有典型的酶反应特性。

10、发酵工程：利用微生物制造工业原料与工业产品提供服务的技术。简答题

1、生物技术制药的特征：1）高技术2）高投入3）长周期4）高风险5）高收益

2、利用基因工程技术生产药品的优点：1）利用基因工程技术可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用建立有效的保障2）可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围3）利用基因工程可以发掘更多内源性生理活性物质4）内源性活性物质在作为药物使用时，存在不足之处，可以通过基因工程和蛋白质工程对其改造5）利用基因工程技术可获得新型化合物，扩大药物筛选来源

3、利用基因工程生产药物的基本过程：①目的基因的克隆，②构造DNA重组体，③构造工程菌，④目的基因的表达，⑤外源基因表达产物的分离纯化产品的检验

4、反转录法获得目的基因的过程：1）mRNA纯化2）cDNA第一链的合成3）cDNA第二链的合成4）cDNA克隆5）将重组体导入宿主细胞6）cDNA文库的鉴定7)目的cDNA克隆的分离与鉴定

5、影响基因工程菌的因素，如何控制：1）培养基：需要对基质中营养物质的配比进行优化，以满足细菌大量繁殖和外源蛋白表达的需要。2）接种量：影响发酵产量和周期。3）溶解氧：菌体扩增及外源基因的表达都需要大量氧进行呼吸作用供能。4）

pH：影响细胞的生长和基因产物的表达。5）温度：影响酶的反应速度，改变菌体代谢产物的反应方向，影响代谢调控机制。6）诱导时机：一般在对数生长后期升温诱导表达。7）代谢副产物：会抑制菌体的生长和蛋白的表达。

6、基因工程菌分离纯化的色谱分离法：方法有离子交换色谱、疏水色谱、反相色谱、亲和色谱、凝胶过滤色谱及高压液相色谱。（1）离子交换色谱IEC：是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。（2）疏水层析HIC：是利用蛋白质表面的疏水区与固定相上疏水性基团相互作用力的差异，对蛋白质组进行分离的层析方法。（3）亲和层析AC：是利用固定化配体与目的蛋白质之间的非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的，又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除。凝胶过滤层析：以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相层析方法。

7、提高质粒稳定性的办法：1）选择合适的宿主菌2）选择合适的载体3）选择压力如抗生素4）分阶段控制培养5）控制培养条件6）固定化

8、动物细胞生理特点:1）细胞的分裂周期长2）细胞生长需贴附于基质，并有接触抑制现象接触抑制又称为密度抑制是指当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片时，即每个细胞与其周围的细胞相互接触时，细胞就停止增殖。此时或能保持充足的营

养，细胞仍可存活一段时间，但细胞密度不再增加。3）正常二倍体细胞的生长寿命是有限的4）动物细胞对周围环境分敏感5）动物细胞对培养基的要求高6）动物细胞对蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同

9、基因工程细胞构建筛选过程：1）真核细胞基因表达载体的构建2）基因载体的导入和高效表达工程细胞株的筛选

10、动物细胞大规模培养方法1）悬浮培养2）贴壁培养3）贴壁-悬浮培养（假悬浮培养）：微载体培养，包埋和微囊培养，结团培养

11、半连续式操作：又称为重复分批式操作或换液操作。采用机械搅拌式生物反应器系统，悬浮培养形式。在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间，从中取出部分培养物，再用新的培养液补足到原有体积，使反应器内的总体积不变。灌流式操作：一种常见的悬浮培养方式，将细胞接种于一定体积的培养基后，为了防止衰退期的出现，在细胞达最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基。与此同时，含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出，以保持培养体积的恒定。

12、动物细胞生物反应器具备要求：1）制作生物反应器的一切材料，对细胞无毒；2)结构具备良好传质，传热和混合的性能；3)密封性能好；4）对培养环境中各种物理化学参数能自动检测和精确调节控制，并且保持环境质量的均一；5)可长期连续运

转；6）容器内面光滑，无死角；7）拆装，连接和清洁方便，耐高温蒸汽消毒，便于操作维修；8）设备成本低廉。

13、列举常用的动物细胞生物反应器：（1）搅拌罐式生物反应器：主要用于是悬浮细胞培养，微载体培养，微囊和巨载体培养以及结团培养（2）气升式生物反应器：气体通过装在罐底的喷管进入反应器的导流管，致使该部液体的密度小于导流管外部的液体形成循环流。（3）中空纤维式生物反应器：占地空间小，产品产量、质量高，生产成本低，不能重复使用，不能耐高压蒸汽灭菌，需用环氧乙烷或其它消毒剂灭菌，难以取样检测。（4）透析袋或膜式生物反应器：可使细胞达到高密度，又可随意组合进行操作，对产品进行浓缩纯化。固定床或流化床生物反应器：结构简单，装填材料易得。

14、植物细胞大规模培养的方法和特点:（1）成批培养法：将培养基一次性地加入反应器中，接种，培养一定时间后收获细胞的操作方式。特点：操作强度低，设备简单，容易发生污染，通气受限制。（2）半连续培养法：在反应器中投料和接种培养一段时间后，将部分培养液和新鲜培养液进行交换的培养方法。（3）连续培养法：是利用连续培养反应器，在投料和接种培养一段时间后，以一定速度采集细胞和培养液，并以同样速度供给诶新鲜培养基以使细胞生长环境长期恒定的方法。（4）固定化培养法：将细胞固定于尼龙网套内，或固定于中空纤维有网状多孔板，尼龙套和中空纤维膜上，放入培养液中进行培养，或连续流