防腐剂与人工甜味剂的测定方法

防腐剂与人工甜味剂的测定方法

作者：张玉梅

来源：《食品界》2018年第08期

薄层层析法

TLC具有简单方便、成本低廉的优点。TLC法分离样品后，需要再以呈色剂及或紫外光照射检视定位作初步鉴定，但因需样品消耗量大，且无法直接与光谱法连接检测，结果仅能定性，难以达到快速定量目的，为其缺点。可利用TLC法定性检测果汁中的糖精、醋磺内酯钾和甜精。随着固相材料及光学侦测技术发达，已可达成定量样品目标。预先对样品以C18管柱进行固相萃取，接着以C18薄层片分离的TLC法进行饮料中己二烯酸、苯甲酸定量，其结果回收率达101%，变异系数1.8%。以TLC法定量分析饮料中对羟苯甲酸、甲酯、乙酯、丙酯、丁酯防腐剂的含量，选用含荧光剂F254的C18薄层片分离，并于波长260nm进行光密度扫描，检测结果变异系数5.1～8.3%。由上述研究结果可知，受限于TLC法分辨率，无法同步分析多类型防腐剂及人工甜味剂。

分光光度法

分光光度法分析防腐剂容易有干扰，早期是使用二次反应产物的间接测定法。早期建立以蒸气蒸馏萃取酸化食品样品中己二烯酸后，加入铬酸钾与硫酸混合溶液氧化己二烯酸生成丙二醛，再与硫巴比妥酸作用形成红色物质，并于波长530nm进行分光光度的定量。防腐剂也有相同干扰情况，以分光光度法尝试直接检测糖精及糖精钠含量，但发现若是样品中苯甲酸存在时，因糖精及糖精钠的最大吸收波峰229nm及235nm波峰和苯甲酸的吸收波长225nm重迭，使亮度吸收受到干扰，无法准确定性、定量。采用直接分光光度测定防腐剂，样品经蒸气蒸馏萃取后，以分析化合物最大吸收波长测定吸亮度，但若是样品中同时含有苯甲酸、己二烯酸、去水醋酸，由于己二烯酸的吸收波峰和苯甲酸、去水醋酸吸收波峰有部分重迭，将影响定量结果。

气相色谱法

气相色谱法具有分离效率佳及灵敏度高的优点，但分析物必须对热稳定且具挥发性，才能适用。受限管柱材料，GC法检测食品中的防腐剂或人工甜味剂甜精，需要个别进行；为避免管柱损伤，样品通常需要进行复杂的净化前处理。近年出现新的高效能萃取技术，如先以顶空固相微萃取饮料中己二烯酸及苯甲酸，再以GC分析，结果回收81.2～108.1%，变异系数

7.5%以下，此法显著降低样品需求量，以及有效减少有机溶剂使用。固相萃取法吸附-热脱附的TD- GC法，可以检测食品中苯甲酸、己二烯酸、对羟苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯等五种防腐剂。

毛细管电泳法

CE是近年来发展迅速的分离技术，具有众多的分离模式，不需更换管柱适应不同类型样品，且样品用量极少，分辨率极高以及直接管柱开口行在线光学侦测等特点。CE分离原理为高压电场作用下，带电物质在极细毛细管（10～

m）内电解液中因泳动差异性，加上毛细管内产生的电渗流冲提作用，可同时快速侦测正、负电荷及中性物质。CE法分离防腐剂及人工甜味剂必须要考虑二者的性质不同，以选择适合的缓冲溶液、pH值、电场强度、离子强度等条件，并避免样品基质干扰。CE法的主要缺点是，操作技术需求高，基线稳定及分析物迁移时间再现性较差，再者，因毛细管内径极小，当使用普遍性光学侦测时，因光径过短导致灵敏度不佳。

高效液相色谱法

HPLC法具有高选择性，可用于分析热不稳定与挥发性低的化合物，分析效果好，易操作，可适用于大部分的化合物分析，成为广泛应用的分析方法。许多学者提出以HPLC法分析食品中的防腐剂和人工甜味剂等添加物采用甲醇-醋酸（35：36，v/v）缓冲溶液（pH4.4）并以梯度进行冲提，利用C18管柱，在波长254nm下，历经25分钟可同时分析苯甲酸、己二烯酸、对羟苯甲酸甲酯、丙酯。针对饮料及特殊营养食品，分析其人工甜味剂，透过不同比例乙腈（15%、20%、25%）和磷酸盐缓冲液为移动相组合，探讨分析物最佳的分辨率，结果得知糖精、醋磺内酯钾和阿斯巴甜，在15%乙腈（v/v）和磷酸盐缓冲液移动相下分辨率最佳。使用C18管柱，以乙腈和0.1M磷酸盐缓冲液等度冲提，探讨低热量饮料及果汁饮料中人工甜味剂含量，于210nm下检测糖精、阿斯巴甜，235nm下检测醋磺内酯钾。HPLC多重检验方法，分析金枣制品中的防腐剂及人工甜味剂，在波长280nm下，利用乙睛和5mM柠檬酸缓冲溶液梯度冲提，于50分钟内同时测得10种添加物（糖精、甘精、苯甲酸、己二烯酸、水杨酸、去水醋酸、对羟苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯）。

综合前述，食品添加物使用液相色谱（LC）、气相色谱（GC）、薄层层析（TLC）等方法分析，因食品种类繁多、成分复杂，容易遭受基质的干扰，造成定性定量的困扰。另一方面，对不具光学吸收分析物，就必须衍生化处理，或以其他检出器替换普遍性应用的UV/ VIS 检测器。