还原糖含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
还原糖含量的测定
05
结果分析与解读
数据处理与图表绘制
数据处理
对实验数据进行整理、筛选和计算， 确保数据的准确性和可靠性。
图表绘制
根据处理后的数据，绘制图表以直观 地展示实验结果，如柱状图、折线图 等。
结果解读与误差分析
结果解读
根据实验结果，分析还原糖含量的变化趋势和规律，判断实 验是否符合预期。
误差分析
对实验结果进行误差分析，找出误差来源，如操作误差、仪 器误差等，以提高实验的准确性和可靠性。
部分多糖
多糖是由多个单糖通过脱 水缩合形成的，部分多糖 也具有还原性，如淀粉、 纤维素等。
还原糖与非还原糖的区别
还原性
还原糖具有还原性，能够还原斐林试 剂或班氏试剂；非还原糖则没有还原 性，不能还原斐林试剂或班氏试剂。
结构
性质
还原糖通常具有较高的反应活性，而 非还原糖则较低。
还原糖通常含有醛基或酮基，而非还 原糖则没有这些基团。
02
还原糖基础知识
定义与性质
定义
还原糖是指具有还原性的糖类，能够 还原斐林试剂或班氏试剂的糖。
性质
还原糖具有醛基或酮基，因此具有还 原性，可与斐林试剂或班氏试剂发生 氧化还原反应。
还原糖的种类
01
02
03
单糖
单糖是最简单的糖类，也 是最具还原性的糖，如葡 萄糖、果糖等。
双糖
双糖是由两个单糖通过脱 水缩合形成的，如麦芽糖、 乳糖等。
色谱法
总结词
色谱法是一种分离和测定复杂混合物中各组 分含量的方法。在测定还原糖含量时，通常 使用高效液相色谱法，将样品中的还原糖与 其他组分分离，通过检测器检测各组分的含 量，从而计算出还原糖的含量。
详细描述
糖含量测定_实验报告
一、实验目的1. 了解糖含量测定的原理和方法；2. 掌握DNS比色法测定还原糖及总糖含量的实验操作；3. 学习使用可见分光光度计进行比色分析；4. 了解不同样品中糖含量的变化规律。
二、实验原理1. DNS比色法测定还原糖含量：还原糖在碱性条件下与3,5-二硝基水杨酸（DNS）反应，生成橙红色的氨基化合物。
在一定浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系。
通过测定光吸收值，可以计算出样品中还原糖的含量。
2. 总糖含量测定：总糖含量可以通过测定还原糖含量来推算。
由于总糖中还原糖的比例相对稳定，因此可以通过测定还原糖含量来估算总糖含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 样品：葡萄糖、果糖、蔗糖等；- DNS试剂；- 氢氧化钠溶液；- 丙三醇；- 标准葡萄糖溶液；- 蒸馏水。
2. 实验仪器：- 可见分光光度计；- 电子天平；- 移液器；- 烧杯；- 试管；- 500mL容量瓶；- 恒温水浴锅；- 离心机。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：（1）取5个50mL容量瓶，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0mL标准葡萄糖溶液，加入蒸馏水定容至刻度；（2）向各容量瓶中加入2.0mL DNS试剂和2.0mL氢氧化钠溶液，混匀；（3）将溶液置于恒温水浴锅中，加热5分钟；（4）取出溶液，冷却至室温；（5）使用可见分光光度计在540nm波长处测定各溶液的光吸收值；（6）以葡萄糖浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：（1）取5个50mL容量瓶，分别加入5.0mL样品溶液，加入蒸馏水定容至刻度；（2）向各容量瓶中加入2.0mL DNS试剂和2.0mL氢氧化钠溶液，混匀；（3）将溶液置于恒温水浴锅中，加热5分钟；（4）取出溶液，冷却至室温；（5）使用可见分光光度计在540nm波长处测定各溶液的光吸收值；（6）根据标准曲线，计算样品中还原糖的含量；（7）根据还原糖含量与总糖含量的比例关系，推算样品中总糖含量。
还原糖浓度测定实验报告
还原糖浓度测定实验报告糖浓度测定实验是一种常见的化学分析方法，常用于食品、制药等行业中对糖类物质进行浓度检测。
本实验旨在通过比色法来测定某种糖溶液的浓度，并利用标准曲线来计算未知样品的糖浓度。
实验所需材料包括：0.5％蔗糖溶液、1.0％蔗糖溶液、1.5％蔗糖溶液、2.0％蔗糖溶液、2.5％蔗糖溶液、浆果酮试剂、水浴、比色皿、分光光度计等。
首先，按照比例将蔗糖溶液稀释成不同浓度的溶液，制备一系列标准溶液。
本实验中采用0.5％、1.0％、1.5％、2.0％和2.5％的蔗糖溶液作为标准溶液。
每个标准溶液都可以测量多次以提高精确度。
接下来，准备浆果酮试剂，将其溶解在适量的乙醇中。
然后，取一定量的标准溶液，加入比色皿中，并加入适量的浆果酮试剂，使试剂与溶液充分反应。
注意保持比色皿内的溶液体积相同。
然后将比色皿放入水浴中，用适当的温度保持一段时间，使反应充分进行。
最后，取出比色皿，将其放置在分光光度计中，测量吸光度值。
然后，根据各标准溶液的吸光度值和已知浓度，绘制标准曲线。
选择合适的测量波长，在分光光度计中设置并记录波长。
使用波长来测量未知样品的吸光度值。
最后，通过读取标准曲线，可以将未知样品的吸光度值转换为对应的糖浓度。
根据实验得到的吸光度值，找到对应的糖浓度，从而得到未知样品中糖的浓度。
糖浓度测定实验的精确度和准确度取决于实验操作的规范性和仪器的准确性。
操作时需要注意保持试剂的纯净度和标准溶液的稳定性，避免外部因素对实验结果的干扰。
在实验报告中，应包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果分析和结论等内容。
实验结果应当和标准曲线进行比较，并给出未知样品的浓度值。
总之，糖浓度测定实验是一种常用的化学分析方法，通过比色法来测定糖溶液的浓度，利用标准曲线来计算未知样品的糖浓度。
实验操作要规范，结果要准确，并在实验报告中详细描述实验过程、结果和结论。
还原糖含量的测定
2、测定样品中还原糖和总糖含量。 （1）提取样品中的还原糖： 立即用流动冷水冷却至室温 乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
立即用流动冷水冷却至室温
以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。 通过本次实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，学习比色定糖法的基本操作，熟悉分光光度计的使用方法。
准确称取0.1g食用面粉放置于100ml三角 然后以葡萄糖浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制出标准曲线。
准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶中，加少量蒸馏水调成糊状，再加入50ml蒸馏水，摇匀，置于50℃水浴条件下20分钟，使还 原糖浸出；
瓶中，加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（
还原糖
总糖
2.0
1.0
0
1.0
1.5
1.5
同时一起在沸水浴中加热5min*
冷却
立即用流动冷水冷却至室温
蒸馏水(ml)
21.5
21.5
吸光值(A540)
结果处理
以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线 上查出相应的还原糖毫克数。按下列公式 计算出样品中还原糖和总糖的百分含量：
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（
可 适 当 延 长 沸 水 浴 时 间 ； 若 不 显 蓝 色 ， 则 还原糖以葡萄糖含量计）。
立即用流动冷水冷却至室温
待水解液冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，用6mol/L NaOH中和至微红色，在4000rpm、5分钟条件下离心，得到的上清液转移到
血糖含量试剂盒说明书
货号：QS2600 规格：50管/48样血糖含量试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：哺乳动物血液中的葡萄糖称为血糖，是其体内糖的主要运输形式。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，调节失衡时出现高血糖和低血糖。
糖尿病、颅内压增加和脱水症等均可引起高血糖；饭后，精神紧张也可出现生理性高血糖。
相反，胰岛β细胞增生或肿癌等，垂体、肾上腺皮质和甲状腺功能减退，以及严重肝病患者均可出现低血糖症状。
此外，饥饿和剧烈运动可引起暂时的低血糖。
测定原理：葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：0.5mmol/L葡萄糖溶液10mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体 25ml×1瓶，4℃保存；试剂三：液体 25ml×1瓶，4℃避光保存；测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。
2、混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合，用多少配多少。
吸光值分别记为A1、A2和A3。
空白管和标准管只要做一管。
血糖含量计算：血糖含量（μmol/mL）= C标准×(A3-A1)÷(A2-A1)=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)C标准：标准管浓度，0.5µmol/mL。
注意：1、最低检测限为1nmol/mL。
2、若样本中存在葡萄糖氧化酶抑制剂，则会造成测定结果偏低，建议改用HPLC法测定。
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糖原含量检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4110
糖原含量检测试剂盒说明书可见分光光度法：UPLC-MS-4110：50T/48S试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1支2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存溶液的配制：1.试剂一：10mg葡萄糖。
用前加1mL蒸馏水充分溶解，2-8℃保存两周。
2.工作液的配制：临用前取1瓶试剂二倒入5.5mL蒸馏水，缓慢倒入22mL浓硫酸，充分溶解混匀后使用。
用不完的的试剂2-8℃保存一周。
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖，是糖的主要的储存形式之一，主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量，分别称为肝糖原和肌糖原。
肝糖原可调节血糖浓度，当血糖升高时可在肝脏合成糖原，血糖降低时，肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。
因此，肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。
肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时，肌糖原不能直接分解成血糖，必须先分解产生乳酸，随血液循环到肝脏，通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理：蒽酮法。
利用强碱性提取液提取糖原，在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
Glycogen+H2SO4+Anthrone Furfural Derivatives（620nm）最低检出限：0.0016mg/mL线性范围：0.003125-0.1mg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计、水浴锅、离心机，可调式移液器、1mL玻璃比色皿、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1﹑细胞或细菌：收集500~1000万细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；加入0.75mL提取液超声波破碎细菌或细胞（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；转移至10mL试管中，置于沸水浴中煮沸20min（盖紧，防止水分散失），隔5min振摇试管1次，使充分混匀；取出试管冷却后，用蒸馏水定容到5mL，混匀，8000g25℃离心10min，取上清待测。
植物组织中还原糖含量的测定
植物组织中还原糖含量的测定应用化学1101 A20110001程志永植物组织中还原糖含量的测定程志永（东北农业大学理学院应用化学系，哈尔滨，150000）摘要：本实验以葡萄糖为标准，以3,5- 二硝基水杨酸(DNS)作显色剂，用分光光度法测定黄瓜中还原糖的含量。
在碱性条件下，3，5–二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的3–氨基–5–硝基水杨酸，该物质在540nm波长处有最大吸收。
在一定浓度范围内，还原糖的量与棕红色物质的光吸收值成正比例关系，利用比色法可定量测定样品中的含糖量。
关键词：还原糖；分光光度法；3,5-二硝基水杨酸中图分类号：Q5-33文献标志码：A引言DNS 比色法的原理是：3,5-二硝基水杨酸在碱性溶液中被还原糖还原成氨基化合物，在沸水浴中显色时间5min，波长在540nm下有最大吸收峰。
试验过程中的诸多因素如吸收光谱、显色剂用量、显色时间等均对测定结果的准确性有直接影响。
因此，我们对用3,5-二硝基水杨酸比色法测定马铃薯块茎还原糖含量的反应条件进行了一系列的试验，试图摸索最佳的试验条件以保证试验的精确度，以期获得可靠的数据为黄瓜品质育种的实践提供参考。
1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 供试药剂3,5-二硝基水杨酸；蒸馏水；葡萄糖溶液。
1.1.2 供试植物材料黄瓜0.96g1.2 实验方法1.2.1 葡萄糖标准曲线的制作称取0.0502g葡萄糖，定容至500ml；吸取葡萄糖标准液0、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80mL，分别置于10mL试管中，编号1、2、3、4、5、6，各加蒸馏水使体积为1.0mL，再加苯酚试液0.51mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸2.5 mL，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热约15min，取出后冷却至室温。
以一号试管为对照组。
用721分光光度计，1cm比色皿，在490nm 处测定吸光度，绘制葡萄糖浓度-吸光度工作曲线。
1.2.2 样品中还原糖含量的测定1.2.2.1还原糖的提取准确称取样品0.5g，用少量蒸馏水研磨成匀浆，然后加入蒸馏水定容至50mL，摇匀，置于50℃恒温水浴中保温10min，使还原糖浸出，移入离心管，4000r/min下离心10min，取上清液。
分光光度计测还原糖含量-中国农大生化实验实验报告
将数据代入公式，得
（1）还原糖含量=【0.0531*15*100/(1*1000)】*100%=7.96%
（2）还原糖含量=【0.0525*15*100/(1*1000）】*100%=7.88%
（3）平均值=（7.96%+7.88%）=7.92%
4．为什么还原糖与3,5-二硝基水杨酸溶液要先反应后稀释？
因为稀释前还原糖浓度较高，并且3,5-二硝基水杨酸溶液过量，这样可以使得还原糖充分反应，如果先稀释则还原糖浓度较低，反应时间加长，速率较慢。
5．结合实际应用，你认为本实验设计有什么不合理之处？
实验中，容量瓶的使用。
参考文献：揭念芹《基础化学》2000年9月第一版2008年7月第八次印刷
结果分析：
所得两组数据的吸光度值不相同，以至于所得浓度也不相同，其中可能存在的原因是使用具塞刻度试管稀释时存在终点标定误差。然而两组数据取平均值，使误差减小在允许范围内。
思考题：
1．比色测定法的原理及特点是什么？
原理：光吸收定律即朗伯-比尔定律，由于物质对光有选择吸收的作用且在一定浓度范围内，物质在某波长下的光吸收与其浓度成正比，所以利用标准溶液求得标准光吸收曲线，再根据所得吸光度值在标准曲线中寻找相对应的点即可知道未知溶液的浓度。光吸收简便，快速，灵敏度高，准确度较高，应用广泛。
2．植物样品中还原糖的提取
将植物样品—苹果称取1g放入研钵中，加入少量石英砂，磨成匀浆，转移到100毫升容量瓶中，用蒸馏水少量多次地清洗研钵，再将洗液转移到容量瓶中，至70-80ml，摇匀，置于80度恒温水浴中浸提半小时，其间摇匀数次，是还原糖浸出。
3．还原糖含量的测定
分光光度计测还原糖含量实验报告
分光光度计测还原糖含量实验报告
实验目的：
测定样品中还原糖的含量，通过分光光度计的测量结果，分析样品的质量和纯度。
实验步骤：
1. 准备工作：将所需实验器材和试剂准备齐全，包括分光光度计、试剂瓶、样品瓶等。
2. 样品处理：将待测样品加入适量的蒸馏水中，并进行适当的稀释。
确保样品浓度在分光光度计的测量范围内。
3. 标准曲线制备：选取不同浓度的还原糖标准溶液，分别加入试管中。
使用分光光度计测定每个标准溶液的吸光度，并记录数据。
4. 测量样品：使用分光光度计测量样品溶液的吸光度，并记录数据。
5. 计算还原糖含量：根据标准曲线的吸光度和浓度关系，计算样品中还原糖的含量。
实验结果：
根据所测得的还原糖标准溶液和样品溶液的吸光度数据，绘制标准曲线。
通过标准曲线，计算出样品中还原糖的含量。
结果显示样品中的还原糖含量为X g/L。
根据实验要求，可以对样品的质量和纯度进行评估。
实验讨论：
在实验过程中，需要注意保持实验环境的稳定和准确。
避免外界
因素对实验结果的影响，如光线、温度等。
此外，还需注意样品的处理和稀释过程中的准确性和精确性，以确保实验结果的可靠性。
实验结论：
通过分光光度计测量还原糖含量的实验，可以得出样品中还原糖的含量。
该实验方法简单快捷，结果准确可靠，可用于样品质量和纯度的评估。
然而，仍需注意实验过程中的误差来源和控制，以获得更准确的结果。
《还原糖的测定方法国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。
本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。
二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀，通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
三、试剂和材料斐林试剂：甲液（称取14.3g硫酸铜（CuSO4·5H2O）和0.05g次甲基蓝（C13H16N3OClS）溶于水中，定容至100ml）、乙液（称取173g酒石酸钾钠（C4H4O6NaK·4H2O）和50g氢氧化钠溶于水中，定容至500ml）。
使用时将甲液、乙液等体积混合。
四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶（能调节温度）4.容量瓶（100ml）5.移液管（10ml）6.比色管（10ml）7.试管（25ml）8.三角瓶（250ml）9.定时钟五、样品制备1.固体样品：取样品适量，用粉碎机粉碎，然后称取约0.2g样品置于试管中。
2.液体样品：直接取适量样品置于试管中。
3.在每个试管中加入4ml斐林试剂，充分混匀后静置10min。
4.将试管中的溶液倒入三角瓶中，加入约80ml水稀释，加热至沸后保持1min。
5.用移液管向每个试管中加入1ml样液，摇匀后置于试管架上。
6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热，同时开启计时器。
当时间达到要求时立即取出试管，用自来水冷却至室温。
7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中，再加入约1ml的样液摇匀。
8.将比色管置于比色槽中，与标准曲线进行比色，得出样品的含量。
9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来，以便后续分析。
六、结果分析通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
计算公式为：含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。
其中吸光度需要在一定波长下测定。
同时需要注意实验过程中操作条件的控制，以保证结果的准确性。
如果操作条件不稳定或样品复杂性较高，需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。
还原糖 测定实验报告
还原糖测定实验报告还原糖测定实验报告引言：还原糖是一类具有还原性的糖类物质，能够还原某些化学试剂。
测定还原糖的含量在食品工业和生化实验中具有重要意义。
本实验旨在通过还原糖的测定实验，掌握还原糖的测定方法以及实验操作技巧。
实验材料和仪器：1. 实验材料：葡萄糖溶液、蔗糖溶液、还原糖标准溶液、硫酸铜溶液、碱式碘液、硫酸、氢氧化钠溶液等。
2. 仪器：分光光度计、试管、移液管、烧杯、量筒等。
实验步骤：1. 制备还原糖标准溶液：取一定量的葡萄糖溶液，用蒸馏水稀释至一定体积，得到一定浓度的还原糖标准溶液。
2. 实验组的操作：取一定体积的蔗糖溶液，加入硫酸铜溶液和碱式碘液，混合均匀后加入硫酸，使溶液变为无色。
然后加入氢氧化钠溶液，使溶液呈现深蓝色。
最后，用分光光度计测定溶液的吸光度。
3. 对照组的操作：取一定体积的还原糖标准溶液，按照实验组的操作步骤进行操作。
4. 分光光度计测定：将实验组和对照组的溶液分别放入分光光度计中，设置适当的波长，测定吸光度。
结果与分析：根据实验数据，在分光光度计上测得实验组和对照组的吸光度值，通过计算可以得到实验组中还原糖的含量。
通过对比实验组和对照组的含量，可以得出蔗糖溶液中还原糖的含量。
实验误差的分析：1. 实验操作误差：由于实验操作中的仪器使用、试剂的取用等步骤，可能会产生一定的误差。
为减小误差，应严格按照实验步骤进行操作，尽量减少操作上的差异。
2. 仪器误差：分光光度计的测量结果也可能存在一定的误差。
为减小仪器误差，应在测量前校准分光光度计，确保其准确性。
实验结论：通过本实验的测定，可以得出蔗糖溶液中还原糖的含量。
实验结果可用于食品工业中对糖类产品的质量控制和生化实验中对还原糖的研究。
总结：本实验通过测定蔗糖溶液中还原糖的含量，掌握了还原糖的测定方法和实验操作技巧。
同时，还了解了实验误差的来源，并提出了减小误差的方法。
这些知识和技能对于食品工业和生化实验具有重要意义。
通过实验的过程，我们不仅学到了实验操作的技巧，还加深了对还原糖测定原理的理解。
一、还原糖含量的测定
三、实验材料、仪器和试剂：
1、实验材料：苹果（约0.5 g）
2、仪器：水浴锅；可见分光光度计等。 3、试剂：
（1）0.5 mg/mL葡萄糖标准液
（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂(碱性)
四、实验步骤：
1、葡萄糖标准曲线的绘制 2、还原糖的提取
3、样品含糖量的测定:
生物化学实验
实
验
四
植物组织中还原糖的测定
—3,5-二硝基水杨酸比色法
学时：3
一、实验目的：
1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理。
2、掌握比色法测定还原糖的操作方法。
二、实验原理:
1、还原糖：指含有游离的半缩醛(酮)基糖。 单糖都是还原糖；某些二糖是还原糖（如麦芽糖、
乳糖等）；多糖为非还原糖。
2、总糖的提取及双、多糖的酸水解。 利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、
3、样品含糖量的测定: 取提取液0.5ml，按上表操作。
五、计算：
还原糖含量(μg/ g )=
还原g)
六、思考题：
1、何谓还原糖？测定还原糖的方法还 有哪几种? 2、本实验的注意事项?
测定还原糖其它方法
(1)蒽酮比色法：
强酸可使糖类脱水生成糠醛，糠醛与蒽
葡萄糖含 量（μg） 0 50 100 150 200
0.5
4 混匀
250
χ1
2、还原糖的提取
① 取0.5g样品于研钵中，加水2ml，充分研磨。
② 用2ml蒸馏水分三次冲洗研钵(总体积小于10 ml)，转入10ml离心管中。 ③ 在50℃水浴中恒温20分钟，冷却后于 4000r/min, 离心5分钟。 ① 取上清转入50ml容量瓶中，用蒸馏水定容， 待测。
总多糖含量测定试剂盒说明书
总多糖含量测定试剂盒说明书分光光度法50管/48样注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：多糖是生物体中广泛存在的物质，是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，它是生物体内重要的生物大分子，是维持生命活动正常运转的基本物质之一。
测定原理：利用水提醇沉法提取总多糖，苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制：试剂一：12mL×1瓶，4℃保存；试剂二：无水乙醇，自备；试剂三：浓硫酸，自备。
总多糖提取：样本烘干粉碎，称取约0.05g样本，加入1mL水，充分匀浆。
100℃水浴提取2h（必须盖紧盖子防止水分流失），冷却后10000g离心10min，取上清。
吸取0.2mL上清，慢慢加入0.8mL无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，10000g离心10min，弃上清，沉淀中加入1mL水，充分混匀溶解沉淀。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至490nm，蒸馏水调零。
2、吸取400µL上清，加入200µL试剂一和1mL浓硫酸，混匀后90℃水浴20min，流水冷却。
取1mL加入比色皿，于490nm下测定吸光值A。
总多糖含量计算：以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为y = 15.962x - 0.0037，R2 = 0.9973，x为葡萄糖含量（mg/mL），y为吸光值。
总多糖含量(μg/g干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000=313.24×(A+0.0037) ÷WV1：醇沉后重新溶解后的体积，1mL；V2：进行醇沉的体积，0.2mL；V3，提取时加入水的体积，1mL；W：样本质量，g；1000，mg到μg的换算系数。
还原糖含量测定
二、还原糖含量的测定葡萄糖标准溶液：(葡萄糖在98~100℃先烘干至恒重，干燥冷却，再称量)1 mg ·mL-1葡萄糖标准液：准确称取1 g 的无水葡萄糖，待溶解后定容至1000 mL 。
DNS 显色液：准确称取无水的3,5-二硝基水杨酸6.5 g 溶解待用。
无水氢氧化钠40 g 溶解后移入500 mL 容量瓶，冷却后定容。
将水杨酸溶解液移入1000 mL 容量瓶并加入325 mL 的氢氧化钠，再加入15 mL 丙三醇溶解定容至1000 mL 贮存于棕色试剂瓶中。
以上试剂均为分析纯。
水为蒸馏水。
采用3,5—二硝基水杨酸比色法：还原糖测定液的制备：准确称取块茎干样品粉末1.3××g ，放入50ml 容量瓶中加入25ml 蒸馏水，置沸水浴中加热20min ，其间摇动数次，取出立即加入2ml 乙酸锌(219g/L)溶液和2ml 亚铁氰化钾(106g/L)溶液，摇匀，冷却，定容至50ml 容量瓶中，过滤，滤液备用。
标准曲线的制作：用移液器准确吸取0、2、4、6、8、10、12、14、16ml ……的葡萄糖标准溶液，分别置于50ml 容量瓶中，用蒸馏水补充至约20ml ，加3,5—二硝基水杨酸溶液5ml ，至沸水浴中煮5min 进行显色，取出后以流水冷却，定容，摇匀。
20min 后比色。
用试剂空白调零，用分光光度计在510nm 波长处测定吸光值（A ），以吸光值为纵坐标，葡萄糖含量（mg ）为横坐标，绘制标准曲线。
样品的测定：用移液器吸取样品溶液5ml ，置于50ml 容量瓶中，加3,5—二硝基水杨酸溶液5ml ，至沸水浴中煮5min 进行显色，取出后以流水冷却，定容，摇匀。
20min 后比色。
用试剂空白调零，用分光光度计在510nm 波长处测定吸光值（A ）。
结果计算：在标准曲线中查出相应的还原糖含量，按以下公式计算样品中还原糖的百分含量。
还原糖（%）=)()(mg mg 样品质量样品稀释倍数数还原糖 ×100式中，分取倍数：50/5=10换算成：还原糖(%FW)=还原糖(%DW)×干物质(%)。
总糖含量检测试剂盒说明书
总糖含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC2710规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体13 mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1．标准品：10 mg 无水葡萄糖。
临用前加1 mL 蒸馏水溶解为10 mg/mL 的葡萄糖标准品备用，2-8℃保存两周。
产品说明：糖类物质是构成植物体的重要成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。
总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖，麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。
总糖酸水解为还原糖，还原糖在碱性条件下与DNS 试剂共热后被还原成氨基化合物，在碱性溶液中呈红棕色，还原糖的量与桔红色物质颜色的深浅成正比关系，以此测定样本中的总糖含量。
3-Amino-5-Nitrosalicylic Acid (Reddish Brown)技术指标：最低检出限：0.0444 mg/mL 线性范围：0.1-1 mg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织样本的处理：称取约0.1g 样本于10mLEP 管中，加入1mL 试剂一，1.5mL 蒸馏水，研磨匀浆，沸水浴30min ，加入1mL 试剂二，涡旋混匀，用蒸馏水定容至10mL ，8000g ，25℃离心10min ，取上清液待测。
（注意稀释，见注意事项）。
2、血清（浆）、液体样本的处理：取0.1mL 血清（浆）于1mLEP 管中，加入0.1mL 试剂一，0.15mL 蒸馏水，匀浆，沸水浴30min ，加入0.1mL 试剂二，涡旋混匀，用蒸馏水定容至1mL ，8000g ，25℃离心10min ，取上清液待测。
还原糖含量试剂盒使用说明
还原糖含量试剂盒使用说明可见分光光度法50管/24样货号：BC0230测定意义：还原糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。
植物体内的还原糖主要包括葡萄糖、果糖和麦芽糖等，是最常见的单糖和双糖，其中葡萄糖和果糖不仅是呼吸作用的主要底物，也是进一步合成蔗糖、淀粉和纤维素的底物。
测定原理：加热促进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖生成棕红色氨基化合物，在540nm 有特征吸收峰；在一定的浓度范围内，还原糖含量与540nm吸光度成线性关系，根据标准曲线，即可求出样品中还原糖的量。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：100mL×1瓶，4℃保存；试剂二：35mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1ml 蒸馏水溶解备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至0.3、0.25、0.2、0.15、0.1、0.05mg/ml。
样品中还原糖的提取：1、细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入2mL提取液的比例超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；转移到有盖离心管中（防止加热时水分散失），80℃水浴中40min并且振荡8~10次，离心，取上清供测定用。
2、组织：称取约0.2g样本，加入2mL试剂一匀浆，转移到有盖离心管中（防止加热时水分散失），80℃水浴中40min并且振荡8~10次，8000g，常温离心10min，取上清供测定用。
加样表和测定步骤（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）：试剂（uL）对照管测定管标准管样本700700-标准液--700试剂二-500500蒸馏水500--将各管摇匀，在沸水浴中加热5min（盖紧，防止水分散失），取出后立即冷却至室温，混匀。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告引言：还原糖是一类含有还原性基团的糖类物质，包括蔗糖、果糖、葡萄糖等，它们具有还原剂性质，能够还原某些化学试剂。
还原糖的测定对于食品工业、生物化学以及医学领域具有重要意义。
本实验旨在通过间接法，利用还原糖对氧化剂的还原能力来测定糖的含量。
实验设备：1. 分光光度计2. 烧杯3. 试管4. 10ml 称量瓶5. 称量盘6. 称重仪7. 20ml 锥形瓶8. 恒温水浴器9. 塑料注射器实验原理与步骤：原理：还原糖具有还原能力，能够将某些氧化剂还原为相应的还原剂。
本实验中，我们采用间接法来测定还原糖的含量。
首先，还原糖被氧化剂氧化生成相应的酸。
然后，我们利用已知浓度的氧化剂标定所需的还原糖的质量。
步骤：1. 取适量的还原糖样品，精确称量并记录其质量。
2. 将样品溶解在足够量的蒸馏水中，使得质量浓度为1克/10ml。
3. 取0.5ml还原糖溶液到一个20ml 锥形瓶中。
4. 加入50ml的磷酸盐缓冲溶液，并用塑料注射器将氧化剂硫酸亚铁溶液滴定到显红的终点，记录所需的滴定体积。
5. 用蒸馏水对照实验进行空白试验，并记录滴定体积。
6. 计算样品的还原糖含量。
实验结果与分析：1. 标定曲线：根据实验所得数据，绘制出硫酸亚铁滴定体积与还原糖质量之间的标定曲线。
2. 样品测定：根据实验步骤中测定的滴定体积数据，结合标定曲线，计算并记录样品中还原糖的含量。
讨论与结论：1. 实验误差：分析实验过程中可能存在的误差来源，如称量误差、滴定体积读取误差等。
提出改进实验方法的建议。
2. 结果分析：根据实验数据的分析与计算，得出样品中还原糖的含量。
3. 结论：通过实验，我们成功测定了还原糖的含量，并得出结论。
实验的意义与应用：1. 食品工业：测定食品中还原糖的含量，为食品质量评价提供重要依据。
2. 生物化学：研究生物体内糖代谢、酶的活性等方面的重要手段。
3. 医学领域：对于糖尿病患者管理血糖以及诊断疾病具有重要意义。
4-还原糖含量测定
还原糖含量测定1.试剂1.1氢氧化钠溶液（200g/L）：称取氢氧化钠20.0g。
加水溶解，定容至100ml。
1.2 DNS试剂：称取3,5二硝基水杨酸3.15g，加水500ml，搅拌3-5s，水浴至45℃。
然后逐步加入100ml氢氧化钠溶液，同时不断搅拌，直到溶液清澈透明（注意，在加入氢氧化钠过程中，溶液温度不要超过48℃）。
再逐步加入四水酒石酸钾钠91.0g、苯酚2.50g和无水亚硫酸钠2.50g。
继续45℃水浴加热，同时补加水300ml，不断搅拌，直到加入的物质完全溶解。
停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000ml。
用烧结玻璃过滤器过滤。
取滤液，贮存在棕色瓶中，避光保存。
室温下存放7d后方可使用，有效期为180d。
1.3葡萄糖溶液，10mg/ml称取无水葡萄糖1.000g，加入纯净水溶解，定容至100ml。
2.测定步骤2.1标准曲线的制作2.1.1吸取纯净水2ml，加入DNS试剂2.5ml，沸水浴加热5min。
用自来水冷却至室温，用水定容至12.5ml，制成标准空白样。
2.1.2分别吸取葡萄糖溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml和7ml，分别用纯净水定容至100ml，配制成浓度为0.10mg/ml、0.20mg/ml、0.30mg/ml、0.40mg/ml、0.50mg/ml、0.60mg/ml和0.70mg/ml的葡萄糖标准溶液。
2.1.3分别吸取上述浓度系列的葡萄糖标准溶液各1ml（做2个平行），分别加入到刻度试管中，再分别加入1ml纯净水和2.5mlDNS试剂。
电磁振荡3s-5s，沸水浴加热5min。
然后用自来水冷却至室温，再用纯净水定容至12.5ml。
以标准空白样为对照调零，在540nm处测定吸光值A。
2.1.4以葡萄糖浓度为Y轴，吸光度A为X轴，绘制标准曲线。
每次新配DNS试剂均需要重新绘制标准曲线。
2.3样品测定2.3.1样品处理液体样品经滤纸过滤后，根据样品中还原糖预估含量进行适当稀释。
还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1170规格：50T/48S产品内容：试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体15mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂10mg×1支，4℃避光保存。
产品说明：谷胱甘肽是由谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）和甘氨酸（Gly）组成的天然三肽，是一种含巯基（—SH）的化合物，广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。
谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。
2-硝基-5-巯基苯甲酸为黄色产物，在波长412nm处具有最大光吸收。
自备仪器和用品：分析天平、微量匀浆器（规格2mL）、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计，1mL玻璃比色皿。
一、样品的处理1、组织处理：新鲜组织首先用PBS冲洗2次，然后称取动物组织或者植物组织0.1g。
加入用试剂一润洗过的匀浆器中（匀浆器提前放冰上预冷）；然后加入1mL试剂一（组织/试剂一比例保持不变即可），迅速冰上充分研磨（使用液氮研磨效果更好）；8000g4℃离心10min；取上清液放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
2、血液处理血浆：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，吸取上层血浆到另一支试管中，加入等体积的试剂一,4℃，8000g离心10分钟,将上清移入新的试管中放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
血细胞：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，弃去上层血浆用3倍体积的PBS清洗3次（用PBS 重悬血细胞，600g离心10分钟），加入等体积试剂一，混匀后4℃放置10分钟，8000g离心10分钟，吸取上清放于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
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还原糖含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC0230
规格：50T/24S
产品内容：
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体35mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1mL蒸馏水溶解备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至0.3、0.25、0.2、0.15、0.1、0.05mg/mL。
产品说明：
还原糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。
植物体内的还原糖主要包括葡萄糖、果糖和麦芽糖等，是最常见的单糖和双糖，其中葡萄糖和果糖不仅是呼吸作用的主要底物，也是进一步合成蔗糖、淀粉和纤维素的底物。
加热促进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖生成棕红色氨基化合物，在540nm有特征吸收峰；在一定的浓度范围内，还原糖含量与540nm吸光度成线性关系，根据标准曲线，即可求出样品中还原糖的量。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。
操作步骤：
一、样品中还原糖的提取：
1.细菌或细胞的处理：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：
试剂一（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一），超声波破碎细菌或
细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；转移到有盖离心管中（防止加热时水分散失），80℃水浴中40min并且振荡8~10次，8000g，常温离心10min，取上清供测定用。
2.组织的处理：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织加入2mL
试剂一），冰浴匀浆。
转移到有盖离心管中（防止加热时水分散失），80℃水浴中40min并且振荡8~10次，8000g，常温离心10min，取上清供测定用。
3.血清（浆）的处理：按照血清（浆）体积（mL）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议取约0.2mL
血清（浆）加入1.8mL试剂一），冰浴匀浆。
转移到有盖离心管中（防止加热时水分散失），80℃水浴中40min并且振荡8~10次，8000g，常温离心10min，取上清供测定用。
二、测定操作表：
1.在EP管中加入下列试剂：
试剂（μL）对照管测定管标准管空白管样本700700
标准液700
试剂二500500500
蒸馏水500700将各管摇匀，在沸水浴加热5min（盖紧，防止水分散失），取出后立即冷却至室温，混匀。
在540nm波长下，用蒸馏水调零，读取标准管、对照管、测定管和空白管吸光值。
计算ΔA=A测定-A对照。
根据标准管浓度和吸光度（为A标准-A空白）建立标准曲线，x为吸光度，y为标准品浓度（mg/mL）。
注意：
1.每个测定管需设定一个对照管。
2.如果ΔA大于2，需要将样本用试剂一稀释，计算公式中乘以相应的稀释倍数。
三、还原糖含量计算：
1、根据标准曲线计算样品中还原糖的含量，即将ΔA（A测定管-A对照管）带入x计算出y值。
2、按样本鲜重计算：
还原糖(μg/g鲜重)=1000×y×V1÷W=2000×y÷W
3、按样本蛋白浓度计算：
还原糖(μg/mg prot)=1000×y×V1÷（V1×Cpr）=1000×y÷Cpr 4、按细菌或细胞密度计算：
还原糖(μg/104cell)=1000×y×V1÷（500×V1）=2×y
5、按血清（浆）体积计算：
还原糖(μg/mL)=1000×y×V2÷V3=10000×y
1000：1mg/mL=1000μg/mL；
V1：加入试剂一体积，2mL；
V2：加入血清（浆）和试剂一总体积，2mL；
V3：加入血清（浆）体积，0.2mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
500：细菌或细胞密度，500万/mL。