垂直板电泳仪的日常使用与维护

海洋食品教育部工程研究中心

仪器设备日常使用与维护规程

设备名称：垂直板电泳仪

厂家型号：北京市六一仪器厂DYY-10C电泳仪

1.仪器的使用

1.1用蒸馏水将制胶玻璃板和梳子冲洗干净，并用吹风机将水分吹干，用夹子封闭玻璃板边缘，在玻璃板支架上夹紧。

1.2根据欲分离蛋白质大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的凝胶；

1.3将配好的分离胶溶液迅速加入制胶板中（约6mL），距梳子下端1cm左右，并在最后加适量的饱和正丁醇；

1.4室温下60~90分钟后分离胶完全凝结，清除凝胶顶端残余的饱和正丁醇；

1.5配制浓缩胶溶液，并迅速加入制胶板中（约2mL），轻轻插入梳子，保证不气泡产生；

1.6室温下30-60分钟后浓缩胶完全凝结，小心拔出梳子，将凝胶板安放在电泳槽内；

1.7向电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶板顶端为宜，如样品孔内有气泡，应设法除去；

1.8用移液枪将处理好的样品（20 L）慢加入被浸没的凝胶加样孔内；

1.9接通电源，红色为正极，黑色为负极，一般浓缩胶电压为80V，以浓缩胶和分离胶分割线为界，分离胶电压为120V，电泳2~3h即可；

1.10根据指示剂观察泳动的位置，判断是否终止电泳；

1.11电泳完毕，关上电源，在凝胶成像仪上观察电泳带及其位置，并与蛋白质分子量标准Marker比较样品蛋白质大小。

2.维护与保养

2.1电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。

2.2仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。

2.3由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。

2.4在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围)，可以多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命。

2.5某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时，允许在稳压状态下空载开机，但在稳流状态下必须先接好负载再开机，否则电压表指针将大幅度跳动，容易造成不必要的人为机器损坏。

2.6使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外事故。