广佛手中两种香豆素类成分的分离与鉴定

广佛手中两种香豆素类成分的分离与鉴定

【摘要】目的分离提取广佛手药材中的香豆素类成分，并对其进行液质核磁鉴定。方法采用硅胶柱层析技术队佛手药材浸膏进行洗脱分离，回收溶剂，重结晶得广佛手香豆素化合物，并进行鉴定。结果从广佛手药材醇浸膏中分离得到2种香豆素浸膏。

【关键词】广佛手；香豆素类；分离；鉴定

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.07.582文章编号：1004-7484（2013）-07-3982-01

佛手又称佛手柑，佛手香橼，为芸香科柑橘属植物佛手citrusmedica l.var.sarcodactylis swingle的果实。味辛、苦，性温，具有舒肝和胃，行气止痛，祛湿化痰等功效，是中医用药中常用的组方成分，我国分布较广，是一种名贵的药食两用的可栽培中药材，具有一定的经济价值。佛手的药用研究不多，主要集中于提取工艺，指纹图谱，化学成分的研究以多糖、挥发油居多，目前还发现了再佛手中含有香豆素类、黄酮类成分等成分[1-3]。

本实验欲采用硅胶柱层析技术从广佛手药材醇提取浸膏中分离

得到香豆素类成分，进行进一步的研究开发。

1实验部分

1.1实验材料广东佛手药材，购自广东广州致信中药饮片有限公司，产地广东肇庆，批号120501，经广东药学院中药学院刘基柱教授鉴定为芸香科柑橘属植物佛手citrusmedica

l.var.sarcodactylis swingle 的果实。

1.2实验仪器与试剂acquity uplc/q-tof-ms系统（美国waters 公司），bruker avanceⅲ500mhz核磁共振仪，乙腈、甲醇均为色谱纯，购自德国merk公司，甲酸为质谱级，水为屈臣氏蒸馏水，乙酸乙酯，乙醇，石油醚为分析纯购自天津大茂试剂有限公司。

1.3提取称取广佛手生药材500g，水清洗，粉碎，加入70%乙醇，回流提取3次，每次3小时，回流温度80度。提取液合并后减压浓缩后的乙醇提取物。

1.4分离取广佛手乙醇提取物，硅胶1：1拌样上样进行硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯：石油醚：5：1进行洗脱[4]，并浓缩回收溶剂，得到广佛手分离样品（a）和（b）。

1.5鉴定方法与结果

1.5.1核磁鉴定取将上述分离得到的广佛手分离样品（a）和（b），用氮气吹干，放入冰箱4度冷藏，重结晶后干燥，进行核磁共振（500mhz）鉴定，结果见

1.5.2液质鉴定供试品溶液的制备将上述核磁鉴定后的样品（a）盒（b）氮气吹干，甲醇超声溶解结晶，过0.22μm微孔滤膜，即得分析样品。

1.5.3液质鉴定条件acquity uplc beh c18（50mm×

2.1mm，1.7μm）色谱柱，柱温为30℃，流速为0.2ml·min-1，进样量为5μl；流动相b：色谱乙腈；梯度洗脱程序为：100%甲醇。esi源正离子模式，capillary：3000v，sample cone：30v，source temp：100℃，desolvation temp：350℃，cone：60（l/hr），desolvation：600

（l/hr）

1.5.4鉴定结果分析利用tof-ms对以上分离得到的各色谱峰成分进行正离子模式扫描，得出主要成分的分子离子信息并使用masslynxtm4.1工作站推算的元素组成，化合物a的[m+h]+峰的

m/z217.0511元素组成为c12h7o4，（a）分子量为216.1950。结合广佛手分离样品（a）的核磁数据如下：

1h-nmr（400mhz dmso）δ：8.16（1h，d，j=9.6hz，4-h），8.09（1h，d，j=2.34hz，2’-h），7.99（1h，s，5-h），7.71（1h，s，8-h），7.08（1h，dd，j=2.16，0.96hz，3’-h），6.42（1h，d，j=9.5hz，3-h）。

13c-nmr（400mhz dmso）δ：160.6（c-2），156.2，（c-9），152.0（c-7），148.3（c-2’），145.5（c-4），125.0（c-6），121.1（c-5），115.8（c-10），114.5（c-4），107.2（c-3’），99.7（c-8）。

与文献比对，发现与5-甲氧基补骨脂素，即5-甲氧基补骨内酯的结构数据相符，得出广佛手分离样品（a）是5-甲氧基补骨脂素[2]，同理，广佛手分离样品（b），[m+h]+峰的m/z207.0662，其元素组成为c11h11o4，核磁数据如下：1h-nmr（300mhz dmso-d6）δ：3.17（3h，s，och3），3.82（3h，s，och3），6.23（1h，d，j=9.3hz，h-3），6.78（1h，s，h-5），7.21（1h，s，h-8），7，92（1h，d，j=9.3hz，h-4）13c-nmr（300mhz cdcl3）δ：50.46（-och3），57.86（-och3），104.62（c-8），111.43（c-6），112.39（c-10），113.53（c-3），146.30（c-4），147.09（c-5），151.36（c-9），152.99（c-2），

162.51（c-7）。得出广佛手分离样品（b）是6，7-二甲氧基香豆素[2]。

参考文献

[1]张爵玉，蒋林，王琴.广佛手的研究现状与进展[j].中国调味品，2008，25（11）：1-4.

[2]尹锋，楼凤昌.佛手化学成分的研究[j].中国药学杂志，2004，24（2）：12-14.

[3]张颖，刘大勇.多产地佛手化学成分比较[j].科技信息（学术研究），2008，21（1）：33-36.

[4]柳江华，姚新生，徐绥绪，等.重齿毛当归中香豆素的进一步分离[j].药学学报，1996，31（1）：63-67.