白花蛇舌草中总黄酮的分离提取及含量测定
白花蛇舌草中总黄酮提取分离工艺的研究
黄酮 类化 合 物 易 溶 于 甲 醇 、 醇 、 酸 乙 酯 、 乙 乙 乙
后装 人 层 析柱 中 。用 ３倍 体 积 的 ９ ％ 乙 醇洗 脱 ， ５ 至 洗 脱液 透 明 并在 蒸 干后 无残 留物 。再 依次 用 ２倍 体
次为 ０ ５ｈ ． 。合并 提 取 液 ， 回收 乙醇 ， 白花 蛇 舌 草 得 浸膏。
吸光 度 ， 测三 次 取平 均 值 ， 计算 标 准 曲线 的 回归 方 程
和相关 系数， Ｙ＝１ ．０ ５ ０ ８ ７ Ｃ＋０ ０ ５ ， ＝０ ９ ９ 。 不 ．１４ ｒ ．９ ８ 同提 取 方法 对总 黄 酮含 量 的影 响见 表 。
５ －６超 临 界 二 氧 化 碳 萃 取 装 置 （ 苏 南 通 华 安 公 ００ 江
司） 。芦 丁标 准 品 （ 中国药 品 生物 制 品鉴 定所 ） 白花 ，
准 曲线 的制 备 ： 密 吸 取 标 准 液 １０ ２ ０ ３ ０ ４０ 精 ．、． 、． 、．、 ５ ０ ０ ０ｍ （ 白 ） 分 别 置 １ ｌ容 量 瓶 中 ， 加 ． 和 ． ｌ 空 ， ０ｎ ｌ 各 无 水 乙醇使 成 ７ｎ ， 密 加人 ５ ｌ 精 ｌ ％亚 硝 酸钠 ０ ３ｍ ， ． ｌ 摇 匀 ， 置 ６ｍ ｎ 精 密 加 人 １％ 三 氯 化 铝 溶 液 ０ ３ 放 ｉ， ０ ．
Ⅳ法 （ 临 界二 氧 化碳 萃取 ） 取 白花蛇 舌 草 ５ 超 ： ０ ｇ 人 超 临 界 萃 取 灌 ， 摸 索 好 的 条 件 启 动 萃 取 装 装 按 置 ， 萃取 物 ， 发 后得 白花蛇 舌 草浸 膏 。 得 蒸
１ ３ 聚 酰 胺 树 脂 柱 的制 备 Ｊ 预 处 理 ： 市 售 聚 ． 取 酰 胺树 脂 ， ９ ％ 的乙 醇 浸 泡 ， 断 搅 拌 ， 用 ５ 不 除去 气 泡
白花蛇舌草中黄酮提取工艺的优化及其结构鉴定
２．８６％。白花蛇舌草的黄酮类化合物主要成分为黄酮醇类。［结论］该研究为白花蛇舌草药用价值的进一步开发提供了参考。
关键词白花蛇舌草；黄酮；微波提取；正交试验 中图分类号ｓ５６７ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６ｌｌ（．２０１１）ｏｉ—００１３１一∞ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｆｌａｙｏｎｏｉ‘Ｉｓ ｆｒｏｍ Ｈｅｄｙｏｔｉｓ ｄｉｆｆｕｓａ ａｎｔｉ Ｉｄｅｎｔｉｆｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｔｓ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ＺＨＡＮＧ Ｃａｉ－ｘｉａ ｅｔ ａｌ（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍａｔｅｒｉａｌ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＪｉａＩｌ弘ｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇａｎｚｈｏｕ，Ｊｉ粕黟ｉ ３４１０００） Ａｂｓｔｒａｃｔ ｆ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ １ Ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｉｔｓ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，∞锄ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒ－ ｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｖａｌｕｅ ｏｆ Ｈｅｄｙｏｔｉｓ ｇｉｆｔ．ｓ．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｂｙ ｅｍｐｌｏｙｉｎｇ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ。ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｈｅｄｙｏｔｉｓ ｄｉｆｆⅢａ ｗａｓ ｏｐｉｔｉｍｉｚｅｄ．Ｉｔｓ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ＵＶ ａｎｄ ＩＲ ａｎａｌｙｓｉｓ．【Ｒｅｓｕｌｔ
１
Ｆａｃｔｏｒｓ
白花蛇舌草三大类成分的分离纯化及抗肿瘤活性测定
白花蛇舌草三大类成分的分离纯化及抗肿瘤活性测定范安琪;侯宝龙;梁艳妮;王征【期刊名称】《辽宁中医杂志》【年(卷),期】2024(51)4【摘要】目的从白花蛇舌草中分离纯化总三萜、总多糖、总黄酮,并检测其抗肿瘤活性。
方法将白花蛇舌草置于乙醇溶液中冷浸,对其中的三萜类、多糖和黄酮类化合物进行粗提;再通过大孔吸附树脂对粗提物进行处理,获得纯化后的总三萜、总多糖、总黄酮。
通过CCK-8法检测白花蛇舌草总三萜、总多糖、总黄酮对A549细胞增殖的影响。
结果三萜类化合物浸膏得率为20.60%,精制后总三萜纯度为82.73%;粗多糖得率为41.17%,精制后总多糖纯度为71.11%;黄酮类化合物浸膏得率为0.49%,精制后总黄酮纯度为38.14%。
纯化后的白花蛇舌草总三萜、总黄酮和总多糖对A549细胞增殖均有抑制作用,白花蛇舌草总三萜和总黄酮对肺癌细胞A549的抑制作用明显。
结论白花蛇舌草总三萜、总黄酮、总多糖均抑制肺癌A549细胞的增殖,为白花蛇舌草总黄酮、总多糖、总三萜的抗肿瘤作用研究提供了一定的参考。
【总页数】5页(P138-142)【作者】范安琪;侯宝龙;梁艳妮;王征【作者单位】陕西中医药大学陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心/秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)/陕西省创新药物研究中心【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.链霉菌NOV-0827产生的抗肿瘤活性成分的分离纯化和结构鉴定2.海洋放线菌ACMA006抗肿瘤活性成分的分离纯化及结构鉴定3.小单孢菌FIM060152中抗肿瘤活性成分的提取分离纯化4.链霉菌BAF-0711产生的抗肿瘤活性成分的分离纯化和结构鉴定5.1株白木香内生真菌中抗肿瘤活性成分的分离纯化和结构鉴定因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
福建产白花蛇舌草活性成分提取与含量测定
福建产白花蛇舌草活性成分提取与含量测定
欧敏锐;许小平;邓燚杰;许嫦娟
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2004(16)2
【摘要】目的研究福建产白花蛇舌草多糖和总黄酮的提取与含量测定.方法采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用亚硝酸钠-三氯化铝法测定总黄酮含量.结果测得多糖含量为9.26%,总黄酮含量为10.33%.结论与其它产地白花蛇舌草比较,福建产白花蛇舌草多糖和总黄酮的含量较高,适用于工业化制备.
【总页数】3页(P43-45)
【作者】欧敏锐;许小平;邓燚杰;许嫦娟
【作者单位】福州大学化学化工学院,福州,350002;福州大学化学化工学院,福州,350002;福州大学化学化工学院,福州,350002;福州大学化学化工学院,福
州,350002
【正文语种】中文
【中图分类】R928.71;R927.2
【相关文献】
1.白花蛇舌草组织培养物多糖的提取与含量测定 [J], 李国平;杨鹭生;黄群策
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3.豫产白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮的含量测定 [J], 刘毅; 叶颖晓; 刘元; 文春南; 赵作威; 麻兵继
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白花蛇舌草总黄酮的提取以及体外对肝癌细胞的作用
白花蛇舌草总黄酮的提取以及体外对肝癌细胞的作用吴杨;周忆新;吴银生【期刊名称】《抗感染药学》【年(卷),期】2008(5)3【摘要】目的:提取白花蛇舌草总黄酮,并用MTT法检测其对HepG-2肿瘤细胞的增殖抑制作用。
方法:用加热回流的方法提取白花蛇舌草中的总黄酮,标准曲线法测定其含量,然后作用于HepG-2肿瘤细胞,MTT法检测白花蛇舌草中的总黄酮对HepG-2肿瘤细胞生长抑制的影响。
结果:成功提取并获得白花蛇舌草总黄酮,其含量约为15%,对人肝癌细胞HepG-2的生长增殖有抑制,48h后效果明显。
结论:白花蛇舌草中的总黄酮对人肝癌细胞HepG-2有显著的抑制作用。
【总页数】3页(P150-152)【关键词】白花蛇舌草;总黄酮;MTT法;HepG-2细胞【作者】吴杨;周忆新;吴银生【作者单位】江苏省苏州惠氏制药公司;江苏省苏州药品检验所【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.白花蛇舌草总黄酮对肝癌MHCC97-H细胞增殖的抑制作用 [J], 张彦兵;王天昶;朱娇;郭亚焕;肖菊香;廖子君;阮之平2.白花蛇舌草总黄酮对TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞EMT的逆转作用及其机制 [J], 张彦兵;朱娇;肖菊香;郭亚焕;廖子君;徐瑞3.白花蛇舌草提取物多糖和总黄酮对于结肠癌HT-29细胞的抑制作用 [J], 谢冬冰;郭玉婷4.白花蛇舌草总黄酮对肝癌的体内外抑制作用及对小鼠移植性肝癌H22细胞增殖周期、凋亡、免疫环境的影响 [J], 张硕;宋衍芹;周三;杨志宏;刘占涛;倪同尚;岳旺5.白花蛇舌草总黄酮体外对人肝癌细胞HepG-2的作用 [J], 周忆新;吴杨;顾珉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超声提取白花蛇舌草总黄酮工艺研究
超声提取白花蛇舌草总黄酮工艺研究
谢璟;陈永刚
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2012(31)5
【摘要】目的研究白花蛇舌草总黄酮的超声提取工艺。
方法以超声波法提取总黄酮类物质,采用正交实验优化提取工艺。
利用聚酰胺柱色谱法纯化提取的总黄酮,以芦丁为对照品,利用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法计算总黄酮含量。
结果最佳提取工艺为白花蛇舌草药材以70%乙醇为提取溶剂,料液比1∶20,超声提取30 min,提取3次,提取率2.38%。
结论优选出的最佳工艺简单易行,能完全提取白花蛇舌草中总黄酮。
【总页数】3页(P640-642)
【作者】谢璟;陈永刚
【作者单位】
【正文语种】中文
【相关文献】
1.超声提取白花蛇舌草多糖的工艺研究 [J], 朱智勇
2.微波辅助酶法提取白花蛇舌草总黄酮的工艺研究 [J], 刘霞;李伟;李传灵;韩加伟;范小娜
3.白花蛇舌草总黄酮的超声提取工艺研究 [J], 黄慧;田素英
4.半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮的提取及纯化工艺研究 [J], 王桂玲; 房建强; 费洪荣; 赵莹
5.乙醇-磷酸氢二钾双水相体系萃取白花蛇舌草总黄酮的工艺研究 [J], 刘霞;刘剑辉;杨莹
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白花蛇舌草总黄酮的超声提取工艺研究
取 芦 丁 对 照 品适 量 ， 密称 定 ， ５ ％乙醇 溶 液 配 制 成 精 用 ０
优 选 出 白花蛇 舌 草总 黄酮 的最 佳 提取 工艺 。
１仪 器 与 试 药
浓 度 为 ０１ １ ／ 的对 照品储 备 液 。 ．０ ｍｇｍｌ ６
２２供 试 品 溶 液 的 制 备 ． 取 白 花 蛇 舌 草 粉 末 （ ３号 筛 ） １ｇ 精 密 称 定 ， 具 塞 过 约 ， 置
白花 蛇 舌草 （ｅ ｙ ｔ ｉｕａ 为茜 草 科 一 年 生 草 本 植 物 ｈ ｄ ｏ ｓｄｆ ｓ ） ｉ ｆ 白花蛇 舌 草 的全草 ， 具有 清 热解 毒 、 尿 消肿 之 功 效 ， 民间 利 是 常 用 的 中草药 。 代 药理 研究 表 明 ， 含有 的总黄 酮具 有抗 １现 其 菌 、 炎 、 肿 瘤 、 强免 疫 力 等 作用 ， 一 类 极 具 开 发 价 值 抗 抗 增 是
ＨＵＮＡＧ Ｈｕ Ｉ Ｉ ｉ ，Ｔ ＡＮ ｕ ｉｇ Ｓ ｙｎ ２
１Ｄｅ ａｔ ｎ ｆＰ ａｍａ ｙ ｔ ｅＣｈｎ ｓ ｄ ｃｎ ｓ ｉ ｌｏ ｉｈ ｕ Ｃｉ ，Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｒｖｎ ｅ Ｈｕｚ ｏ ５１ ０ ， ｉａ ． ｐ ｒｍｅ ｔｏ ｈ ｒ ｃ ，ｈ ｉｅ ｅＭｅ ｉｉｅ Ｈｏ ｐｔ ｆＨｕ ｚ ｏ ｔ ａ ｙ ａ ｇ ｏ ｇ Ｐ ｏ ｉ ｃ ， ｉｈ ｕ ６ ０１ Ｃｈｎ ； ２Ｌ ｂ ｒｔｒ ｅ ｔｒｏ ｈ ｎ ｓ ａ ｌ ｇ ， ａ ｇ ｏ ｇＰｈ ｒ ｃ ｕｃ ｉｅ ｓｔ，Ｚ ｏ ｇ ｈ ｎ ５ ８ ５ ，Ｃ ｉ ａ ．ａ ｏａｏｙ Ｃ ｎ ｅ ｆＺ ｏ ｇ ｈ ｎ Ｃｏｌ ｅ Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ａ ｍａ ｅ ｔａ Ｕｎｖ ｒｉ ｅ ｌ ｙ ｈ ｎ ｓａ ２ ４ ８ ｈｎ
ｐ ｔｏｅ ｍ ｔ ｅ ｔｔ ｉ ｓ ｈ ｎ ａ ｄ ２ ｉ ｓ ｖ ｌ ｍｅ ｏ ０ ａ ｃ ｈ ｌ ｌ ａ ｏ ｉ ｘ ｒ ｃ ｒ ３ ｎ ｗｉ ｉ ｓ ｈ ｅｒ ｌｕ ｅｈ ｒ ｆ ｗｏ ｔ ｏ ｍｅ ，ｔ ｅ ｄ ０ ｔ ｍｅ ｏ ｕ ｆ ７ ％ ｌ ｏ ｏ ，ｕ ｔ ｓ ｎ ｃ ｅ ｔａ ｔｆ ０ ｍｉ ｔ ３ ｔｍｅ ．Ｔ ｅ ｒ ｏ ｈ
白花蛇舌草中总黄酮微波辅助提取工艺研究
草 干粉 ， 将 一定 体积 分数 的乙醇作 为提 取剂 ， 按设
定好 的 （ 乙醇 溶 液 ）： （ 白草 花 蛇 ） （ 以下 简 称
液料 比） 加 人烧 瓶 ， 移 人微 波 快 速 反 应 系统了较 佳提 取条 件 ， 可为 白花 蛇舌 草进
一
科 研 开 发
Ｓ Ｃ Ｉ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ ＆ Ｔ Ｅ Ｃ Ｈ Ｎ Ｏ Ｌ （ ） Ｇ Ｙ 化 Ｉ Ｎ 工 科 Ｃ Ｈ 技 Ｅ Ｍ ， ２ ０ Ｉ Ｃ １ ３ Ａ ， Ｌ ２ １ Ｉ （ Ｎ ３ Ｄ ） Ｕ ： ２ Ｓ ３ Ｔ ￣ Ｒ ２ Ｙ ６
白花 蛇 舌 草 中 总 黄 酮 微 波 辅 助 提 取 工 艺 研 究 ＊
１ ． ３ 标准 曲线 的绘 制
白花蛇 舌草 ： 江 西泰 和居 潮 中药材 购销 部 ； 芦
丁 标准 品 ： 纯度＞９ ９ ， 西 安荣 升 有 限公 司 ； 无水
乙醇 、 石油醚、 氢 氧化 钠 、 亚硝 酸钠 、 硝 酸铝 等均 为
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ １ — １ ６
刘 军 海
（ 陕西理工学院 化学与环境科学学院 ， 陕西 汉 中 ７ ２ ３ ０ ０ １ ）
摘
要： 研 究 了白花 蛇舌草 中总黄酮的微波辅助提 取 工艺 ， 在 单 因素 实验基 础上 ， 采 用正交 实验 对
白花蛇舌草总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究
白花蛇舌草总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究作者：张俊霞王应玲姜宁来源：《湖北农业科学》2017年第18期摘要：研究白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd）总黄酮的提取工艺及其体外抗氧化活性。
以白花蛇舌草总黄酮提取率为评价参数，通过单因素试验、正交试验优化提取工艺；测定了总还原力及Fe2+螯合力、羟自由基和超氧阴离子清除能力研究白花蛇舌草总黄酮的抗氧化活性。
结果表明，用95%乙醇与白花蛇舌草粉末按40∶1（mL∶g），在90 ℃下提取180 min，此时提取率最高，达（2.22±0.01）%。
体外抗氧化活性结果显示白花蛇舌草总黄酮具有较强的总还原力，Fe2+螯合率最高为90%，羟自由基和超氧阴离子的清除率分别达79%、77%。
白花蛇舌草总黄酮具有显著的体外抗氧化活性，具有进一步开发利用的价值。
关键词：白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd）；总黄酮；正交试验；体外抗氧化中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）18-3523-05DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2017.18.033Abstract： This study was to optimize the conditions of extraction of total flavonoids from Hedyotis diffusa Willd and detect their antioxidant activities in vitro. Using extraction rate as the evaluation index，single factor experiments and orthogonal test were adopted to optimze the extraction process. Then，four antioxidant parameters of total flavonoids from Hedyotis diffusa Willd，including total reducing power，Fe2+ chelating，hydroxy radical scavenging，and superoxide anion radical scavenging capacities，were measured. The results showed that the optimum conditions of extraction were as following：ethanol concentration was 95%，the ratio of liquid to solid was 40∶1（mL∶g）； extraction time 180 min and temperature，90 ℃. Under these conditions，the extrction ratio was（2.22±0.01）%. The total flavonoids from Hedyotis diffusa Willd had showed high total reducing power，their chelating rate of Fe2+ reached 90%，the radical scavenging activities against hydroxyl radical and superoxide anion were 79% and 77%，respectively. So the antioxidant activities in vitro of flavonoids from Hedyotis diffusa Willd is obvious，which is worth further being developed and utilized.Key words： Hedyotis diffusa Willd； total flavonoids； orthogonal test； antioxidant activities白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd）属于茜草科耳草属，全草含三萜类、环烯醚萜、蒽酮类、黄酮类化合物、有机酸及酯类等化合物[1，2]，具有抗肿瘤、抗炎、提高免疫力、抗氧化、抗化学诱变、保护胃黏膜损伤等作用[3-12]。
豫产白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮的含量测定
Assay of Total Anthraquinone and Flavone Contents of Hedyotis Diffusa in Henan Province 作者： 刘毅[1];叶颖晓[2];刘元[2];文春南[2];赵作威[2];麻兵继[2]
作者机构： [1]安庆医药高等专科学校,安徽安庆246052;[2]河南农业大学中药材系,郑州
450002
出版物刊名： 德州学院学报
页码： 25-29页
年卷期： 2019年 第6期
主题词： 白花蛇舌草;总蒽醌;总黄酮;比色法
摘要：目的:采用比色法测定河南地区白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮的含量.方法:以大黄素和槲皮素为对照品,分别以70%、80%、90%、100%乙醇提取白花蛇舌草药材,在441 nm波长下测定白花蛇舌草总蒽醌含量,在365 nm波长下测定总黄酮含量.结果:90%乙醇提取的白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮含量均最高,总蒽醌含量为0.86 mg/g,总黄酮含量为1.19 mg/g.结论:以90%乙醇提取白花蛇舌草的总蒽醌和总黄酮效果最佳,为评价该地区人工栽培白花蛇舌草药材的内在质量提供科学依据.。
白花蛇舌草的化学成分及含量测定研究进展
白花蛇舌草的化学成分及含量测定研究进展李全斌 1 何开勇 2 吴建萍1（1湖北中医药高等专科学校荆州 434020；2湖北省食品药品监督检验研究院武汉 430071；）刘春霞，朱培仪，宋粉云．白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸的毛细管电泳高频电导法测定[J]．中药材，2008,31（8）：1176-1178．目的：建立白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。
方法：采用毛细管区带电泳，高频电导检测；未涂层弹性融硅石英毛细管柱55cm×75 μmID，有效长度50cm；1．2mmol ／L三乙胺-HC1(pH=10．0)，0.24mmol／L β-环糊精为运行缓冲液；分离电压l2.5kV；重力进样10s(高度20cm)。
结果：以布洛芬为内标，齐墩果酸、熊果酸线性范围分别为3．9～39．0μg/ml(r=0．9991)和20．0～140．0μg/ml (r=0．9990)；平均回收率分别为97．1％和96．0％。
结论：该法简便、准确、快速、重现性好，可用于白花蛇舌草药材中齐墩果酸和熊果酸的含量测定。
关键词：毛细管电泳；高频电导检测；白花蛇舌草；齐墩果酸；熊果酸张瑜，谈献和，蒋国斌，等．原子荧光法测定中药白花蛇舌草中重金属的含量[J]．南京中医药大学学报，2007，23（6）：382-384．摘要：目的采用一次性微波消解原子荧光法测定江苏栽培品白花蛇舌草药材中有害重金属砷(As)、镉(Cd)、铅(Pb)、汞(Hg)的含量，建立白花蛇舌草重金属的含量检测方法，为从源头上控制中药白花蛇舌草的质量提供科学依据。
方法一次性微波消解法，氢化物发生原子荧光法。
结果江苏5个产地栽培品白花蛇舌草As、cd、Pb、Hg的RSD<3．0％，加样回收率分别为95，1％、99．2％、106．8％、91．4％，均在90．0％～110．0％的范围内。
结论本法操作简便，灵敏度高，重复性好，适用于中药材有害重金属的含量检测。
白花蛇舌草中总黄酮的分离提取及含量测定
白花蛇舌草中总黄酮的分离提取及含量测定一实验背景白花蛇舌草(oldenland is diffusa willd)原茜草科耳草属植物，广泛分布于我国长江以南地区，含有丰富的黄酮、多酚、有机锗、熊果酸、齐墩果酸、多糖等化合物。
民间常用此草药内服治疗小儿疳疾、毒蛇咬伤、咽喉炎、结肠炎、肝炎、肿瘤等，外用治疗疮疖肿毒等症。
现代药理学研究表明其具有抗炎、抗菌、增强免疫功能、抗肿瘤的作用。
白花蛇舌草总黄酮(total flavones of oldenlendia diffusa willd FOD)是从白花蛇舌草中提取的有效部位，总黄酮含量达56％[1-3]。
二实验目的①认识白花蛇舌草中的总黄酮的化学结构与性质，了解白花蛇舌草中活性成分的应用；②设计、优化分离、提取白花蛇舌草中的总黄酮的实验方案；③选择合适的化学或仪器分析方法测定白花蛇舌草中总黄酮的含量。
三实验原理总黄酮是指黄酮类化合物，泛指两个苯环通过中央三碳链连接的一系列化合物，是一大类天然产物，总结构式为：如2-苯基色原酮：。
有交叉共轭体系存在的大都显色，如二氢黄酮醇无色，而黄酮醇显灰黄-黄色。
助色团的引入会使颜色加深，尤其是7，4’引入助色团对颜色的影响较大。
总黄酮多为结晶型固体，少为无定型粉末。
黄酮苷元多难溶于水，易溶于有机溶剂（甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚）和稀碱液；黄酮苷类可溶于热水、甲醇、乙醇、稀碱液，难溶于亲酯性有机溶剂。
黄酮类化合物的酸性来自于酚羟基，其中7，4’位羟基的酸性较为显著。
黄酮类化合物在紫外光谱图上有两个吸收带：环肉桂酰系统引起的吸收带( 300-550nm)和环苯酰系统引起的吸收带(240-280nm)。
若加人铝盐，则铝离子与黄酮化合物形成稳定的配合物，吸收带会明显向长波方向移动(红移)，而且强度相应增加。
故，可采用紫外-可见分光光度法进行含量测定。
四主要仪器与试剂1.仪器粉碎机，4号筛，天平，恒温干燥箱，色谱柱，紫外-可见分光光度计，250mL锥形瓶，10mL容量瓶，离心机，电炉，冷凝管，水浴锅等。
差示分光光度法测定白花蛇舌草注射液中总黄酮的含量
差示分光光度法测定白花蛇舌草注射液中总黄酮的含量
彭燕;王本富;苗爱东;陈九宫
【期刊名称】《新疆中医药》
【年(卷),期】2007(25)4
【摘要】目的:分析测定白花蛇舌草注射液中总黄酮的含量.方法:采用差示分光光度法,不经分离,可直接测定无干扰.结果:线性范围2～20 μg·mL-1,回归方程
△A=0.0375C-0.0067,r=0.9998,平均回收率和RSD分别为100.54%和1.38%.结论:本法快速、简便、准确,适用于该制剂的质量控制.
【总页数】2页(P77-78)
【作者】彭燕;王本富;苗爱东;陈九宫
【作者单位】中国人民解放军第474医院,新疆,乌鲁木齐,830011;中国人民解放军第474医院,新疆,乌鲁木齐,830011;北京军区联勤部药品仪器检验所,北京,100071;中国人民解放军第474医院,新疆,乌鲁木齐,830011
【正文语种】中文
【中图分类】R2
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1.差示分光光度法测定猫爪草中总黄酮的含量
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差示分光光度法测定白花蛇舌草注射液中总黄酮的含量
参考文献
效 成份 ， 所以 ， 我们选择丹 酚酸 Ｂ作为贞芪通络胶 囊及丹参药材的质量控制依据之一 。丹酚酸 Ｂ结
构 中含 多个 羟 基 和羧 基 ， 极性 较 大 ， 在采 用 《 中国药 典 ） ０５年版 一 部丹 参 药 材 鉴别 条件 的试 验 中 ， ） ０ ２ 经 多次 试 验 ， 发 现 其 斑 点 拖 尾 严 重 ， 均 与其 他 斑 点 难
摘
要 目的： 分析测定 白花蛇舌草注 射液 中总黄酮的含量。方法 ： 采用差示分光光度 法， 不经分离 ， 可直接
测定 无干扰。结果 ： 线性范围 ２ ２ ｐ ・ Ｌ 回归方￣ＡＡ ０ ３ ５ 一 ． ６ ，＝ ． ９ ， ￣０ ， ｍ － ｇ ， ＝ ． ７ Ｃ ０ ０ ７ １０ ９ ８ 平均 回收率和 Ｒ Ｄ分别为 ０ ０ ＂ ９ － Ｓ １０５ ％和 １ ８ ０． ４ ． ％。结论 ： ３ 本法快速、 简便、 准确 ， 用于该制剂的质量控制。 适 关键词 差 示分光光度法 ； 白花蛇舌草注射 液； 总黄酮； 含量测定
维普资讯
新疆 中医药
２０ ０ ７年 第 ２ ５卷 第 ４期（ 总第 ｌ０期 ） ｌ
７ ７
差示分光光度法测定 白花蛇舌草注射液中总黄酮的含量
彭 燕 ， 王本 富 ， 爱东 ， 苗 陈九宫
（． １中国人 民解放军第 ４４医院， ７ 新疆 乌鲁木齐 ８０ １ ；． ３０１２ 北京军 区联勤部药 品仪器检验所 ， 北京 １０ ７ ） ０ ０ １
【 中华人 民共和 国药典 （ 部） 】 １ 】 一 【． ｓ 北京 ： 学工业 出版 社 ，０ ０ 化 ２０ ：
２ ９． ４
【 葛勤 ， 大锭， ２ 】 徐 蒋雪 勤． 心脉神 口服液 中黄芪 甲苷含量 的测 定田．
白花蛇舌草黄酮提取工艺研究进展
第１４期 收稿日期：２０２０－０５－１０基金项目：贵州省高层次人才创新型人才培养项目（２０１７－（２０１５）－０１０）；贵州省高层次人才创新型人才培养项目（２０１７－（２０１５）－０１１）；铜仁职业技术学院科研团队建设项目（铜职院发［２０１７］７５号）；铜仁职业技术学院ＳＲＴ项目（铜职院办发［２０１９］１２号）作者简介：宁 娜（１９８４—），女（壮族），广西南丹人，教授，博士，主要从事药用资源开发及利用。
白花蛇舌草黄酮提取工艺研究进展宁 娜１，２，３，韩建军１，郁建生１，２，３（１．铜仁职业技术学院药学院，贵州铜仁 ５５４３００；２．民族中兽药分离纯化技术国家地方联合工程研究中心，贵州铜仁 ５５４３００；３．铜仁职业技术学院中兽药国家民委重点开放实验室，贵州铜仁 ５５４３００）摘要：白花蛇舌草含有黄酮、多糖和蒽醌类成分，其中黄酮类类成分含量较高，具有广泛的药理活性。
白花蛇舌草多糖具有抗癌、抗炎、抗氧化等多种活性。
本文对白花蛇舌草黄酮的提取技术进行了综述，为白花蛇舌草的进一步开发利提供依据。
关键词：白花蛇舌草；黄酮；提取工艺；进展中图分类号：ＴＱ４６０．７；Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０２０）１４－００４９－０２ＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＦｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＨｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｆｕｓａＮｉｎｇＮａ１，２，３，ＨａｎＪｉａｎｊｕｎ１，ＹｕＪｉａｎｓｈｅｎｇ１，２，３（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＴｏｎｇｒｅｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌａｎｄＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｔｏｎｇｒｅｎ ５５４３００，Ｃｈｉｎａ；２．ＮａｔｉｏｎａｌａｎｄＬｏｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｒｅｆｏｒＳｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎＥｔｈｎｉｃＣｈｉｎｅｓｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＨｅｒｂｓ，Ｔｏｎｇｒｅｎ ５５４３００，Ｃｈｉｎａ；３．ＫｅｙＯｐｅｎＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＴｏｎｇｒｅｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌａｎｄＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｔｏｎｇｒｅｎ ５５４３００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｈｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｆｕｓａｉｓｒｉｃｈｉｎａｖａｒｉｅｔｙｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓ，ｅｔｃ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｓｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｓｈｉｇｈｅｒ，ｗｈｉｃｈｈａｓｗｉｄｅｌｙｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙ．ＴｈｉｓｐａｐｅｒｒｅｖｉｅｗｅｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＨｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｆｕｓａ，ｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｄｔｈｅｂａｓｉｓｆｏｒｂｅｔｔｅｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＨｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｆｕｓａ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｈｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｆｕｓａ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｐｒｏｇｒｅｓｓ 白花蛇舌草为茜草科耳草属植物白花蛇舌草ＨｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｆｕｓａＷｉｌｌｄ．的干燥全草，具有清热解毒、消肿止痛的功效［１］。
白花蛇舌草中黄酮提取工艺的优化及其结构鉴定
白花蛇舌草中黄酮提取工艺的优化及其结构鉴定张彩霞;蔡定建;方文英【摘要】[目的]采用微波辅助提取白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)中的黄酮类化合物,并优化其提取工艺,对提取物的化学结构进行鉴定,为白花蛇舌草药用价值的进一步开发提供参考.[方法]用正交试验优化白花蛇舌草黄酮类化合物的最佳提取工艺条件,通过紫外光谱、红外光谱等对提取物的化学结构进行表征.[结果]影响黄酮提取率的因素主次顺序为:提取温度＞乙醇浓度＞提取时间＞料液比;最佳提取工艺为:乙醇浓度为80%,提取时间为40 min,料液比为1∶40,提取温度为80 ℃,在此条件下白花蛇舌草中黄酮的提取率达2.86%.白花蛇舌草的黄酮类化合物主要成分为黄酮醇类.[结论]该研究为白花蛇舌草药用价值的进一步开发提供了参考.%[ Objective ] To optimize the extraction process of flavonoids from Hedyotis diffusa and identify its structure, so as to provide reference for the further development of the medicinal value of Hedyotis diffusa. [ Method] By employing single factor test and orthogonal test, the extraction process of flavonoids from Hedyoti. diffusa was opitimized. Its chemical structure was identified by UV and IR analysis. [ Result]The influencing order of each factor on the yield of flavonoids was determined to be extraction temperature > concentration of ethanol > extraction duration > solid to liquid ratio, and the optimal extraction conditions were as follows:80％ of ethanol concentration, 40 min of extraction duration, 1: 40 of solid to liquid ratio and 80 ℃ of extraction temperature. The yield of flavonoids from Hedyotis diffusa was up to 2. 86％ under the optimum extraction conditions. The flavonoids from Hedyotis diffusa were rich in tlavonol.[ Conclusion] The study provides reference for the further development of the medicinal value of Hedyotis diffusa.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)001【总页数】4页(P131-133,136)【关键词】白花蛇舌草;黄酮;微波提取;正交试验【作者】张彩霞;蔡定建;方文英【作者单位】江西理工大学材料与化学工程学院,江西赣州,341000;江西理工大学材料与化学工程学院,江西赣州,341000;江西理工大学材料与化学工程学院,江西赣州,341000【正文语种】中文【中图分类】S567黄酮类化合物是一类在植物中分布很广而且重要的多酚类天然产物，具有抗氧化、抗肿瘤、消炎及免疫调节、抗病毒等生物活性［1］，因此，黄酮的提取与活性研究成为当前生命科学研究的热点。
豫产白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮的含量测定
豫产白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮的含量测定刘毅; 叶颖晓; 刘元; 文春南; 赵作威; 麻兵继【期刊名称】《《德州学院学报》》【年(卷),期】2019(035)006【总页数】5页(P25-29)【关键词】白花蛇舌草; 总蒽醌; 总黄酮; 比色法【作者】刘毅; 叶颖晓; 刘元; 文春南; 赵作威; 麻兵继【作者单位】安庆医药高等专科学校安徽安庆 246052; 河南农业大学中药材系郑州 450002【正文语种】中文【中图分类】R2841 引言白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd.）为茜草科耳草属的植物，味苦、淡、性寒，具有清热解毒、利尿消肿、活血止痛、保肝利胆等功效，临床上用于治疗消化系统癌症如食道癌、直肠癌[1，2]，肝癌[3]、胃癌、肺癌[4]、淋巴癌、宫颈癌以及各种炎症，为恶性肿瘤治疗最常用的中药材之一. 近年来，河南省驻马店确山、汝南等地逐渐形成国内最大的人工栽培区域，年产可达5000 t，系河南大宗药材之一，约占全国产量的二分之一. 现代研究表明白花蛇舌草主要化学成分有蒽醌类、黄酮类、萜类、甾醇类等[5，6].其中白花蛇舌草总黄酮提取物是抑菌杀菌的有效成分，对肝损伤也有明显的保护作用[7]，还可调节与肝癌的发生、发展密切相关的部分过表达的基因恢复至正常水平，发挥抗肝癌作用[8，9]. 蒽醌类成分对卵巢癌细胞株具有体外抑制及诱导凋亡作用[10]，一些羟基蒽醌还有很好的抗氧化活性[11].虽然白花蛇舌草为常用的中医临床用药，临床上多数治疗癌症的处方中都含有白花蛇舌草，但目前该药材的活性成分和药理活性研究尚不够充分，且药典也没有针对性的质量控制标准. 鉴于河南产白花蛇舌草的活性物质含量和药材质量缺乏研究，本文采用比色法首次测定了河南产的白花蛇舌草中总蒽醌和总黄酮的含量，以期为评价该地区人工栽培白花蛇舌草药材的内在质量提供科学依据.2 材料与方法2.1 材料与仪器白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd.）为河南省驻马店确山县白花蛇舌草基地采摘，经河南农业大学中药材系文春南老师鉴定为白花蛇舌草；对照品大黄素（上海融禾医药科技有限公司，批号：150311）、槲皮素（Solarbio试剂公司，编号为：IQ0010），无水乙醇为分析纯，水为纯净水.UV1901PCS双光束紫外可见分光光度计（上海佑科仪器仪表有限公司）；万分之一精密电子天平FA1204N（上海菁海仪器有限公司）；KQ-5200DE型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；RE-52AA旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；BioTek Epoch全波长酶标仪.2.2 对照品溶液的制备精密称取大黄素标品 0.0050 g用无水乙醇定容至 50 mL，取 10 mL定容至 100 mL，浓度为 0.01 mg/mL；精密称取槲皮素标品 0.0100 g，超声溶解后，用无水乙醇定容至 100 mL，浓度为 0.1 mg/mL，备用.2.3 供试品溶液的制备将白花蛇舌草药材粉碎，置60℃ 干燥至恒重，过 60 目筛，精密称取 4 份 2.0 g 白花蛇舌草粉末，分别加入 50 mL的 70%乙醇，80%乙醇，90% 乙醇，无水乙醇，超声提取 3 次，每次 30 min，抽滤后将滤液旋干，定容至 20 mL，微孔滤膜滤过，备用.3 结果与分析3.1 最大吸收波长的确定取出对照品溶液稀释至合适浓度，用紫外可见分光光度计进行全波长扫描，以无水乙醇做空白对照，扫描结果如图1示.图1 标准品扫描紫外可见光谱图1 空白扫描 2 大黄素标准品扫描 3 槲皮素标准品扫描用酶标仪筛选出最适的吸收波长，大黄素标品在 441 nm处有最大吸收波长，槲皮素标品在 365 nm下有最大吸收波长，故分别选择 441 nm作为总蒽醌的吸收波长，365 nm作为总黄酮的吸收波长.3.2 白花蛇舌草中总蒽醌含量的测定1）标准曲线的绘制分别取大黄素标准液 0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL至 10 mL容量瓶，以无水乙醇定容至 10 mL，摇匀，静置. 在 441 nm处测定吸光度值，以浓度为横坐标，绘制标准曲线图（见图2），得到线性回归方程为y=41.929x-0.0003，R2=0.9995.图2 大黄素标准曲线2）精密度试验精确移取标准品大黄素溶液和 4 组供试品溶液1 mL（5 个平行样），至 10 mL 容量瓶，以无水乙醇定容至 10 mL，摇匀，静置，在 441 nm处测定吸光度值结果如表1所示. 分析结果可知，标准品溶液与样品溶液RSD值均在 1.15%以下，说明精密度良好.3）稳定性试验精确移取标准品大黄素溶液和 4 组供试品溶液1 mL，同（3.2.2精密度试验）操作方法相同，在 0，15，30，45，60，75，90 min分别测定吸光值，计算RSD 值，结果如表 2 所示，分析可得结果，RSD值均在 1.59%以下，标准品与供试品在 90 min内稳定性良好.表1 精密度试验结果项目平均值 RSD（%）标准品吸光值 0.084 0.084 0.085 0.085 0.085 0.084 0.56 70%无水乙醇提取 0.279 0.280 0.278 0.277 0.284 0.280 0.97 80%无水乙醇提取 0.328 0.319 0.320 0.325 0.323 0.323 1.14 90%无水乙醇提取 0.350 0.361 0.354 0.355 0.360 0.356 1.27无水乙醇提取 0.287 0.286 0.280 0.281 0.281 0.283 1.15样品号1 2 3 4 5表2 稳定性试验结果项目15 30 45 60 75 90 平均值 RSD（%）标准品吸光值0.084 0.084 0.084 0.085 0.085 0.085 0.086 0.085 0.81 70%无水乙醇提取0.280 0.284 0.290 0.277 0.279 0.281 0.278 0.281 1.59 80%无水乙醇提取0.319 0.328 0.328 0.325 0.323 0.323 0.323 0.324 0.98 90%无水乙醇提取0.350 0.361 0.354 0.355 0.360 0.356 0.361 0.357 1.16无水乙醇提取 0.275 0.285 0.285 0.287 0.279 0.287 0.278 0.282 1.72时间（min）04）加样回收率试验精确移取 4 组供试品溶液 1mL（3 个平行样），分别加入大黄素标准品溶液 1 mL、2 mL、3 mL至 10 mL容量瓶，同（3.2.2精密度试验）操作方法相同，并计算回收率，结果见表3. 四个样的平均回收率均在 99% 以上，RSD值最大不超过 1.6%，说明测定结果比较准确.5）样品中蒽醌含量测定精确移取 4 组供试品溶液各 1 mL（3 个平行样），至 10 mL容量瓶，同（3.2.2精密度试验）操作方法相同，计算样品中蒽醌的含量，结果见表 4，以90% 乙醇提取的蒽醌含量最高，为 0.86 mg/g，其次为 80% 乙醇提取的样品.表3 加样回收率测定试验结果样品号标准品加入量（mg）样品蒽醌量（mg）（mg）回收率（%）平均回收率（%）测得量RSD（%）1 0.010 0.06780.0778 99.60 70%乙醇提取20.020 0.0678 0.0875 98.60 3 0.030 0.06780.0983 101.74 99.98 1.60 80%乙醇提取90%乙醇提取1 0.010 0.0783 0.0882 98.93 2 0.020 0.0783 0.0982 99.40 3 0.030 0.0783 0.1083 100.12 1 0.0100.0862 0.0961 99.80 2 0.020 0.0862 0.1059 98.66 3 0.030 0.0862 0.1164 100.71 99.48 0.60 99.73 1.03 1 0.010 0.0685 0.0786 101.17无水乙醇提取20.020 0.0685 0.0882 98.33 3 0.030 0.0685 0.0984 99.65 99.72 1.43表4 总蒽醌含量的测定结果样品吸光度蒽醌含量（mg/mL）平均含量（mg/mL）0.282 0.673 70%乙醇提取0.284 0.678 0.284 0.678 0.68 0.328 0.783 80%乙醇提取0.326 0.778 0.327 0.781 0.78 0.359 0.857 90%乙醇提取0.361 0.8620.360 0.859 0.86 0.287 0.685无水乙醇提取0.281 0.671 0.285 0.680 0.683.3 白花蛇舌草中总黄酮含量的测定1）标准曲线的绘制分别取槲皮素标准液 0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL至 10 mL容量瓶，以无水乙醇定容至 10 mL，摇匀，静置. 在 365 nm处测定吸光度值，以浓度为横坐标，绘制标准曲线图（见图3），得到线性回归方程为y=69.336x-0.0154，R2=0.9997.图3 槲皮素标准曲线2）精密度试验精确移取标准品槲皮素溶液 1 mL（5 个平行样），至 10 mL容量瓶，以无水乙醇定容至 10 mL，摇匀，静置，在 365 nm处测定吸光度值，结果如表5所示. 分析结果可知，标准品槲皮素溶液与样品溶液RSD值均在 1.07% 以下，显示精密度良好.表5 精密度试验结果平均值 RSD（%）标准品吸光值 0.730 0.731 0.730 0.730 0.732 0.731 0.12 70%无水乙醇提取 0.626 0.634 0.633 0.630 0.634 0.631 0.54 80%无水乙醇提取 0.760 0.763 0.762 0.760 0.753 0.760 0.51 90%无水乙醇提取 0.830 0.845 0.831 0.841 0.835 0.836 0.77无水乙醇提取 0.563 0.551 0.549 0.558 0.560 0.556 1.07项目样品号1 2 3 4 53）稳定性试验精确移取标准品溶液和 4 组供试品溶液 1 mL，同2.3.2操作方法相同，在0，15，30，45，60，75，90 min分别测定吸光值，计算RSD值，结果如表6所示.分析可得结果，RSD值均在 1.39% 以下，标准品槲皮素与供试品在 90 min内稳定性良好.4）加样回收率试验精确移取 4 组供试品溶液 1mL（3 个平行样），分别加入槲皮素标准品溶液1 mL、2 mL、3 mL至10 mL容量瓶，同（3.2.2精密度试验）操作方法相同，并计算回收率，结果见表 7. 分析可知，平均回收率均在 99% 以上，RSD值均低于 1.25%，说明测定结果比较准确.5）样品中黄酮含量测定精确移取 4 组供试品溶液各 1 mL（3个平行样），至 10 mL容量瓶，同（3.2.2精密度试验）操作方法相同，计算样品中总黄酮的含量，结果见表8，以90% 乙醇提取的总黄酮含量最高，为 1.19 mg/g，其次为 80% 乙醇提取的样品.表6 稳定性试验结果15 30 45 60 75 90 平均值 RSD（%）标准品吸光值 0.731 0.730 0.728 0.734 0.721 0.730 0.732 0.729 0.57 70%无水乙醇提取 0.6260.628 0.629 0.631 0.626 0.635 0.634 0.630 0.58 80%无水乙醇提取 0.7500.742 0.751 0.753 0.735 0.743 0.760 0.748 1.11 90%无水乙醇提取 0.8120.842 0.840 0.842 0.845 0.845 0.840 0.838 1.39无水乙醇提取 0.550 0.5580.551 0.563 0.560 0.563 0.546 0.556 1.23项目时间（min）0表7 加样回收率测定试验结果样品号标准品加入量（mg）样品黄酮量（mg）测得量（mg）回收率（%）平均回收率（%） RSD（%）1 0.10 0.0881 0.1871 99.00 70%乙醇提取20.20 0.0881 0.2879 99.93 3 0.30 0.0881 0.3903 100.76 99.90 0.88 1 0.10 0.1022 0.2035 101.27 80%乙醇提取20.20 0.1022 0.3015 99.66 3 0.30 0.1022 0.3986 98.80 99.91 1.25 1 0.10 0.1196 0.2201 100.46 90%乙醇提取20.20 0.1196 0.3200 100.16 3 0.30 0.1196 0.4159 98.77 99.80 0.91 1 0.10 0.0790 0.1798 100.83无水乙醇提取20.20 0.0790 0.2804 100.69 3 0.30 0.0790 0.3769 99.32 100.28 0.83表8 总黄酮含量的测定结果0.631 0.888 70%乙醇提取0.634 0.892 0.633 0.891 0.89 0.766 1.083 80%乙醇提取0.761 1.075 0.764 1.080 1.08 0.841 1.191 90%乙醇提取0.840 1.189 0.845 1.196 1.19 0.551 0.772无水乙醇提取0.548 0.768 0.548 0.768 0.774 讨论实验结果表明，在相同条件下超声提取 3 次，每次 30 min，以 90% 乙醇提取的白花蛇舌草总蒽醌和总黄酮含量最高，总蒽醌含量达 0.86 mg/g，总黄酮含量为1.19 mg/g，均优于 70% 乙醇、80%乙醇和无水乙醇提取的样品. 白花蛇舌草总蒽醌的提取用70% 乙醇和无水乙醇提取效果相当，为 0.68 mg/g，但含量均低于90% 乙醇的提取效率. 在总黄酮的提取实验中，70%、80%、90% 乙醇依次提取的提取效率呈递增趋势，但以无水乙醇的提取效果最差（0.77 mg/g），比 90% 乙醇提取的总黄酮的含量低了不少.另外，河南地区栽培的白花蛇舌草与刘志刚等[12] 测定的广西、江西地区生产的白花蛇舌草总黄酮相比含量略高. 李贺敏[13]等人研究表明，河南所产白花蛇舌草全草中多糖和氨基酸含量较高，其中总多糖最高达 140 mg/g，总氨基酸最高达约160 mg/g，表明河南地区栽培的白花蛇舌草活性成分含量相对较高，因而药材质量相对较好.一般来说，中药材的品质除了药材自身遗传基因外，还与其生长环境和栽培、管理方式等密切相关. 近年来由于白花蛇舌草市场需求量大引发国内很多地区盲目人工引种，加之没有具体的标准化栽培操作规范，导致药材的品质参差不齐. 本研究结果不仅可为河南地区人工栽培的白花蛇舌草药材质量检测提供依据，也可为白花蛇舌草今后在工业化提取工艺上的优化提供参考.参考文献：【相关文献】[1] 纪宝玉，范崇庆，裴莉昕，等．白花蛇舌草的化学成分及药理作用研究进展[J]．中国实验方剂学杂志，2014，20（19）：235-240．[2] 钟立敏，周宏霞，刘丹．白花蛇舌草的药理和临床应用进展[J]．中医药信息，2001，18（4）：14-15．[3] 陶文琪．白花蛇舌草汤内服外敷治疗肝癌[J]．中医杂志，2007，48（8）： 723．[4] 陈丽萍．白花蛇舌草提取液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的实验研究[D]．江西医学院，2005．[5] 代龙，杨培民，魏永利．中药白花蛇舌草研究进展[J]．现代中药研究与实践，2009，23（1）：75-79．[6] 黄建荣，刘咏海，喻志标，等．白花蛇舌草化学成分和药理活性研究进展[J]．中成药，2005，27（11）：1329-1331．[7] 郑岳，徐梅梅，孙伟，等．白花蛇舌草粗黄酮对小鼠肝损伤保护作用的研究[J]．重庆医学，2016，45（24）：3340-3342．[8] 张硕，宋衍芹，周三，等．白花蛇舌草总黄酮抑制人肝癌细胞的靶基因调控[J]．世界华人消化杂志，2007，15（10）：1060-1066．[9] 张硕，王宏韬，石振艳，等．应用基因芯片技术研究白花蛇舌草豆甾醇抑制人肝癌细胞体外生长的靶基因调控[J]．现代生物医学进展，2007，8（11）：1181-1183．[10] 万小旭，张行，王佳贺．白花蛇舌草的有效成分2-羟基-3-甲基蒽醌通过Fas/FasL信号通路诱导卵巢癌细胞凋亡[J]．实用药物与临床，2015，18（12）：1405-1409．[11] 于新，杜志坚，陈悦娇，等．白花蛇舌草提取物抗氧化作用的研究[J]．食品与发酵工业，2002，28（3）：10-13．[12] 刘志刚，颜仁梁，罗佳波．不同产地白花蛇舌草总黄酮含量比较[J]．中国中医药科技，2009，16（5）：382-383．[13] 李贺敏．白花蛇舌草药材质量管理研究[D]．河南农业大学，2007．。
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白花蛇舌草中总黄酮的分离提取及含量测定
一实验背景
白花蛇舌草(oldenland is diffusa willd)原茜草科耳草属植物，广泛分布于我国长江以南地区，含有丰富的黄酮、多酚、有机锗、熊果酸、齐墩果酸、多糖等化合物。
民间常用此草药内服治疗小儿疳疾、毒蛇咬伤、咽喉炎、结肠炎、肝炎、肿瘤等，外用治疗疮疖肿毒等症。
现代药理学研究表明其具有抗炎、抗菌、增强免疫功能、抗肿瘤的作用。
白花蛇舌草总黄酮(total flavones of oldenlendia diffusa willd FOD)是从白花蛇舌草中提取的有效部位，总黄酮含量达56％[1-3]。
二实验目的
①认识白花蛇舌草中的总黄酮的化学结构与性质，了解白花蛇舌草中活性成分的应用；
②设计、优化分离、提取白花蛇舌草中的总黄酮的实验方案；
③选择合适的化学或仪器分析方法测定白花蛇舌草中总黄酮的含量。
三实验原理
总黄酮是指黄酮类化合物，泛指两个苯环通过中央三碳链连接的一系列化合物，是一大
类天然产物，总结构式为：如2-苯基色原酮：。
有交叉共轭体系存在的大都显色，如二氢黄酮醇无色，而黄酮醇
显灰黄-黄色。
助色团的引入会使颜色加深，尤其是7，4’引入助色团对颜色的影响较大。
总黄酮多为结晶型固体，少为无定型粉末。
黄酮苷元多难溶于水，易溶于有机溶剂（甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚）和稀碱液；黄酮苷类可溶于热水、甲醇、乙醇、稀碱液，难溶于亲酯性有机溶剂。
黄酮类化合物的酸性来自于酚羟基，其中7，4’位羟基的酸性较为显著。
黄酮类化合物在紫外光谱图上有两个吸收带：环肉桂酰系统引起的吸收带( 300-550nm)和环苯酰系统引起的吸收带(240-280nm)。
若加人铝盐，则铝离子与黄酮化合物形成稳定的配合物，吸收带会明显向长波方向移动(红移)，而且强度相应增加。
故，可采用紫外-可见分光光度法进行含量测定。
四主要仪器与试剂
1.仪器
粉碎机，4号筛，天平，恒温干燥箱，色谱柱，紫外-可见分光光度计，250mL锥形瓶，10mL容量瓶，离心机，电炉，冷凝管，水浴锅等。
2.试剂
白花蛇舌草（干燥），聚酰胺树脂，芦丁标准液，无水乙醇，蒸馏水，1％三氯化铝溶液等。
五实验步骤
1.白花蛇舌草总黄酮的提取
将干燥的白花蛇舌草用中药粉碎机磨成粉末，过4号筛（即65目筛，250±9.9um），称取粉末25 g，于恒温干燥箱60℃干燥至恒重。
置于250mL锥形瓶中，加入95％乙醇50mL，置于水浴中加热回流4小时。
过滤，将滤液浓缩至大约25mL，得到白花蛇舌草浸膏，置于冰箱备用[4-5]。
2.聚酰胺树脂柱分离总黄酮
加入适量蒸馏水，充分搅拌，于冰箱放置过夜。
次日离心，收集上清液，加入到聚酰胺树脂柱中，调节流速5mL/min，用蒸馏水洗去杂质，以80％乙醇为流动相解吸附，回收乙醇，得到总黄酮提取物，浓缩至膏状[6]。
3.总黄酮含量测定
选择410nm为测定波长，以芦丁作标准液[4]，用标准曲线法测定含量。
①标准曲线的绘制
分别取芦丁标准液0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0mL于10mL容量瓶，加入4mL三氯化铝溶液，然后用95％乙醇定溶，摇匀，静置15min。
在410nm处测定吸光度值，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线图，得到线性回归方程。
②总黄酮溶液吸光度的测定
取三个10mL容量瓶，分别加入1mL上述产品，加入4mL三氯化铝溶液，用95％乙醇定容，摇匀，静置15min。
在410nm处测定吸光度，取三组平均值，代入线性回归方程，得到黄酮类化合物浓度。
计算含量，产率。
参考文献
[1]江苏省药品监督管理局.江苏省中药饮片炮制规范[S].江苏:江苏科学技术出版社.2002: 238.
[2]于新,杜志坚,陈悦娇等.白花蛇舌草提取物抗氧化作用的研究[J].食品与发酵工业.2002,28(3):10-2.
[3]王宇翎,张艳,方明.等.白花蛇舌草总黄酮的抗炎及抗菌作用[J].中国药理学通报.2005,21(3):348-350.
[4]杨悠,许军,刘燕华,熊俭.比色法测定白花蛇舌草中总黄酮含量的研究[J].中华中医药学刊,2011(2):313-316.
[5]吴杨,周忆新,吴银生.白花蛇舌草总黄酮的提取以及体外对肝癌细胞的作用[J].抗感染药学,2008,5(3):150-152.
[6]毛杏飞,罗佳波.白花蛇舌草中总黄酮提取分离工艺的研究[J].中药材.2002,7:499-502.。