【开题报告】酶解法提取牛皮胶原蛋白的条件优化
牛肌腱胶原的提取及生物相容性的研究的开题报告
牛肌腱胶原的提取及生物相容性的研究的开题报告一、研究背景及意义胶原蛋白是一种重要的结缔组织蛋白质，存在于人类和动物的结缔组织中，具有广泛的生物学功能和药理学应用价值。
主要由氨基酸组成，其中三个氨基酸占据了其85%以上的结构，因此其具有三螺旋结构和交联网状结构。
牛肌腱是牛肉的重要部分，其含有较高的胶原蛋白，因此牛肌腱是胶原蛋白的一种重要来源。
目前，人工合成的胶原蛋白具有很强的生物相容性和组织相容性，但存在一定的局限性。
因此，从天然来源获取胶原蛋白具有广阔的应用前景。
牛肌腱胶原的提取及生物相容性的研究，不仅有助于深入了解胶原蛋白的特性和结构，还可为其在医疗和化妆品上的应用提供重要的科学依据。
二、研究内容1. 牛肌腱胶原的提取方法：通过比较不同的提取方法，确定牛肌腱胶原的最佳提取方案。
2. 牛肌腱胶原的理化特性分析：对提取到的牛肌腱胶原进行理化特性测试，包括分子量、吸收光谱、电泳等。
3. 生物相容性的研究：采用体外细胞培养等方法，探究牛肌腱胶原在人类细胞中的生物相容性、毒性等参数。
三、研究方法1. 提取方法：常规浸泡离子交换等方法提取牛肌腱胶原。
2. 理化特性测试：利用紫外吸收光谱、电泳、分子量测定等方法，对提取到的牛肌腱胶原进行理化特性测试。
3. 生物相容性评价：采用体外细胞培养和形态学等方法评估牛肌腱胶原在细胞中的生物相容性和毒性。
四、预期成果1. 确定牛肌腱胶原的最佳提取方法，获得较高的提取产率。
2. 对提取到的牛肌腱胶原进行理化特性测试，探究其结构和特性。
3. 评估牛肌腱胶原在人类细胞中的生物相容性和毒性，为其在医疗和化妆品上的应用提供科学依据。
五、研究进度计划1. 阶段一（第一至第二个月）：收集文献，了解胶原蛋白的基本知识，确定牛肌腱胶原的提取方法。
2. 阶段二（第三至第四个月）：开展牛肌腱胶原的提取工作，通过比较提取产率等参数确定最佳技术方案。
3. 阶段三（第五至第六个月）：对提取到的牛肌腱胶原进行理化特性测试，并进行数据分析。
酶法提取牛骨胶原蛋白研究
酶法提取牛骨胶原蛋白研究陈静怡;肖厚荣;杨红;张靖华;张佩佩;朱许燕【摘要】以牛骨为原料,采用酶解法提取胶原蛋白,对影响胃蛋白酶酶解过程的诸多因素进行研究;在单因素实验的基础上进行正交优化,得到酶解法提取胶原蛋白的最佳工艺参数.结果表明:最佳酶解条件为脱脂时间6h,脱钙时间6h,加酶量0.50％,pH 1.8,酶解温度38℃,酶解时间8h.在该条件下,牛骨胶原蛋白提取率最高,可以达到25.38％.【期刊名称】《蚌埠学院学报》【年(卷),期】2016(005)006【总页数】5页(P31-35)【关键词】牛骨;胶原蛋白;酶解法;正交设计【作者】陈静怡;肖厚荣;杨红;张靖华;张佩佩;朱许燕【作者单位】合肥学院生物与环境工程系,安徽合肥230601;合肥学院生物与环境工程系,安徽合肥230601;合肥学院生物与环境工程系,安徽合肥230601;安徽华伊美科技企业集团,安徽合肥230088;合肥学院生物与环境工程系,安徽合肥230601;安徽华伊美科技企业集团,安徽合肥230088【正文语种】中文【中图分类】TQ936胶原蛋白是一类蛋白质家族，具有其特殊的三股螺旋结构，已至少发现了30余种胶原蛋白链的编码基因，可以形成16种以上的胶原蛋白分子，根据其结构，可以分为纤维胶原、基膜胶原、微纤维胶原、锚定胶原、六边网状胶原、非纤维胶原、跨膜胶原等。
根据它们在体内的分布和功能特点，可以将胶原分成间质胶原、基底膜胶原和细胞外周胶原。
间质型胶原蛋白分子占整个机体胶原的绝大部分，包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原蛋白分子，Ⅰ型胶原蛋白主要分布于皮肤、肌腱等组织，也是畜产品加工废弃物(皮、骨)含量最多的蛋白质，占全部胶原蛋白含量的80%-90%左右，在医学上的应用最为广泛[1]。
胶原蛋白具有特殊的三股螺旋结构，其生物相容性好，可生物降解，无毒，在医学、生物学、组织工程等方面显示出巨大的潜力。
1976年，胶原蛋白产品在美国通过一系列的审批后被批准上市，调查报告显示，从1993-2000年短短的几年中，全球胶原蛋白年销售额从12亿增加到了40亿。
211126668_超声波辅助酶法提取牛皮胶原蛋白及其结构表征
赵改名，王壮壮，祝超智，等. 超声波辅助酶法提取牛皮胶原蛋白及其结构表征[J]. 食品工业科技，2023，44（9）：190−199. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022070219ZHAO Gaiming, WANG Zhuangzhuang, ZHU Chaozhi, et al. Ultrasound-Assisted Enzymatic Extraction and Structural Characterization of Cowhide Collagen[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(9): 190−199. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022070219· 工艺技术 ·超声波辅助酶法提取牛皮胶原蛋白及其结构表征赵改名1，王壮壮1，祝超智1, *，余小领1，张秋会1，祁兴山2（1.河南农业大学食品科学技术学院，河南郑州 450002；2.恒都综合试验站，河南驻马店 463000）摘 要：以牛皮为原料，优化超声波辅助酶提取牛皮中胶原蛋白的工艺。
在单因素实验的基础上设计响应面试验，以牛皮胶原蛋白提取率为响应值，优化得到胶原蛋白的最佳提取工艺，并对其进行结构表征。
结果表明：牛皮中胶原蛋白的最佳提取工艺条件为超声波功率161 W 、超声波处理时间64 min 、胃蛋白酶添加量109 U/g 、料液比1:16 g/mL ，在此条件下胶原蛋白的提取率为63.77%。
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE ）、紫外光谱（UV ）和傅立叶红外光谱（FTIR ）分析表明，超声波辅助酶提取的胶原蛋白符合Ⅰ型胶原蛋白的特征，保持了其完整的三螺旋结构，氨基酸组成和扫描电镜（SEM ）分析得到超声波辅助酶提取的胶原蛋白三螺旋稳定程度略微下降。
胃蛋白酶水解牛皮胶原成分的动力学研究
胃蛋白酶水解牛皮胶原成分的动力学研究
许亮;周荣清;石碧
【期刊名称】《皮革科学与工程》
【年(卷),期】2006(16)1
【摘要】以牛皮胶原成分为底物，研究了胃蛋白酶用量和温度对胶原成分水解动力学的影响。
实验结果表明，在15～40℃范围内，提高温度有利于水解过程的进行；提高酶用量，也可以促进水解过程。
胃蛋白酶对牛皮胶原成分的水解过程基本符合内切酶限制水解历程，其动力学模型为：C（-NH2）=b^-1，1n[1＋a·b·t]，式中动力学参数“随着实验条件的不同而不同，其与实验条件的关系有待进一步的研究，而动力学参数b为胃蛋白酶住一定条件下水解牛皮胶原成分的水解动力学常数，其值在6．0附近波动。
【总页数】4页(P29-32)
【关键词】酶;胶原;水解;动力学
【作者】许亮;周荣清;石碧
【作者单位】皮革化学与工程教育部重点实验室(四川大学)
【正文语种】中文
【中图分类】TS512
【相关文献】
1.Alcalase
2.4L催化牛骨胶原蛋白水解反应及其动力学研究 [J], 吴晖;王晨;李晓凤;李丽丽;余以刚;唐语谦
2.鳕鱼皮胶原蛋白碱性蛋白酶Properase E控制水解动力学模型 [J], 刘尊英;李八方;曾名勇;张建婷
3.Bacillus cereus胞外胶原蛋白酶水解牛骨胶原蛋白的动力学 [J], 刘丽莉;杨协力;任广跃;段续
4.胃蛋白酶水解草鱼鱼鳞制备胶原肽的工艺优化 [J], 申锋;杨莉莉;熊善柏;赵思明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
【开题报告】牛皮胶原蛋白酶解条件优化
开题报告食品科学与工程牛皮胶原蛋白酶解条件优化一、选题的背景与意义胶原蛋白与胶原多肽的生物功能和药用、保健功能正在逐渐被人们认识，这方面的研究也逐渐成为人们研究的热点。
食品加工业每年产生大量的动物皮和骨等废弃物，其中含有大量胶原蛋白，弃之可惜，又造成环境污染，利用其开发新功能食品、保健品、化妆品、医药品和化工产品等具有广阔的发展前景。
胶原肽是采用先进的定向酶切、变性、干燥、萃取等技术，从胶原中提取得到的产物，胶原肽的平均分子量在1.000Da左右，相对胶原蛋白复杂的三级超螺旋结构，胶原肽的线状结构使其消化吸收率高达80%。
与普通胶原蛋白2.000~3.000Da的分子量相比，胶原肽无需分解即可被人体吸收和利用。
二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：(一)研究的基本内容1.通过单因素实验选择合适的酶2.复合酶的合成3.根据相关资料通过复合酶对胶原蛋白进行酶解4.测量水解度（二）拟解决的主要问题1.解决酶解条件（PH、温度、水解时间、底物浓度、酶用量）对水解度的影响。
2.通过对水解度的测量找到酶解胶原蛋白的最佳条件三、研究的方法与技术路线：1.研究的基本方法（1）酶活力的测定：福林酚试剂（2）单因素试验法：选酶（3）正交试验：酶解条件优化（4）水解度测定：甲醛滴定法2..研究的技术路线酶的选择→酶的复合→酶解→水解度测定→酶解条件优化（PH值、温度、水解时间、底物浓度、酶用量）四、研究的总体安排与进度：1、2010年10月至2011年12月：实验前的准备工作；查阅相关的文献，完成开题报告、任务书及文献综述。
2、2011年1月至2011年4月：实验研究阶段。
(1) 酶制剂的选择和复合(2) 研究不同实验条件对胶原蛋白酶解的影响(3) 水解度的测定（4）酶解条件的优化3、2011年4月至2011年5月：整理实验阶段，并完成毕业论文。
五、主要参考文献：[1] S．R．Fahnestock,A．Steinhiiche1．Biopolymers(8)：Poly amidesand Complex Proteinaceous Materials[M]，2005[2] Piez K A，Eigner E A，Lewis M S．The chromatographicseparation and amino acid composition ofthe subunits ofseveral collagens[J]．Biochemistry．1963，(2)：58—66[3] 蒋挺大，张春萍肢原蛋白[M]．化学工业出版社，2001[4] 菅景颖，张志胜．酶解胶原蛋白研究进展[J]．浙江化工，2007，38(1)：18-20[5] 曹健，李卫林，张磊等．酶解胶原蛋白产物分子量的控制研究[J]食品工业科技，2006，27(8)：85．88[6] 李彦春，祝德义，侯立杰等．酶解胶原蛋白多肽的制备与分析[J]．中国皮革，2004，33(3)：22—26[7] 蒋寅，翟青，郭桦，等．壳聚糖对锌(铁)离子的配位特性及其配合物的应用[J]．现代食品科技，2007，23(9)：89—91[8] 安广杰，徐清萍．Neutrase蛋白酶降解骨胶原蛋白制备水解明胶[J]．食品与机械，2007，5，23(3)：39-40[9]韩风杰，赵征．酶法制取比目鱼皮胶原蛋白寡肽[J]食品研究与开发，2006，27(8)：104．107[10]刘海英，李丁，李双祁等．斑点叉为尾鲴鱼皮明胶水解方法的研究[J]．食品工业科技，2007，28(2)：176-178[11]郑巧东，林东强，姚善泾等．胶原蛋白水解为胶原多肽的动力学研究[J]．中国皮革，2005，34(11)：21—27[12]Bo Li，Feng Chen，Xi Wang，eta1．Isolation and identification of antioxidative peptides from porcine collagen hydrolysate by consecutive chromatography and electrospmy ionizationmass spectrometry[J]．FoodChemistry,2007，(102)：1135—114[13]V．Semrl-Kosmac．A．Gantar,I．Anzur．Modification of collagenhydrolysates[J]．Resources，Conservation and Recycling，1995，(13)：97—104[14] Ruud A．Bank,Marianne Kxikken，B0b Beckman et a1．Asimplefied mesurement of degraded collagen intissues：application in h~ thy ，fibrillated and osteoarthritic cartilage[J]．Matrix Biology,1997，16：233—243[15]S．R．L．Temel,B．K．Simpson．Characterization of thecollagenolytic enzymefraction from winter flounder （ Pseudopl euronectes americanus)[J]．Comp． Biochem．Physio1．1995，lI2B(1)：131-136 [16] Masato Hiyama，Masaaki Shinozuka,Masam Iizuka eta1．Degradation of Gelatin and Collagen by Serine Proteinaseof Aspergillus sydowi[J]．Journal of Fermentation AndBioengineering,1996，81(5)：464-465 [17]Siripom Damrongsakkul，Kongpob Ratanathammapa~Kittinan Komolpis et a1．Enzymatic hydrolysis of rawhideusing papain and neutrase[J]．Journal of Industrial and Engineering Chemistry,2008，(14)：202—206[18] 常虹，李远志，等．菠萝粉干燥特性的研究[J]．现代食品科技，2008，124(1)：5—7[19]曾名勇，李八方，陈胜军等．红非鲫鱼皮胶原蛋白酶解条件的研究[J]．中国海洋药物杂志．2005，24(5)：24-29[20]薛勇，薛长湖，杜世振等．岩藻聚糖硫酸酯寡糖-Ce(IV)配合物水解胶原蛋白的研究[J]_中国海洋大学学报，2006，36(2)：273．276[21]孙爱梅，张贵锋，倪文等．胶原蛋白降解物高效液相色谱／质谱联用分析[J]．中国生物工程杂志．2005，25(2)：66—72[22]陈秀金，曹健，魏明等．碱性蛋白酶水解脱铬革屑制备胶原水解物的研究[J]．中国皮革，2004，33(1)：42-46[23] 李彦春．酶法提取牛皮胶原蛋白．中国皮革，2002，31(23)：6 -10[24] 魏世林，许雯．用537酸性蛋白酶软化处理削匀山羊蓝湿皮的研究．中国皮革，1991，20(20)：12 -18[25]Yoshio Yamakawa，Tamotsu Omori—Sathoa，Dietrich Mebs． Hemorrhagic principles in the enom of Bifs arietans，a viperous snake．II．Enzymatic’，properties with special reference to substrate specificity[J]．Biochimica et Biophysica Acta，1995，(1247)：17-23[26]A．Cristina Sarmento，C1 audia S．Oliveira，Arm S．Duarte et a1．Evaluafon of cardosin A as a probe for limited proteolysisinon—aqueous environments—complex substrates hydrolysis[J]．Enzyme and Microbial Technology,2006，(38)：415-421[27]Eric Dufour,Mich~le Dalgalarrondo，Guy Herv6 et a1．Proteolysis of Type III Collagen by Collagenase and Cathepsin B Under Hi曲Hydrostatic Pressure[J]．Meat Science．1996，42，(3)：261—269。
碱性蛋白酶提取牦牛皮胶原蛋白的工艺研究
碱性蛋白酶提取牦牛皮胶原蛋白的工艺研究
陈渭
【期刊名称】《青海大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2017(035)004
【摘要】为了改变牦牛原料皮传统制革的利用方法,实现其经济效益最大化和利用方式绿色化.文中对牦牛皮的基本组成进行了分析,且通过单因素试验法,并在其基础上设计了正交试验,从效率、资源、能源、经济等方面对碱性蛋白酶提取牦牛皮胶原蛋白的最佳工艺进行了研究.结果表明:牦牛皮中含有丰富的胶原蛋白,占到其干重的74.98%;同时碱性蛋白酶酶解牦牛皮制备胶原蛋白的最佳工艺条件为碱性蛋白酶用量为1.5%、温度36 ℃、液比1∶35和浸提时间12 h.由此可使碱性蛋白酶提取牦牛皮胶原蛋白的提取率达到68.3%.
【总页数】5页(P71-75)
【作者】陈渭
【作者单位】青海师范大学化学化工学院,青海西宁 810016
【正文语种】中文
【中图分类】S879
【相关文献】
1.林蛙皮中胶原蛋白的提取工艺研究 [J], 屈巧凤;姜大成
2.木瓜蛋白酶提取牦牛皮胶原蛋白的工艺研究 [J], 陈渭;陈明月;羊家聪;赵丽娜;张志彭军;孙哲
3.石蛙皮中胶原蛋白提取工艺研究 [J], 蓝松; 查道远
4.响应面法优化牦牛骨胶原蛋白的提取工艺研究 [J], 甘文梅;张炜;田格;辛小丽;王志娟
5.牦牛皮胶原蛋白的提取工艺研究 [J], 孙爱平
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牛骨胶原蛋白酶解工艺优化及结构特性分析
牛骨胶原蛋白酶解工艺优化及结构特性分析刘丽莉;李丹;杨陈柳;孟圆圆;代晓凝【摘要】为研究前期纯化的特异性降解牛骨胶原蛋白的胶原蛋白酶(BSC)对牛骨胶原蛋白的酶解工艺,以水解度为响应值,在单因素试验基础上通过五元二次正交旋转组合试验,确定最佳酶解工艺为:反应温度46℃、牛骨胶原蛋白添加量5.14 g/100 mL、BSC添加量0.42 g/100 mL、反应时间6h、pH 6.5,该工艺条件下水解度为34.98％.采用紫外光谱(UV)、荧光光谱(FS)、傅里叶红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)对牛骨胶原蛋白及其产物进行结构特性分析.通过UV分析表明BSC酶的降解作用破坏了牛骨胶原蛋白的三股螺旋结构,游离出大量的氨基酸;FS分析表明牛骨胶原蛋白分子表面CO、CONH2、COOH逐步增多,胶原蛋白肽中生色基团分布也随之发生变化;FT-IR分析可知牛骨胶原蛋白经降解后的胶原蛋白肽的肽链上-NH2+-排斥作用逐渐减弱,主要以β-转角为主;SEM表明酶破坏了牛骨胶原蛋白的表面分子结构,使其变得疏松.%In this work,the enzymatic hydrolysis of bovine bone collagen was studied by pre-purified bone-specific collagenase (BSC).As evaluated in terms of degree of hydrolysis.The enzymatic hydrolysis process was studied through single factor and quadratic general rotary unitized design experiments.The results showed that the optimum hydrolysis conditions were as follows:reaction temperature 46 ℃,the amount of bovine bone collagen 5.14 g/100 mL,the amount of BSC enzyme 0.42 g/100 mL,reaction time 6 h,pH 6.5.Under these conditions,the degree of hydrolysis value was 34.98％.The structural properties of bovine bone collagen and its hydrolysate were characterized byultraviolet,fluorescence,fourier transform infrared spectroscopy,anddifferential scanning calorimetry.The UV analysis showed that the BSC degradation enzyme damage the bone collagen three helix structure,a large number of free amino acid;FS analysis showed that the collagen molecular surface C-O,CONH2 and COOH gradually increased,collagen peptide chromophore distribution also changes;FT-IR analysis showed that the degradation of collagen from bovine bone collagen peptide after the the pep tide chain of-NH2+-repulsion effect gradually weakened,mainly in the beta angle;SEM showed that the enzyme damaged the surface of bovine collagen molecular structure,and made it loose.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2017(033)007【总页数】7页(P40-46)【关键词】牛骨;胶原蛋白;酶解;结构特性【作者】刘丽莉;李丹;杨陈柳;孟圆圆;代晓凝【作者单位】河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471023;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471023;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471023;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471023;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471023【正文语种】中文近年来，随着人们对肉制品需求的增加，其副产物——动物骨骼的加工利用受到研究学者的广泛关注。
酶法制备牛皮明胶的工艺研究
酶法制备牛皮明胶的工艺研究
刘乃强[1]
【期刊名称】《明胶科学与技术》
【年(卷),期】2018(038)003
【摘要】本文通过实验研究了用中性蛋白酶提取牛皮中明胶的工艺方法,并对工艺参数进行了优化,减少对环境的污染,减少废液的产生,缩短工艺时间。
在本研究中发现在pH=7.3、温度为40℃的环境下对牛皮进行酶解处理,酶解时间为3小时,酶用量为0.03%,提胶的温度为70℃,此条件下明胶的粘度为5.609mPa·s,产率为35.99%,为最优参数条件。
表征了所制明胶的结构。
酶法提取明胶工艺的生产周期短,污染小,具有很好的应用前景。
【总页数】8页(P123-130)
【作者】刘乃强[1]
【作者单位】[1]四川轻化工大学材料科学与工程学院自贡643000
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.21
【相关文献】
1.酶法制备明胶的新工艺研究 [J], 张锋;施辉阳;张鹏
2.酶法生产水解明胶工艺研究 [J], 张立萍
3.罗非鱼鱼皮提取明胶的酶法脱脂工艺研究 [J], 李佳;许永安
4.外切型蛋白酶法制备高档医用骨明胶工艺研究 [J], 张海林;朱友双;张玉然;仇艳
新;吴红;杨志茹
5.酶法制备牛骨明胶的工艺研究 [J], 李伟[1]
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酶法提取蛋壳膜中胶原蛋白的工艺优化
酶法提取蛋壳膜中胶原蛋白的工艺优化
刘林;刘佳
【期刊名称】《江西化工》
【年(卷),期】2024(40)2
【摘要】胶原蛋白具有促进伤口愈合、止血等功能。
目前市场上胶原蛋白的主要
来源是阿胶及各种动物的皮胶等。
用蛋壳膜也可提取胶原蛋白,但相关研究较少。
本研究以废弃蛋壳为原材料,先使用盐酸浸泡使壳膜分离,用氢氧化钠将蛋白质进行
纯化,采用胃蛋白酶酶解-盐析法提取废弃蛋壳膜中的胶原蛋白。
以胃蛋白酶的浓度、溶液pH值、酶解时间、提取温度四个因素为变量进行单因素实验,在此基础上,通
过L9(34)正交实验设计得出最佳的提取工艺条件,用紫外分光光度法测定蛋壳膜中
胶原蛋白的含量。
研究结果表明:酶用量10%、溶液p H值1.7、酶解时间30 h、提取温度40℃,胶原蛋白的提取率是30.41%。
相较有关研究,提取率提高了
0.361%。
【总页数】6页(P58-63)
【作者】刘林;刘佳
【作者单位】阿坝师范学院资源与环境学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS253.9
【相关文献】
1.酶法提取鸡蛋壳膜胶原蛋白工艺
2.响应面法优化酶法提取大鲵皮胶原蛋白工艺
3.响应面法优化蛋壳膜硫酸软骨素提取工艺
4.响应面法优化超声协同胃蛋白酶提取鲣鱼皮胶原蛋白的工艺研究
5.响应面法优化蛋壳膜中硫酸软骨素提取工艺
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胃蛋白酶提取牛皮胶原蛋白的工艺研究
摘要 : 以新鲜牛皮 为原料 , 分析了牛皮的基本组成 ; 采用胃蛋白酶提取牛皮胶原蛋白 , 研究了提取过程 中加酶量、 提取温度、 提取时间和料液比对胶原蛋白提取率的影响 , 得到酸酶结 合法提取 牛皮中胶 原蛋白 的最佳 工艺条 件 为 : 以 0 5 mo l/L 乙酸作提 取剂 , 每 1 g牛 皮加入 30 mL 浸 提液 ( 即料液比 1 30), 胃蛋白 酶加入量 3 000 U /g 牛 皮 , 提取 温度 30 , 提取时 间为 8 h, 在该条件下胶原蛋白的提取率为 61 7 % 。提取的胶原蛋白经 过初步纯化后 进行紫外扫描 , 测得其最大紫外吸收波长为 232 nm, 与 Sig m a标准 ! 型胶原蛋白一致。 关键词 : 牛皮 ; 胶原蛋白 ; 提取 ; 优化 ; 分离技术 中图分类号 : TS251 92 文献标识码 : A 文章编号 : 1003- 5214( 2010) 12- 1187- 05
A bstract : The collagen from cattle skin has been ex tracted by using th e pepsin , and the com posit ion o f cattle sk in w as a lso ana ly zed . E ffects o f enzym e addit io n , te m peratu re and ex tract ion t i m e as w ell as so lid liquor ratio on the extraction effic iency of co llagen w ere investigated in th is paper . The opti m al processing conditions w ere obta in ed by orth ogonal experi m ents as fo llow s: 0 5 m o l/L acetic ac id as extractio n so lv en, t the added pepsin dosage of 3 000 U /g and the ratio o f m ater ia l to liquor 1 30 , extractio n at 30 for 8 h , the recovery y ie ld o f th e co llagens w as 61 7 % . T he m ax i mu m absorpt ion w ave length o f the samp le is 232 nm by UV scan , wh ich is consistent w ith the S igm a produc. t K ey words : cattle skin ; co llagen ; extraction ; opt i m izatio n ; separa tio n techno lo gy 胶原蛋白 ( Co llagen) 是由动物细胞合成的一种 生物性高分子 , 广泛存在于动物骨、 腱、 软骨和皮肤 及其他结缔组织中 , 具有支撑器官、 保护机 体的功 能
酶法提取猪皮胶原的工艺研究的开题报告
酶法提取猪皮胶原的工艺研究的开题报告一、选题背景胶原是一种结构的蛋白质，广泛分布于人、动物组织中，在组织支持、结构维护方面起着重要的作用。
猪皮作为一种常见的动物副产品，其中含有较高浓度的胶原蛋白，可以利用酶法提取猪皮胶原，其提取效率高、成本低，成为当前研究的热点之一。
本项目将对酶法提取猪皮胶原技术进行深入研究，为其工业化生产提供参考。
二、研究目的本项目旨在通过实验研究，探索酶法提取猪皮胶原的最佳提取工艺，分析不同工艺条件对提取效率、成本、产品纯度等指标的影响，为其工业化生产提供技术支撑。
三、研究内容1. 猪皮胶原提取酶的筛选以碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶等为提取酶，对猪皮胶原进行提取，通过对提取液中胶原质量浓度、胶原颗粒大小等指标的测定，筛选出较为适宜的提取酶。
2. 优化提取条件根据实验结果，设计提取酶浓度、提取液pH值、提取温度、提取时间等参数组合，采用正交实验法，优选提取条件，获得最佳提取效果。
3. 产品性质分析对提取得到的猪皮胶原产品进行蛋白质含量、氨基酸组成、颗粒大小等指标的测试和分析，评价产品的质量，为其后续应用提供参考。
四、研究方法1. 猪皮预处理：采用碱处理方法将猪皮去除不必要的杂质，后经水洗净后再进行酶解。
2. 酶解提取：采用不同的提取酶，在一定的反应条件下，将猪皮胶原逐步溶解提取。
3. 提取液清洁：采用沉淀、过滤等方法处理提取液，去除不溶的杂质，得到纯净的猪皮胶原。
4. 产品性质测试：通过蛋白质含量测定、SDS-PAGE电泳、氨基酸组成分析、单光子计数法测颗粒大小等方法，对猪皮胶原产品的性质进行测试。
五、预期成果1. 完成猪皮胶原酶法提取技术的实验研究，提取工艺条件得到优化。
2. 对猪皮胶原的产率、纯度、产品性质等进行测定分析。
3. 研究结果为猪皮胶原的工业化生产提供技术支撑，具有一定的理论价值和现实意义。
六、研究难点及解决途径研究难点主要包括：不同酶提取条件对猪皮胶原提取效果的影响、提取液清洁工艺方法的选择、提取液浓缩及干燥方法的选择等。
酶法提取牛骨胶原蛋白研究
胶 原蛋 白是 一类 蛋 白质 家 族 ， 具 有 其 特 殊 的 三
９ ０ ％左 右 ， 在 医 学上 的应 用 最 为 广 泛 Ｊ 。胶 原 蛋 白
股螺旋结构 ， 已至少发现了 ３ ０ 余种胶原蛋 白链的编 码基 因 ， 可 以形成 １ ６种 以上 的 胶原 蛋 白分 子 ， 根 据 其结 构 ， 可 以分为纤 维 胶原 、 基膜 胶原 、 微 纤维胶 原 、
到２ ５ ． ３ ８ ％。
关键词 ： 牛 骨； 胶 原蛋 白； 酶解法 ； 正 交设计
中图分 类号 ： ： Ｔ Ｑ ９ ３ ６ 文献标 识码 ： Ａ 文章编 号 ： （ ２ ０ １ ６ ） ０ ６— ０ ０ ３ １— ０ ５
Ｓｔ ｕｄ ｙ ｏ ｎ ｔ ｈｅ Ｅｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ｏｒ Ｃｏ ｌ ｌ ａ ｇｙ Ｅｎ ｚ ｙ ｍｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ
陈静怡 ， 肖厚荣 ， 杨 红 ， 张靖 华 ， 张佩佩 ， 朱许燕
（ １ ． 合肥学院
摘
生物与环境工程 系 ， 安徽
合肥
２ ３ ０ ６ ０ １ ； ２ ． 安徽华伊美科技企业集 团 ， 安徽
合肥
２ ３ ０ ０ ８ ８ ）
要： 以牛骨为原料 ， 采 用酶 解法提取胶 原蛋 白， 对 影响 胃蛋 白酶酶解过 程 的诸 多因素进行研 究 ； 在单 因素 实验
ｗｈｉ ｃ ｈ ｔ ｈ ｅ ｙ ｉ ｅ ｌ ｄ ｏ ｆ ｃ ｏ ｌ ｌ ａ ｇ ｅ ｎ ｃ ａ ｎ ｒ ｅ ａ ｃ ｈ ｔ ｈ ｅ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｓ ｔ ２５ ． ３ ８％ 。 Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ： ｂ ｏ ｖ ｉ ｎ ｅ ｂｏ ｎ ｅ； ｃ ｏ ｌ ｌ ａ ｇ ｅ ｎ； ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ； ｏ ｒ ｔ ｈ ｏ ｇ ｏ ｎ ａ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ
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开题报告
食品质量与安全
酶解法提取牛皮胶原蛋白的条件优化
一、选题的背景与意义
胶原蛋白，主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧带和血管中，是结缔组织极重要的结构蛋白。
由于胶原蛋白具有良好的物理性能和生物学特性，因而其被广泛的应用于化工、食品、医学、生物材料以及农业等诸多领域。
因此，胶原蛋白的提取一直是研究的热点。
目前国际上已开发出许多胶原保健品和功能性胶原生物材料。
相对于我国，其在胶原蛋白的基础研究上已经具有一些优势并拥有一定的国际专利，而且部分已经投入市场，形成一定的市场规模。
而我国的高质量胶原蛋白基础研究还有差距，有关这方面的核心专利技术不多。
但就目前的消费趋势来看，我国胶原蛋白的需求量逐渐增加，特别是随着人们对饮食和健康的不断重视，因此市场前景较为关阔。
另一方面在肉制品和制革加工过程中含有丰富胶原物质的副产物（皮、内脏、肉骨头）利用的附加值很低。
这样既浪费资源又污染环境，利用这些废弃物生成胶原蛋白实现资源的合理和有价值的利用，实现经济和社会效益的双赢。
本实验的以牛肉制品的下脚料——牛皮为原料，利用酶解法提取胶原蛋白，同时通过试验条件的优化，得到较优的提取条件，为今后的进一步研究提供参考。
二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：
基本内容：
1、对牛皮成分的测定：主要测其水分、脂肪、粗蛋白、胶原蛋白等。
2、酶制剂的选择和复合：选择两种胶原蛋白提取率比较高的酶，然后按一定比例进行复合试
验。
3、研究不同实验条件对胶原蛋白提取率的影响：通过对加酶量、水解pH、水解温度、水解
时间、固液比等因素进行单因素试验，并在此基础上进行正交试验得出优化的工艺条件。
拟解决的问题：
1、如何选择合适的比例对两种单酶进行复合。
2、如何提高胶原蛋白的提取率。
三、研究的方法与技术路线：
研究的方法：
1、牛皮成分测定：水分测定采用直接干燥法；脂肪测定采用索式提取法；蛋白质测定采用凯
式定氮法；胶原蛋白的含量测定采用羟脯氨酸法
2、酶制剂的酶活力测定：采用福林酚法。
3、胶原蛋白的提取：
⑴预处理：去脂采用丙酮法，去除其他非胶原成分采用5%的NaCl。
⑵胶原蛋白测定：采用羟脯氨酸测定法。
4、条件优化方面：采用单因素实验法和正交实验法
技术路线：
牛皮→预处理→酶提→测定
四、研究的总体安排与进度：
1、2010年10月至2011年12月：实验前的准备工作；查阅相关的文献，完成开题报告、任务书及文献综述。
2、2011年1月至2011年4月：实验研究阶段。
⑴对牛皮成分的测定
⑵酶制剂的选择和复合
⑶研究不同实验条件对胶原蛋白提取率的影响
3、2011年4月至2011年5月：整理实验阶段，并完成毕业论文。
五、主要参考文献：
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