选修一2.1 微生物的实验室培养-基础知识

不加含碳有机物的无碳培养基: ——分离自养型微生物
加 入想高一浓想度：食怎盐样的从培土养基壤:浸出液中分离出纤维 素—分—分解离菌金？黄色葡萄球菌
合成培养基、天然培养基、半合成培养基
MS培养基
牛肉膏蛋白胨培养基
培养基
3. 成分：
水、无机盐、碳源、氮源、生长因子 +满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的要 求
液体培养基：
常用于微生物的生产
固体培养基：
在液体培养基的基 础上再添加凝固剂 （如琼脂）。
常用于微生物分离、 鉴定、计数和菌种 保存等方面
鉴别培养基
常见的选择培养基
加入四环素等抗生素的培养基: ——分离导入了目的基因的受体细胞
HAT培养基: ——分离杂交瘤细胞
不加氮源的无氮培养基: ——分离固氮菌
超净工 作台
带着问题
怎样对微生物进行计数？
微生物计数方法
1、显微计数法（血球计数板计数法） 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌；
难以计数微小的细菌。 2.活菌计数法（菌落计数法） 稀释倒平板操作→培养→ 统计菌落数→计算
菌种的保存
1、临时保藏法： 对象： 频繁使用的菌种 温度： 4℃（冰箱） 缺点： 容易被污染或产生
选修一专题2 微生物的培养与应用1 ——基础知识
设想情境
为了~~~ 我希望找到ta~~~ 我在~~~寻觅再寻觅~~
分离纯化？ 培养？ 保存？
带着问题
什么是微生物？肉眼可见么？怎样用肉眼 区分不同的微生物？
基础知识之基本概念：
微生物、接种、培养基、菌落
微生物
1.现代定义：微生物是一切肉眼看不见或看 不清的微小生物的总称。
带着问题
对微生物进行培养的过程中，如果有大量 杂菌的存在，会有什么影响？
怎样做到无菌？
无菌技术
阅读P15-16，思考：
1. 无菌技术的主要目的是？
2. 无菌技术包括哪些方面？
3. 消毒和灭菌有何不同？
4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？
无菌技术P15
获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵， 无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。主要 包括消毒与灭菌及操作过程中避免与环境及周 围物体中的微生物接触。
变异
2、甘油管藏法： 对象： 长期保存的菌种 温度： -20℃（冷冻箱）
基础知识归纳
基本概念：
微生物、菌落、培养基、接种
工具：
接种环、涂布器、高压蒸汽灭菌锅、超净工作 台、恒温培养箱
重要过程：
无菌技术操作、微生物的分离纯化、微生物计 数方法、微生物的保存方法
料用具与周围物品相接触。
无菌要求及操作方法
2.常用方法： 消毒：
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒 （如70%的酒精擦拭、福尔马林熏蒸 ）等
灭菌：
1.灼烧灭菌： 2.干热灭菌： 3.高压蒸汽灭菌：
高压蒸汽灭菌
将需灭菌的物品放到盛 有水的高压灭菌锅内煮 沸，待冷空气排尽后， 密闭继续加热至锅内压 力到100kPa，温度到 121℃后，维持15～ 30min
C
接种与接种环（平板划线）
接种（inoculation） ，是指按无菌操作技 术要求将目的微生物移接到培养基中的过 程。
平板划线法
接种与涂布器（涂布平板）
梯度稀释
稀释涂布平板法
涂布平板
归纳
——将微生物接种在固体培养基中，会形成 单个的菌落。可借此进行微生物的分离与 纯化。 接种方法、工具： 培养基类型及作用：
2.特点：形体微小，结构简单，通常要用光 学显微镜和电子显微镜才能看清楚（大型 真菌？）
菌落P18
菌落（colony）：是由单个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞的群体。
各种微生物在一定条件下形成的菌落特征 （如大小、形状、边缘、表面、质地、颜 色等）具有一定的稳定性，是衡量菌种纯 度、辨认和鉴定菌种的重要依据
不 同 的 菌 落
培养基
1.概念：
——按照微生物对营养物质的不同需求所配制出 的供其生长繁殖的营养基质。
2. 种类：
按物理形态分： 液体培养基、固体培养基、半固体培养基 按照培养基用途分 ： 选择培养基、鉴别培养基 按照培养基的成分来分 ： 合成培养基、天然培养基、半合成培养基
液体培养基 与固体培养基
消毒： 使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀死 物体表面或内部的部分微生物。 灭菌： 使用较为强烈Байду номын сангаас理化因素杀死物体内外的所有 微生物（包括芽孢和孢子）。
无菌要求及操作方法
1.要求：
（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和 手进行清洁消毒；
（2）将培养皿、接种用具进行灭菌； （3）接种的过程要在酒精灯附近进行。 （4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材