细胞培养复习题有答案
细胞生物学》复习资料与答案
《细胞生物学》复习资料与答案一、选择题1、在真核细胞中,含量稳定,mRNA寿命短而蛋白质寿命又很长的一类蛋白质是A.基因调控蛋白;B.非组蛋白;C.组蛋白;D.核糖体蛋白。
2、核仁的大小随细胞代谢状态而变化,下列4种细胞中,核仁最大的是A.肌细胞;B.肝细胞;C.浆细胞;D.上皮细胞。
3、动物细胞培养中最常用的细胞消化液是A.胃蛋白酶 B. 胰蛋白酶C. 组织蛋白酶D. 枯草杆菌蛋白酶4、过量TdR可以阻止动物细胞分裂停止在A. G0B. G0/G1C. G1/SD. G2/M5、动物体内各种类型的细胞中,具有最高全能性的细胞是A.体细胞;B.生殖细胞;C.受精卵;D.干细胞。
1---5 C C B C C二、不定项选择题1.细胞中含有DNA的细胞器有:A.线粒体B.叶绿体C.细胞核D.质粒2.胞质骨架主要由组成。
A.中间纤维B.胶原纤维C.肌动蛋白D.微管3.细胞内具有质子泵的细胞器包括:A.内体B.溶酶体C.线粒体D.叶绿体4.细胞内能进行蛋白质修饰和分选的细胞器有:A.核糖体B.细胞核C.内质网D.高尔基体5.各种水解酶之所以能够选择性地运入溶酶体是因为它们具有:A.M6P标志B.导肽C.信号肽D.酸性6.介导桥粒形成的细胞粘附分子desmoglein及desmocollin属:A.钙粘素B.选择素C.整合素D.透明质酸粘素7.线粒体内膜的标志酶是:A.苹果酸脱氢酶B.细胞色素C氧化酶C.腺苷酸激酶D.单胺氧化酶8.具有极性的细胞结构有:A.微丝B.中间纤维C.高尔基体D.微管9.在电子传递链的NADH至CoQ之间可被阻断。
A.鱼藤酮B.抗霉素AC.氰化物D.阿米妥10.染色质由以下成分构成:A.组蛋白B.非组蛋白C.DNA D.少量RNA1、ABCD2、ACD3、ABCD4、CD5、A6、A7、B8、ACD9、A D10、ABCD三、填空题1、组蛋白由(H2A )、(H2B )、(H3 )、(H4 )和(H1/H5 )5种组分。
细胞工程复习提纲有答案
细胞工程复习提纲一、名词解释细胞工程:是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科;细胞分化:是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,包括时间上和空间上的分化;时间上的分化:是指一个细胞在不同的发育阶段可以形成不同的形态和功能;细胞全能性:是指分化细胞保留着全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能;无性生殖:不涉及性别、没有配子参与、没有受精过程的生殖都属于无性生殖;有性生殖:是两个配子融合为一,成为合子或受精卵,再发育成为新一代个体的生殖方式;脱分化:又称去分化,是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程,即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程;植物组织培养:是将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料无菌条件下培养在人工培养基上,在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术;愈伤组织:脱分化后的植物细胞经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团,称之为愈伤组织外植体:主要指用于离体培养的植物或组织切段;胚状体体细胞胚:又叫胚状体,是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物;人工种子:是指将植物离体培养中生产的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳;体外受精:是指将哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术;试管动物:是指将供体的精子和卵子在体外受精,体外培养胚胎发育到一定阶段通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物;胚胎分割:即是将一枚胚胎用显微手术的方法分割成二分、四分甚至八分胚,经体内或体外培养,然后移植入受体中,以得到同卵双生或同卵多生后代的技术,也是胚胎克隆的一种方法;性别控制:就是通过人为干预或操作手段使母畜繁殖所需要的后代;细胞核移植:是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术;细胞融合:是指用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术;非对称细胞融合:利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再与另外一个完整细胞进行融合;原生质体:去除细胞壁后裸露的细胞称之为原生质体染色体组:生物体配子的全部染色体称为一个染色体组;染色体工程:按照一定的设计,有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体,从而达到定向改变遗传性和选育新品种的目的的技术单倍体:细胞中含有正常体细胞的一半染色体数,即具有配子染色体数目的个体;同源多倍体:多倍体的染色体来自于同一物种或在原有染色组的基础上加倍而成;异源多倍体:多倍体的染色体来自于不同一物种;雌核发育:精核进入卵细胞后未与卵核融合而退化,卵核未经受精而单独发育成单倍体;植物细胞培养:是在离体条件下,将分离的植物细胞通过继代培养增殖,获得大量细胞群体的一种技术;次级代谢产物第7讲是通过次级代谢合成的产物,大多是分子结构比较复杂的小分子化合物,例如抗生素、激素、生物碱、毒素等;毛状根,冠瘿组织第8讲是由根癌农杆菌Agrobacteriumtumefaciens感染引起的植物肿瘤组织,它能在无外加植物激素的培养基上生长;;接触性抑制:是某些动物细胞体外培养的生长特性之一;是指由于细胞相互接触而抑制细胞运动性的现象;微载体培养第10讲微载体培养:解决空间分布与贴壁,连续灌注培养;多克隆抗体:一种抗原通常具有多个不同的抗原决定族,因此能刺激多个B淋巴细胞产生相应的单克隆抗体,因此血清中的抗体是针对不同抗原决定族的单克隆抗体混合物,称为多克隆抗体;单克隆抗体:动物脾脏有上百万个B淋巴细胞,一个细胞就是一个克隆,它针对抗原上的一个抗原决定族产生的抗体是单克隆抗体;灭活病毒疫苗:通过化学、物理或简单加热的方法使病毒失去在宿主体内生长复制的能力,但仍保留了病毒的免疫原性,接种人体后能产生对此病毒的抵抗力,这种将病毒杀灭后制备的疫苗被称为灭活疫苗;减毒活疫苗:采用自然法或人工法通过动物传代或细胞传代筛选对人毒性低的变异株病毒;转基因生物反应器:将外源基因转入细胞或动植物,利用细胞增殖或者动植物代谢制备外源基因的表达产物的技术;微藻:一般是指那些在显微镜下才能辨别形态微小的藻类干细胞:动物胚胎和成体组织中存在的能一直进行自我更新、保持未分化状态、具有分裂能力的未分化细胞;胚胎干细胞:是一种全能干细胞,它是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞系,可以分化成任何一种组织类型的细胞;成体干细胞:又称组织干细胞,传统的观念认为它们是存在于成体组织的未分化细胞,现在认为也包括未成年动物的组织干细胞,它们具有不断增殖和自我更新能力、又具有多向分化潜能;组织工程:是利用生命科学、医学、工程学原理与技术,单独或组合地利用细胞、生物材料、细胞因子实现组织修复或再生的一门技术;二、简答题1、细胞工程的主要研究内容研究范畴有哪些第1讲答:细胞工程的研究内容有:动物细胞与组织培养、植物细胞与组织培养、细胞融合、细胞核移植、染色体工程、胚胎工程、干细胞与组织工程、转基因生物与生物反应器;1、简述细胞工程技术的应用第1讲答:细胞工程的应用包括:•优质植物快速培育与繁殖•动物胚胎工程快速繁殖优良、濒危品种•利用动植物细胞培养生产活性产物、药品•新型动植物品种的培育•在医学器官修复或移植中的应用•制备转基因动植物的生物反应器•珍稀动植物资源的保存与保护•在遗传学、发育生物学等领域的理论研究•在能源、环境保护等领域的应用3、植物组织培养的应用第2讲答:1.无性系快速繁殖;2.种苗脱毒;3.新品种选育:1 利用培养变异,筛选优良突变体;2利用远缘杂交幼胚培养,获得杂种植株,克服其杂交不亲和性;3利用细胞融合技术,克服远缘杂交不亲和性;4倍性育种;4.离体种质保存5.在遗传、生理生化和病理等研究上的应用;4、植物组织细胞培养中要用到哪些激素在细胞分化中的调节作用如何第2讲答:生长素:在植物组织培养中,生长素主要用来刺激细胞分裂和诱导根的分化;细胞分裂素:诱导芽的分化促进侧芽萌发生长、促进细胞分裂与扩大;5、植物组织培养再生植株有哪些途径第2讲答:器官发生途径:成熟细胞—遇上组织—出根出芽—完整植株体细胞胚发生途径:成熟细胞—分生细胞—胚状体—完整植株其中体细胞胚发生途径包括:器官外植体直接发生途径、悬浮培养细胞发生途径、愈伤组织发生途径;6、简述人工种子制备的基本过程第2讲答:胚状体同步发育,人工种皮制作,人工胚乳配制,包埋,贮藏与发芽;7、简述胚胎移植的技术路线第3讲答:8、简述多莉羊技术路线第3讲答:1-供核细胞获得与取核,2-卵母细胞收集与去核,3-细胞核融入卵细胞4-重构胚的培养5-妊娠监护----简单流程请自行添加描述;9、你认为英雄、伟人可以通过克隆再生吗第3讲答:主观题10、克隆动物存在哪些问题答:1.技术尚不成熟;遗传疾病问题;3 克隆人带来的社会、伦理学问题;11、怎样制备、分离和鉴定原生质体第4讲制备:两步法:果胶酶处理材料——游离出单细胞——纤维素酶处理单细胞——分离出原生质体一步法:外植体——酶液配制:注意纤维素酶、果胶酶和渗透压稳定剂甘露醇的配比及pH——酶液离心——过滤灭菌后-20℃保存——外植体放入酶液,真空泵抽引渗透处理——26℃摇床振荡2-8小时分离:飘浮法:无菌下,浓度较高溶液如20%蔗糖溶液加入离心管——加入原生质体混合液——封口后,离心,原生质体漂浮在上面——用吸管收集原生质体液面,放入液体培养基或甘露醇悬浮洗涤原生质体2-3次——将原生质体悬浮在液体培养基中备用沉降法:微孔滤膜过滤酶混合液——低速离心3-5min——弃去上清液和酶液——液体培养基或甘露醇悬浮洗涤原生质体2-3次——将原生质体悬浮在液体培养基中备用不连续梯度法:离心管中配制成不同的浓度梯度——加入原生质体混合液——离心5min,原生质体位于某一浓度梯度,用吸管收集——液体培养基或甘露醇悬浮洗涤原生质体2-3次——将原生质体悬浮在液体培养基中备用鉴定:低渗爆破法:爆破后是无形的;渗透压调节剂:葡萄糖、甘露醇、山梨醇等;染色法:有活力的原生质体吸收不同染料显示与死亡细胞不同的颜色来分析;FDA二乙酸荧光素能自由地穿越细胞质膜,在活细胞内,FDA被酯酶裂解即发荧光荧光素,由于荧光素不能自由通过质膜,因而可以在荧光显微镜下通过具荧光的细胞的观察确定细胞活性酚藏花红染色法%:酚藏花红能使无活力的原生质体染成红色,有活力的原生质体不着色;伊凡蓝Ev an’s blue染色法%:有活力但受损伤的细胞和死细胞能够摄取这种染料,活细胞不摄取;氧电极法:光照下放出氧气,黑暗耗氧气;12、为什么要对融合细胞进行筛选第4讲细胞融合是一个随机的物理过程,经融合后细胞将以多种形式出现,需要通过培养和筛选,除去不需要的细胞,分离出需要的杂种细胞,从而解决融合细胞的选择问题;13、举几个单倍体和多倍体的例子第5讲单倍体:全雄系芦笋雄性蜜蜂和蚂蚁三倍体桑树:表现为体细胞较大、叶肉厚、叶色深、叶质较好、抗寒性增强;花卉:三倍体花器官增大、色彩更鲜艳,同时还能使花期延迟,大大提高了花卉的观赏价值和商业价值;三倍体鲍鱼:具有高度不育性,因而使体细胞生长方面的能量相对增加,增强了鲍鱼的抗逆性和抗病能力,提高了生长速度;此外,还可以延长鱼类寿命、控制过度繁殖三倍体西瓜:无籽西瓜14、为什么动物的多倍体比植物少第5讲植物:1大多数植物是雌雄同体或雌雄同花的,它们的精原细胞和卵原细胞可能同时发生不正常的减数分裂,使配子中染色体数目不减半,这种配子通过自体受精而自然形成了多倍体;2植物的繁殖比较容易,如果多倍体植物不能形成种子,它还能依靠营养器官的无性繁殖来产生后代,因此在生物进化过程中,植物多倍体有可能被保存下来;动物:1高等动物的远源杂交能力很弱,这样难以形成杂种个体;2多倍体动物高度不育,染色体异常通常会造成胚胎死亡,因此很难得到多倍体的子代个体;15、单倍体产生原理第5讲假受精:远缘花粉刺激未受精卵细胞分裂发育成单倍性的胚;组织培养:花药、花粉雄配子、未授粉的子房胚珠雌配子的培养;雄核发育Androgenesis或孤雄生殖:卵细胞不受精,卵核消失,或卵细胞受精前失活,由精核在卵细胞内单独发育成单倍体,因此只含有一套雄配子染色体;这类单倍体的发生频率很低;雌核发育Gynogenesis或孤雌生殖:精核进入卵细胞后未与卵核融合而退化,卵核未经受精而单独发育成单倍体;16、怎样制备植物的单细胞第6讲1.由完整的植物器官分离单细胞1酶解法选择专一性水解酶在温和的条件下将植物细胞壁物质纤维素、果胶、多糖降解,从而使细胞彼此分开,这种方法称为酶解法;经常采用的生物酶包括:纤维素酶、果胶酶等;2机械法第一种方法:用刀片刮叶片第二种方法:叶片研碎、离心2.由愈伤组织分离单细胞通过培养植物外植体诱导产生愈伤组织,并使其大量增殖,再通过机械震荡或者酶解的方法使细胞分离从而获得游离的细胞;17、常见的植物细胞培养生物反应器有哪些第7讲1机械搅拌式生物反应器2气升式生物反应器3鼓泡式生物反应器18、体外培养动物细胞的形态有哪几种第9讲成纤维细胞型细胞:外形与体内成纤维细胞形状相似,细胞大致呈梭形或不规则形;成群细胞呈现放射状、旋涡状等形式;多数细胞之间排列疏散,有较大的细胞间隙上皮型细胞:类似上皮细胞的细胞,特点是:扁平状,形态较为规则,细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形,中央有扁圆形核,生长时彼此紧密连接成单层细胞游走型细胞:呈散在生长,一般不连成片,胞质常突起,呈活跃游走或变形运动,方向不规则;此型细胞不稳定,有时难以和其他细胞相区别多形型细胞:多形型细胞是一些形态上不规则的细胞;多形型细胞不常见,只有某些像神经组织细胞等难以确定其稳定形态的,才可归于多形细胞19、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同第11讲植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同,不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁,然后再融合;动物细胞融合是两个体细胞直接融合;20、转基因动物反应器主要有哪些第12讲乳腺生物反应器动物血液生物反应器动物膀胱生物反应器禽蛋生物反应器蚕茧精液21、简述转基因动物制备中目的基因导入的方法第12讲1电穿孔法:利用脉冲电场提高细胞膜的通透性,在细胞膜上形成纳米级的微孔,达到增加通透性的效果,从而使外源DNA转移至细胞中;优点是简单、效率较高;2显微注射法:利用显微操作技术转移外源基因的方法;此法转入基因长度可达数百kb;并能随机地整合在受体细胞染色体DNA上,因此应用范围广;但是这种整合有时会导致转基因动物基因组的重排、易位、缺失或定点突变;3裸露DNA直接注射4磷酸钙—DNA共沉淀法:这种方法是受二价金属离子能促进细胞吸收外源DNA的启发而发展起来的;当核酸以磷酸钙—DNA共沉淀物的形式在时,细胞摄取DNA的能力显著加强;但转移效率较低,仅有1%~5%的外源DNA可以进入受体细胞核中,大约仅有1%的DNA可以在细胞中稳定表达;5脂质载体包埋法:将需转移的外源DNA或RNA与脂质体混合,带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体内形成DNA-阳离子脂质体复合物;由于脂质体具有磷脂双层结构,与细胞膜类似,因此可以与受体细胞膜融合,从而将外源DNA转入宿主细胞;效率高;6病毒介导的生物学方法:将目的基因重组到反转录病毒载体上,感染细胞;病毒进入细胞后,利用宿主细胞的酶体系自行反转录和复制,从而可以使病毒单拷贝基因组稳定地进入宿主细胞;22、三大经济微藻指哪三类第13讲1螺旋藻Spirulina2.小球藻Chlorella3.杜氏藻Dunaliella23、怎样利用微藻培养生产生物柴油第13讲以微藻等水生植物油脂为原料通过酯交换工艺制成可代替石化柴油的再生性柴油燃料;24、干细胞具有哪些特征第14讲1.自我更新特征:1对称分裂symmetric division是指一个干细胞分裂产生的两个子细胞全是干细胞;2不对称分裂asymmetric division是指一个干细胞分裂成一个干细胞和一个短暂增殖细胞,称之为祖细胞progenitor cell;由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配,使得祖细胞分裂形成两个专一功能的分化细胞,不具备自我复制的能力2.增殖特征:1增殖的缓慢性一般情况下,干细胞处于休眠或缓慢增殖状态;缓慢增殖还可以减少基因发生突变的可能性;2增殖的自稳性也称自我维持,是指干细胞能自我更新维持自身数目的恒定,主要是通过不对称分裂来实现;3.分化特征:1具有分化潜能2可以去分化与转分化25.组织工程三要素第15讲1.种子细胞2.支架材料3.生长因子三、问答题1、试述植物组织培养的基本过程第2讲1培养材料的收集2培养材料的消毒3制备外植体4接种和培养5根的诱导6炼苗和移栽老师PPT第2讲P34-392、试述试管动物培育流程第3讲1精子的采集与体外获能,卵子采集与成熟培养2体外受精3胚胎体外培养4胚胎移植5体内发育、出生老师PPT第3讲P143、试述原生质体融合的方法第4讲1生物法:病毒诱导细胞融合2化学法:NaNO3诱导融合、高pH的高浓度Ca2+离子诱导融合、PEG诱导、高Ca2+和pH诱导PEG结合诱导3物理法:电融合诱导法老师PPT第4讲P26-394、试述多倍体的诱导方法第5讲1植物多倍体A化学法:细胞松弛素B,秋水仙素B生物方法:体细胞杂交,利用染色体加倍个体与未加倍个体杂交繁殖多倍体后代2动物多倍体A物理方法:温度休克法、水静压法B化学法:细胞松弛素诱导法、6-甲氨基嘌呤诱导法C生物法老师PPT第5讲P22-325、试述植物单细胞培养的方法第6讲看护培养:用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖;饲养层培养:把处理过的如X射线处理无分裂能力或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞,使其分裂和生长;液体浅层静置培养:将一定密度的悬浮细胞接种在培养皿或三角瓶中封口静止培养;细胞同步化培养:进行同步化培养可获得生长周期一致的细胞作为研究材料,常用方法有体积选择法、冷处理法、饥饿法、抑制法这里特指的是植物单细胞小规模培养,不清楚题目是否包括固定化培养6、试述影响植物细胞培养生产次级代谢产物的因素第7讲一、生物因素1细胞株稳定、高产、生长速度快的细胞株是细胞大规模培养生产代谢产物的前提;在进行植物细胞培养生产有价值的代谢产物时必须弄清楚产物的合成部位,也就是应该考虑到不同部位来源细胞的特性;缺乏适合的细胞株是目前许多代谢产物无法利用细胞培养生产的主要限制之一;2细胞凋亡细胞凋亡是植物细胞培养过程中不可避免的现象,但是可以通过条件改变进行调控来减少细胞凋亡;关键是要保证充足的营养供给以及避免有害代谢产物的积累,这可以通过采用合适的培养工艺来实现;3细胞团细胞团的形成影响稳定的悬浮体系的维持,同时造成了培养物的显著异质性,细胞团表面与内部的细胞存在营养吸收和代谢产物分泌的差异;此外,细胞团容易受剪切力影响而破碎,引起培养液粘度增加,致使气体交换与传递受到影响;适当大小的细胞团有利于代谢产物积累;4生物合成机制次级代谢产物的生物合成不同于蛋白质合成,涉及多基因参与基因簇,机制非常复杂,影响因素非常多;结合目标产物进行生物合成机制研究,揭示代谢途径及诱导合成机制是细胞培养的重要生物学问题,有利于指导建立优化的培养工艺与技术;二.化学因素1营养盐:一方面是保证植物细胞生物量的增长;另外一方面是要保证细胞能合成和积累次级代谢产物;2前体precursor :缺乏某一种前体时细胞就不能合成某一种代谢物;如果在培养基中加入外源前体将会有助于合成该代谢产物或使其产量增加;3诱导子:广义诱导子、狭义诱导子、内源性诱导子、外源性诱导子4反馈抑制:植物次级代谢产物在培养系统的积累有时会对目标产物的合成具有反馈抑制;可以采用流加/半连续培养、两相培养等工艺技术可以克服;三、物理因素主要包括:光照、温度、通气、搅拌、pH值等;1光照:光对细胞代谢产物的合成有很重要的影响;光照时间长短、光质、光强等都会对代谢产物合成和积聚产生作用;光对许多酶有诱导或抑制作用;2温度:温度会影响酶的活性;细胞的生长速率与培养温度紧密相关;植物细胞培养一般在25℃左右进行;3pH:会影响培养液的渗透压、酸碱度,酶的活性,从而影响细胞代谢;植物细胞液体培养的pH 变化范围在5-6 之间,最佳的起始pH在-之间;如果对培养液pH 进行控制,将有利于次级代谢产物的生成;7、试述毛状根产生的机制第8讲发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物、少数单子叶植物及个别的裸子植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根;发根农杆菌之所以具有这种致根性,是因为它具有能诱导毛状根产生的RiRoot inducing质粒;在通常状态下,Ri质粒上Vir区的基因处于抑制状态,当发根农杆菌感染寄主植物时,受损伤的植物细胞合成的低分子苯酚化合物乙酰丁香酮使Vir区处于抑制状态的基因被激活,产生一系列限制性核酸内切酶,在酶的切割作用下产生T-DNA链,T-DNA进入植物细胞核内,整合进植物细胞的基因组;其整合和表达的结果导致了大量毛状根的产生;8、试述动物组织、细胞培养的培养基及培养条件第9讲动物细胞培养基一般可分为天然、合成、无血清培养基等几种;培养条件:温度:人类和哺乳类动物细胞培养适宜温度为±5℃;pH:哺乳动物细胞为;渗透压:细胞在高渗透压或低渗透压溶液中会发生皱缩或肿胀,甚至破裂;用BSS 溶液可维持细胞渗透压,调控培养液酸碱度平衡;气体:细胞的生长代谢离不开O2和CO2,作为代谢产物的CO2还有调节pH作用;用二氧化碳培养箱可使培养环境中的氢离子浓度保持恒定以提供一个比较稳定的pH范围;9、什么是微载体培养步骤有哪些第10讲微载体Microcarrier:是直径60-250μm的适用于贴壁依赖型细胞生长的微粒;一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成;微载体培养细胞的步骤1选择合适微载体类型2浸泡水化及消毒3接种4培养观察和细胞计数5消化与细胞回收6细胞收获7传代培养10、试述HAT选择系统的基本原理第11讲HAT培养基中的氨基蝶呤可阻断细胞正常途径合成DNA;融合所用的瘤细胞一般是HGPRT或TK缺陷型,也不能采用正常途径合成DNA;两条途径被阻断后,瘤细胞未融合的以及与自身融合的因不能正常合成DNA而死亡;融合细胞具有亲代双方的遗传性能,具有来自淋巴细胞的HGPRT与TJ,可采用不就途径合成DNA,因此可在HAT培养基中存活与繁殖;11、试述单克隆抗体制备的基本过程第11讲。
植物细胞培养测试题
植物细胞培养测试题(总8页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--实验室及设备单元复习题1.组培能够进行,其理论依据是____和____-。
2.接种室要求室内____,墙面____,门为____,并设置____,防止出入时带进杂菌。
3.紫外灯灭菌利用_____波长左右的紫外光,它的灭菌强度较弱,须离被灭菌物____。
4.配制培养时,一般先配制母液,其目的在于____-和____-。
6.pH值一般调节为____,常用____和____方法来进行。
7.压力单位中1kg/cm2____Mpa,,在 mPa时锅内温度为____。
9.蔗糖使用浓度为____%,它主要起____作用。
二、名词解释20分1.外植体2.愈伤组织3.灭菌4.细胞全能性5.脱分化三选择题10分1.接种工具灭菌常采用()①灼烧②高压③过滤④熏蒸2.具有促进愈伤组织生成的物质是()①VPP ②VB1 ③VB6 ④甘氨酸3.微量元素母液的配制浓度()① 10倍②100倍③1mg/ml ④10mg/ml四、问答题40分1 配制培养基时,使用生长调节物质的原则是什么?2. 无菌接种室怎样做好接种前的灭菌工作3. 高压灭菌器的使用程序怎样4 MS培养基的名称来源及特点5 为什么要配制母液,配制时要注意什么6 表面灭菌如何操作?培养基章复习题一、填空(20分)1.配制培养时,一般先配制母液,其目的在于_____和______。
2.培养架一般长为_____米,宽为____米。
3.培养基PH值一般调节为_____,常用____和_____方法来进行。
4.培养基中缺铁会使幼苗____,培养基中以_____形式加入铁。
5.磷是构成____的主要成分,这种物质又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。
磷也是____的成分、这是一种常见的直接能量物质。
6.琼脂加入浓度大约是___________,蔗糖加入浓度大约是______________ 。
细胞生物学考试小题复习
1、原核细胞和真核细胞相比,共有的基本特征中,哪一条描述是不正确的()。
A.都有细胞膜;B.都有内质网;C.都有核糖体;D,都有两种核酸DNA和RNA 。
【答案】B。
2、7S RNA分析显示,古细菌与真细菌同属一类。
【答案】对3、自然界最小、最简单的细胞是支原体。
4、关于病毒的增殖,下列说法中错误的是()A,必须在细胞内进行;B.病毒的核酸和病毒蛋自均在宿主细胞内合成;C.病毒是否侵染细胞,主要取决于病毒表面的识别结构;D.存在以RN4为模板反转录为DNA的过程【答案】C5、能特异显示液泡系分布的显示剂是( )A.希夫试剂;B.中性红试剂;C.詹姆斯绿;D.苏丹黑试剂【答案】B6、核质比反映了细胞核与细胞体积之间的关系,当核质比变大时,说明( )A.细胞质随细胞核的增加而增加;B.细胞核不变而细胞质增加;C,细胞质不变而核增大;D,细胞核与细胞质均不变。
【答案】C7、淋巴细胞在体外培养时是以贴壁的方式进行生长。
【答案】错8、经流式细胞仪分离出的细胞可继续培养。
【答案】对9、将多细胞生物的细胞进行体外培养时,分散贴壁生长的细胞一旦相互汇合接触,即停止移动和生长的现象,称为接触抑制。
10、体外培养细胞加血清的主要原因是()。
A,血清含有多种营养物质;B,血清含有多种生长因子;C,血清含有补体、抗体等免疫活性物质,可以抗污染;D,作用不明。
【答案】B11、在动物细胞培养过程中,要用( )来观察细胞分裂状况。
A.电子显微镜;B.暗视野显微镜;C.倒置显微镜;D.普通顺置光学显微镜。
【答案】C12.关于光镜的使用,下列哪项有误( ).A,观察标本时,应双眼同时睁开,,双手并用B.按照从低倍镜到高倍镜到油镜的顺序进行操作;C,使用油镜时,需在标本上滴香柏油,将聚光器降至最低,光圈关至最小;D,使用油镜是,不可一边在目镜中观察,一边下降镜筒或上升载物台。
【答案】C 13、把重组DNA导入细菌并生产激素或蛋白质的过程可称为( ).A,基因工程;B,细胞工程;C,酶工程;D,微生物工程【答案】A14、单克隆抗体技术:一种免疫学技术,将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓瘤细胞杂交,融合后的杂交瘤细胞既能产生抗体,又具有无限增殖的能力,并以此生产抗体。
高一生物必修一细胞的增殖复习题有答案
1.下列关于细胞周期的叙述中,正确的是()A.细胞周期分为前期、中期、后期、末期8.加入DNA合成抑制剂,细胞将停留在分裂期C细胞分裂间期为细胞分裂期提供物质基础D.成熟的生殖细胞产生后立即进入下一个细胞周期2.下列关于染色体的叙述中,不正确的是()A.染色体是细胞核中容易被碱性染料染成深色的物质B.严格地说,只有在细胞分裂期才能形成染色体C蓝藻细胞在进行有丝分裂时也能形成染色体D .染色体和染色质是同一种物质在细胞不同时期的两种存在状态3.如图是同一细胞不同分裂时期的图像,据图分析可做出的判断是()A.图②③④表示一个完整的细胞周期B.若按分裂的先后顺序排列,应为①T④T③-②C 该种生物的叶肉细胞中共含有6个DNA分子D.图③过程染色体数保持不变4.下列关于高等动物细胞有丝分裂的叙述,正确的是()A .前期核膜解体成磷脂分子和蛋白质分子B.中期是观察染色体数目和形态的最佳时期C后期着丝粒断裂导致染色单体数目加倍D.末期囊泡聚集成的细胞板形成新的细胞膜5.有关动物细胞有丝分裂的叙述,正确的是()A .细胞板在细胞有丝分裂末期形成B.同源染色体配对通常发生在分裂前期C在分裂末期,细胞膜内陷形成两个子细胞D.在分裂中期,两个中心粒复制形成两组中心粒6关于细胞有丝分裂的叙述,正确的是()A.赤道板是有丝分裂过程中出现的一种结构B.有丝分裂间期DNA的复制和有关蛋白质的合成过程需要酶参与C分裂后期细胞中形成纺锤体,使子染色体被拉向细胞两极D.细胞周期中,分裂间期的持续时间通常比分裂期的持续时间短7.在一次有丝分裂中,最可能发生在同一时期的是()A.着丝点的分裂和细胞质的分裂B.染色体数加倍和染色单体形成C细胞板的出现和纺锤体的出现D.染色体复制和中心粒复制8.【2017-2018学年福建省厦门双十中学高一下学期第二次月考】下面是动物细胞有丝分裂不同时期染色体卜)数目、核DNA分子8)数目的柱形统计图,对此进行的有关叙述正确的是()① ② ③A.①时期染色体复制,核DNA和染色体数目都加倍8.③时期核膜、核仁重建,细胞中部出现细胞板C.①一②表示着丝点分裂,染色体数目加倍,但核DNA分子数目不变D.②一③表示染色单体相互分离,染色体和核DNA分子数目也随之减半9.【2019届黑龙江省哈尔滨市第六中学高三上学期10月月考】如图是蛙红细胞的无丝分裂过程,和有丝分裂相比,下列叙述正确的是()A.分裂过程中没有出现纺锤丝,但有染色体的出现B.有DNA和染色体的复制C.分裂过程中细胞核缢裂成两个细胞核,因此子细胞中染色体减少一半D.无丝分裂和有丝分裂都有核膜与核仁的周期性消失和重建10.【2017—2018学年浙江省温州市十五校第二学期联考】下列关于“制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片”实验的叙述,错误的是()A.在解离环节,需要在室温下解离10〜15分钟B.在漂洗环节,需要放入盛有水的培养皿中漂洗1〜2分钟C.在制片环节,需要在盖玻片上覆盖滤纸,然后用橡皮或笔端轻轻敲击盖玻片几下,使细胞分散开D.制作有丝分裂临时装片和永久装片的方法是不同的11 .【2018 年江苏省扬州市高二学业水平测试模拟卷】下列关于“制作并观察植物细胞有丝 分裂的临时装片”活动的叙述,正确的是()A .用稀盐酸解离可使细胞相互分散开B .用清水漂洗可洗去碱性染料以保持细胞活性C 常用苏丹m 染液使染色体着色以利于观察D .可用高倍镜观察植物细胞连续的分裂过程12.【2017-2018学年河南省中原名校(即豫南九校)高一下学期第一次联考】如图表示某 同学进行某次实验的基本操作步骤,下列相关叙述正确的是()A .该实验中所用的解离液就是质量分数为8%的盐酸B .该同学的操作步骤中解离后应该用酒精进行漂洗C .实验过程中采用的龙胆紫染液也可以换用醋酸洋红染液D .最后在观察装片时,会发现绝大部分细胞都处于分裂的间期,如果此时用药物抑制DNA 的复制,则细胞将停留在分裂间期的S 期 13.【2017-2018学年黑龙江省哈尔滨市第三中学高一上学期期末考试】图1细胞进行有丝分裂的部分简图,图2是一个细胞周期中每条染色体中DNA 数目变化,据图回答:(1)图1是 __________ 细胞有丝分裂简图,你的判断依据是 ______________________ 。
细胞培养复习题(含答案)
1.体外培养的细胞按生长方式可分为哪二种? 按细胞在体外生长的形态特征,可分为哪几种常见类型?⑴按生长方式分为二型:粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。
悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面, 而在悬浮状态下即可生长的细胞。
(绝大多数有机体细胞属粘附型细胞。
)⑵可分四型: (1)上皮型细胞 (2)成纤维型细胞 (3)游走型细胞 (4)多形型细胞2.简述体外培养细胞的整个生命活动过程的分期及每代贴附生长细胞的生长过程⑴通常, 体外培养细胞的全部生命期大致可被分为以下三个阶段:①原代培养期: 也称初代培养, 是指从机体中取出细胞接种培养到第一次传代之前的这一阶段。
此期的细胞呈现出活跃移动的特点, 可见细胞分裂, 但不旺盛。
处于原代培养阶段的细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上有很大的相似性。
细胞群具有明显的异质性, 细胞间的相互依存性强, 在软琼脂培养基培养时细胞集落形成率很低。
②. 传代期:通常是培养细胞全生命期中持续时间最长的时期, 原代培养的细胞经传代后常被称做细胞系。
一般情况下, 正常体细胞在传代10-50次左右后, 细胞分裂的能力就会逐渐减弱, 甚至完全丧失, 细胞便进入衰退期。
③衰退期:处于衰退期的培养细胞, 增殖速率已经变得很慢或不再增殖, 直至最后衰退死亡。
以上特点, 主要是针对体外培养的机体正常细胞, 对于体外发生转化的细胞和肿瘤细胞而言, 永生性或恶型性的获得使得这类细胞获得持久性的增殖能力, 这样的细胞群体常被称为无限细胞系或连续细胞系。
⑵每代贴附生长细胞的生长过程:①游离期:细胞接种后在培养液中呈悬浮状态, 也称悬浮期。
此时细胞质回缩, 胞体呈圆球形。
时间:10分钟一4小时②贴壁期:细胞附着于底物上, 游离期结束。
底物:玻璃、塑料、胶原、其它细胞等③潜伏期:此时细胞有生长活动, 而无细胞分裂。
细胞株潜伏期一般为6~24小时。
④对数生长期:细胞数随时间变化成倍增长, 活力最佳, 最适合进行实验研究。
细胞复习题
1、如何理解“细胞是生命活动的基本单位”。
2、细胞所共有的基本特征有哪些?描述每种特征的重要性。
3、从结构、功能、遗传、代谢的角度比较原核细胞与真核细胞。
4、植物细胞有哪些特殊的细胞结构,描述其基本特征和功能。
5、病毒的特征是什么?他与细胞的关系如何?6、如何理解细胞培养技术在细胞生物学研究中的重要作用。
7、单克隆抗体的制备技术和注意事项8、常用的细胞生物学研究的模式生物,描述其基本特征和在研究中的贡献。
9、生物膜的基本特征是什么?这些特征与其生理功能有何关系?10、从蛋白质、脂类和糖着手,描述膜的不对称性11、描述三种膜蛋白的性质和他们之间的差异。
12、简述膜的流动性对细胞的重要作用。
13、红细胞膜骨架的基本结构和功能。
14、比较物质跨膜运输的四种基本方式。
15、比较通道蛋白和载体蛋白的特点16、描述Na+--K+泵的工作原理及其生物学意义。
17、葡萄糖在细胞内的运输方式。
18、离子跨膜转运与膜电位的关系。
19、胞吞作用和胞吐作用的过程及相关机制。
20、胞饮作用和吞噬作用的异同。
21、组成型胞吐和调节型胞吐作用的特点和异同。
22、线粒体的基本结构和组成。
23、电子传递链和氧化磷酸化的关系。
24、电子转运复合物及其在电子传递中的作用。
25、ATP合酶的结构及ATP合成的机制。
26、质子梯度在ATP合成中的作用。
27、叶绿体的结构和功能。
28、为什么线粒体和叶绿体是半自主性细胞器。
29、细胞质基质的结构和作用。
30、RER和SER的主要形态和功能的差别。
31、描述编码分泌蛋白的mRNA与核糖体结合后到蛋白质离开内质网之间所发生的主要步骤。
32、细胞内蛋白质的合成的部位、蛋白的种类及去向。
33、高尔基体的结构特征及其生理功能。
34、蛋白质修饰的基本类型和特征。
35、溶酶体的结构和功能。
36、溶酶体的发生过程。
37、过氧化物酶体的功能,过氧化物酶体与溶酶体的区别。
38、图解说明细胞内膜系统的各种细胞器在结构和功能上的联系。
细胞生物学复习题含答案
细胞生物学复习题含答案1、对老年斑形成的最合理解释是()A、细胞内水分减少,细胞收缩B、细胞核体积增大,染色质固缩,染色加深C、细胞中的酪氨酸酶活性升高D、细胞内脂褐素累积E、细胞内大分子物质交联变性答案:D2、下列细胞中含线粒体最多的是()A、上皮细胞B、心肌细胞C、成纤维细胞D、淋巴细胞答案:B3、其他条件相同时,在()情况下膜的流动性较高。
A、胆固醇含量高B、饱和脂肪酸含量高C、长链脂肪酸含量高D、在生理温度范围内温度升高答案:D4、细胞分化的普遍规律是()A、基因组改变B、基因组不发生变化C、染色体丢失D、基因发生不可逆变化E、以上都不对答案:E5、真核细胞出现的关键是()的形成A、细胞膜B、细胞核C、线粒体D、核糖体E、DNA答案:B6、在第一次减数分裂时,核膜的解体主要是在()A、偶线期B、粗线期C、终变期D、中期Ⅰ答案:C7、细胞骨架中()的组装没有踏车现象。
A、微管B、微丝C、中间纤维D、三者均是答案:C8、肿瘤细胞常旺盛地进行()A、细胞分裂B、细胞分化C、二者均有D、二者均无答案:A9、以下哪些反应不在线粒体进行()A、糖酵解B、乙酰辅酶A的生成C、三羧酸循环D、氧化磷酸化E、电子传递答案:A10、下列哪种蛋白质转运过程以囊泡转运方式进行?A、胞质→细胞核B、内质网→高尔基复合体C、胞质→内质网D、胞质→线粒体E、胞质→过氧化物酶体答案:B11、细胞学说不包括的内容是( )A、细胞是生命活动的基本结构单位和功能单位B、多细胞生物由单细胞生物发育而来C、细胞只能来自细胞D、细胞的增殖方式都是有丝分裂E、所有生物体都是由细胞构成的答案:D12、要探知细胞内某一DNA的表达水平,可以通过()技术实现。
A、Southern blotB、Northern blotC、Western blotD、原位分子杂交答案:A13、疏水层析是依靠填充物的()将蛋白质按其疏水性的强弱分开A、亲和基团B、电荷C、分子量D、疏水基团答案:D14、由起始实验材料所进行的细胞培养叫()A、原位培养B、三维培养C、传代培养D、原代培养答案:D15、关于细胞周期限制点描述,错误的是()A、限制点对正常周期运转并不是必需的B、它的作用是细胞遇到环境压力或者DNA受损时使细胞周期停止的‘刹车’作用,对细胞进入下一期之前进行检查。
细胞培养复习题
细胞培养(动物细胞培养):动物细胞培养是指将动物活体体内取出的组织用机械或消化的方法分散成单细胞悬液,然后放在类似于体内生存环境的体外环境中,进行孵育培养,使其生存、生长并维持其结构与功能的方法。
组织培养:从生物体内取出活的组织(多只组织块)在体外进行培养的方法。
有时泛指所有的体外培养。
器官培养:是将活体内的器官(一般是胚胎器官)、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。
合成培养基:根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的、配方恒定的培养基。
无血清培养基:由基础培养基和替代血清的补充因子(生长因子和激素、结合蛋白等)组成。
完全培养基:在合成培养基里添加血清后的培养基。
接触抑制:体外培养的细胞在贴附底物上连接成片、相互接触后失去运动的现象。
无限细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。
去分化(脱分化):细胞在体外不可逆地失去原有特性。
注意:去分化不意味分化能力完全丧失!在适当调节信号刺激下仍能表现出分化特性。
但分化能力会随培养时间延长而逐渐丧失。
不适应:各种分化细胞,在体外培养时逐渐失去各自的形态与功能特征,表现出某种趋同性。
原因:培养条件变化使分化发生阻抑细胞分裂指数(MI):是指细胞群中每1000个细胞中的分裂相数量细胞群体倍增时间:是指培养物中细胞数量翻倍的时间。
原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。
培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。
1)体外培养细胞,其生长方式主要有贴壁生长和悬浮生长两种,分别称为贴壁细胞和悬浮细胞。
2)一般可将贴壁细胞生长的体外培养细胞大体分为成纤维细胞型、上皮细胞型、游走细胞型、多行细胞型四种类型,最常见的为前两种。
3)体外培养细胞的主要生长特点:①贴附生长②接触抑制③密度依赖性培养细胞分化状态的变化:①去分化(脱分化)②不适应1、细胞培养的基本要求有哪些和工作方法要求:1)培养前准备2)操作间消毒3)洗手和着装4)火焰消毒培养前的准备的基本要求:培养基的选择和无菌配制动物细胞培养用液的类型、配制和无菌处理方法:1)操作程序规范2)试剂设备专人负责3)培养用品定点存放2、平衡盐溶液(BBS):(1)成分:无机盐和葡萄糖,少量酚红。
细胞生物学复习题(含参考答案)
细胞生物学复习题(含参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.细胞凋亡与细胞死亡最主要的区别是()A、炎症反应B、细胞变形C、细胞核肿胀D、内质网扩张正确答案:A2.下述哪种细胞最易分裂()A、心肌细胞B、神经元C、肝细胞D、脂肪细胞E、胃、肠上皮细胞正确答案:E3.最先被认识的成体干细胞是()A、皮肤干细胞B、肝干细胞C、造血干细胞D、间充质干细胞E、神经干细胞正确答案:C4.葡萄糖分解过程中产生的能量主要以()分子形式被利用和储存A、ATPB、GTPC、NADHD、CTPE、ATP和NADH正确答案:E5.决定红细胞血型的物质是()A、糖蛋白B、磷脂C、糖脂D、胆固醇正确答案:A6.在下列细胞物质运输方式中,不需要能量的是()A、胞吞作用B、钠钾泵C、易化扩散D、Na+驱动的葡萄糖主动运输正确答案:C7.高尔基体的主要生物学功能是()A、合成糖类B、蛋白质合成C、参与细胞氧化过程D、对蛋白质进行加工和转运E、合成脂类正确答案:D8.根据已有研究成果,下列哪项不是产生肿瘤细胞的直接诱发因素()A、长期接触放射性同位素钴60B、急性上呼吸道感染C、在切尔诺贝利核电站核泄露处居住20年D、长期食用富含亚硝酸盐的食品E、长期食用含黄曲霉的谷物正确答案:B9.位于染色体着丝粒和臂的两端,由高度重复序列组成的染色质是()A、常染色质B、核仁相随染色质C、结构异染色质D、兼性异染色质正确答案:C10.以实验的方法在小鼠的染色体DNA中插入特定的外源基因是()技术A、基因剔除小鼠B、转基因小鼠C、基因替换小鼠D、免疫缺陷正确答案:B11.细胞与基底膜之间形成的连接称为A、紧密连接B、桥粒C、间隙连接D、粘合带E、半桥粒正确答案:E12.牛脊神经节切片所观察的神经节细胞外围分布有()A、被囊细胞B、脂肪细胞C、平滑肌细胞D、血细胞正确答案:A13.细胞分裂的哪个阶段可以观察到孟德尔自由组合定律的证据()A、有丝分裂中期B、减数分裂后期ⅡC、减数分裂后期ⅠD、有丝分裂后期正确答案:C14.有关内膜系统的说法错误的是()A、内膜系统包括内质网、高尔基复合体、溶酶体、转运小泡、核膜以及线粒体等功能结构。
高考生物专题复习《细胞的增殖》真题练习含答案
高考生物专题复习《细胞的增殖》真题练习含答案一、选择题1.(2024·十堰高三统考)下列关于细胞增殖的叙述,正确的是()A.真核细胞进行有丝分裂,原核细胞进行无丝分裂B.细胞周期是指从一次细胞分裂开始到这次细胞分裂结束时为止C.可以用14C标记法研究细胞有丝分裂过程中染色体变化的基本规律D.纺锤体在有丝分裂的分裂前期形成,分裂末期消失2.(2022·辽宁,8)二甲基亚砜(DMSO)易与水分子结合,常用作细胞冻存的渗透性保护剂。
干细胞冻存复苏后指标检测结果如表所示。
下列叙述错误的是()注:细胞分裂间期分为G1期、S期(DNA复制期)和G2期。
A.冻存复苏后的干细胞可以用于治疗人类某些疾病B.G1期细胞数百分比上升,导致更多干细胞直接进入分裂期C.血清中的天然成分影响G1期,增加干细胞复苏后的活细胞数百分比D.DMSO的作用是使干细胞中自由水转化为结合水3.(2021·海南,7)真核细胞有丝分裂过程中核膜解体和重构过程如图所示。
下列有关叙述错误的是()A. Ⅰ时期,核膜解体后形成的小泡可参与新核膜重构B. Ⅰ→Ⅱ过程中,核膜围绕染色体重新组装C. Ⅲ时期,核膜组装完毕,可进入下一个细胞周期D.组装完毕后的核膜允许蛋白质等物质自由进出核孔4.(2023·湖北,13)快速分裂的癌细胞内会积累较高浓度的乳酸。
研究发现,乳酸与锌离子结合可以抑制蛋白甲的活性,甲活性下降导致蛋白乙的SUMO化修饰加强,进而加快有丝分裂后期的进程。
下列叙述正确的是()A.乳酸可以促进DNA的复制B.较高浓度乳酸可以抑制细胞的有丝分裂C.癌细胞通过无氧呼吸在线粒体中产生大量乳酸D.敲除蛋白甲基因可升高细胞内蛋白乙的SUMO化水平5.(2021·全国乙,1)果蝇体细胞含有8条染色体。
下列关于果蝇体细胞有丝分裂的叙述,错误的是()A.在分裂间期,DNA进行半保留复制,形成16个DNA分子B.在前期,每条染色体由2条染色单体组成,含2个DNA分子C.在中期,8条染色体的着丝粒排列在赤道板上,易于观察染色体D.在后期,成对的同源染色体分开,细胞中有16条染色体6.(2024·江苏南京第九中学高三模拟)细胞周期检验点是细胞周期调控的一种机制,主要是确保周期每一时相事件有序、全部完成,并与外界环境因素相联系。
细胞生物学期末复习附带答案及作业题目
一选择1 最早发现细胞的是:胡克2 观察无色透明细胞:相差显微镜;观察运动细胞:暗视野显微镜。
3 信号传递中,重要的脂类是:磷酸酰基醇。
4 多药性蛋白属于ABC转运器。
5 植物细胞与细菌的协助运输借助于质子浓度梯度。
动物则借助钠离子浓度梯度。
6 鞭毛基体和中心粒属于三联微管。
7 叶绿体质子动力势产生是因为类囊体腔的PH值低于叶绿体基质的PH值。
8 Hela细胞属于宫颈癌上皮细胞。
9 电子显微镜的分辨力:0.2nm。
光镜:0.2um。
人眼:0.2mm。
10 鞭毛轴丝由9+2微管组成。
11 矽肺与溶酶体有关。
12 纺锤体的微管包括:星体微管,动粒微管,极微管。
13 具有细胞内消化作用的细胞器是:溶酶体。
14 细胞生命活动所需能量均来自线粒体。
15 信号识别颗粒是一种核糖核蛋白,包括RNA和蛋白质。
16 抑制脂质分裂的是:松弛素。
17 钙离子浓度上升时,PKC转移到质膜内表面。
18 类囊体膜上电子传递方向:PSII---PSI---NADP+。
19 由膜围成的细胞器是胞内体。
20 氚标记的尿嘧啶核苷用于检测细胞中RNA转录。
21 膜脂不具有的分子运动是跳跃运动。
(具有的是:侧向,旋转,翻转)22 膜流的正确方向:内质网——高尔基体——质膜。
23 初级溶酶体来自粗面内质网和高尔基体。
24 线粒体合成ATP。
25 微丝重要的化学成分是肌动蛋白。
26 不消耗能量的运输方式是:电位门通道。
27 肌质网可贮存钙离子。
28 高尔基体功能功能:分泌颗粒形成。
29 微丝在非肌细胞中功能:变形运动,支架作用,吞噬运动。
30 中心粒:9组3联。
31 胞内信使有:CAMP,CGMP,DG。
生长因子:EGFR。
、32 流式细胞术可快速测定细胞中DNA含量。
33 完成细胞膜特定功能的组分为膜蛋白。
34 细胞质外层的一个复合结构体系和多功能体系成为:细胞膜。
35 酪氨酸蛋白激酶受体是血小板衍生生长因子受体。
36 肝细胞解毒作用发生在滑面内质网。
细胞生物学(第三版)复习课后题答案总结
细胞生物学(第三版)复习课后题答案总结第一章大题(细胞基本知识)1、试论述当前细胞生物学研究最集中的领域。
答:当前细胞生物学研究主要集中在以下四个领域:⑴细胞信号转导;⑵细胞增殖调控;⑶细胞衰老、凋亡及其调控;⑷基因组与后基因组学研究。
人类亟待通过以上四个方面的研究,阐明当今主要威胁人类的四大疾病:癌症、心血管疾病、艾滋病和肝炎等传染病的发病机制,并采取有效措施达到治疗的目的。
2、细胞生物学的概念和研究内容答:概念:细胞生物学是以细胞为研究对象, 从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次,以动态的观点, 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。
细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一,主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。
从生命结构层次看,细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间,同它们相互衔接,互相渗透。
研究内容:细胞生物学的主要研究内容主要包括两个大方面:细胞结构与功能、细胞重要生命活动。
涵盖九个方面的内容:⑴细胞核、染色体以及基因表达的研究;⑵生物膜与细胞器的研究;⑶细胞骨架体系的研究;⑷细胞增殖及其调控;⑸细胞分化及其调控;⑹细胞的衰老与凋亡;⑺细胞的起源与进化;⑻细胞工程;⑼细胞信号转导。
3、细胞的基本共性答:所有的细胞都有相似的化学组成;脂-蛋白体系的生物膜;DNA-RNA的遗传装置;蛋白质合成的机器―核糖体;一分为二的分裂方式。
4、细胞生存所需的最基本的细胞结构和功能。
答:细胞的生存必须具备细胞膜、核糖体、一套完整的遗传信息物质和结构。
功能:①细胞膜为细胞生命活动提供了相对稳定的环境;为DNA、RNA、蛋白质的复制、转录翻译提供了结合位点,使代谢反映高效而有序的进行;又为代谢底物的输入与代谢产物的排除提供了选择性物质运输的通道,其中伴随能量的传递。
②细胞核是遗传信息储存和表达的重要场所和指挥部,细胞的分裂、生长、分化、增值等一切生命活动均受细胞核遗传信息的指导调控。
细胞生物学复习题与答案
细胞生物学复习题与答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.若双链DNA分子的一条链中(A+T)/(C+G)=a,其互补链中(A+T)/(C+G)的值是A、1/aB、1C、aD、1+1/aE、1-1/a正确答案:C2.关于低密度脂蛋白受体的错误叙述是A、与低密度脂蛋白特异性结合B、其合成受到细胞内游离胆固醇含量的影响C、由多个穿膜糖蛋白构成的蛋白复合体D、参与受体介导的胞吞作用E、与家族性高胆固醇血症的发生有关正确答案:C3.脂锚定蛋白与膜脂分子相连是通过A、共价键B、氢键C、离子键D、范德华力E、疏水作用正确答案:A4.血红蛋白是血液内负责载氧的功能性蛋白,由四条链组成,每条链上有一个包含铁原子的血红素,使血液呈现红色。
下列关于血红蛋白的叙述中,不正确的是A、血红蛋白形成三级结构后即可发挥生物学功能B、铁离子作为无机盐离子参与血红蛋白的功能调控C、血红蛋白属于多亚基蛋白D、人血红蛋白的β-珠蛋白基因全长约1700bpE、在人血红蛋白中,若其β链上的第六位谷氨酸如果被缬氨酸替代,可导致人镰刀形红细胞贫血的发生正确答案:A5.普通光学显微镜的理论分辨率A、1-10μmB、527nmC、1.4D、1E、0.2μm正确答案:E6.下列哪项不可能是衰老细胞的膜上发生的变化A、流动性降低B、膜蛋白增多C、间隙连接减少D、膜内颗粒分布发生变化正确答案:B7.在结构上具有显著极性的细胞器是A、溶酶体B、过氧化物酶体C、高尔基复合体D、核糖体E、内质网正确答案:C8.细胞在冻存时应该遵循的原则是A、快速冷冻B、直接放入液氮C、慢速冷冻D、先快速降温后慢速降温E、先慢速降温后快速降温正确答案:C9.间隙连接蛋白基因在S期的哪一时期复制A、S期的晚期B、S期的早期或中期C、S期的中期D、S期的早期正确答案:D10.衰老细胞的细胞核最明显的变化是A、大量的核仁裂解B、核膜内折,染色质固缩化C、凋亡小体出现D、核膜破裂E、细胞核体积减小正确答案:B11.能够观察细胞膜内部结构的技术是A、重金属投影B、X射线衍射技术C、透射电镜技术D、扫描电镜技术E、冰冻断裂电镜技术正确答案:E12.将固定后的组织进行切片前还需要进行包埋。
(完整版)细胞生物学复习题及详细答案
第一章绪论六、论述题1、什么叫细胞生物学?试论述细胞生物学研究的主要内容。
答:细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,它是在三个水平(显微、亚显微与分子水平)上,以研究细胞的结构与功能、细胞增殖、细胞分化、细胞衰老与凋亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容的一门科学。
细胞生物学的主要研究内容主要包括两个大方面:细胞结构与功能、细胞重要生命活动。
涵盖九个方面的内容:⑴细胞核、染色体以及基因表达的研究;⑵生物膜与细胞器的研究;⑶细胞骨架体系的研究;⑷细胞增殖及其调控;⑸细胞分化及其调控;⑹细胞的衰老与凋亡;⑺细胞的起源与进化;⑻细胞工程;⑼细胞信号转导。
第二章细胞的统一性与多样性一、名词解释1、细胞;由膜转围成的、能进行独立繁殖的最小原生质团,是生物体电基本的开矿结构和生理功能单位。
其基本结构包括:细胞膜、细胞质、细胞核(拟核)。
2、原核细胞;没有由膜围成的明确的细胞核、体积小、结构简单、进化地位原始的细胞。
8、原核细胞和真核细胞核糖体的沉降系数分别为70S和 80S 。
9、细菌细胞表面主要是指细胞壁和细胞膜及其特化结构间体,荚膜和鞭毛等。
10、真核细胞亚显微水平的三大基本结构体系是生物膜结构系统、遗传信息表达系统,和细胞骨架系统。
三、选择题1、大肠杆菌的核糖体的沉降系数为( B )A、80SB、70SC、 60SD、50S3、在病毒与细胞起源的关系上,下面的( C )观战越来越有说服力。
A、生物大分子→病毒→细胞B、生物大分子→细胞和病毒C、生物大分子→细胞→病毒D、都不对8、原核细胞的呼吸酶定位在( B )。
A、细胞质中B、质膜上C、线粒体内膜上D、类核区内7、细菌核糖体的沉降系数为70S,由50S大亚基和30S小亚基组成。
(√)五、简答题1、为什么说支原体是目前发现的最小、最简单的能独立生活的细胞生物?答:支原体的的结构和机能极为简单:细胞膜、遗传信息载体DNA与RNA、进行蛋白质合成的一定数量的核糖体以及催化主要酶促反应所需要的酶。
细胞生物学复习题(含答案)
细胞生物学复习题(含答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.高尔基复合体的功能不包括A、蛋白质的糖基化B、蛋白质的分选C、蛋白质的合成D、蛋白质的运输E、部分肽链的水解正确答案:C2.关于微管的超微结构,不正确的叙述是A、外径24nm,内径15nmB、呈中空的圆筒状结构C、原纤维由微管蛋白α、β异二聚体连接而成D、微管蛋白α和β的氨基酸组成和排列不相同E、管壁由13条直径为5nm的原纤维组成正确答案:E3.光学显微镜的分辨极限是A、0.002nmB、0.2μmC、100μmD、2μmE、2nm正确答案:B4.动物精子头部的顶体,在入卵受精过程中起到重要作用,帮助精子溶解、消化围绕卵细胞的滤泡细胞和细胞外被,因而其实质上是A、特化的内质网B、特化的溶酶体C、特化的线粒体D、特化的核糖体E、特化的微体正确答案:B5.微管是有极性的细胞骨架,细胞内微管聚合的核心是A、纤毛B、中心体C、中心粒D、微绒毛E、鞭毛正确答案:B6.细胞内的遗传信息储存的部位主要是A、细胞核B、内质网C、溶酶体D、高尔基体E、线粒体正确答案:A7.下列关于核被膜的叙述不正确的是A、核被膜与其他细胞膜完全一样B、核被膜将遗传物质与细胞质相隔离C、外核膜附着核糖体D、膜上散布着核孔E、内核膜核质面附着核纤层正确答案:A8.原核细胞的染色体是A、一条与RNA、组蛋白结合在一起的DNAB、一条与组蛋白结合在一起的DNAC、一条不与RNA、组蛋白结合在一起的裸露的DNAD、一条以上裸露的DNAE、一条以上与RNA、组蛋白结合在一起的DNA正确答案:C9.细胞内的生命控制中心是A、溶酶体B、细胞核C、内质网D、高尔基复合体E、线粒体正确答案:B10.处于末期阶段的吞噬性溶酶体由于水解酶的活性很小或消失,还残留一些物质未被消化和分解,仍旧残留于溶酶体内,形成电镜下所见到的A、多泡体B、脂褐质C、含铁小体D、残余小体E、髓鞘样结构正确答案:D11.下面哪项不属于胞吞作用A、吞饮作用B、受体介导的胞吞作用C、基团转移D、通过网格蛋白有被小泡介导的胞饮作用E、吞噬作用正确答案:C12.三羧酸循环反应主要进行的场所是A、细胞质基质B、线粒体基粒C、线粒体嵴膜D、线粒体基质E、线粒体内膜正确答案:D13.组成ATP合酶复合体的F1亚基由几种多肽链组成A、1种B、2种C、3种D、4种E、5种正确答案:E14.有关细胞分化不正确的说法是A、生理功能发生变化B、形态结构发生变化C、细胞数目迅速增加D、细胞的遗传物质一般不变化E、生化特征发生变化正确答案:C15.在胚胎发育过程中,细胞分化的规律是A、单能性→全能性→多能性B、全能性→单能性→多能性C、多能性→全能性→单能性D、多能性→单能性→全能性E、全能性→多能性→单能性正确答案:E16.细胞内衰老、死亡细胞器被分解的过程称为A、吞饮作用B、自噬作用C、异噬作用D、自溶作用E、吞噬作用正确答案:B17.下列哪项主要与细胞识别有关A、磷脂B、脂锚定蛋白C、钙网素D、糖萼E、信号识别蛋白正确答案:D18.以下属于肌动蛋白结合蛋白的是A、MAP-1B、MAP-2C、TauD、MAP-3E、Myosin正确答案:E19.相关蛋白质克隆实验表明,溶酶体的膜蛋白具有高度同源性,其在结构上具有共同的特点,均有一段信号肽ua、一个腔内区、一个单次跨膜区和一个胞质尾区。
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1.体外培养的细胞按生长方式可分为哪二种? 按细胞在体外生长的形态特征,可分为哪几种常见类型?⑴按生长方式分为二型:粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。
悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面,而在悬浮状态下即可生长的细胞。
(绝大多数有机体细胞属粘附型细胞。
)⑵可分四型:(1)上皮型细胞 (2)成纤维型细胞 (3)游走型细胞 (4)多形型细胞2.简述体外培养细胞的整个生命活动过程的分期及每代贴附生长细胞的生长过程⑴通常,体外培养细胞的全部生命期大致可被分为以下三个阶段:①原代培养期:也称初代培养,是指从机体中取出细胞接种培养到第一次传代之前的这一阶段。
此期的细胞呈现出活跃移动的特点,可见细胞分裂,但不旺盛。
处于原代培养阶段的细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上有很大的相似性。
细胞群具有明显的异质性,细胞间的相互依存性强,在软琼脂培养基培养时细胞集落形成率很低。
②.传代期:通常是培养细胞全生命期中持续时间最长的时期,原代培养的细胞经传代后常被称做细胞系。
一般情况下,正常体细胞在传代10-50次左右后,细胞分裂的能力就会逐渐减弱,甚至完全丧失,细胞便进入衰退期。
③衰退期:处于衰退期的培养细胞,增殖速率已经变得很慢或不再增殖,直至最后衰退死亡。
以上特点,主要是针对体外培养的机体正常细胞,对于体外发生转化的细胞和肿瘤细胞而言,永生性或恶型性的获得使得这类细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体常被称为无限细胞系或连续细胞系。
⑵每代贴附生长细胞的生长过程:①游离期:细胞接种后在培养液中呈悬浮状态,也称悬浮期。
此时细胞质回缩,胞体呈圆球形。
时间:10分钟一4小时②贴壁期:细胞附着于底物上,游离期结束。
底物:玻璃、塑料、胶原、其它细胞等③潜伏期:此时细胞有生长活动,而无细胞分裂。
细胞株潜伏期一般为6~24小时。
④对数生长期:细胞数随时间变化成倍增长,活力最佳,最适合进行实验研究。
⑤停止期(平台期):细胞长满瓶壁后,细胞虽有活力但不再分裂机制:接触抑制、密度限制3.简述体外培养细胞对生存环境的基本要求.⑴细胞的营养需要:①基本营养物质:氨基酸(12种+谷氨酰胺)、维生素、葡萄糖、核糖、脱氧核糖等无机离子。
②促细胞生长因子:多由血清提供⑵细胞的生存环境:①温度条件对细胞生长的影响:不同生物来源的组织细胞培养温度不同;体外培养动物细胞最常用的温度是37℃,耐低温不耐高温。
在生理温度范围内,温度与细胞生长率之间存在正相关关系。
②气相环境对细胞生长的影响:动物细胞培养的气相环境都是采用5%CO2与95%空气(提供氧)的混合气体。
O2参与细胞的能量代谢过程,CO2用于维持培养液的酸碱度,一般多为开放式培养③培养液的酸碱度对细胞生长的影响:大多数的有机体细胞能在pH6.0~8.0的环境中生存。
最适宜的pH值范围是7.2~7.4。
体外培养的正常细胞耐酸能力要强于耐碱能力④无污染、无毒。
4.什么是细胞培养用液,主要分为哪几类?⑴培养用液是维护组织细胞生存、生长及进行细胞培养各项操作过程中所需的基本溶液。
⑵主要包括:平衡盐溶液;培养基;其他培养用液。
5.D-Hank’s与Hank’s的主要区别是什么?D-Hank’s不含有Ca2+、Mg2+ ,常用于配制胰酶溶液。
6.简述胰酶的常用浓度及配制时的注意事项。
胰酶(trypsin)溶液:浓度一般为0.1%~0.25%,配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液。
7.细胞培养中血清的主要作用?(1)提供基本营养物质; (2)提供贴壁和扩展因子 (3)提供激素及各种生长因子;(4)提供结合蛋白 (5)对培养中的细胞提供某些保护作用8.血清的使用与储存有哪些注意事项?(1)使用前的处理:使用前通常在56℃加热30分钟,这一过程称为灭活。
热灭活目的:灭活血清中的补体成分。
对于一些品质高的胎牛血清和新生牛血清可以考虑不经灭活直接用于细胞培养。
(2)储存条件:血清一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融。
大包装的血清,首先将血清灭活处理,然后分装为小包装,如10ml、20ml、50ml,储存于-20℃,使用前融化。
融化后的血清在4℃不宜长时间存放,应尽快使用。
9.简述干粉培养基的配制过程。
DMEM培养液的配制(举例):⑴900 mL ddH2O于1000 mL烧杯中,将DMEM粉1包倒入其中,盛粉袋用50 mL ddH2O分次冲洗,也倒入容器,磁力(或玻棒)搅拌溶解。
⑵用5%-10%的NaHCO3调pH至7.2。
⑶加青、链霉素至终浓度100u/mL 和100ug/mL ⑷用0.22um的滤膜过滤除菌。
⑸分装(200 mL左右)后4℃冰箱保存。
10.细胞培养工作室可分为那几个部分,各有什么作用?一般包括:准备室、培养室和缓冲室。
作用:⑴准备室:用于进行培养器皿的清洗、包装、培养物质的准备和消毒以及供应物品的保藏等。
⑵培养室:用于进行细胞培养和各种无菌操作的实验室。
其基本条件是:清洁、无菌、干燥、不通风,并具有适宜的光线。
天花板不宜高过2.5M。
⑶缓冲室:(更衣室)11. CO2培养箱的作用及使用中的注意事项。
用于维持适当温度、湿度与pH。
注意事项:⑴质量关键在控温装置,温度变化一般不应超过0.5度;培养箱的温度设在35~37℃,这是人和哺乳动物培养细胞的最适温度。
⑵培养容器需与外界保持通气状态。
⑶箱内空气应保持干净,定期消毒(紫外灯、酒精)⑷水槽:保持一定湿度12. 试述清洁液的配方组成及配制时的注意事项。
⑴清洁液:重铬酸钾(g)浓硫酸(ml)蒸馏水(ml),强清洁液63∶1000∶200 ,次强清洗液120∶200∶1000 ,弱清洁液100∶100∶1000⑵配制时应注意安全,须穿戴耐酸手套和围裙,并要保护好面部及身体裸露部分。
配制过程中可使重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加浓硫酸,并不停的用玻璃棒搅拌,使产生的热量挥发,配制溶液应选择塑料制品。
配成后清洁液一般为棕红色13.简述消毒灭菌的常用方法、要求条件及主要应用范围。
⑴物理消毒灭菌法①紫外线:用于空气,操作台表面和不能使用其它法进行消毒的培养器皿。
消毒时间:30min(至少);紫外杀菌功能除了紫外本身以外,还可以由产生的臭氧来完成。
紫外灭菌以后,最好过一个小时再进去。
②过滤:0.22μm(适用于液体)③湿热(高压蒸气灭菌法)15磅,121℃,20min各种物品有效消毒压力和时间不同,一般要求如下:培养用液、橡胶制品l0磅l0分钟布类、玻璃制品、金属器械等15磅20分钟④干烤:160℃, 2 小时(适用于玻璃器皿等)注意:消毒后不要立即打开箱门,以防冷空气骤然进入引起玻璃炸裂,影响消毒效果。
⑵化学消毒灭菌法:①75%酒精主要用于操作者的皮肤,操作台表面及无菌室内的壁面处理。
②1-2‰新洁尔灭主要用于器械的浸泡及皮肤和操作室壁面的擦试消毒。
③抗生素主要用于培养用液灭菌或预防培养物污染。
细胞培养中最常用的抗生素是青霉素(常用浓度是100u/ml)与链霉素(100μg/ml)。
不要在原代培养中加入抗生素。
14. 如何对玻璃器皿进行有效清洗?玻璃器皿的清洗:浸泡—刷洗(+烘干)—浸酸—冲洗;清洗后的玻璃器皿:干净透明无油迹。
⑴浸泡:①初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附着物软化或被溶掉。
②新的初次使用的玻璃器皿,在生产及运输过程中,玻璃表面带有大量的干固的灰尘,且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等。
先用自来水简单刷洗,然后用5%稀盐酸液浸泡过夜,以中和其中的碱性物质。
③再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的残留蛋白质,干固后不易洗掉,用后立即浸入水中,要求完全浸入,不能留有气泡或浮在液面上。
⑵刷洗:用毛刷(特制的羊毛刷)沾洗涤剂刷洗,以除去器皿表面附着较牢的杂质。
刷洗要适度,过度会损害器皿表面光泽度。
自然晾干或烘干后泡酸。
⑶浸酸:玻璃器皿浸泡到清洁液(洗液)中。
清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用,而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质。
浸泡时器皿要充满清洁液,勿留气泡或器皿露出清洁液面。
浸泡时间:一般为过夜,不应少于6 小时。
⑷冲洗:在使用后,刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗,使之尽量不留污染或清洁液的残迹。
最好用洗涤装置。
如用手工操作,需流水冲洗十次以上,每次水须灌满及倒干净,然后用蒸馏水清洗3-5 次,晾干(或烘干)备用15.细胞培养中最常用的抗生素及使用浓度是什么?青霉素(常用浓度是100u/ml)与链霉素(100μg/ml)。
16.什么是原代培养?简述原代培养方法的分类及主要操作步骤。
⑴原代培养:取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称原代培养。
⑵原代培养方法分类:贴块法和消化法。
消化法又分为冷消化与热消化;一次性消化与分次消化。
主要步骤:贴块法:将取得洗净并剔去多余成分的组织切成约1mm3大小的植块,用于植块培养。
消化法:将取得洗净并剔去多余成分的组织剪碎——蛋白酶溶液消化——机械方吹打组织块—对滤过液离心(<1000r/min, <10min)——用培养液悬浮成细胞悬液——计数并调节细胞密度——用于分离细胞培养17.何谓传代培养?简述贴壁细胞的传代操作步骤。
⑴传代培养是指细胞从一个培养瓶以1:2或其他比率转移,接种到另一培养瓶的培养。
⑵贴壁细胞传代培养:①选取生长良好的细胞,在超净工作台的酒精灯旁,倒去瓶中的旧培养液,加入2~3ml的D- Hanks液,轻轻振荡漂洗细胞,以除去悬浮在细胞表面的碎片。
②加入适量0.1%-0.25%胰蛋白酶消化液,室温消化,倒置显微镜下观察,待细胞单层收缩突起出现空隙时,倒去酶液。
③用Hanks液洗涤1次,加入适量培养液,反复吹打细胞,使其成细胞悬液。
④以1:2或1:3进行分装,并在培养瓶上做好标记,注明代号、日期,轻轻摇匀,37 ℃CO2培养箱培养。
⑤观察:细胞培养24h后,即可观察培养液的颜色及细胞的生长情况。
18.收集细胞时一般常用的转速和时间是多少?转速:1000r/min;时间:5min19. 什么是冷冻保存?影响细胞冷冻保存效果的因素有哪些?⑴冷冻保存(cryopreservation):将体外培养物悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度(一般是低于-70℃的超低温条件),并在此温度下对其长期保存的过程。
⑵①冷冻速率当冷冻速度过慢时,细胞脱水严重,细胞体积严重收缩,超过一定程度时即失去活性。
冷冻速度过慢,还会引起细胞外溶液部分结冰,从而使细胞外未结冰的溶液中溶质浓度增高,产生溶质损伤。
当冷冻速度过快时,细胞内水分来不及外渗,会形成较大冰晶,造成细胞膜及细胞器的破坏,产生细胞内冰晶损伤。
②冷冻保存温度:液氮温度(-196℃)是目前最佳冷冻保存温度。
应用-70℃~-80℃条件冷冻保存细胞,短期内对细胞活性无明显影响,但随着冻存时间延长,细胞存活率明显下降。