临床标本的念珠菌感染分类和药敏分析

临床标本的念珠菌感染分类和药敏分析
发表时间：2009-06-11T17:34:20.013Z 来源：《中外健康文摘》2009年2月第5期供稿作者：靖杰[导读] 目的了解医院念珠菌感染的病原菌分类及药敏分析。

临床标本的念珠菌感染分类和药敏分析
【摘要】目的了解医院念珠菌感染的病原菌分类及药敏分析。

方法各种临床标本经分离培养后，用改良纸片法测定标本分离的各类念珠菌对氟康唑的敏感性。

结果临床念珠菌感染中以白念珠菌为主(52.0%)，热带念珠菌（17.2 %），光滑念珠菌（10.1%），克柔念珠菌（9.4%），其他念珠菌（11.4 %）。

非白念珠菌感染呈上升趋势。

两性霉素、制霉菌素耐药率最低，分别为6.1 %、3.4%，其次为伊曲康唑(17.0%)，氟康唑耐药率最高(57.1 %)，克柔念珠菌是耐药性较强的念珠菌，其次是光滑念珠菌、热带念珠菌；非白念珠菌与白念珠菌相比耐药率有显著差异。

结论临床标本的念珠菌感染呈上升趋势，应加强念珠菌的检测和耐药性分析，临床经验用
药应依据药敏结果合理选用。

【关键词】念珠菌药敏试验
随着广谱抗生素、激素和免疫抑制剂的广泛应用，念珠菌引起患者医院感染日益增多，患者往往有严重的基础疾病，并长期使用抗生素，由于条件致病性念珠菌感染病例不断增多，又使得念珠菌治疗后的耐药问题日渐突出。

我们对2005年1月～2007年 11月呼吸道分离的437株念珠菌菌种及药敏结果进行分析，现报道如下。

1 材料与方法
1.1 试验菌株收集2005年1月～2007年11月我院住院患者临床标本中分离的437株念珠菌。

1.2 质控菌株白色念珠菌ATCC64548（S），白色念珠菌ATCC64550（R）。

1.3 真菌药敏琼脂及药敏纸片氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B、制霉菌素、5-氟胞嘧啶等5种药敏纸片及改良Shadomy琼脂平板均购自丹麦Rosco公司。

1.4 培养与鉴定菌落分离于沙保弱琼脂培养基(自制)，科玛嘉显色培养基(郑州博赛科技有限公司)，鉴定API系统20C AUX试条（法国生物梅里埃公司生产）。

1.5 药敏试验 (1)接种液的配制：挑取单个菌落于无菌盐水，调制成为5×105CFU/ml的菌悬液，再用生理盐水1∶1稀释。

克柔念珠菌先配成5×105CFU/ml的菌悬液，再用生理盐水 1∶10稀释。

(2)按试剂说明书所提供的方法和标准进行操作。

Shadomy琼脂培养：先置35℃干燥20～25min，对于9cm平皿吸 0.5ml接种液，14cm吸1.0ml接种液，倾注于平板表面，涂布均匀，用移液管吸走多余液体，然后，平板在35℃干燥10min，贴药敏纸片，培养18～24h后判读结果。

抑菌圈判断敏感（S）≥ 20mm，剂量依赖性敏感（SDD）12-19mm和耐药（R）≤11mm。

真菌纸片药敏的质控，白色假丝酵母菌ATCC64548对氟康唑的抑菌环为36-42（S），白色假丝菌酵母菌ATCC64550为11-17（R）。

2 结果
437株念珠菌鉴定白念珠菌占52.0% (227/437)，光滑念珠菌占10.1% (44/437)，热带念珠菌占17.2% (75/437)，克柔念珠菌占9.4% (41/437)，白念珠菌的检出率明显高于光滑念珠菌。

3 讨论
各种临床标本中真菌的检出率以痰液最高，而且我们还发现，大多为混合感染或继发于其他细菌感染。

白色念珠菌是临床常见的条件致病菌，抗生素的滥用及免疫抑制广泛使用使得念珠菌的感染机会逐渐增加。

近年来，人类念珠菌感染有由白念珠菌转向其他非白念珠菌感染的趋势［1］。

本研究非白念珠菌感染占 47.9%，这也与国内、外的报道一致［2］。

有文献报道，氟康唑对克柔念珠菌引起的感染疗效略差，与我实验相符，伊曲康唑对热带念珠菌疗效不佳［3］。

随着氟康唑应用的日益广泛，导致念珠菌症向非白念珠菌症变迁，且那些感染菌对抗真菌药物的耐药率明显高于白念珠菌，非白念珠菌与白念珠菌对抗真菌药物的耐药率相比有显著差异。

我们还发现，多重感染的患者长期接受抗真菌药物治疗，使其对常用抗真菌药物敏感性降低，出现念珠菌的多重耐药现象，导致少见的致病性真菌寄生和感染现象增加。

痰标本中437株念珠菌对5种常用抗真菌药物的耐药率显示，两性霉素 B和制霉菌素的耐药率最低(3.4%～6.1%)，伊曲康唑其次，氟康唑的耐药率最高(57.1%)。

氟康唑不良反应小，较安全，能广泛渗透体液组织器官，对念珠菌属、隐球菌属感染疗效较好，目前临床广泛使用，部分念珠菌已出现耐药，白念珠菌尽管有较多菌株对氟康唑耐药，但对其他抗真菌药物的敏感性仍然较好，因此，将临床分离的念珠菌鉴定至种水平，对临床抗真菌感染治疗有着重要的指导意义。

建议有严重免疫功能低下的患者，应避免长期使用唑类药物。

参考文献
[1] 王文莉，王端礼. 念珠菌对咪唑类药物耐药现象的研究现状[J].国外医学皮肤性病学分册，1996，22.
[2] 陶风蓉，宣天芝，张秀珍. 用E-test方法监测酵母样真菌对氟康唑的耐药性[J].中华医学杂志，2002，12(18)：632.
[3] 王苏建，王友良. 真菌血症18例微生物学及临床分析[J].中华医学检验杂志，1999，22：97.【中图分类号】R379.4 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2009)05-0093-02 靖杰（武警湖北总队医院湖北武汉 430061）。