生物制药工艺学思考题及答案资料讲解

生物制药工艺学思考
题及答案
抗生素发酵生产工艺
1. 青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义？
青霉素是发现最早，最卓越的一种B-内酰胺类抗生素，它是抗生素工业的首要产品，青霉素是各种半合成抗生素的原料。

青霉素的缺点是对酸不稳定，不能口服，排泄快，对革兰氏阴性菌无效。

青霉素经过扩环后，形成头孢菌素母核，成为半合成头孢菌素的原料。

2. 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制？
青霉素在深层培养条件下，经历7个不同的时期，每个时期有其菌体形态特性，在规定时间取样，通过显镜检查这些形态变化，用于工程控制。

第一期：分生孢子萌发，形成芽管，原生质未分化，具有小泡。

第二期：菌丝繁殖，原生质体具有嗜碱性，类脂肪小颗粒。

第三期：形成脂肪包含体，积累储蓄物，没有空洞，嗜碱性很强。

第四期：脂肪包含体形成小滴并减少，中小空泡，原生质体嗜碱性减弱，开始产生抗生素。

第五期：形成大空泡，有中性染色大颗粒，菌丝呈桶状。

脂肪包含体消失，青霉素产量提高。

第六期：出现个别自溶细胞，细胞内无颗粒，仍然桶状，释放游离氨，pH 上升。

第七期：菌丝完全自溶，仅有空细胞壁。

一到四期为菌丝生长期，三期的菌体适宜为种子。

四到五期为生产期，生产能力最强，通过工艺措施，延长此期，获得高产。

在第六期到来之前发束发酵。

3. 青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？
控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标，不同时期分段控制。

在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，菌体浓度。

最后要注意消沫，影响呼吸代谢。

4. 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？
青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。

提炼工艺包括如下单元操作：
①预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。

②萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。

③脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。

④结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐可直接结晶析出。

氨基酸发酵工艺
1. 如何对谷氨酸发酵工艺过程进行调控？
发酵过程流加铵盐、尿素、氨水等氮源，补充NH4+；生物素适量控制在2-5μg/L；pH控制在中性或微碱性；供氧充足；磷酸盐适量。

2. 氨基酸生产菌有什么特性，为什么？
L-谷氨酸发酵微生物的优良菌株多在棒状杆菌属、小短杆菌属、节杆菌属和短杆菌属中。

具有下述共同特性：①细胞形态为短杆至棒状；②无鞭毛，不
运动；③不形成芽孢；④革兰氏阳性；⑤生物素缺陷型；⑥三羧酸循环、戊糖磷酸途径突变；⑦在通气培养条件下产生大量L-谷氨酸。

3. 生物素在谷氨酸发酵过程中的作用是什么？
生物素是不饱和脂肪酸合成过程中所需的乙酰CoA的辅酶。

生物素缺陷型菌种因不能合成生物素，从而抑制了不饱和脂肪酸的合成。

而不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。

因此，磷脂的合成量也相应减少，这就会导致细胞膜结构不完整，提高细胞膜对谷氨酸的通透性，解除其对谷氨酸脱氢酶的抑制，源源不断生产谷氨酸。

维生素发酵生产工艺
1. 比较分析现行维生素C的两种生产工艺过程及本质区别，有什么优势？
现行的维生素c生产工艺过程有：莱氏化学合成法和两步发酵法。

莱氏化学合成法：D-葡萄糖为原料，进过催化氢化生成D-山梨醇，然后生物氧化转变为L-山梨糖，酸性液中丙酮化，对α-β-二仲醇进行保护。

L-山梨糖高锰酸钾在碱性溶液中氧化为二丙酮-2-酮-L-古龙酸，除去丙酮，内酯化和烯醇化得到L-抗坏血酸。

整个合成过程必须保持第4位碳原子的构型不变。

两部发酵法：①催化氢化：催化氢化D-葡萄糖，控制压力，在氢做还原剂、镍做催化剂的条件下，将醛基还原成醇基，从而制备D-山梨醇。

②第一部发酵：D-山梨醇C2位羟基氧化为羰基，其他基团不变，微生物转化得L-山梨糖。

③第二部发酵：L-山梨糖到2-酮基-L-古龙酸需要将C1位醇基氧化为羧基，保持其他基团不发生变化。

其中两步发酵法更具有优势。

原因如下：①以生物氧化代替化学氧化简化了生产工艺。

②省略了丙酮化反应步骤，节省了丙酮、硫酸等大量化工原料和
其防爆设备，节约了成本，有利于安全生产。

③三废和污染较小。

④提高了生产能力。

2.维生素C的生产工艺中，手性中心是如何实现的？
维生素C分子中含有两个手性碳原子，故有四个光学异构体。

其中L(+)-抗坏血酸括性最高，D（-）-异抗坏血酸活性仅为其20％，工业上将其作为食品抗氧剂。

D(-)-抗坏血酸和L(+)-异抗坏血酸几乎无活性。

3. 在未来，一步发酵能取代两部发酵，成为维生素生产的主流工艺吗，为什么？
一步法发酵对工业菌株的山梨醇/糖旁路代谢途径进行敲除。

与原始菌株比较，发现单菌发酵24h后，培养基中剩余的山梨醇糖含量基本保持恒定，NSR 缺失株相对于原始菌株残糖量提高了85.9%。

基因工程制药工艺
1. 工程菌与宿主菌对培养基要求有何不同，为什么？
碳源：大肠杆菌以蛋白胨等蛋白质的降解物作为碳源；酵母利用葡萄糖、半乳糖等单糖类物质为碳源。

氮源：不同工程菌对氮源利用能力差异大，具有很高的选择性。

大肠杆菌利用酵母粉等大分子有机氮源；酵母利用氨基酸为氮源。

选择剂：基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择剂；基因工程酵母菌常用氨基酸营养缺陷型。

2. 影响工程菌培养工艺的主要参数是什么？如何优化控制？
温度：生长与生产温度不一致。

较高温度表达量大，易形成包涵体。

策略：较低温度下有利于表达可溶性蛋白质。

对于热敏感的蛋白质，高温会降解破坏。

策略：生产期可采用先高温，然后低温，变温表达，避免蛋白质降解。

pH：了解发酵过程中各个阶段的适宜pH以后，进一步设法控制pH在合适的范围内。

分阶段控制pH：根据试验结果来确定生长最适pH和产物最适pH，以达到最佳生产。

溶解氧：从供应量和需要量（菌体生长、质粒稳定性、产物积累）二个方面考虑，使之需氧不超过设备的供氧能力，在临界溶解氧浓度之上。

3. 诱导物对生长和产物合成有何影响，为什么？
诱导物用来诱导表达型工程菌。

在细胞生长到一定阶段，必需添加诱导物，以解除目标基因的抑制状态，活化基因，进行转录和翻译，生成产物。

适宜的诱导时间非常重要。

诱导物的浓度及其发酵温度会影响表达量和产物存在形式。

化学诱导型启动子：lzc、tac、T7等，诱导时间为对数生长期。

温度诱导型启动子：P L、P R等，诱导时间为对数期或稍后一些。

基因工程制药工艺
1. 什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？
将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。

工程菌构建的基本过程如下：目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质）
酶切：在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。

（DNA+缓冲液+限制性内切酶；37℃，1小时；加热、加EDTA终止；电泳检查酶切完整性）
链接：DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。

（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；16-26℃，数小时；70℃加热10min终止反应）
转化：把外源基因导入宿主细胞的过程。

（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）
2. 目标基因克隆的主要方法有哪些？分析其特点及其适用范围
①PCR扩增。

优点：简便快速，高效，数kb单基因克隆。

缺点：DNA聚合酶活性和保真性限制。

（94℃变性→55℃退火→72℃延伸→94℃变性……）
②文库筛选。

优点：长片段，无碱基错误，位置序列基因克隆。

缺点：繁琐，过程复杂，耗时，昂贵。

③化学合成：简便，准确，已知序列基因克隆，引物合成。

缺点：受合成仪性能限制，长度很短。

3. 大肠杆菌中高效表达蛋白药物着重设计哪几个方面？
为了确保工程菌构建的有效性，必须遵循GMP及其有关生物制品研究技术指导原则，做好菌种的记录和管理。

①表达载体，详细记录表达载体，包括基因的来源、克隆和鉴定，表达载体的构建、结构和遗传特性。

②宿主细胞:详细记录宿主细胞的资料，包括细胞株系名称、来源、传代历史、鉴定结果及基本生物学特性等。

③目标基因序列:目标基因的序列包括插入基因和表达载体两端控制区的核苷酸序列，以及所有与表达有关的序列，做到序列清楚。

重组人干扰素生产工艺
1. 重组人干扰素生产工艺路线有哪几条，有何缺点？
①体外诱生干扰素制备工艺：仙台病毒诱导人白细胞：血浆→人白细胞（病毒诱导）→分离纯化→人白干扰素。

缺点：产量低，1g IFNα需要105L人血白细胞，来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵，潜在的血源性病毒污染的可能性。

②Namalva细胞培养（病毒培养）→合成干扰素→分离纯化→多压型混合干扰素。

优点：首次实现大规模商业化生产，用细胞培养8000L。

缺点：活性低，退出临床应用。

③工程菌构建→发酵培养→包涵体→复性→重组人干扰素。

工艺特点：发酵过程，随后变性、复性过程。

缺点：生物合成、纯化及制剂阶段均使用了一些动物或人血液提取成分，仍然没有摆脱潜在的传播血源性疾病的危险。

④工程ＣＨＯ细胞系构建→细胞培养→收集培养液→分离纯化→重组人干扰素。

工艺特点：分泌表达，产量低，成本高，过程控制严格。

可以做到无血清培养。

⑤基因工程假单胞杆菌发酵生产工艺。

工艺特点：发酵周期短：几个小时，无需变性、复性过程，获得有活性产品，纯化过程：淘汰抗体亲和层析，制剂中采用非人血清白蛋白新型保护剂，使得整个制造过程中不使用任何血液提取成分。

2. 重组人干扰素发酵工段的关键控制点是什么，如何实现最优化过程控制？
①摇瓶培养：摇瓶培养：30℃，pH7.0，250rpm，16-20h；
②种子罐培养：接种：接入50L种子罐，接种量10%培养：30℃，pH7.0控制：级联调节通气量和搅拌转速。

3. 干扰素纯化工艺的原理是什么？
基于蛋白质的电荷性除去杂质，准确控制缓冲液和上样液的pH及电导值，纯化干扰素
4. 干扰素纯化工艺过程中各工段的目的是什么？
①溶解粗干扰素：配置缓冲液（超纯水，pH7.5磷酸缓冲液，0.45μm滤器和10ku超滤系统，百级层流下收集），冷却至2-10℃。

在均浆器中完全溶解粗干扰素。

②等点沉淀与疏水层析：磷酸调节至pH5.0，沉淀杂蛋白，离心收集上清液（含有人干扰素）。

用NaOH调节上清液pH7.0，并用5M NaCl调节溶液电导值180ms/cm，上样，进行疏水层析，利用干扰素的疏水性进行吸附。

在2-10℃下，用0.025M磷酸缓冲液（pH7.0）+1.6M NaCl进行洗涤，除去非疏水性蛋白。

用0.01M磷酸缓冲液（pH8.0）进行洗脱，收集洗脱液，干扰素。

或②等电点沉淀与盐析：磷酸调节pH4.5，调节电导值40 ms/cm，2-10℃静置过夜，除杂蛋白。

1000ku超滤膜过滤，除去大蛋白。

调整溶液pH8.0，10ku 超滤膜，0.005M缓冲液。

③阴离子交换层析与浓缩：0.01M磷酸缓冲液（pH8.0）平衡树脂，盐浓度线性梯度5~50ms/cm进行洗脱，2-10℃，配合SDS-PAGE收集干扰素峰。

把目标馏分合并，调整溶液pH和电导值，10ku超滤膜，0.05M醋酸缓冲液（5.0）中透析。

④阳离子交换层析与浓缩：用0.1M醋酸缓冲液（pH0.5）平衡树脂。

上样，相同缓冲液冲洗。

盐浓度线性梯度5-50ms/cm进行洗脱，配合SDS-PAGE收集干扰素峰。

合并馏分，10ku超滤膜系统。

⑤凝胶过滤层析：0.15M NaCl的0.01M磷酸缓冲液（pH7.0）清洗系统和树脂。

上样，相同洗脱液进行洗脱。

合并干扰素部分。

⑥无菌过滤分装：0.22μm膜过滤干扰素溶液，分装，-20℃以下的冰箱中保存。

动物细胞培养制药工艺
1. 离体动物细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的代谢特征是什么？蛋白质的合成、修饰、分泌功能与制药有何关系？
葡萄糖代谢：糖酵解为主，生成丙酮酸和乳酸。

丙酮酸经TCA循环，氧化产生CO2和水，释放能量。

葡萄糖一小部分进入PPP途径，生成4、5、7碳糖和NADPH。

谷氨酰胺：作为氮源，转氨、脱氨（为主），合成非必需氨基酸。

大多数谷氨酰胺通过脱氨生成谷氨酸，并释放铵离子。

小部分谷氨酰胺通过转氨生成其他嘌呤、嘧啶和氨基糖等合成代谢的前体。

氨基酸在粗糙内质网上的核糖体上，以mRNA为模板，进行密码翻译，生成蛋白质的多肽链。

在粗糙内质网腔和高尔基体内加工修饰形成糖基化蛋白质。

糖基结构易变化，不同细胞系糖基化特征不同，要根据药物的结构选择适宜细胞系。

2. 制药动物细胞系的种类和特点有哪些？
有限细胞系：是生长和寿命有限的细胞，经过若干传代培养后失去增殖能力，老化死亡。

有限生长，无致瘤性，有接触抑制性。

e.g.2BS。

寿命取决于细胞来源的物种和年龄、器官。

胚成纤维细胞人（50代），鸡胚（30代），小鼠（8代）
无限细胞系：寿命和活性不受传代次数影响的细胞系，可连续培养。

也称为永久细胞系或连续细胞系。

没有接触抑制现象，对培养条件和营养因子等要求低，倍增时间短，非常适合于制药工业生产。

人源细胞系：Namalwa，WI-38，MRC-5
哺乳动物细胞系：CHO，贴壁或悬浮培养，对剪切力和渗透压有较高的忍受能力。

BHK-21，C127，Vero
杂交瘤细胞系：脾脏B细胞与骨髓瘤细胞通过原生质体融合，获得的杂交细胞。

无血清培养，高密度悬浮生长，容易转染和生长，大量分泌和高效表达3. 与大肠杆菌和酵母系统相比，哺乳动物源细胞系统制药的优缺点，如何选择？
CHO细胞：Chinese hamster ovary，中国仓鼠卵巢，亚二倍体核型，
2n=22。

特点：贴壁型生长，也可悬浮培养，对剪切力和渗透压有较高的忍受能力。

最为普遍和成熟表达糖基化蛋白药物的细胞。

多种衍生突变株，高表达。

BHK-21细胞：成纤维样细胞，非整倍体，2n=44.用于增殖病毒、制备疫苗和重组蛋白。

C127细胞，贴壁生长，适合于牛乳头病毒DNA载体的转化。

Vero细胞：多倍体核型，贴壁依赖性。

Vero6最为常用，增至病毒，生产疫苗。

4. 工程动物细胞系的建立：基本过程，表达载体设计，转化与培养方案筛选和鉴定方法。

它们与基因工程微生物的异同是什么？
5. 动物细胞培养基组成成分及其作用是什么？与微生物培养基培养基相比，有何特殊性？
动物细胞培养基的成分主要有糖类、氨基酸、维生素与无机盐、激素及附加成分。

作用：糖类提供细胞生长的碳源和能源。

分解后释放出能量ATP。

氨基酸可通过生糖或生酮途径转变为糖或脂肪酸，间接提供能量。

维生素既不是细胞的物质基础，也不是能量物质，对代谢和生长起调节和控制作用。

无机盐是细胞代谢所需酶的辅基，同时保持细胞的渗透压和缓冲PH的变化。

激素对细胞的生长有刺激作用。

贴附因子的作用是让细胞的贴壁生长。

6. 生产用最适动物细胞培养基应该选择哪种，为什么？
合成培养基，组分稳定，容易配置。

已有几十种合成培养基，大部分已商品化
7. 如何控制动物细胞培养基的质量？
培养用水质：必须按照GMP要求进行制备，除去普通水中的各类元素、有毒或有害物质及微生物和热源，达到纯水标准。

缓冲液：H2CO3/NaCHO3；NaH2PO4/Na2HPO4；恒定pH。

平衡盐溶液：BBS，由NaCl、无机盐和葡萄糖、缓冲剂、指示剂组成。

满足细胞对盐离子、碳营养要求；pH和渗透压要求；直观观察pH。

磷酸盐缓冲液：PBS，KCl、KH2PO4、NaCl、NaHPO4。

培养物、器皿的洗涤液。

氨基酸配置：50倍浓缩液。

使用L型氨基酸，对于DL混合型氨基酸，使用量应该加倍。

谷氨酰胺不稳定，需单独配置（100倍浓缩液，-20℃保存）。

8. 基质依赖性与非依赖性细胞系对培养条件的要求有什么不同？如何满足？
贴壁依赖性细胞：依赖于生长基质，并在表面才能生长的细胞。

只能贴壁生长。

多数天然细胞。

非贴壁依赖性细胞：不依赖于生长基质，可悬浮生长。

淋巴细胞、杂交瘤细胞、肿瘤细胞。

生长基质：改变介质表面特性，支撑、促进动物细胞贴附的物质。

为支持介质表面提供适量带正电荷，细胞被吸附在介质上。

9. 细胞大规模培养有几种方法，有何特点，如何选择应用？
①单层贴壁培养。

单层贴壁培养是指把细胞贴附于一定的固体支持表面上，生长形成单层细胞的培养方法，适合于贴壁依赖性细胞培养。

②悬浮培养。

悬浮培养是指细胞在细胞反应器内游离悬浮生长的培养过程，主要对于非贴壁性依赖性细胞，如杂交瘤细胞。

③微囊培养。

把动物细胞包埋在微载体内或胶囊内固定化后，进行悬浮培养，适合于贴壁依赖性和非贴壁依赖性细胞。

④微载体培养。

微载体是三维培养系统，有很大的比表面积，细胞贴附于载体上增值，再悬浮于细胞液中，兼具有贴壁和悬浮培养的双重优点。

10. 比较微生物发酵控制过程的异同
重组人红细胞生成素的生产工艺
1. 比较各种表达系统生产rhEPO的优缺点。

①SV40病毒启动子的表达载体，在COS-1中瞬时表达hEPO。

②昆虫SF9细胞中杆状病毒载体表达rhEPO。

产率有所改善，糖基化程度较小。

③家蚕系统表达，糖基化简单，药物在体内稳定性较低、活性较差等问题。

④大肠杆菌表达，仅具体外抗原结合活性。

⑤干扰素-α基因启动子的rhEPO表达载体，BALL-1细胞，产生较高量的rhEPO。

⑥CHO、BHK细胞中稳定表达，rhEPO与天然EPO结构、活性相似。

2. CHO培养生产rhEPO的基本工艺过程及其控制点是什么，为什么？
①复苏：液氮冻存的CHO细胞系在37℃中水浴快速融化。

无菌离心，弃上清。

②培养：加适量DMEM（10%小牛血清），37℃、CO2培养箱培养，连续传三代。

③消化：用胰蛋白酶消化贴壁细胞后，制成细胞浓度约为2.5×106个/ml。

用于接种。

④反应器灭菌：加纤维素载体片及pH7.0的PBS缓冲液，高压灭菌。

⑤接种：排出PBS缓冲液，加DMEM培养基（含10％血清），接入种子细胞。

⑥贴壁培养：pH7，<50r/min，37℃，DO50-80%。

⑦扩增培养：80－100r/min。

pH7，37℃。

⑧灌流培养：控制温度、DO、pH值等培养条件，进行无血清培养基连续培养。

⑨收获培养物：连续收获，4℃－8℃保存。

控制点：
①搅拌控制：接种后,搅拌速度缓慢，使细胞贴附于载体上，随着细胞数量的增加逐渐提高搅拌速度。

②温度控制：较为严格，恒定37℃
③pH值控制：7.2-7.4,输入CO2和碳酸氢盐溶液维持其恒定。

④溶解氧控制：在50-80％的范围内，通入氧气、空气、氢气或氮气的比例混合气体。

⑤葡萄糖控制：流加补料
⑥代谢废物控制：监测铵、乳酸盐类等，维持较低浓度，减少对细胞损害。

3. rhEPO分离纯化工艺中使用了哪些操作单元，为什么？
收获培养液、透析、过滤、DEAE离子交换、凝胶过滤。

三废处理工艺
1. 简述制药企业清洁生产的途径
①资源综合利用——原料资源的综合利用、水资源的综合利用、二次资源综合利用、废物综合利用；
②改革工艺和装备——原料处理工艺的改革、产品制造工艺的全过程统筹、装备技术的更新；
③改进操作和加强管理；
④必要的末端处理。

2. 简述制药工业的末端污染特点
制药厂排出的污染物通常具有毒性、刺激性和腐蚀性。

化学制药厂的污染物还具有数量少、组分多、变化大、间歇排放、pH不稳定、COD高等特点。

这些特点与防治措施的选择有直接关系。

3. 制药废水分为哪几种类型？有何特点？如何治理？
①含悬浮物或胶体的废水。

废水中所含的悬浮物一般可通过沉淀、过滤或气浮等方法除去。

是废水的常规预处理程序。

气浮法的原理：利用高度分散的微小气泡作为载体去粘附废水中的悬浮物，使其密度小于水(相对密度<1)而上浮到水面，从而实现固液分离。

对于悬浮物质：用沉淀、气浮、过滤等方法去除。

对于树脂状物：由于不易上浮和沉淀，须采用辅助手段（如通入压缩空气、直接蒸汽加热、加入无机盐等）使悬浮物聚集起来沉淀或气浮分离。

对于极小胶体：可用混凝法或吸附法处理。

②含酸碱性废水。

化学制药过程中常排出各种含酸或碱的废水，其中以酸性废水居多。

含酸浓度高的废水——应考虑尽量回收利用及综合利用，如利用废硫酸制作磷肥等。

含酸（碱）1%以下而没有经济价值的废水——经中和后才能排放，以免腐蚀排水管道，危害水中生物。

中和时，尽量采用废碱或废酸，也可考虑用氨水中和，然后用于灌溉。

若中和后的废水水质符合国家规定的排放标准，可直接排入下水道，否则需进一步处理。

③含无机物废水。

药厂中常见的无机物是溶解于废水中的卤化物、氰化物、硫酸盐及重金属离子。

稀释法——不含毒物且一时无法回收综合利用的无机盐废水。

浓缩结晶法——单纯的无机盐废水。

化学处理法——剧毒的氰化
物、氟化物废水。

化学沉淀法——重金属废水（汞、铜、铬等）形成碳酸盐、氢氧化物、硫化物等。

④含有机物废水。

此类废水中所含的有机物一般为原辅材料、产物和副产物等。

在进行无害化处理前，应尽可能考虑回收和综合利用。

常用的回收和综合利用方法有蒸馏、萃取和化学处理等。

对于成分复杂、难以回收利用或者经回收后仍不符合徘放标准的有机废水，则需采用适当方法进行无害化处理。

生物处理法——易被氧化分解的有机废水。

沉淀、萃取、吸附——低浓度、不易被氧化分解的有机废水。

焚烧法——浓度高、热值高、又难以用其它方法处理的有机废水。

4. 简述废水处理的基本方法
①物理法——是利用物理作用将废水中呈悬浮状态的污染物分离出来，在分离过程中不改变其化学性质。

如沉降、气浮、过滤、离心、蒸发、浓缩等。

物理法常用于废水的一级处理。

②化学法——是利用化学反应原理来分离、回收废水中各种形态的污染物。

如中和、凝聚、氧化和还原等。

化学法常用于有毒、有害废水的处理，使废水达到不影响生物处理的条件。

③物理化学法——是综合利用物理和化学作用除去废水中的污染物。

如吸附法、离子交换法和膜分离法等。

近年来，物理化学法处理废水已形成了一些固定的工艺单元，得到了广泛的应用。

④生物法——是利用微生物的代谢作用，使废水中呈溶解和胶体状态的有机污染物转化为稳定、无害的物质，如H20和CO2等。

生物法能够去除废水中的大部分有机污染物，是常用的二级处理法。