尿液或脑脊液总蛋白测定

尿液或脑脊液总蛋白测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理
在酸性环境中，蛋白和含有钼酸盐离子的苯三酚结合形成蓝色复合物，在600nm处有最大吸收峰。

因此在600nm处标本中蛋白的浓度与吸光度的变化成正比例。

3 标本：
3.1 病人准备：留取24h尿液标本（加苯防腐）混匀后记录尿液总量取少量尿液离心或用滤纸过滤。

在避免蒸发的条件下，CSF可在2℃和8℃保存5d。

3.2 类型：尿液或脑脊液。

3.3 标本存放尿液的稳定性：20～25℃保存可稳定1天，2～8℃保存至少可稳定2天；脑脊液的稳定性：20～25℃保存可稳定1天，4～8℃保存可稳定6天，-20℃保存可稳定6个。

3.4 标本运输常温条件下运输。

3.5 标本拒收标准细菌污染的标本。

4 实验材料
4.1 试剂磺基水杨酸—硫酸钠试剂
4.1.1 试剂准备：可随时取用, 2-80C可稳定到有效期
4.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻！
4.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.4 注意事项：不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂
4.2 校准品：使用总蛋白（200mg/L）校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：每批样品检测时，总蛋白（200mg/L）校准品进行内部质量控制。

5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制
在每一批标本中都应把总蛋白（200mg/L）校准品做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法
以总蛋白（200mg/L）校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mg/L报告。

9 参考值范围
尿液：<150mg/24h；脑脊液<500mg/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

临床情况 CSFPr含量（g/L）临床情况 CSFPr含量（g/L）
正常 0.15—0.45 癫痫 0.5—3 球菌性脑膜炎 1—30 神经梅毒 0.5—1.5
结核性脑膜炎 0.5—3 多发性硬化症 0.25—0.8
浆液性脑膜炎 0.3—1 脊髓肿瘤 1—20
脑浆 0.5—3 脑瘤 0.15—2
脑出血 0.3—1.5 脑脓肿 0.3—
3
尿液：24～140mg/24h
10注意事项：
10.1 尿液的有多含细胞或浑浊，应先离心除去，取清晰透
明尿的测定。

10.2 测血前应将尿液作蛋白实性，如Pr为2+以上应用生理
盐水将尿液稀释5-20倍，结果乘以稀释倍数。

10.3 温度时间加试剂的方式等可影响实验结果，故不宜使
用标准曲线法，宜每次带标准管同样操作。

10.4 磺基水杨酸——硫酸钠溶液放置过久，如产生颜色或
细微沉淀应重新配制。

10.5 CSF内Pr含量过高时，一定要稀释后再测定。

10.6 加磺基水杨酸—硫酸钠溶泊10min内浊度进行性增加，
到10分钟达顶点，如遇絮状发生，应颠倒混合后进行比浊。

10.7 加磺基水杨酸一硫酸钠溶泊时，应边加边摇，最后摇匀即可，但勿剧烈振摇，否则形成过多的泡沫，影响比浊。

11临床意义
在多数肾脏疾病中可观测到尿液总蛋白浓度升高（蛋白尿）。

肾病可导致肾小球渗透性增加或肾小管再吸收能力下降。

导致肾后的蛋白尿原因有感染，出血或泌尿管的恶性疾病。

尿液蛋白水平升高可能与生理或心理压力和其他急性病症如发烧有关。

生理性蛋白尿：功能性蛋白尿：常见于剧烈运动的零冷等，24h尿Pr一般在2g以下，体位性蛋白尿：清晨无蛋白尿,起床活动后出现蛋白尿。

摄食性蛋白尿：静脉输注蛋白制剂或进食过多Pr时，尿中Pr可排出增多。

病理性蛋白尿：肾前性蛋白尿、MM、溶血性疾病所致血蛋白尿、大面积肌肉创伤或炎症时的肌红蛋白尿、单核细胞性白血病时的溶菌酶尿等。

肾小球性蛋白尿，肾小球肾炎、肾孟肾炎、急性肾功衰、高血压肾病、肾小管酸中毒、重金属中毒、肾盂输尿管、膀胱及尿道的炎症，结石和肿瘤等疾病时可以出现蛋白尿。