常规菌检测标准
菌安全鉴定报告检测
菌安全鉴定报告检测
样品：绿色蔬菜
检测项目：菌群数、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、霉菌、酵母菌检测结果：
项目检测值结果
菌群数1.2×105 CFU/g 合格
大肠杆菌<10 CFU/g 合格
沙门氏菌未检出合格
金黄色葡萄球菌3.5×102 CFU/g 不合格
霉菌2.0×103 CFU/g 不合格
酵母菌1.0×102 CFU/g 合格
检测结论：
1. 样品的菌群数合格，符合食品卫生标准。
2. 大肠杆菌和沙门氏菌未检出，符合食品卫生标准。
3. 样品含金黄色葡萄球菌超过了食品卫生标准的要求，存在潜在的健康风险。
4. 样品中霉菌含量较高，超过了食品卫生标准要求，存在潜在的健康风险。
5. 样品的酵母菌含量符合食品卫生标准。
建议：
1. 对于含金黄色葡萄球菌超标的样品，建议厂家控制生产线的卫生状况，通过加强清洁和杀菌措施来防止污染。
2. 对于霉菌超标的样品，建议厂家注意产品存储条件，避免过长时间放置。
加强产品包装的卫生和防潮措施，确保产品质量和安全。
3. 建议厂家定期对生产环境和工作人员进行检查和培训，加强对生产过程中各个环节和关键控制点的监控和管理，提高产品质量和安全水平。
细菌鉴定标准
肠球菌
做穿刺
动
不动
动球菌
蠕(乳)球菌
细菌
产生芽孢
阳性
看是否产生芽 孢
厌氧
好氧
微好氧
梭状芽孢 杆菌
芽孢杆菌
产孢芽孢 杆菌
阳性
丝状
放线菌
不动 蠕(乳)球菌
杆菌 革兰氏染色
不产生芽孢 过氧化氢酶试验(10%)
阴性
不含有规则细胞
乳酸杆菌
氧化酶试 验阴性
看能否把 酒精转变
为醋酸 （乙酸）
能
棒状杆菌
能否把乙酸转 化为CO2
不能
能
葡萄糖杆 菌
醋酸杆菌
枯草杆菌，孢子繁殖时产酸不产气， 菌包装的产酸腐败。
乳中微
亚群A
A群（非发 酵群体， 在厌氧条 件下生
长）
氧化酶实 验阳性/过 氧化氢酶 阳性(1较
高，不易 分离
阳性 是否产气
不能
否
是
产气
黄单孢菌
看是否运 动
阴性 红色 不变色 无气 有丝
有异议 来源 说明
兼性厌氧（产 酸力强）
H2O2+
H2O2-
葡萄球菌
是否有四 个细胞连 成一个方
块
有
无
片球菌
在10℃下培养
不生长
链球菌 (streptoc
occus)
生长
接到葡萄糖 发酵液中培 养（32℃）
兼性厌氧
产孢芽孢 杆菌
看是否产气
产气 明串珠菌
不产气
生长
45℃培养 看是否是 否生长
不产芽孢
好氧(产酸力弱 、H2O2+、基本
为微球菌）
产芽孢
一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法如下：
1.制备10倍品匀液。
按上一步操作程序，每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。
2.取样并制备平板。
同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内空白对照。
及时将15mL-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃士1℃恒温水浴锅中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
3.待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃士1℃培养48h+2h。
如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板，按2.1条件进行培养。
4.平板上菌落计数可使用自动化菌落计数仪，也可用肉眼观察（必要时可用放大镜观察）记录培养基上菌落数量和相应的稀释倍数。
选取菌落数在30-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。
以上就是一般生菌数检验方法，希望对解决您的问题有所帮助。
微生物菌剂检测标准
微生物菌剂检测标准
微生物菌剂检测标准基本上是由国家或国际相关机构制定的，在不同的国家和地区可能会有所不同。
下面是一些常见的微生物菌剂检测标准：
1.细菌数量测定标准：通过在凝胶中依赖(或独立)生长技术，或平板计数法或滤膜法测定细菌菌量。
这通常以CFU/g(或/ml)的形式报告。
2.纯度检测标准：使用不同的原核生物和真核生物培养基对微生物进行检测。
该标准是确保微生物菌剂纯度的关键。
3.活性检测标准：测定微生物菌剂中生物活性的程度。
这种活性可以测定菌剂对病原体的抑制作用，或对土壤生态系统的生物地球化学循环的发挥作用。
4.物理性状标准：物理性状标准包括外观、气味、质地、水分含量及pH等方面。
5.微生物污染检测标准：必须测定微生物菌剂是否受到污染，以保证微生物菌剂使用的安全性。
总之，微生物菌剂检测标准主要考虑以下因素：微生物数量、纯度、活性、物理性状、污染等方面。
菌落总数检测标准
菌落总数检测标准
菌落总数检测是一种常见的微生指标检测方法用于评估食品、饮用水、医疗器械等物品中的微生物污染情况。
检测的菌落总一般采用生物计数法，即推测细菌总数的检验方法。
不同国家和地区可能有不同的标准和规定，但通常微生物指标检测标准的结构都是相对类似的，包括菌落总数、大肠埃希氏菌、霉菌、酵母菌等项目。
这些标准涉及了食品安全、饮用水卫生、医疗器械清洁等方面。
以下是一些常见的菌落总数检测标准：
1. 食品行业：根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定GB 4789.2-2016》，菌落总数检测的标准上限值因不同食品类别而有所不同。
2. 饮用水行业：根据《生活饮用水卫生标准GB 5749-2006》，每毫升饮用水中的菌落总数应低于100个。
3. 医疗器械清洁行业：医用器械清洁标准如ISO 15883等对菌落总数也有相关的规定。
需要注意的是，具体标准和检测方法可能因国家、行业、用途等
而异，建议根据具体情况查询相关标准以获取最准确的信息。
微生物限度标准
微生物限度检查结果判断
微生物限度标准
另外：
1．含原药材粉的制剂细菌数每1g不得过10000个(丸剂每1g不得过30000个)、每1ml不得过500；霉菌和酵母每1g、1ml不得过100个；每1g、1ml不得检出大肠埃希菌；大肠菌群每1g应小于100个、每1ml应小于10个。
2．含豆豉、神曲等发酵成分的制剂细菌数每1g不得过100000个、每1ml不得过1000；霉菌和酵母每1g不得过500个、1ml不得过100个，每1g、1ml不得检出大肠埃希菌，大肠菌群每1g
应小于100个、每1ml应小于10个。
3．用于表皮或黏膜不完整的含原药粉的局部给药制剂：细菌数每1g或10cm2不得过1000个、每1ml不得过100个；霉菌和酵母每1g、1ml或10cm2不得过100个；每1g、1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌。
4．用于表皮或黏膜完整的含原药粉的局部给药制剂：细菌数每1g或10cm2不得过10000个、每1ml不得过100个；霉菌和酵母每1g、1ml或10cm2不得过100个；每1g、1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌。
手卫生微生物学检测的标准
手卫生微生物学检测的标准
手卫生微生物学检测的标准主要包括细菌菌落总数的合格标准。
普通手卫生的细菌菌落数应≤10cfu/cm²，而外科手消毒的细菌菌落数应≤5cfu/cm²。
这意味着在手卫生消毒后，每平方厘米的手部皮肤上，细菌的数量不应超过这些标准。
此外，手卫生消毒效果的监测还应考虑不同环境下的手合格标准。
例如，在Ⅰ类和Ⅱ类区域，细菌菌落总数应≤5cfu/cm²；在Ⅲ类区域，细菌菌落总数应≤10cfu/cm²；在Ⅳ类区域，细菌菌落总数应≤15cfu/cm²。
这些标准旨在确保手部卫生在不同环境下都能达到一定的卫生标准，从而减少细菌感染的风险。
总的来说，手卫生微生物学检测的标准是确保手部清洁和卫生，减少细菌数量，以降低感染的风险。
医务人员和公众都应遵循这些标准，并定期进行手部卫生检测，以确保手部的卫生状况符合要求。
医院常规空气细菌培养
7、操作步骤与质量标
1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分 别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
(6)点燃酒精灯； (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处
（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
2采样面积及方法被检人五指并拢将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次一只手涂擦面积30cm并随之转动采样棉试子剪去手接触部位将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检
医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
急诊 班丽萍 2014-8-15
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
细菌检测合格判定标准
3、水溶性产品的制备：
称取10g样品放入灭菌的90ml生理盐水中的锥形瓶中，充分
名称：
菌落总数检验操作规程
职能部门：
质检部
页数：
第３页 共４页
2、半成品……………………………………………菌落总数<10cfu/g（ml）
3、空气
质检部微检室……………………………………菌落总数<10cfu/m3
消毒室、灌装间…………………………………菌落总数<500cfu/m3
配料间……………………………………………菌落总数<1000cfu/m3
4、包装容器及半成品贮料桶
7、消毒的手
质检部微检室……………………………………菌落总数<5cfu/手
折布室……………………………………………菌落总数<300cfu/手
灌装间……………………………………………菌落总数<300cfu/手
8、消毒毛巾…………………………………………菌落总数<10cfu/cm2
9、去离子水…………………………………………菌落总数<100cfu/ml
1.1%氯化三苯四氮唑（ＴＴＣ）
称取0.1gＴＴＣ，放入三角瓶中，加水100ml，溶解后，塞上胶塞，用报纸包好，用皮圈扎好，１21度,20min高压灭菌。
平皿、小勺用报纸包好，１21度,20min高压灭菌。
菌落总数检验收的操作方法：
1、收到车间送检样品后，按要求填写记录，写好标签（每样品写２张小标签），用法75%酒精擦干净样品，并把样品放入干净的小筐中，放在无菌室中的小推车上，把高压灭菌后的所需生理盐水、平皿、吸管放在小推车上。用小盆装１000ml水，加入４瓶盖新洁而灭消毒水配成0.1%水溶液作为无菌操作时洗手和擦操作台用。
食用菌（蘑菇）的食品检测标准
食用菌（蘑菇）的食品检测标准食用菌（蘑菇）的食品检测标准食用菌包含有香菇、蘑菇、平菇、金针菇、黑木耳、银耳、金耳、猴头菇、灵芝、天麻、白灵菇、杏鲍菇、冬虫夏草等食(药)用菌等等。
以下为各种菌类测试的项目标准：香菇（GB/T1013-1998），灰树花（NY/T446-2001）, 黑木耳（GB 6192-2008）, 双孢蘑菇（NY/T224-2006），草菇（SB/T10038-1992，NY/T833-2004），无公害食品质茶树菇（NY/T5247-2004），银耳（NY/T834-2004）, 口蘑（NY/T445-2001，），绿色食品食用菌（NY/T749-2003）。
从理化指标上来看：新鲜的食用菌：水分应该≦86.0，灰分≦8.0（野生菌≦12.0）干的食用菌：水分应该≦12.0（冷冻干燥≦6.0）香菇，黑木耳≦13.0. 灰分≦8.0（野生菌≦12.0）。
干湿比例在1：7~1：10（黑木耳≥1：12）。
食用菌粉：水分应该≦9.0从污染物，农药残留，食品添加剂限量上看，应符合以下指标：项目指标检测方法食用菌鲜品食用菌干品食用菌粉镉（以Cd计）≦0.2 ≦1.0（香菇≦2.0）GB/T5009.15六六六（BHC）≦0.05 NY/T761滴滴涕（DDT）≦0.05 NY/T761毒死蝉≦0.05 NY/T761乐果≦0.02 NY/T761溴氰菊酯≦0.05 NY/T761氯氰菊酯≦0.05 NY/T761多菌灵≦1 NY/T1680敌敌畏≦0.5 NY/T761百菌清≦2 NY/Y761亚硫酸盐（以≦10 ≦50 GB/T5009.34 SO2计）各农残检测项目除采用表中所列检测方法外，如有其他国家标准，行业标准以及部文公告的检测方法，且其检出限和定量限能满足限量值要求时，在检测时可采用。
微生物指标：大肠菌群，MPN/g <3.0 GB4789.3霉菌和酵母，CFU/g ≦50 GB4789.15致病菌（沙门氏菌，志贺氏菌，金黄色葡萄球菌）不得检出GB4789.4，GB/T4789.5.GB 4789.10。
致病菌常规检测方法
致病菌常规检测方法
致病菌常规检测方法主要包括以下几类：
1. 直接涂片镜检：
适用于一些具有明显形态特征的病原菌。
通过采集样本，制作涂片，进行革兰氏染色、抗酸染色等，通过显微镜观察形态和染色特性初步判断病原菌类别，如结核分支杆菌可通过抗酸染色识别。
2. 分离培养：
将疑似感染病人的标本（如血液、痰液、尿液、脑脊液、粪便、脓液等）接种到适宜的培养基上，如血平板、巧克力琼脂、麦康凯琼脂等，根据生长的菌落特征、色素、气味、溶血现象等进行初步鉴定。
3. 生化试验：
对分离出的菌株进行系列生化反应，如糖发酵试验、触酶试验、氧化酶试验、IMViC试验等，通过一系列生物化学反应特征来确定病原菌的种类。
4. 血清学试验：
使用已知抗体对未知菌株进行鉴定，如玻片凝集试验、间接血凝试验、ELISA等方法，以确定细菌的特异性抗原，适用于某些病原菌如志贺菌、沙门菌等的分型和鉴定。
5. 分子生物学检测：
PCR（聚合酶链反应）技术、基因测序、基因芯片技术等，通过对细菌DNA或RNA的特异性片段扩增或测序，快速准确地识别致病
菌种类，如对耐药基因、毒力基因的检测。
6. 药敏试验：
通过纸片扩散法、稀释法等，测定分离出的病原菌对抗生素的敏感性，指导临床合理用药。
7. 即时诊断（POCT）技术：
现场快速检测技术，如免疫层析法、胶体金法等，能在短时间内得出初步检测结果。
8. 分子杂交技术：
通过核酸探针与待测样品中的核酸序列进行互补配对，以检测特定病原菌的存在。
在实际工作中，我们要根据临床表现、标本类型、疾病流行趋势及实验室资源等因素，选择最适合的检测组合来确认或排除某种或某类致病菌的感染。
菌检判断标准
微生物检验程序及判断标准一、大肠杆菌供试品（10g+90mlNS）↓10mlBL增菌液↓37℃18～24H――――――――――――――↓↓澄清浑浊↓↓-――――――――――――――――――――-↓↓↓MUG：—MUG：±MUG：＋I：—Ｉ：Ｉ：＋↓↓ＥＭＢ分离↓－――――――――↓↓无菌生长有菌生长↓↓―――――――――↓↓非典型黑色或暗黑色菌落Ｇˉ球杆菌↓↓未检出检出二、金葡菌供试品（10g+90mlNS）↓10ml营养肉汤增菌液↓37℃18～24H―――――――――――――↓↓澄清浑浊↓↓甘露醇高盐分离↓－――――――――↓↓无菌生长有菌生长↓↓―――――――――↓↓非典型金黄色，圆形突起，边沿整齐，外围有黄色环，直径０.７～１㎜Ｇ＋球菌↓↓未检出检出三、沙门菌供试品（10g+90mlNS）↓10ml营养肉汤增菌液↓37℃18～24H四硫黄酸钠亮绿↓37℃18～24H胆盐硫乳琼脂ＤＹ麦康凯琼脂分离ＭＫ↓―――――――――――――↓↓无菌落生长有菌落生长↓↓―――――――――↓↓非典型ＤＹ：无色至浅澄色，半透明，菌落中心带黑色或全部黑色或无黑色。
ＭＫ：无色至淡红色，透明或半透明，菌落中心有时为暗色。
Ｇ＋球菌↓↓未检出三糖铁琼脂培养基↓―――――――――↓↓斜面未见红色检出底层未见黄色↓未检出。
室内细菌含量检测标准
室内细菌含量检测标准引言室内细菌含量对人们的健康和生活质量具有重要的影响。
为了确保室内环境的安全与卫生，制定一套合理的室内细菌含量检测标准势在必行。
本文将提出一份详细的室内细菌含量检测标准，旨在为相关机构和个人提供指导和参考。
1. 室内细菌含量标准的制定依据室内细菌含量的标准制定应基于以下几个方面：- 国家卫生标准相关法规及政策；- 国内外室内环境健康评估标准的调研和分析结果；- 日常生活和工作经验总结。
2. 室内细菌含量检测方法室内细菌含量检测方法应具备以下特点：- 准确性和可靠性：检测结果能够准确反映实际细菌含量；- 可行性和操作简便：检测方法应简便易行，能够被普通人员掌握；- 经济性：检测方法应具备经济性，可以在合理的成本范围内进行。
常用的室内细菌含量检测方法包括：- 采样和培养法：通过取样室内空气或物体表面细菌，然后在培养基上培养并定量检测细菌数量；- PCR法：通过分子生物学方法对细菌的DNA/RNA进行扩增和检测；- 流式细胞仪法：通过光电设备检测细菌的数量和特性。
3. 室内细菌含量标准的确定室内细菌含量标准的制定应综合考虑以下几个方面：- 不同区域和不同用途的室内环境所要求的细菌含量有所差异；- 细菌的种类和数量对人体健康的影响存在差异；- 国家卫生标准相关法规及政策的要求。
根据以上综合考虑，制定室内细菌含量标准应包括以下内容：- 室内空气中细菌含量标准；- 室内各表面的细菌含量标准；- 不同区域和不同用途的室内环境所要求的细菌含量标准。
4. 室内细菌含量标准的执行与管理室内细菌含量标准的执行应由相关机构负责，包括但不限于卫生监测机构、环境保护部门等。
执行过程中应注意以下几个方面：- 定期进行室内细菌含量检测，以监测和评估室内环境的卫生状况；- 对不符合标准的室内环境进行整改，并进行复检确认；- 鼓励公众关注室内环境卫生，并提供室内细菌含量检测的相关服务。
结论室内细菌含量的检测标准对于保障室内环境的安全与卫生具有重要意义。
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Step 2 1)确证实验: 大肠菌群(coliforms); 2)确证实验: 粪大肠菌群 Step 3 确认实验: 大肠杆菌(E. coli).
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第一步:推测实验(大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌)
检样
LST肉汤(月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤)
常规菌检测标准
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检测方法概述
1.
卫生指标菌的检测
细菌总数、大肠菌群、肠杆菌科
2.
病原菌的检测
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、环境李 斯特菌属
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微生物检测标准
Thanks for your attentions!
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大肠菌群检验的VRB固体平板法
选适宜稀释度的样液，滴加1ml到平皿
将冷至46C的结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) 1015ml倾注于每个平板，并混匀
待琼脂凝固后，再加3-4ml VBRA覆盖平板表层 翻转平板，置于351C培养18-24h
液体食品
用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释液的 500mL稀释瓶中,按上述方法迅速振摇,制成1:10的样品 匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸 管内液体要在2～4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释 液中吹洗吸管。
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告
金黄色葡萄球菌检验的SN法
检样 选择3个连续稀释度接种于10%NaCl的TSB管中
361℃ 48 2h
从有菌的管中接种1环到BairdParker平板上
361℃ 45-48 h
从BP平板上挑取典型菌落到肉汤培养基中
361℃ 20-24h
兔血浆凝固酶试验
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检样
EC肉汤发酵管
44.5C
24h
不产气(阴性)
产气 在EMB平板上划线分离
35C
35℃ 24-48h
24h
NA(营养琼脂）
乳糖(LB)发酵管
ห้องสมุดไป่ตู้
革兰氏染色
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大肠菌群固体平板计数法
VRB (Violet Red Bile) FDA BAM, SN Deso (Desoxycholate Agar) Japan 3M PetrifilmTM
直接计数方法
增菌培养方法
Baird-Parker平板 0.3mL、0.3mL、0.4mL (36±1)℃ 24h
7.5％氯化钠肉汤 或TSB (36±1)℃ 24h
血平板
(36±1)℃ 24h
血平板， Baird-Parker平板
(36±1)℃ 24h
涂片染色
观察溶血
血浆凝固酶试验
报 Copyright© 2007, 3M. All rights reserved.
确 认 实 验
从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和 可疑菌落，接种BGLB肉汤管，361C培养 24-48h，观察产气情况
BGLB肉汤管产气， 革兰氏染色为阴性杆 菌的为大肠菌群阳性
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大肠菌群检验的Deso固体平板法
大肠菌群检测的GB法
检样 10倍梯度连续稀释 选3个适宜的稀释度，接种至乳糖胆盐发酵管
361℃
不产气
242h
产气
大肠菌群阴性
伊红美蓝(EMB)平板分离
361℃ 361℃
产气
18-24h 24h
不产气
乳糖发酵
大肠菌群阳性
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44.5 + 0.2℃
24+2h
37℃
48+2h
产气(阳性),查MPN表, 报告粪大肠菌群数 第三步:确认 E.coli
产气(阳性),查MPN表, 报告大肠菌群数
37℃
24+2h
EMB平板
EMB平板
37℃
24+2h
PCA平板 Copyright© 2007, 3M. All rights reserved.
TSI底层+、H2S-、KCN-、尿素大肠杆菌 Copyright© 2007, 3M. All rights reserved.
非左述的各种反应结果
非大肠杆菌
大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检验程 序(FDA BAM和 SN法)
Step 1 推测实验: 大肠菌群(coliforms), 粪大
肠菌群(fecal coliforms )和 大肠杆菌(E. coli);
大肠菌群阴性
大肠杆菌检测的GB法
测大肠菌群MPN
检 样
25g＋营养肉汤225ml 污染严重的检样匀液 麦康凯 EMB (36±1)℃ 18h~24h
(36±1)℃ 6h 肠道菌增菌肉汤
乳糖发酵阳性的发酵管
乳糖发酵或不发酵的菌落3个~5个， 氧化酶阴性，革兰氏阴性杆菌
TSI、靛基质、pH7.2尿素、KCN、 赖氨酸、动力
国家标准 GB4789 行业标准 SN FDA BAM AOAC AFNOR ISO
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细菌总数检测的GB/SN
检样 10倍梯度连续稀释 选2-3个适宜的稀释度， 各取1ml分别加入灭菌平皿内
每平皿内加入15ml左右营养琼脂*
选适宜稀释度的样液，滴加1ml到平皿
倾注Deso培养基 翻转平板，置于351C培养18-24h
确 认 实 验
从Deso平板上挑取典型和可疑菌落，接种 LB肉汤管，361C培养24-48h，观察产气 情况
LB肉汤管产气，革兰 氏染色为阴性杆菌的 为大肠菌群阳性
Copyright© 2007, 3M. All rights reserved.
日本大肠菌群的检验方法 (MPN法)
检样
BGLB肉汤发酵管
35℃
24-48h
不产气(阴性)
产气 在EMB平板上划线分离
35C
35℃ 24-48h
24h
NA(营养琼脂）
乳糖(LB)发酵管
革兰氏染色
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日本大肠杆菌的检验方法 (MPN法)
日本不同食品的大肠菌群检测
Deso 冰淇淋, 发酵奶, 乳酸菌饮料, 黄油， 好油, 奶酪, 浓缩乳清，冷冻食品 MPN(BGLB) 除了Deso方法中的其它乳制品, 肉, 炸鱼片
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金黄色葡萄球菌检验的GB法
检 样 25g(mL)+225mL灭菌生理盐水
第三步:确认E.coli
EC肉汤(阳性)
37℃
24+2h
EMB平板
37℃
18-24h
挑取可疑菌落于PCA平板
37℃
18-24h
LST肉汤
IMViC (吲哚,甲基红,3羟基-2-丁酮和柠檬酸)
革兰氏染色
37℃
48h
++--/-+-按EC肉汤管数,查MPN表,报告大肠杆菌 无芽胞G-杆菌
产酸产气
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LST
37℃
48 2h
不产气(阴性)
产气
第二步:确证实验
2)确证实验:粪大肠菌群 和大肠杆菌
1)确证实验:大肠菌群
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第二步:确证实验
LST肉汤产气
2)确证实验:粪大肠菌群
1)确证实验:大肠菌群
BGLB
EC肉汤
BGLB肉汤(亮绿乳糖胆盐肉汤)
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要点
样品均液的制备
干燥或干粉食品
以无菌操作取25g样品,放入装有225mL稀释液和适量玻 璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成 1:10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次, 也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。
361℃ 48 2h
菌落计数
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要点
细菌总数的含义
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在平
板计数琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数
样品均液的制备
固体或半固体食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有 225mL稀释液的灭菌均质杯内或均质袋中,于8000r/min 均质1～2min或同样效果的拍打频率,制成1:10的样品 匀液 ；