实验五 细菌的菌落计数
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量计算出样品中细胞密度。由于待测样品往往不易完全分散成单个细 胞，平板上形成的每个菌落不一定是单个细胞生长繁殖而成，有的可
能来自2个或多个细胞。因此，平板菌落计数的结果往往比样品中实
际细胞数低，这就是现在使用菌落形成单位（colony-forming unit， CFU）取代以前用绝对菌落数来表示样品活菌含量的原因。
三、实验器材和试剂
酒精灯，记号笔，标签，火柴，灭菌培养皿 菌种，平板，培养基
四、实验操作 1、编号：
取无菌牛肉膏蛋白胨培养皿9套，分别用记号笔标明10-4、
ห้องสมุดไป่ตู้
10-5、10-6（稀释度）各3套。另取6支盛有4.5ml无菌水
的试管，依次标明10-1、10-2、10-3、、、10-6。
2、稀释：
用1ml无菌吸管准确吸取0.5ml已充分混匀的大肠杆菌培 养液（待测样品），加入标有10-1字样的试管中，此为1
实验五 细菌的菌落计数
一、目的要求 1．学习平板菌落计数的基本原理和方法，并掌 握其基本技能。
二、实验原理
平板分离法中的稀释涂布平板法，能有效分离纯化微生物外，还可用 于测定样品中活菌数量。 平板菌落计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上；经过培养
后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据稀释倍数和取样
4、培养：
将平板倒置在37℃的恒温箱中培养24-48h
五、实验报告
稀释度
菌落数 CFU/ml 简要说 明
10-4
1 2 3
10-5
平均 1 2 3 平均
10-6
1 2 3 平均
六、思考题
1、怎样判断稀释涂布平板计数数据是否可靠？ 需要掌握哪几个关键？
0倍稀释。将10-1试管在手掌或置震荡器上震荡，使菌液
充分混匀。接着取0.5ml 10-1菌液精确地放入 10-2试管 中，此为100倍稀释……..其余依次类推。
3、取样涂布：
无菌吸取10-4、10-5、10-6稀释菌悬液各0.1ml放在不同
稀释度编号的平板上，尽快用无菌涂布棒将菌液在平板
上涂布均匀，平放于试验台上20-30min，使菌液渗入培 养基表层内。
能来自2个或多个细胞。因此，平板菌落计数的结果往往比样品中实
际细胞数低，这就是现在使用菌落形成单位（colony-forming unit， CFU）取代以前用绝对菌落数来表示样品活菌含量的原因。
三、实验器材和试剂
酒精灯，记号笔，标签，火柴，灭菌培养皿 菌种，平板，培养基
四、实验操作 1、编号：
取无菌牛肉膏蛋白胨培养皿9套，分别用记号笔标明10-4、
ห้องสมุดไป่ตู้
10-5、10-6（稀释度）各3套。另取6支盛有4.5ml无菌水
的试管，依次标明10-1、10-2、10-3、、、10-6。
2、稀释：
用1ml无菌吸管准确吸取0.5ml已充分混匀的大肠杆菌培 养液（待测样品），加入标有10-1字样的试管中，此为1
实验五 细菌的菌落计数
一、目的要求 1．学习平板菌落计数的基本原理和方法，并掌 握其基本技能。
二、实验原理
平板分离法中的稀释涂布平板法，能有效分离纯化微生物外，还可用 于测定样品中活菌数量。 平板菌落计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上；经过培养
后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据稀释倍数和取样
4、培养：
将平板倒置在37℃的恒温箱中培养24-48h
五、实验报告
稀释度
菌落数 CFU/ml 简要说 明
10-4
1 2 3
10-5
平均 1 2 3 平均
10-6
1 2 3 平均
六、思考题
1、怎样判断稀释涂布平板计数数据是否可靠？ 需要掌握哪几个关键？
0倍稀释。将10-1试管在手掌或置震荡器上震荡，使菌液
充分混匀。接着取0.5ml 10-1菌液精确地放入 10-2试管 中，此为100倍稀释……..其余依次类推。
3、取样涂布：
无菌吸取10-4、10-5、10-6稀释菌悬液各0.1ml放在不同
稀释度编号的平板上，尽快用无菌涂布棒将菌液在平板
上涂布均匀，平放于试验台上20-30min，使菌液渗入培 养基表层内。