红细胞膜缺陷性贫血及其实验诊断考点总结

红细胞膜缺陷性贫血及其实验诊断考点总结

<大纲要点>

一、红细胞膜的结构与功能（了解）

二、红细胞膜缺陷的检验及其应用（掌握-熟练掌握）

三、遗传性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断（掌握-熟练掌握）

四、获得性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断（熟练掌握）

一、红细胞膜的结构与功能

1.红细胞膜的组成与结构红细胞膜（脂类、蛋白质、碳水化合物）的主要蛋白有主体蛋白和外周蛋白。后者包括收缩蛋白、肌动蛋白、锚蛋白和区带（4.1～4.5）等，即骨架系统，起支架作用，对维持红细胞的形状、稳定性和变形性有重要作用。膜的主要脂类为磷脂和胆固醇，起屏障和保持内环境稳定性作用。

红细胞膜的组成与结构示意图

2.红细胞膜的功能屏障作用和可变性；半透性；免疫性；受体特性：激素类受体、递质类受体、丙种球蛋白受体、病毒受体、EPO受体和铁蛋白受体等。

3.影响红细胞膜稳定的因素红细胞能量代谢紊乱；红细胞膜有遗传性缺陷；酶缺陷。

二、红细胞膜缺陷的检验及其应用

1.红细胞渗透脆性试验（熟练掌握）

2.自身溶血试验及其纠正试验（掌握）

3.酸化甘油溶血试验（掌握）

4.蔗糖溶血试验（掌握）

5.酸化血清溶血试验（熟练掌握）

6.红细胞膜蛋白电泳分析（掌握）

1.红细胞渗透脆性试验

原理：检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中，当水渗透到红细胞内部达一定程度时，红细胞发生膨胀破裂。

根据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况，通过红细胞表面积与容积的比值，反映对低渗盐溶

液的抵抗性。比值愈小，红细胞抵抗力愈小，渗透脆性增加。反之抵抗力增大。

参考值：开始溶血0.44%～0.42%（NaCl液），完全溶血0.34%～0.32%（NaCl液）。

临床意义：脆性增高见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等；降低见于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。

2.自身溶血试验及其纠正试验

原理：红细胞在37℃孵育48小时，其间由于膜异常引起钠内流倾向明显增加，ATP消耗过多；或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可导致溶血，称为自身溶血试验。在孵育时，加入葡萄糖或ATP 作为纠正物，观察溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。

参考值：48小时内不加纠正物的溶血度小于4.0%，加葡萄糖溶血度小于0.6%，加ATP的溶血度小于0.8%。

临床意义：膜缺陷患者溶血度增加，加纠正物可被纠正；G6PD缺陷症者溶血度轻度增加，能被葡萄糖纠正；自身免疫性溶贫溶血度轻度增加，加葡萄糖无预示价值；PNH本试验常正常。

3.酸化甘油溶血试验

当甘油存在于低渗溶液氯化钠磷酸缓冲液时，可阻止其中的水快速进入红细胞内，使溶血过程缓慢。但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在pH 6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50%的时间（AGLT50）明显缩短。

参考值：AGLT50大于290s（30min）。

临床意义：减少见于遗传性球形细胞增多症（25～150s）、肾功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶贫血和妊娠妇女。

4.蔗糖溶血试验

为PNH简易、重要的筛查试验。

原理：是根据PNH患者的红细胞，在低离子强度的蔗糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育，补体与红细胞膜结合加强，蔗糖溶液进入红细胞内，导致渗透性溶血而设计的。

参考值：定性试验：正常为阴性；定量试验：正常溶血率＜5%。

临床意义：PNH患者为阳性或溶血率增加，可作为PNH的筛选试验。自身免疫性溶贫有的可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。

5.酸化血清溶血试验

原理：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者体内存在对补体敏感的红细胞。酸化血清溶血试验，也称Ham test，即红细胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。而正常红细胞不被溶解，无溶血现象。

结果：阴性。

临床意义：是PNH的确诊试验。阳性主要见于PNH，某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。

PNH患者血清溶血，左为正常对照

6.红细胞膜蛋白电泳分析

（1）原理：将制备的红细胞膜样品进行SDS-PAGE电泳，根据样品中各蛋白相对分子质量的不同，分离得到红细胞膜蛋白的电泳图谱，从而可见各膜蛋白组分百分率。

参考值：各种膜蛋白组分百分率变化较大，多以正常红细胞膜蛋白电泳图谱作比较。或以带3蛋白为基准，各膜蛋白含量以与带3蛋白的比例表示。

（2）临床意义：许多溶血性疾病常见红细胞膜蛋白异常。各种膜缺陷疾病如遗传性球形红细胞增多症

有收缩蛋白等含量减低或结构异常。某些血红蛋白病骨架蛋白等可明显异常。

三、遗传性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断

1.遗传性球形红细胞增多症（熟练掌握）

2.遗传性椭圆形红细胞增多症（掌握）

1.遗传性球形红细胞增多症

（1）血象：红细胞呈球形，直径变小（6.2～7.0μm），大小一致，数量占10%～70%，硬度增加，中心淡染区消失，简易红细胞滚动试验呈阳性。

（2）骨髓象：骨髓红细胞系统增生活跃。

不同患者外周血涂片可见球形红细胞

球形红细胞形成机制

遗传性球形红细胞增多症患者常表现为黄疸、脾大、胆石症

（3）特殊试验：

脆性试验：红细胞常于0.68%NaCl液中开始溶解，0.4%NaCl液中完全溶解，盐水渗透脆性增加，孵育后脆性更高，ATP或葡萄糖能够纠正筛选试验，红细胞寿命期缩短。

自溶试验：溶血大于5%，加ATP可减轻溶血。

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析：红细胞骨架蛋白、收缩蛋白缺陷。

2.遗传性椭圆形红细胞增多症

血象：红细胞呈椭圆形、球形，大小一致，数量占10%～70%，硬度增加，中心淡染区消失。

骨髓象：骨髓红细胞系统增生活跃。

特殊试验：脆性试验、孵育后和自身溶血试验阳性。