止凝血

IX
IX
Blood X Sampling X
IX Trisodium IX VIII Citrate VIII
without
VII
VII
V
V
IV without
IV
III without
III
II
II
I
I
APTT Reagent
Intrinsic System
Activator
Ellagic acid, silica etc.
第一阶段 凝血酶原酶生成 内源性凝血途径 外源性凝血途径
第二阶段 凝血酶生成 第三阶段 纤维蛋白生成
凝血系统
凝血模式
凝血系统
凝血因子
1.内源性途径凝血因子 XIIa、XIa、IXa、VIIIa、Ca 2+
2.外源性途径凝血因子 III、VIIa、Ca 2+
3.共同途径凝血因子 Xa、Va、IIa、Ia、XIIIa、 Ca 2+
4.维生素K依赖的凝血因子
II、VII、IX、X
凝血系统
抗凝因子
一、体液抗凝作用
1 丝氨酸蛋白酶抑制因子 抗凝血酶（AT）、肝素辅因子-II、 2巨球蛋白、 1抗胰蛋白酶、C1-抑制物等
2 蛋白C 抗凝系统 PC、TM、PS、PCI 凝血酶和TM结合后，激活PC为APC，在PS的 辅助下，APC灭活Va、VIIIa，并激活纤溶系统
in Blood
in Plasma
Fbg Reagent
XIII
XIII
XII
XII
IX
IX
Blood X Sampling X
II
Thrombin
without
IX Trisodium IX VIII Citrate VIII
VII
VII
V
V
IV without
IV
III without
III
II
贫血：CR%= CR% 100/（100-Hct）
临床意义：退缩不良见于
1 血小板减少 Plt〈50 109/L ； 2 血小板功能异常 血小板无力症； 3 凝血因子异常 VIII 缺乏； 4 纤维蛋白原或凝血酶原显著降低
血小板的有关检验
三、血小板粘附试验 四、血小板聚集试验 五、血小板激活的分子标志物
（1）弥散性血管内凝血（DIC）的检查
（2）其他应用
一、基础理论
（1）止血机制（血小板） （2）凝血系统和抗凝机制 （3）纤溶系统 （4）血液流变学改变
止血机制
一、血管的止血功能
血管破损 反射性收缩（15—30s）；
血小板
释放产物引起收缩
二、血小板的止Hale Waihona Puke Baidu和促栓作用
血小板粘附、聚集和释放，形成血小板血栓
四、APTT测定的临床应用
* 肝素治疗的监测的理想实验 APTT比(1.5-2.5)
* 血友病的筛选：血友病甲、乙、丙
（缺VIII、IX 、XI因子），APTT明显延长 * DIC的诊断 * 内源凝血因子异常的筛选 * 血栓倾向的诊断 * 手术前常规(代替凝血时间) * 抗凝物质的检测
Principle of Fbg (Clauss Method)
抗凝物质的检查
凝血酶时间（thrombin time,TT) 抗凝血酶III活性和抗原测定 蛋白C抗原、游离蛋白S测定 组织因子途径抑制物测定 肝素定量 狼疮抗凝物质
纤溶功能的检查
• 优球蛋白溶解时间 • t-PA活性测定 . 纤维蛋白（原）降解产物 • PLG活性测定 • PAI-1活性测定 . D-Dimer测定 • 2-PI:A活性测定 • 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P试验） • PAP测定 • 纤维蛋白肽B1-42和B15-42
标准化出血时间测定器法测定BT
血管壁的检验
三、血管内皮细胞的检验
血管性血友病因子抗原测定（vWF：Ag）
血浆 6-酮-前列腺素 F1测定 （PGI2的降解产物）
血浆血栓调节蛋白抗原测定（TM：Ag）
血浆内皮素-1测定
血小板的有关检验
一、血小板计数(platelet count,PC)
参考值：（100-300）109/L 临床意义：
（4）BT正常，Plt正常：血管壁异常（过敏性紫癜、
遗传性出血性毛细血管扩张症等）
检验项目的选择和应用
2 二期止血缺陷的筛选试验 凝血异常、抗凝物质
（1）APTT延长， PT正常 内源途径因子缺乏，VIII、 IX、XI
（2）APTT正常， PT延长 外源途径因子缺乏，VII （3）APTT延长， PT延长 共同途径因子缺乏，X、V、
三、检验项目的选择和应用
1 一期止血缺陷的筛选试验：血管壁、血小板
（1）BT延长，Plt减少：血小板减少性紫癜，
分特发和继发性
（2）BT延长，Plt增多：血小板增多症，分原发
和继发性
（3）BT延长，Plt正常：凝血因子缺乏（低纤维
蛋白原血症、血管性 血友病）；血小板功能 异常（血小板无力症、 PF3缺乏症，贮存池病）
血栓与止血的检验
•南京中医药大学西内教研室 徐庆
本章提纲
一、基础理论
（1）止血机制（血小板） （2）凝血系统和抗凝机制 （3）纤溶系统 （4）血管内皮细胞系统
(5) 血液流变学改变
二、检验项目
（1）血管壁的检验 （2）血小板方面的检验 （3）凝血功能检验 （4）抗凝物质检查 （5）纤溶功能检查
三、检验项目的选择和应用
尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）
3．纤溶系统抑制因子
纤溶酶原激活物抑制因子（PAI）
纤溶酶抑制因子（2-AP）
纤溶系统 纤维蛋白生成和降解
•
二、检验项目
（1）血管壁的检验 （2）血小板方面的检验 （3）凝血功能检验 （4）抗凝物质检查 （5）纤溶功能检查
血管壁的检验
一、毛细血管抵抗力试验（capillary resistance test,CRT），毛细血管脆性试验，束臂试验
（白色 血栓）
一期止血
三、凝血因素
激活内、外源凝血途径，形成纤维蛋白网， 形成止血血栓（红色血栓）
二期止血
凝血机制
一、 凝血因子：
12种国际命名因子 (I--XIII,缺VI） 激肽释放酶原（PK） 高分子量激肽原（HMWK）
几乎所有的凝血因子都是糖蛋白， 在肝内合成。
凝血系统
二、凝血过程：
凝血因子相继激活的逐级放大的“瀑布”学 说
PL
Phospholipid
CaCl2
XII
IV
Calcium (Ca2+)
XI
IX
Ca2+, PL VIII
Measure
37癈
Clotting Time
X
Ca2+, PL
V
II
I
Fibrin
Normal Range 32-43 sec
凝血功能的检验
一、APTT试剂组成
磷脂：经氯仿或乙醚浸提的组织凝血活酶 (部分凝血活酶）
F1+2（凝血酶原片段1+2） FPA （纤维蛋白肽A） SFMC（可溶性纤维蛋白单体复合物） TAT （凝血酶-抗凝血酶复合物）
PT 试验原理
in Blood
in Plasma
PT Reagent
without
XIII
XIII
XII
XII
IX
IX
Blood
Sampling
X
X
IX Trisodium IX VIII Citrate VIII
活化部分凝血活酶时间 （Activated Partial Thromboplastin Time,
APTT）
凝血功能的检验
三、纤维蛋白原测定 （2-4g/L） 四、凝血时间（clotting time,CT） 五、简易凝血活酶生成试验及纠正试验 六、凝血因子活性测定 七、组织因子测定 八、凝血酶生成分子标志物检测
3 组织因子途径抑制物（TFPI） 抑制VIIa和Xa
二、细胞抗凝作用
单核-巨噬系统、肝细胞
抗凝因子
1 抗凝血酶（AT） 占体内总抗凝活性的50-67%
2 蛋白C抗凝系统示意图
纤溶系统
纤溶系统及其抑制因子
纤溶酶原（PLG）
纤溶酶 （PL）
1．内源性纤溶的激活
XIIa、激肽酶
2．外源性纤溶的激活
组织型纤溶酶原激活物（t-PA）
Normal Range 11-13 sec
凝血功能的检验
一、PT实验结果报告形式
PT时间：11-13s，超过 3s为异常 PT比值（PTR）：10.05 国际标准化比值（INR）：PTRISI，10.1
二、临床意义：
PT延长 见于外源及共同途径凝血因子异常 先天性或获得性（DIC、Vit K缺乏，肝病等）
1 减少：〈100109/L （1）生成障碍：再障、放射线损伤、白血病、骨髓纤维化等； （2）破坏或消耗增加：a 免疫破坏：血小板自身抗体、过敏性
药物损伤、血小板同种抗体；b 消耗亢进：DIC；c 血小板自 身异常：先天性血小板减少症 2 增加：〉400109/L （1）原发增多：慢粒、真性红细胞增多症、原发血小板增多症 （2）反应性增多：急慢性炎症、缺铁性贫血、肿瘤
1、-血小板球蛋白（ -TG）和 血小板第4因子（PF4）测定
2、P-选择素 3、血浆血栓烷B2（TXB2）测定 六、血小板第3因子有效性测定 七、血小板抗体检查
凝血功能的检验
一、外源性凝血途径的综合检查
血浆凝血酶原时间 （Prothrombin Time, PT）
二、内源性凝血途径的综合检查
II
I
I
37℃
I
Fibrin
Measurement Clotting Time
Calculated for Fibrinogen concentration
Normal Range 200-400 mg/dL
凝血功能的检验 纤维蛋白原测定的临床应用
1 FIB参考值：2 - 4 g/L 2 纤维蛋白原含量增高
判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目， 常见疾病如 脑血栓形成、心肌梗塞、结核、风湿病、 肺炎、恶性肿瘤等
3 纤维蛋白原含量减少
a/肝脏疾病：慢性肝炎、肝硬化。 b/DIC诊断的重要筛选实验 c/溶栓治疗的监测 d/原发性纤维蛋白原缺乏症、原发性纤溶活性亢进、
恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等
受血小板数量和功能影响，其次受血管壁完整性和收缩功 能影响，凝血因子影响较小
参考值：标准化出血时间测定器法（template
bleeding time,TBT)：6.9±2.1min, 超过9min为异常
临床意义：延长见于：
1 血小板明显减少 原发或继发性血小板减少性紫癜； 2 血小板功能异常 血小板无力症； 3 严重缺乏血浆有关因子 vW病、DIC； 4 血管异常 遗传性出血性毛细血管扩张症； 5 药物影响 乙酰水杨酸
VII
VII
V
V
IV without IV
III without
III
II
II
I
I
Extrinsic System
III IV
Tissue Factor Calcium (Ca2+)
VII III
Ca2+, PL X
Ca2+, PL
V
II
37癈
I
Fibrin
Measure Clotting Time
接触因子激活物：白陶土、鞣花酸等
二、参考值 32-43s，延长10秒以上为异常 三、临床意义
APTT延长见于内源性及共同通路凝血因子缺乏 1 先天性凝血因子异常：甲、乙型血友病等 2 后天性多种凝血因子缺乏：严重肝病、 DIC 等 3 循环抗凝物增加：SLE
APTT缩短见于DIC、妊高征等高凝状态
凝血功能的检验
原理：对毛细血管施加压力，观察血管壁、血管
内皮细胞、 血小板综合止血作用
参考值：5cm直径圆圈内，男性<5个出血点，
女性及儿童<10个出血点 临床意义：抵抗力减弱：血管病变；血小板减少；
血小板功能异常；血管性血友病 举例：遗传性出血性毛细血管扩张症
血管壁的检验
二、出血时间（Bleeding Time，BT）测定 原理：皮肤毛细血管刺破，出血自然停止所需的时间。主要
PT缩短 见于高凝状态、多发性骨髓瘤等
凝血功能的检验
三、PT试验的临床应用
口服抗凝剂的监测 （INR最好在2.0-3.0） 肝疾患严重程度的分类 维生素K缺乏 DIC诊断标准 外源性途径出血筛选 手术前常规检查
APTT试验原理
in Blood
in Plasma
XIII
XIII
XII
XII
凝血功能的检验 凝血酶生成分子标志物检测原理
F 1+2：反映凝血酶生成总量及凝血酶原酶活性
凝血酶原
凝血酶
F1+2
FPA：代表凝血酶生成后对纤维蛋白原水解能力
纤维蛋白原 凝血酶 非连接性纤维蛋白单体
FPA、FPB SMFC：反映凝血酶作用后纤维蛋白单体的形成
TAT：反映凝血酶被抗凝血酶中和的程度
血小板的有关检验
二、血块退缩试验（clot retraction test，CRT） 原理：血液凝固后，血小板释放血栓退缩蛋白，使纤维蛋白
网退缩，挤出血清。与血小板质、量，纤维蛋白原的质、 量，其他凝血因子的质、量，纤溶功能有关
参考值：退缩时间：凝固后1/2-1h 开始，24h 退缩完全
退缩度测定：析出血清量与全血量之比（65.8 ±11.0%)