酒精性肝损伤造模

酒后饮绿茶对小鼠肾功能影响的实验性研究

李佳陈路军陈洁徐立思齐慧娟陆妙君

指导老师：黄品贤

（上海中医药大学03中西（七）上海201203）

[摘要]目的观察给最佳酒醉状态的小白鼠灌茶对肾功能的影响。方法检测给小白鼠

0.15ml/10g白酒后20min灌入低、中、高浓度茶、解酒阳性对照药枳椇子各0.20ml/10g，连续7天后血肌酐、血尿素蛋及尿蛋白含量。结果⒈高中浓度茶组、模型组的尿蛋白与正常组相比有显著差异，P<0.05。⒉各组生存曲线比较的Log-rank检验结果：χ2=20.39，

P<0.01。⒊肾脏病理改变：低浓度茶组小鼠肾小球、肾小管未见明显病变，但间质血管扩张充血明显，有较多量红细胞漏出，可见炎症反应，间质未见纤维化；中浓度茶组肾组织结构完整，肾小球、肾小管未见明显病理变化，间质未见明显充血，少量红细胞漏出，间质未见纤维化；高浓度茶组肾脏组织结构与中浓度茶组接近。阳性对照组肾组织结构基本完整，肾小球、肾小管未见明显病理变化，间质少量充血。结论根据尿蛋白、实验小鼠的生存曲线分析、肾脏的病理结果的一致性得出：⒈酒后饮茶均可导致小鼠的死亡，但是酒后高浓茶对肾脏的损害作用最小。⒉酒后饮淡茶及阳性解酒药枳椇子能起到一定解酒作用，但对肾脏有明显的损害。但本次实验由于死亡率高致样本含量不够，确切的结论有待继续研究。

[关键词]酒，茶，小白鼠，肾功能，病理学

在中国，茶能解酒是自古以来就流传的说法。日常生活中，人们通常用绿茶来帮助消食解酒，且认为茶越浓解酒效果越好。人们认为，饮茶能够使人大脑兴奋、清醒，酒后饮茶能够让被酒精冲昏了的头脑清醒一些，从而达到“醒酒”的效果。

但近年来，有越来越多的报道指出：过量饮酒后饮茶对肾脏有害无益。其理论依据为：绿茶的主要成分茶碱有利尿作用，浓茶中的大量茶碱更能迅速发挥利尿作用，促使尚未分解的酒精代谢产物——乙醛过早地进入肾脏，而乙醛对泌尿系统有很大的损害作用。

本实验采用56度白酒以最佳致醉量对小鼠灌胃后，用等量不同浓度的绿茶及阳性对照药物枳椇子对醉酒小鼠进行灌胃的方法，通过检测鼠尿中的尿蛋白、血样中血肌酐、尿素氮指标及对肾脏组织病理切片的观察，对以上两种观点的正确性作出验证。

现将实验研究结果报告如下。

1 材料与方法

1.1实验动物：昆明种小鼠120只，体重：20-35g，雌雄各半，由上海中医药大学动物实验中心提供。动物房饲养温度：20-23℃，相对湿度：50-70％，标准饮食，饮自来水。

1.2实验仪器和试剂及其制备：

1.2.1实验仪器：针筒灌胃针、天平、试剂瓶、代谢笼、离心机、气象色谱仪、生化分析

1.2.2 实验试剂及其制备：

1.2.2.156度红星二锅头：北京红星酿酒总厂生产。

1.2.2.2 绿茶：黄山毛峰（一级，散装）。绿茶制备：低浓度茶：10g 绿茶加入100度蒸馏水1000ml，浸泡30分钟，用两层纱布过滤；中浓度茶：25g绿茶加入100度蒸馏水1000ml，浸泡30分钟，用两层纱布过滤；高浓度茶：40g绿茶加入100度蒸馏水1000ml，浸泡30分钟，用两层纱布过滤。

1.2.2.3 枳椇子：由张江孙桥饮片厂提供。枳椇子水煎剂制备：枳椇子25g，加200ml水煎煮1.5小时，纱布过滤，滤渣加200ml水煎煮1小时，过滤，两次滤液合并。提取液含生药62.5mg/ml。[1-4]

1.2.2.4 尿蛋白测定试剂盒（考马斯亮蓝法）；尿素氮试剂盒-BUN(OPA法)；肌酐试剂盒-CRE(苦味酸不除蛋白法)。

1.3实验方法：

1.3.1 预实验：以0.25ml/20g，0.30ml/20g，0.35ml/20g 56度红星二锅头分别对三组小鼠进行灌胃，每组5只。观察令小鼠出现翻正反射消失而无小鼠死亡的所需酒量。找出最佳致醉量为0.30ml/20g。[5-6]

1.3.2 动物分组：称重后，按体重将105只小鼠随机分为6组，空白对照组、模型组、枳椇子组，每组17只；低浓度茶、中浓度茶、高浓度茶组，每组各18只。每日11点开始灌胃，连续7天。

1.3.3 给药量见下表1。

表1 酒后饮绿茶给药量方法

组别第一次灌（0.15ml/10g）20min后再灌

空白组0.9％生理盐水0.9％生理盐水0.2ml/10g

造模组白酒0.9％生理盐水0.2ml/10g 枳椇子组白酒枳椇子水煎剂0.2ml/10g

高浓度茶组白酒高浓度茶0.2ml/10g

中浓度茶组白酒中浓度茶0.2ml/10g

低浓度茶组白酒低浓度茶0.2ml/10g

注：每日灌白酒的量相当于成人每天饮用三两酒的量。

1.4生化检测及病理检查

第8天以小鼠代谢笼法搜集尿样，并断头取血，取肾脏。样品由上海中医药大学附属曙光医院检验科检测生化指标：尿蛋白、血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）；由曙光医院病理实验室制作病理切片。

1.5统计方法：

计量资料以均数±标准差表示；计数资料用百分率表示。资料经正态性检验和方差齐性检验后，再进行方差分析和LSD检验；以及采用Log-rank检验，用SPSS12.0统计软件

2 结果

2.1.各组小鼠实验中的死亡情況和各组生存曲线比较的Log-rank检验。见表2。

表2 各组小鼠实验中的死亡情況

组别实验

前第1

天

第2

天

第3

天

第4

天

第5

天

第6天第7天死亡率

(%)

正常

组

17 0 0 1 1 0 0 0 11.7

模型

组

17 3 1 0 1 0 0 1 35.3

阳性对照

组

17 4 2 3 1 0 1 1 70.5 高浓度茶

组

18 6 1 1 0 0 2 3 72.2 中浓度茶

组

18 7 2 2 0 2 0 0 72.2

低浓度茶

组

18 3 4 2 1 1 1 1 72.2 合计105 23 10 9 4 3 4 6 56.2 注:各组间有显著差异: P<0.05.

表3 各组生存曲线比较的Log-rank检验结果

组别n 平均生存时间（天）95%可信区间生存率(%)

正常

组

17 6.59 6.05～7.13 88.24