微生物自动化检测

微生物自动化鉴定系统－原理（15）
─查码

无此码
此生化谱太不典型； 不能接受，%id＜80.0； 可疑，未知菌某一生化反应为阳性，而相似菌 对该反应的阳性百分率为0； 菌种是否为纯菌。

微生物自动化鉴定系统
─基本结构与性能

微生物数码分类鉴定系统+读数仪(人工、
自动)+电脑分析软件=半自动化或自动化微

%id ＜ 80.0


前3条之和 ＜ 80.0
不可接受的鉴定
微生物自动化鉴定系统－原理（12）
─编码

定义：将所得生化反应模式转换成数学模式， 可把某一菌的全部生化反应结果快速转录成 数字，经查阅检索本可将该数字转化成细菌 名称。 原则：将多个生化反应的阴阳性结果而得出 的＋/－为标志的信息编为一组数字。
微生物自动化鉴定系统－原理（6）

单项总发生频率 = 各个细菌条目中各种生化 反应频率之积


多项总发生频率 = 各项单项总发生频率总和
鉴定百分率(%id)=(单项总发生频率/多项总
发生频率)×100

未知菌单项总发生频率(PO)和多项总发生频 率及鉴定百分率
────────────────────── 条目 单项总发生频率 鉴定百分率(%id) ────────────────────── A 0.500*0.929*0.869*0.021*0.949=0.00804 1.06 B 0.990*0.990*0.849*0.979*0.917=0.74702 98.78 C 0.849*0.151*0.909*0.031*0.126=0.00045 0.06 D 0.990*0.949*0.979*0.011*0.071=0.00072 0.10 ────────────────────── 多项总发生频率 0.75623
微生物自动化鉴定系统－原理（10）
─鉴定百分率排序 按%id大小排序。并将相邻两项的%id之比为R，代 表着首选条目与次选条目的差距。 如%id≥80.0，参考T值及R值作出鉴定。下表中条 目B是唯一选择 ───────────────────── 排序 条目 %id R值 T值 ───────────────────── 1 B 98.78 93.19 1 2 A 1.06 10.60 0.0216 3 D 0.10 1.67 0.0009 4 C 0.06 0.0008
─查码

有此码

Байду номын сангаас
有一个或几个菌名条目及其%id和T值。
对鉴定结果好坏的评价：最佳......等。 用小括号指出关键的生化结果，并列出应得的阳 性百分率。 遇到分辨不清或多条菌名列在一起时，指出必须 增加补充试验的项目及其应得的阳性百分率。 指出某些注意要点，如推测性鉴定，需用血清学 鉴定作进一步的证实等。
生物分析系统
微生物自动化鉴定系统
─工作流程和操作要点
准备 标本处理 预试验 菌落的选择 制备细菌悬液 接种 观察及记录结果
接种 观察及记录结果
结果的解释 结果的解释 结果解释的依据是鉴定百分率表、编码本和 电脑软件
自动化药敏试验系统 ─微量称释试验系统（１）

是目前应用最多的系统


计算机辅助手工系统
微生物自动化鉴定系统－原理（9）
—模式频率T值计算

模式频率T值(Tindex)=未知菌单项总发生频率(PO)/ 最典型反应模式单项总发生频率(PT) T值代表着个体与总体的近似值，它越接近1，代表 个体与总体相接近，鉴定价值亦越大
────────────────────────── 条目 PO PT 模式频率T值 ────────────────────────── A 0.00804 0.37502 0.0216 B 0.74702 0.74702 1 C 0.00045 0.55257 0.0008 D 0.00072 0.84508 0.0009 ──────────────────────────
微生物自动化鉴定系统－原理（5）
─ 计算未知菌对5种反应出现频率
出现阳性反应＝p/100；出现阴性反应＝1－(p/100) 未知细菌对5种反应出现频率计算表
─────────────────────── 反应 条目───────────────────── 1 2 3 4 5 ─────────────────────── — + + + — A 0.500 0.929 0.869 0.021 0.949 B 0.990 0.990 0.849 0.979 0.917 C 0.849 0.151 0.909 0.031 0.126 D 0.990 0.949 0.979 0.011 0.071 ───────────────────────
微生物自动化鉴定系统－原理（２）

基本原理：计算并比较数据库内每个细菌 条目对系统中每个生化反应出现的频率总 和
微生物自动化鉴定系统－原理（３）
数据库1

细菌条目11 细菌条目12 细菌条目1..
分析系统 细菌条目21 数据库2 细菌条目22 细菌条目2.. 每个细菌条目可代表一个细菌种或生物型或属 鉴定是通过试剂条中的生化试验将一种细菌与

放射性标记 特殊感受器 均质荧光技术
检测 pH或氧化还原电势


假阳性？
假阴性？
微生物自动化培养系统
血培养系统（３）－ 仪器基本结构

主机

半自动：仅有的分析仪

自动化：检测系统＋恒温孵育系统

计算机及其外围设备
微生物自动化培养系统
血培养系统（４）
培养瓶
需氧、厌氧、小儿专用、中和抗生素等
半自动系统
全自动系统
自动化药敏试验系统
微量称释试验系统（２）─计算机专家系统

优点：根据专业知识及医疗机构需要编制标 准化的程序，与实验室信息系统联接，自动 检查并验证所得数据，检测不太可能或异常 表型，或者识别试验中出现的技术错误。
自动化药敏试验系统
─纸片扩散法阅读系统

可阅读平板抑菌圈及解释结果，但推荐 工作人员检查平板上的细小的突变株
最典型反应模式的单项总发生频率(PT)

从数据库的典型反应计算得到 最典型反应模式单项总发生频率计算表
────────────────────────── 反应 条目 ──────────────── 单项总发生频率 1 2 3 4 5 ────────────────────────── A 0.500 0.929 0.869 0.979 0.949 0.37502 B 0.990 0.990 0.849 0.979 0.917 0.74702 C 0.849 0.849 0.909 0.961 0.874 0.55257 D 0.990 0.949 0.979 0.989 0.929 0.84508 ──────────────────────────
第三十六章 微生物自动化检测
陶传敏
微生物自动化培养系统
血培养系统（1）
传统血培养 每天肉眼观察 血培养系统 自动监测，10分钟一次
普通孵育
盲目传种
振荡孵育
自动绘制生长曲线，阳性自动报警
只能做血培养
需氧培养
血、无菌体液
需氧＋厌氧＋L菌＋结核菌
微生物自动化培养系统
血培养系统（２）

细菌和真菌生长时释放CO2，通过各种手段检 测CO2来判断阴阳性
终末传代
微生物自动化培养系统
分枝杆菌的培养 分枝杆菌属的检测、 鉴定和药敏
常规：罗氏培养基6～8周 放射性或非放射性检测


微生物自动化鉴定系统－原理（１）

微生物数码分类鉴定技术集数学、电子、信 息及自动分析技术于一体，采用标准化、商 品化和配套的生化反应试验条（板），可将 细菌鉴定到属、群、种和亚种或生物型，并 可对不同来源临床标本进行针对性的鉴定。
微生物自动化培养系统
血培养系统（５） 抗凝剂和吸附剂

SPS(聚茴香脑磺酸钠)：①抗凝。②抑制溶 菌酶。③ 拮抗氨基糖苷类或多粘菌素类抗 生素。④抗补体、抗吞噬。 活性炭 树脂

微生物自动化培养系统
血培养系统（6） － 影响的有关因素
正确使用、定期维护
采血次数：2~3次
采血时间 采血量 采血方法 及时送检

微生物自动化鉴定系统－原理（13）
─编码

具体作法：将全部反应每3个为一组，每个 组的第1位反应阳性时记作4，第2位反应阳 性时记作2，第3位反应阳性时记作1，各种 反应阴性时均记作0。再将每组3个反应得出 的3个数字相加成一个数字，结果可能为0~7 的任何一个数字。
微生物自动化鉴定系统－原理（14）
其他细菌相互鉴别，并用鉴定百分率(%id)表示每种 细菌的可能性
微生物自动化鉴定系统－原理(4)

假设一数据库有4个细菌条目，每个条目包括5种生 化反应。 数据库中的数字为各菌对单项生化反应的阳性百分 率(p)。

──────────────────────── 反应 条目────────────────────── 1 2 3 4 5 ──────────────────────── A 50.0 92.9 86.9 2.1 5.1 B 0 100 84.9 97.9 8.3 C 15.1 15.1 90.9 3.1 87.4 D 0 94.9 97.9 1.1 92.9 ────────────────────────

微生物自动化鉴定系统－原理（11）
─解释

%id≥80.0


最佳鉴定: %id≥99.9和T≥0.75 很好鉴定: %id99.0~99.8和T≥0.5 好的鉴定: %id90.0~98.9和T≥0.25 可接受的鉴定: %id80.0~89.9
前2个条相加≥80.0 前3个条相加≥80.0 (前2个条相加＜80.0) 条件：鉴定到种水平；鉴定到属水平 否则追加生化试验