蛙心灌流-机能实验
蛙心灌流试验
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.观察心脏的解剖结构
（腹面）
（背面）
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一 松结；在左主A下再穿一 线结扎。
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管
1.2 在主动脉根部剪一
斜口，将插管插入动脉
圆锥， 在心室收缩时
将插管插入心室，结扎 固定。
实验步骤
二、连接仪器和装置
1.用试管夹将蛙心管固定 在铁支架上 2.把张力换能器固定铁支 架支台上，在心室舒张期 将与换能器相连的蛙心夹 夹在心尖上。
注意事项
1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必 须用任氏液冲洗3次。 2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液 体吸出。 3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 4.换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。 5.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。
4期自动去极速度↑
自律性↑
心率↑
结果分析与讨论
5. 1:10000 Ach灌流 与心肌M受体结合 K+外流↑, Ca2+内流↓ [Ca2+]i↓ 自律性↓ E-C耦联↓ 心率↓ 最大复极电位↑ 4期K+外流↑
收缩力↓
结果分析与讨论
6. 2.5％NaHCO3 灌流 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结 合，心肌收缩力恢复。
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
结果分析与讨论
3. 1%KCl灌流：
[K+ ]o↑
AP平台期缩短 Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓
结果分析与讨论
4. 1:10000 E灌流 与心肌β1受体结合 cAMP Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑ 兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑
牛蛙机能实验报告分析(3篇)
第1篇一、实验背景牛蛙作为生理学实验中常用的动物模型，其心脏、神经肌肉系统等生理机能的研究对于理解生物体的基本生命活动具有重要意义。
本实验通过对牛蛙进行离体心脏灌流实验、神经肌肉标本制备实验等，旨在分析牛蛙的心脏功能、神经肌肉兴奋传导等生理学特性。
二、实验目的1. 了解牛蛙心脏生理特性，分析不同离子及药物对离体蛙心脏的影响。
2. 掌握神经肌肉标本制备方法，研究神经肌肉兴奋传导规律。
3. 探讨牛蛙生理学实验在医学、生物学等领域的应用价值。
三、实验方法1. 离体心脏灌流实验- 实验对象：牛蛙- 实验材料：BL-420机能实验系统、蛙心夹、机械-电换能器、铁支架、试管夹、蛙心插管、蛙手术器械、滴管、烧杯、棉线、任氏液、0.65% NaCl、1% KCl、1：10000去甲肾上腺素、1：100000乙酰胆碱等溶液、3% 乳酸、2.5% NaHCO-3。
- 实验步骤：1. 制备蛙心插管，将插管插入牛蛙心脏，进行灌流。
2. 改变灌流液的组成成分，观察心脏活动变化。
3. 分别加入不同浓度的NaCl、KCl、去甲肾上腺素、乙酰胆碱等溶液，观察心脏活动变化。
2. 神经肌肉标本制备实验- 实验对象：牛蛙- 实验材料：RM6240生物机能实验系统、张力换能器、标本槽、哺乳动物手术器械、丝线、棉球、任氏液、乙酰胆碱液。
- 实验步骤：1. 制备蛙腹直肌标本，将其悬挂于盛有任氏液的标本槽中。
2. 配制不同浓度的乙酰胆碱溶液，观察标本收缩力变化。
3. 绘制量效曲线，求EC50、pD2。
四、实验结果与分析1. 离体心脏灌流实验- 实验结果显示，改变灌流液的组成成分对离体蛙心脏活动有显著影响。
当灌流液中Na+浓度增加时，心脏收缩力增强；K+浓度增加时，心脏收缩力减弱；去甲肾上腺素和乙酰胆碱均能增强心脏收缩力。
- 分析：Na+是维持心脏兴奋和收缩的重要离子，K+则对心脏兴奋和收缩具有抑制作用。
去甲肾上腺素和乙酰胆碱作为心脏兴奋剂，能增强心脏收缩力。
蛙心灌流-机能实验
4. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后， 加入2％CaCl21~2滴，观察心搏曲线变化。
2 % CaCl2
5. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入1:10000 肾上腺素1~2滴，观察心搏曲线变化。
1:10,000 肾上腺素
6. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入 1:100000 乙酰胆碱1~2滴，观察心搏曲线变化。
实验七
理化物质对离体灌流蛙心的影响
一、实验目的
1. 学习离体蛙心的灌流方法 （离体实验的优势？） 2. 用离体蛙心灌流的方法观察：
① 离子浓度(Na+、K+、Ca2+) ② 酸、碱度 ③肾上腺素（Adr）乙酰胆碱（ACh）
对心脏活动的影响
二、实验原理
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋， 心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化 环境。
正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的强弱 曲线疏密 —— 心率 曲线规律性 —— 心跳的节律性 曲线基线 —— 舒张的程度
2. 完全等量置换0.65%NaCl溶液， 观察心搏曲线变化。
0.65 % NaCl
3. 用任氏液换洗三次，待心搏曲线恢复正常后， 加入1%KCl 1~2滴，观察心搏曲线变化。
心室 心房
白线 静脉窦
静脉窦
4. 将心脏翻回原位置，结扎右侧主 动脉干, 左侧主动脉干远心端结扎并剪口。
剪口
5. 蛙心插管向左后、向下旋转，于心缩期插入心室内。
泵血
6. 将预置线的活结扎死,并固定于插管壁的小钩 上,于各结扎线远端将心脏连同静脉窦一起剪下。
小钩
扎线
泵血
换液
7. 用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，将心脏机 械活动通过换能器转换为电信号输入到电脑 。
机能实验蛙心实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响，如离子浓度、药物等。
3. 掌握实验记录和分析方法。
二、实验原理蛙心灌流实验是生理学中常用的一种实验方法，通过将蛙心置于人工灌流系统中，模拟心脏在体内的生理环境，研究各种因素对心脏活动的影响。
蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
四、实验方法与步骤1. 蛙心制备：- 使用手术刀将蛙麻醉，然后破坏蛙的中枢神经系统。
- 暴露心脏，固定蛙心，将动脉圆锥下方穿一线，用于连接灌流装置。
- 游离心脏，将心脏的主动脉和肺动脉分别插入蛙心夹。
2. 连接实验装置：- 将蛙心夹固定在支架上，连接张力传感器。
- 将灌流液（任氏液）置于培养皿中，通过滴管控制灌流液的流速。
- 将灌流液通过动脉圆锥下方的线，连接到蛙心夹的主动脉。
3. 观察记录：- 观察蛙心的收缩和舒张情况，记录心脏跳动频率和幅度。
- 分别进行以下实验：- 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入2%CaCl2（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1%KCl（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1:10000肾上腺素（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
4. 数据分析：- 对实验数据进行统计分析，比较不同处理组之间的差异。
五、实验结果与分析1. 正常蛙心收缩活动：- 在任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张，跳动频率和幅度适中。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告离体蛙心灌流实验报告近年来，科学技术的快速发展为人类探索生命奥秘提供了更多的工具和方法。
其中，离体器官实验是一种常见的研究手段，通过将动物器官分离出来进行实验，可以更深入地了解其结构和功能。
本文将介绍一项离体蛙心灌流实验，探究心脏的工作原理和血液循环。
实验开始时，我们首先需要准备实验所需的器材和材料。
实验器材包括显微镜、注射器、导管等，材料则包括新鲜的蛙心和生理盐水。
在实验室的洁净台上，我们小心地将蛙心取出，并用生理盐水清洗，以确保实验的准确性和可靠性。
接下来，我们需要进行灌流的准备工作。
首先，将蛙心放置在显微镜下，用显微镜观察心脏的结构和血管的分布。
通过观察，我们可以清晰地看到心脏的主要组成部分，如心房、心室和动脉、静脉等。
然后，我们将准备好的生理盐水注入注射器中，并连接导管。
在注射器中注入适量的生理盐水，以保持心脏的湿润，并确保血液循环的正常进行。
接下来，将导管插入心脏的主动脉，并将生理盐水缓慢地注入心脏内。
随着生理盐水的注入，我们可以观察到心脏开始跳动，并将血液推送到体内各个组织和器官。
这个过程中，我们可以通过显微镜观察到心脏的收缩和舒张，以及血液在血管中的流动情况。
这一实验过程不仅让我们更加深入地了解了心脏的工作原理，还帮助我们理解了血液循环的过程。
通过实验观察，我们可以发现心脏的跳动是有规律的，每次跳动都是由心房和心室的收缩和舒张所控制。
心脏的收缩将血液推送到动脉中，而心室的舒张则使血液回流到心脏中。
这种有序的跳动和血液流动保证了氧气和养分的输送，维持了身体各个组织和器官的正常功能。
除了观察心脏的跳动和血液流动，我们还可以通过实验进一步研究心脏的特性和功能。
例如，我们可以改变生理盐水的浓度，观察心脏的反应。
我们还可以加入药物，以模拟不同的生理和病理情况，进一步研究心脏的适应性和反应能力。
通过离体蛙心灌流实验，我们不仅可以深入了解心脏的结构和功能，还可以探究血液循环的机制。
机能学实验---离体蛙心灌流
碳酸氢钠
乳酸
九、结论
离体心脏的活动受环境理化因素的影响。
Thank you!
4.肾上腺素（Adr）
Adr
心肌细胞膜β1受体结合 Ca2＋ 与肌钙蛋白亲 和力↓，肌浆网摄 钙速度↑ 复极期肌浆Ca2 ＋ 浓 度降低速度↑ 舒张速度↑ 细胞膜对Ca2＋ 通透性↑
肌 浆 网 对 Ca2 ＋ 通透性↑
动作电位期间 Ca2＋内流性↑ 收缩力↑
4期自动除极 化速度↑
自律性↑ 心率↑
5. 乙酰胆碱 （Ach） ACh
3.蛙心插收缩时插入心室
A B
4.连接仪器记录蛙心搏动曲线
五、观察项目
（一）描记正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的程度 曲线疏密 —— 心率 曲线基线 —— 舒张的程度
（二）观察离子、药物和酸碱的影响
1. 换成无钙任氏液灌注，冲洗（下同） 2. 加入3%氯化钙溶液1～2滴 3. 加入1%氯化钾溶液1～2滴
六、实验结果
观察项目
1．无钙任氏液 2． 2%CaCl2 3． 1%KCl 4．Adr 5．Ach 6． 2.5%NaHCO3 7． 3%乳酸
心率
收缩程度
观察项目 无钙任氏液 3%CaCl2 1%KCl Adr
Ach 2.5%NaHCO3 3%乳酸
心率
↓ ↑ ↓ ↑ ↓ ↑ ↓
收缩幅度（收缩力）
心肌细胞膜M受体结合 细胞膜对K＋ 通透性增加
窦房结细胞4期K+ 外流增加、最大复 极电位增大 自律性降低 心率减慢 细 胞 膜 对 Ca2 ＋ 通透性下降 动作电位期间 Ca2＋内流减少 抑制钙通道
心肌收缩力降低
6. 2.5％NaHCO3 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结合，心肌收缩力恢复。 7. 3%乳酸 H+与Ca2+竞争肌钙蛋白， Ca2+不能与肌钙蛋白结 合，心肌收缩力↓。
实验六 蛙类离体心脏灌流
五、注意事项
1. 向套管中加入药物之前，套管中应保留 少量的任氏液； 2．吸去的药液和清洗的任氏液应滴入废液 缸，切记不能污染新鲜的任氏液和其他 药液； 3. 实验记录要完整，即有头有尾，要记得 作标记。
六、结果和目标
观察并记录各灌流成分对心搏的影响。
七、思考题 1． 此实验说明心肌有哪些生理特性？ 2. 以本实验为例说明内环境相对恒定 的重要意义。
四、实验内容 （步骤）
看示范和录像） （一）离体蛙心的制备 （看示范和录像） （二）暴露心脏 （三）连接实验装置 （四）记录心搏曲线
（五）向套管内加2-6滴5%NaCl溶液，加液时 按一下“enter”键作标记记录的曲线出现变化 时，立即吸套管中的灌流液（作好冲洗标记）， 用新鲜任氏液清洗2-3次，待心搏恢复正常。 （2）向套管内加入1滴2%Cacl2溶液观察心搏 曲线的变化（方法同上）。 （3）向套管中加1-2滴1%Kcl溶液观察心转曲 线的变化（方法同上）。 （4）向套管中加入1-2液1:100,000肾上腺素 溶液，观察心搏曲线的变化（方法同上）。 （5）向套管中加入1-2滴1:1000,000乙酰胆碱 溶液，观察心搏曲线变化（方法同上）。
动物生理实验模块
实验六
蛙类离体心脏灌流
一、实验目的 1#43;、Ca2+、肾 上腺素、乙酰胆碱等对离体心 脏活动的影响。
二.原理
心肌具有自动节律性，可用人工灌流的方 法研究心脏活动的体液调节。
三、试剂与器材
蛙、微机、生物信号处理系统、解剖针、 手术剪、眼科剪、尖头手术镊、蛙心套 管、圆头手术镊、蛙板、张力换能器、 蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、长胶头 滴管、5%NaCl溶液、2%CaCl溶液， 1%Kcl溶液、1:100,000肾上腺素溶液、 1:1000,000乙酰胆碱溶液、烧杯
蛙类离体心脏灌流实验
蛙类离体心脏灌流实验蛙类离体心脏灌流实验一、实验目的1、探究不同溶液对心肌特性的影响2、掌握离体心脏灌流的技术二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因素敏感（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关。
细胞外液K＋浓度[K＋]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾：[K＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高。
[K＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV 左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失。
另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，导致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞。
此外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，动作电位平台期缩短，因此，不应期缩短。
此外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用，导致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋]0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2＋]0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋]0降低时，所引起的变化与高钙时相反。
（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na＋]0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增大，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。
蛙心灌流
七、中英文单词对照
（Comparison of Chinese and English words） ）
内环境 internal environment 自律性 autorhythmicity 传导性 conductivity 静脉窦 Venous sinus 阈电位 threshold potential(TP) 动作电位 action potential( AP) 肾上腺素 adrenaline(AD) 乙酰胆碱 acetylcholine(Ach) 心力衰竭 heart failure 受体 receptor 兴奋性 excitability 收缩性 contractibility 窦性节律(sinus rhythm) 窦性节律 静息电位 resting potential(RP) 平台期 plateau 普萘洛尔 propranolol(prop.) 阿托品 atropine(Atro) 强心苷类 cardiac glycosides
祝同学们实验成功！ 祝同学们实验成功！
Thank you!
蛙心灌流及药物对离体蛙心的作用
Frog Heart Perfusion and the Role of Drugs on the Isolated Frog Heart
机能学教研室
Department of Functional Medicine
一、实验目的 (Experimental purposes)
1.学习离体蛙心的灌流方法。 2.用离体蛙心灌流的方法观察：
① 离子浓度(K+、Ca2+) ② 酸、碱度 ③β：肾上腺素、普萘洛尔 M：乙酰胆碱、阿托品 ④ 复制心衰模型，强心苷类
对心脏活动的影响
分ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ、探讨
实验七 蛙类离体心脏灌流实验
实验七蛙类离体心脏灌流一．目的要求：1．学习掌握离体蛙心灌流法；2．观察Na+、K+、Ca+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活动的影响。
二．基本原理：心肌具有自动节律性收缩活动的特性，可用人工灌流的方法研究心脏活动的规律及其特点，还可通过改变灌流液的成分或加入某些药物来观察其对心脏活动的影响。
三．动物、器材和试剂：1．动物：蟾蜍2．器材：常有手术器械、蛙心夹、蛙心插管、张力换能器、滑轮、蛙盘、滴管、烧杯。
3．试剂：任氏液、5％NaCl溶液、2％CaCl2溶液、1％KCl溶液、1:100000肾上腺素溶液、1:100000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液。
四．方法与步骤：1．双毁髓，将蟾蜍固定于蜡盘；2．暴露心脏，分离心脏周围的大血管。
在左主动脉下方穿一线，距动脉圆锥2~3mm 处结扎。
再从左、右两主动脉下方穿一线，打一活结备用。
在前、后腔静脉下穿一线，结扎，保留静脉窦。
用眼科剪在动脉圆锥前端，沿向心方向剪一斜口，然后将盛有少量任氏液－肝素溶液的蛙心插管由此开口处插入动脉圆锥。
当插管尖端到达动脉圆锥基部时，应稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（可用另一只手轻轻捏住心室，感觉插入位置，不可插得过深，以免心壁堵住插管尖端）。
3．用滴管吸去套管中的血液，更换新的任氏液。
提起打活结的备用线，将左右主动脉连同插入的插管扎紧，再将连线固定于插管的小钩上。
剪断结扎线以外的血管及所有牵连的组织，将心脏离体。
用任氏液反复冲洗心室内余血，使灌流液不再有血液，至心室发白。
加入一定高度的任氏液，标记。
4．用蛙心夹夹住心室尖，接滑轮，固定于张力感受器。
5．连接仪器，调整初长度，开始实验。
在任氏液中加入几滴5％NaCl溶液，观察曲线变化，当曲线出现明显变化时，立即吸去灌洗液，用任氏液反复冲洗，至曲线恢复正常。
加任氏液至标记高度。
同法做CaCl2、KCl、肾上腺素、乙酰胆碱，记录。
五．注意事项：1．插入时应注意方向，不能用力过大，也不可强硬插入；2．插管时要防止凝血，需互相配合；3．扎插管时应扎紧，防止实验时滑出；4．液面高度应保持一致；5． 加药时应有前后对照；6． KCl 、乙酰胆碱的影响较剧烈，应注意快速清除。
机能实验报告蛙心(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解蛙心解剖结构及其功能。
2. 观察心脏搏动规律，掌握心脏搏动曲线的记录方法。
3. 掌握心脏灌流实验的基本原理和操作方法。
4. 分析灌流液成分对心脏搏动的影响。
二、实验原理心脏是人体循环系统的核心器官，主要负责泵血，维持血液循环。
蛙心作为实验材料，具有解剖结构简单、易于操作等优点。
心脏搏动曲线可以反映心脏搏动的规律和强度，通过观察和分析搏动曲线，可以了解心脏功能。
三、实验材料1. 实验动物：牛蛙2. 实验器材：蛙心夹，常用手术器械，生理信号采集系统，张力传感器，支架，双凹夹，培养皿，滴管，任氏液，秒表，棉线，套管夹，0.65%NaCl，2%CaCl2，1%KCl，1:10000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱，3%乳酸。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心：取牛蛙一只，用刺蛙针通过枕骨大孔损毁脑和脊髓后，背位固定于蛙板上。
左手持有齿镊提起胸骨剑突下端的皮肤，用手术剪剪开一个小口，然后将剪刀由切口处伸入皮下，沿左、右两侧锁骨方向剪开皮肤。
将皮肤掀向头端，再用有齿镊提起胸骨剑突下端的腹肌，在腹肌上剪一口，将剪刀伸入胸腔（勿伤及心脏和血管）。
2. 蛙心夹夹持心脏：用蛙心夹夹住心脏的左心房和左心室交界处，将心脏固定在支架上。
3. 记录心搏曲线：将张力传感器连接到生理信号采集系统，将传感器放置在心脏表面，记录心脏搏动曲线。
4. 心脏灌流实验：按照以下步骤进行灌流实验：a. 以0.65%NaCl作为基础灌流液，观察心脏搏动曲线；b. 将灌流液更换为2%CaCl2，观察心脏搏动曲线；c. 将灌流液更换为1%KCl，观察心脏搏动曲线；d. 将灌流液更换为1:10000肾上腺素，观察心脏搏动曲线；e. 将灌流液更换为1:10000乙酰胆碱，观察心脏搏动曲线；f. 将灌流液更换为3%乳酸，观察心脏搏动曲线。
5. 观察并记录灌流液成分对心脏搏动的影响。
五、实验结果与分析1. 心脏搏动曲线记录结果显示，心脏搏动具有规律性，搏动曲线呈现周期性变化。
蛙心灌流试验报告
蛙心灌流实验实验目的1、学习斯氏或八木氏离体蛙心灌流法。
2、了解心肌的生理特性。
3、观察Na+、K+、Ca2+及肾上腺素（Adr）、乙酰胆碱（Ach）等对离体心脏活动的影响。
实验原理动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。
改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发生改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件。
实验材料与用品1、材料：蟾蜍、斯氏蛙心套管、套管夹、支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板（蜡盘）、常用手术器械、滴管、废液缸、棉线2、药品：任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2 、1%KCl、0.01% 肾上腺素、0.01%乙酰胆碱3、仪器：计算机采集系统、张力传感器实验步骤1、取一只蟾蜍，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨，暴露心脏。
用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。
2、识别心脏的各个部分，包括心房、心室、静脉窦等，并观察心跳。
3、插蛙心插管，制备离体蛙心。
在左主动脉下穿一线结扎，靠近动脉窦，接着在左右主动脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。
4、用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主动脉距分叉3mm处向心脏剪一斜口，右手将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入，先进入动脉圆锥，然后在心室收缩时，向前略向左推动蛙心插管，使之经主动脉瓣插入心室腔内（注意：为了使蛙心插管顺利插入心室，应使心室与动脉圆锥成一条直线）。
进入心室的标志是随着心室搏动，均有血液喷入插管，插管的液面随着心搏而升降。
结扎插管并将结扎线固定于插管侧面的小钩上，以防止标本滑脱。
在蛙心插管插入心室后，用吸管及时吸出管内的血液，更换新鲜任氏液。
提起插管，剪断主动脉左、右侧分支，轻轻提起插管和心脏，在静脉窦下方绕一线，将左右肺静脉及前后腔静脉一起结扎（切勿损伤静脉窦），在结扎线下方剪去所有牵连的组织，将心脏摘出。
医学机能实验蛙实验报告
一、实验名称蛙心脏生理特性观察二、实验目的1. 观察蛙心脏的解剖结构。
2. 学习使用蛙心灌流装置。
3. 观察并记录蛙心脏在不同条件下的生理特性。
三、实验原理蛙心脏由心房和心室组成，通过心脏的收缩和舒张，将血液泵送到全身。
本实验通过观察蛙心脏在不同生理条件下的反应，了解心脏的生理特性。
四、主要仪器与试剂1. 仪器：蛙心灌流装置、显微镜、剪刀、镊子、解剖刀、生理盐水、任氏液等。
2. 试剂：生理盐水、任氏液、1%硫酸溶液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、lmol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。
五、实验步骤1. 麻醉蛙：用剪刀剪开蛙的后背，暴露心脏，注入生理盐水，使蛙麻醉。
2. 解剖心脏：用解剖刀剪开心包，暴露心脏，观察心脏的解剖结构。
3. 连接蛙心灌流装置：将蛙心脏与蛙心灌流装置连接，注入任氏液，使心脏在灌流条件下保持活性。
4. 观察心脏收缩：在显微镜下观察心脏的收缩情况，记录收缩频率和收缩幅度。
5. 逐步改变灌流条件：改变灌流液中的生理盐水浓度、温度、pH值等，观察心脏的反应。
6. 加入药物：向灌流液中加入去甲肾上腺素、乙酰胆碱等药物，观察心脏的反应。
六、实验结果1. 心脏解剖结构：心脏由心房和心室组成，心房和心室之间有房室瓣，心室和动脉之间有动脉瓣。
2. 心脏收缩：在正常灌流条件下，心脏收缩频率约为60次/分钟，收缩幅度约为0.5mm。
3. 改变灌流条件：降低灌流液温度，心脏收缩频率减慢；升高灌流液温度，心脏收缩频率加快；降低灌流液pH值，心脏收缩幅度减小；升高灌流液pH值，心脏收缩幅度增大。
4. 加入药物：加入去甲肾上腺素，心脏收缩频率加快，收缩幅度增大；加入乙酰胆碱，心脏收缩频率减慢，收缩幅度减小。
七、讨论1. 本实验通过观察蛙心脏在不同生理条件下的反应，了解了心脏的生理特性。
2. 心脏的收缩频率和收缩幅度受多种因素的影响，如温度、pH值、药物等。
蛙心灌流实验
实验报告一、实验结果1.正常情况下的心搏曲线图溶液后的心搏曲线图2.滴加2%CaCl23.滴加0.01%肾上腺素后的心搏曲线图4.滴加0.01%乙酰胆碱后的心搏曲线图5.滴加0.01%阿托品后的心搏曲线图（本来应该是先滴加0.01%阿托品再滴加0.01%乙酰胆碱后的心搏曲线图）6.滴加1%KCl溶液后的心搏曲线图二、分析与讨论溶液1.滴2%CaCl2加入氯化钙后，曲线上升。
细胞外Ca2+浓度的增加，使细胞膜对Na+内流产生竞争性抑制，细胞去极化减小，使兴奋性和传导性降低。
Ca2+内流增多，导致慢反应细胞去极化加强，传导性增高，复极化加速，心肌细胞的兴奋-收缩偶联加强，最后心脏收缩加强。
2.滴0.01%肾上腺素加入肾上腺素后，曲线呈上升。
肾上腺素和心肌细胞膜上的β受体结合，导致Ca2+通透性增强，肌浆中Ca2+浓度增高，心肌细胞的兴奋-收缩偶联加强，最后心脏收缩加强。
3.滴0.01%乙酰胆碱加入乙酰胆碱后，曲线下降。
乙酰胆碱能和心肌细胞膜M受体结合，提高心肌细胞膜 K+通道的通透性，也抑制Ca2+的内流。
一K+通道的通透性的增强，促使K+外流，使复极电位绝对值增大； Ca2+内流减少，减弱心肌收缩。
心肌细胞的兴奋-收缩偶联减弱，最后心脏收缩减弱。
本实验结束后，心脏出现类似于抽搐的现象，因此我们认为乙酰胆碱对心脏的影响较大4.先滴0.01%阿托品再滴0.01%乙酰胆碱本实验由于疏忽在滴加阿托品后忘记滴加乙酰胆碱，故无法得出最后实验效果，继而无法确定先滴加阿托品后滴加乙酰胆碱会有什么效果。
但根据理论知识阿托品是乙酰胆碱M受体阻断剂，滴加阿托品会占据乙酰胆碱与M受体的结合位点，使乙酰胆碱无结合位点，抑制它的作用。
并且阿托品对心肌细胞无影响，所以最后曲线应该是无明显变化。
5.滴1%KCl溶液加入KCl后，曲线呈明显下降，最后为直线。
细胞外K+浓度增高时，与Ca2+产生竞争性拮抗作用，抑制Ca2+内流，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低。
蛙心灌流实验报告
蛙⼼灌流实验报告实验⼆离体蛙⼼灌流实验专业: 学号: 姓名:实验⽬的1?学习离体器官（蛙⼼）灌流的⽅法。
2.观察理化因素对蛙⼼活动的影响。
⼆、实验原理蛙⼼的灌流：蛙⼼⽆营养性⾎管，离体之后采⽤⼈⼯灌流的⽅法，仍可保持其新陈代谢，⼼脏仍能有节律的⾃动收缩、舒张，并维持较长时间，⼼肌的营养是通过⼼脏内膜液体的直接渗透⽽得。
⼼肌：1任⽒液：正常对照含有NaC k CaC2、KC、NaH2PQ、N&HPQ和蒸馏⽔，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
灌流：细胞』液C爼州⼼肌细胞动作电位期间C护+内流H⼼肌细胞胞浆C屛+浓度W⼼肌收缩⼒卄%CaQ灌流:细胞外液C汁浓度显著升髙膜内■外C B孝度梯度增⼤慢反应细胞4期. ⾃动去极速度:=r—~ ==⼯作细胞动為电位期间C』内流怦' ---肌浆C乳浓度料肌浆cf浓度持续升⾼⾃律性'Cn古与肌钙蛋⽩结合数量忖⼼率专⼼肌收缩⼒怦C強与肌钙蛋⽩只结合币解离⼼肌持续收缩%KC灌流:辘楝K理度協牖K帥制層内沆郞?屉糕梯黠⼩Ca纳巔少1 ,觴且位軸值诙⼩1 f'rtv瞅奋7嫦1 1鶉电位与胃电住般作⽤减⼩J灯的电雌减⼩「1 111⼼M瞅葩升⾼细胞膜对通透性4窦房结细胞最⼤复极电位绝对值增⼤.4期K ⼇外流增加动作电位期iWCa^內流只⼼肌收缩⼒井⼼率*7. ⼼得安3受体阻断剂，抑制肾上腺素与8. 阿托品M 受体阻断剂，抑制Ach 减慢⼼率，加速房室传导，增加⼼房收缩⼒。
细胞外液Q 浓度显著升⾼膜内■外哎浓度梯度减⼩静息电位绝对值减⼩⾄■55inV Na 通道失活⼼肌细胞兴奋性丧失⼼脏停?于舒张状态:10000 E 灌流肾上腺素(E) ⼼肌细胞膜Bj 受体结合6呜肌钙蛋⾃亲细胞膜対C 尹通透性⼻和⼒#肌浆⽹摄C0速度t4期⾃动去极化速度丰复扱期肌浆C 必浓度降低速度聲⼼肌舒张丰:10000 Ach 灌流⾃律性齐浆⽹对A C 产逋透性I IT动作电位期钳t间C 尹内流⼁⼁ Jr⼼肌收缩⼒存⼄酰胆＜(Ach) ⼼肌细胞膜M 受体结合TC1抑制钙通道⾃律性*3受体结合，使E 不能发挥作⽤。
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心室 心房
白线 静脉窦
静脉窦
4. 将心脏翻回原位置，结扎右侧主 动脉干, 左侧主动脉干远心端结扎并剪口。
剪口
5. 蛙心插管向左后、向下旋转，于心缩期插入心室内。
泵血
6. 将预置线的活结扎死,并固定于插管壁的小钩 上,于各结扎线远端将心脏连同静脉窦一起剪下。
小钩
扎线
泵血
换液
7. 用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，将心脏机 械活动通过换能器转换为电信号输入到电脑 。
1:100,000 乙酰胆碱
7.用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加入 3%乳酸1~2滴，观察并记录心搏曲线变化。待效应 明显后，再加入2.5% NaHCO3 1~2滴，观察并记 录心搏曲线变化。
六、注意事项
1、连接蛙心夹和张力换能器的手术线松紧适宜。 2、蛙心插管内液面均应保持同一高度。 3、各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。 4、加试剂时，每次不宜太多，先加1-2滴，如作用不明显
蛙 心 夹
微机操作
（1）启动微机，BL-420,显示软件界面； （2）实验项目—循环实验—蛙心灌流 （3）挂上蛙心，自动调零， 等待屏幕图形稳定； （4）开始实验，描记正常心搏曲线； （5）滴加药物，观察实验项目。
[开 始 做 实 验]
加药
加药
五、观察项目
1.记录正常心搏曲线，观察心率及收缩幅度，作为对照
再补加。 5、随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润状态。
祝同学们实验成析
1 % KCl
4. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后， 加入2％CaCl21~2滴，观察心搏曲线变化。
2 % CaCl2
5. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入1:10000 肾上腺素1~2滴，观察心搏曲线变化。
1:10,000 肾上腺素
6. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入 1:100000 乙酰胆碱1~2滴，观察心搏曲线变化。
蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似于其血浆的任 氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和 收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境 因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏 活动的改变（心脏跳动的频率和幅度）。
三、实验动物及用品
BL-420生物机能实验系统 张力换能器 蛙心夹 蛙心插管 万能支台 蛙类手术器械 滴管
实验七
理化物质对离体灌流蛙心的影响
一、实验目的
1. 学习离体蛙心的灌流方法 （离体实验的优势？） 2. 用离体蛙心灌流的方法观察：
① 离子浓度(Na+、K+、Ca2+) ② 酸、碱度 ③肾上腺素（Adr）乙酰胆碱（ACh）
对心脏活动的影响
二、实验原理
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋， 心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化 环境。
任氏液 0.65％NaCl l％KCl 1％乳酸 2.5％NaHCO3 1％CaCl2 l：10000肾上腺素 l：10000乙酸胆碱
四、实验步骤
1.动物的捉拿、捣毁脑和脊髓
毁脑髓
枕 骨 大 刺孔 蛙 针
毁脊髓
①
②
剪皮
剪开胸骨
2.观察手术过程和解剖结构
③
④
右主动脉
左主动脉
剪开心包膜
动脉圆锥
心脏
3. 在两个主动脉干下穿一根细线，将心脏翻向 头侧，在静脉窦的远端结扎，阻断静脉回流。
正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的强弱 曲线疏密 —— 心率 曲线规律性 —— 心跳的节律性 曲线基线 —— 舒张的程度
2. 完全等量置换0.65%NaCl溶液， 观察心搏曲线变化。
0.65 % NaCl
3. 用任氏液换洗三次，待心搏曲线恢复正常后， 加入1%KCl 1~2滴，观察心搏曲线变化。