脂质体的研究新进展

脂质体的研究新进展
杨鹏波;张华
【摘要】[目的]综述脂质体的应用和研究进展，为药物制成脂质体提供更多的选择。

[方法]查阅近几年国内相关的文献资料并总结脂质体在各方面的应用、新的制备方法和修饰方法及其各自的优点。

[结果]从脂质体的的应用、制备方法、修饰、质量评价等方面，可看脂质体与生物膜有着极好的相容性，作为载体有很大的优势，修饰后，能增强靶向性，提高药物的疗效，降低毒副作用。

[结论]随着新材料的产生和新技术的发展，脂质体的优势将更加显现脂质体作为一种新型的药物载体，与生物膜具有相似性，具有多种优良特性，改变了传统的给药方式。

经过近40年的研究，已到广泛的应用。

%[Objective]This paper summarizes the latest literature,which can offer more choices for making liposome
drug.[Methods]This article summarizes the application of liposomes in al aspects and new preparation methods and modification methods and their respective advantages. [Results]Liposome as a new type of drug
carrier,which has similarity with biological membrane,has many good qualities and changes the traditional way to give medicine. [Con-clusion]Liposome has the broad application after nearly forty years of research.
【期刊名称】《浙江中医药大学学报》
【年(卷),期】2013(000)007
【总页数】4页(P936-939)
【关键词】脂质体;分类;制备方法;联用技术;质量评价
【作者】杨鹏波;张华
【作者单位】山东中医药大学济南 250355;山东中医药大学济南 250355
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
脂质体是由脂质双分子层 (由磷脂和胆固醇组成）构成的封闭囊泡，它具有很多的优良性质，如具有细胞的亲和性和靶向性、缓释性、减低药物毒性、提高药物稳定性、透皮吸收效率高、可以携带药物进入细胞、避免耐受性、改变给药途径等[1]。

近年来随着新材料，新技术的产生,又出现了一些新型的脂质体。

1 分类
依据载药脂质体给药途径不同，可分为以下几种。

1.1 口服脂质体主要用于粘膜免疫和抗肿瘤两个方面。

王刚[2]等将槲皮素制成脂
质体，通过研究槲皮素口服给药后在胃组织中的药物浓度和吸收百分率得出：槲皮素脂质体有较强的胃肠粘附性，可以延长药物在胃中的滞留时间，从而提高了药物在胃肠道的吸收率。

1.2 非口服脂质体
1.2.1 透皮给药脂质体脂质体透过皮肤的机理：水合作用、穿透机制、融合机制等。

吴青青[3]等采用乙醇注入法制备姜黄素脂质体，对姜黄素的溶液和其脂质体经小
鼠离体皮肤的累积渗透量及皮肤滞留量进行比较发现，姜黄素脂质体在皮肤中的滞留量和皮肤累积透过量都比较大，提高了疗效，降低了毒性。

1.2.2 眼用载药脂质体目前主要应用于滴眼剂、玻璃体内注射给药及眼用喷雾剂等。

作用机制：与生物膜融合作用、通过角膜细胞实现跨角膜转运和脂质体与眼角膜的吸附作用。

郑建灵[4]等采用无膜溶出法研究西罗莫司壳聚糖包覆脂质体-原位凝胶的释放机制，对释放曲线进行拟合分析，与传统眼用药物相比,提高了西罗莫司的
生物利用度，降低了对眼睛的刺激性，具有很好的生物安全性。

1.2.3 肺部给药脂质体包括抗感染药物、抗哮喘药物、抗肿瘤药物、多肽蛋白类药物、基因药物、抗氧剂[5]。

刘洁[6]等从细胞免疫水平考察流感疫苗脂质体干粉肺
部免疫的免疫原性，流感疫苗脂质体肺部免疫产生的细胞免疫效果比较高，并具有良好的物理稳定性和生物学稳定性。

1.2.4 注射用脂质体有抗肿瘤药物和抗感染药物及局部用药。

钱隽[7]等对注射用
紫杉醇脂质体和常规紫杉醇注射液在肿瘤患者中的药动学进行了比较。

注射用紫杉醇脂质体加强了组织亲和性，具有缓释作用，降低了药物的毒性，增强了抗肿瘤效果。

王燕[8]等考察了两性霉素B脂质体注射剂与普通注射剂的疗效，两性霉素B
脂质体注射剂增强了药物的作用，降低了毒副作用。

王桂芝[9]考察了利多卡因脂
质体注射剂与普通注射剂，利多卡因脂质体注射剂降低了毒性，延长了麻醉时间。

2 脂质体的制备方法
脂质体常用的制备方法有乙醇注入法、逆向蒸发法、乙醚注入法、pH梯度法、薄膜分散法、冻融法、超声分散法、冷冻干燥法[10]等。

近几年又产生几种新的方法。

2.1 超临界二氧化碳法超临界二氧化碳是一种无毒、惰性且对环境无害的介质，
较传统制备方法安全，且包封率较高。

文震[11]等利用超临界CO2技术先将膜材
和药物制成脂质体混悬液，再真空干燥制备脂质体，影响脂质体包封率和粒径的因素有压力（脂质体的包封率、载药量均随着压力的升高而增大）、温度[当温度低
于323 K(磷脂相变温度)Tm时，包封效果较差；当温度高于323 K，包封率、载
药量随温度增加而增大；再继续增高就会下降]、共溶剂。

测得脂质体平均包封率
为87.2%，平均载药量为5.9%，平均粒径448nm。

2.2 微乳法用微乳法制备脂质体包封率比较高，粒径较大。

用有机溶剂溶解磷脂
和胆固醇后加入待包封的药物溶液，乳化得W/O乳液；再加入大量的水中混合，乳化得W/O/W乳液；在一定温度下除去有机溶剂可得脂质体。

姚新武[12]等利
用复乳法制备龙胆苦苷脂质体。

发现第1次乳化超声时间、除去有机溶剂时的温度、超声功率等对粒径和包封率均有影响。

测得药物脂质体平均粒径为131nm，其包封率为52.39%。

2.3 硫酸铵梯度法与常用的pH梯度法相比，此法不需要改变水相的pH值，比较容易控制梯度，也不需要缓冲液和pH滴定，脂质体的包封率比较高。

制备步骤：将硫酸铵包于脂质体水相；通过透析、凝胶色谱或超滤的方法除去脂质体外水相的硫酸铵，药物逆硫酸铵梯度载入脂质体，即得药物脂质体。

王琳[13]等采用硫酸铵梯度法制备马钱子碱脂质体。

影响脂质体包封率、粒径的因素有卵磷脂与胆固醇比、硫酸铵浓度、药脂比和硫酸铵溶液的体积。

其包封率平均为92.17%。

也可使用联用技术，如下。

2.4 薄膜分散-机械振荡法陈柳华[14]等利用薄膜蒸发-超声分散法制备氟比洛芬脂质体，并通过鱼精蛋白凝聚法研究了影响脂质体载药性能的因素。

先采用薄膜分散法制备得烧瓶内壁形成一层脂质膜；通氮气除去残留溶剂后加磷酸缓冲液，超声，经滤膜过滤得氟比洛芬脂质体。

影响脂质体载药性能因素有卵磷脂浓度、氟比洛芬/卵磷脂的质量比、胆固醇浓度。

测得药物脂质体的平均粒径为100～250nm，具有良好的分散性，且载药量高。

2.5 膜水化-高压均质法邓礼荷[15]等采用该法制备羟基喜树碱脂质体，并研究冻
干工艺及保护剂对羟基喜树碱脂质体质量的影响。

制备：先将膜材溶于溶剂后，40℃下旋转蒸发溶剂至成膜，加磷酸盐缓冲溶液水化后经高压均质机均化；加入
冷冻干燥剂后经微孔滤膜后经分步预冻，加入冷冻干燥机中经冷冻干燥既得。

测得药物脂质体的平均包封率均87%，平均粒径约200nm，加入冻干剂可降低冻结过
程中脂质体囊泡的脱水速度和皱缩速度，并可以防止冰晶对泡囊的机械损伤。

2.6 薄膜挤压-硫酸铵梯度法采用薄膜挤压-硫酸铵梯度法制备的脂质体粒径小而均匀，且载药量较高。

陈斯泽[16]等采用该法制备盐酸洛拉曲克脂质体并考察了其理化特性。

先采用薄膜挤压法制备空白脂质体，透析后再采用硫酸铵梯度法制备得盐酸洛拉曲克脂质体。

测得药物脂质体质体平均粒径为10
3.5nm,平均包封率为
83.6%，且分布均匀，还可以缓慢释放药物。

3 脂质体的修饰
普通脂质体具有被动靶向性，存在靶向性低、对某些疾病的治疗不理想、稳定性差等缺点，因此对脂质体表面进行了修饰，修饰脂质体具有更强的靶向性保证药物在病变部位充分释药。

修饰的物质主要有胆固醇、聚乙二醇、抗体、壳聚糖及其衍生物、胶原蛋白、壳聚糖、半乳糖、聚乙烯醇、转铁蛋白、吐温80等[17]。

3.1 长循环脂质体用聚乙二醇修饰脂质体，可延长其在循环系统的滞留时间。

聚
乙二醇连接主要有两种方式：一种是以共价键；另一种是以疏水性取代基的疏水吸附或结合。

周蔚[18]等采用薄膜超声分散法制备长循环紫杉醇脂质体，并考察了长循环紫杉醇脂质体和普通剂型在体内的分布情况，发现以相同剂量给药，紫杉醇长循环脂质体较普通型抑瘤作用更明显；提高了动物的最大耐受量，降低了毒性，提高了药物的体内安全性。

3.2 膜融合脂质体将脂质体与特定病毒融合，这些病毒包括人免疫缺陷病毒1型、流感病毒、仙台病毒、城疫病毒和疱疹性口炎病毒等,可以快速、高效地介导基因
进入宿主细胞，降低了药物的毒性，提高了靶向性。

刘丽梅[19]等将新城疫病毒Ⅳ系弱毒株构建新型膜融合脂质体，观察新城疫病毒Ⅳ系弱毒株膜融合脂质体诱导的细胞毒性T淋巴细胞反应活性及体内抑瘤效应，发现其能充分调动肿瘤患者淋巴
细胞的活化，提高对肿瘤细胞的杀伤能力，降低了药物的毒副作用，提高了安全性。

3.3 热敏脂质体以热敏脂质体为载体包埋化疗药物，可以提高靶向性、降低全身
毒性、增强抗肿瘤疗效。

设计时需注意：选择具有合适的、人体能够耐受相变温度（Tm，一般应低于45℃）的磷脂；加入适量胆固醇（磷脂与胆固醇的质量比通常为3:1～6:1）以增加脂质体膜的刚性，提高脂质体中药物的稳定性、减少药物泄露，但刚性过强会影响脂质体的热敏性及药物的释放[20]。

尤晓惠[21]等用薄膜分散法制备紫杉醇热敏脂质体及紫杉醇普通脂质体，发现热敏脂质体能在加热部位聚集，增加了肿瘤血管的通透性，使药物更易通过血管进入肿瘤组织，提高加热部位的药物浓度，从而提高了药物的疗效，减低了毒性。

3.4 免疫脂质体分为抗体介导的免疫脂质体和受体介导的免疫脂质体两大类,将单克隆抗体联接到脂质体表面即可实现免疫性能。

主要应用：化疗药物的载体、放射性核素的载体、基因治疗的载体、透过血脑屏障药物的载体、疫苗载体等[22]。

段降龙[23]等制备尿素免疫脂质体发现免疫脂质体延缓了药物的生物降解,尿素从脂质体中缓慢释放,药效持续时间长，降低了尿素治疗血管瘤后并发症的发生。

3.5 磁性脂质体主要材料是纳米级的四氧化三铁或三氧化二铁等。

制备方法：一是直接将脂质体覆盖在磁粒子上（优点是粒径小、不会溶解表面活性剂类的两亲分子）；二是将磁粒子微乳化而进入脂质体内部（优点是可以同时携带药物等物质，应用广泛）。

凌家俊[24]等用薄膜分散-超声法制备羟基喜树碱磁性脂质体并引入微透析技术，动态、连续地考察磁性脂质体的肿瘤局部聚集性，发现羟基喜树碱磁性脂质体在外加磁场引导下具有明显的磁靶向性，从而减低药物毒副作用、提高药物的疗效，增强了靶向性。

此外还有很多种修饰脂质体，例如pH敏感脂质体、隐形脂质体、光敏脂质体、柔性脂质体等。

4 脂质体的质量评价
4.1 形态与粒径及其分布脂质体的形态为封闭的多层囊状或者多层圆球。

粒径一般用光学显微镜或者电镜测定。

4.2 载药量与包封率影响因素有：药物的性质、粒径、类脂质膜材料的投料比、
药脂比、制备方法、其他因素（例如温度、浓度、pH）测量方法有紫外分光光度法、HPLC、EPR、NMR等方法。

作为药品开发时，脂质体的包封率不得低于80%[25]。

4.3 渗漏率脂质体的渗漏率是脂质体不稳定性的主要指标。

如果脂质体的渗漏率
较高可以在膜材中加入一定量的胆固醇，以提高脂质体的膜稳定性，从而减少膜流动。

4.4 脂质体制剂应该符合中国药典有关制剂通则的规定。

5 结论与展望
脂质体具有与生物膜极好的相容性，作为药物的载体具有极大优势，在进行修饰后更增强了靶向性使药物病灶聚集性增强，提高疗效，降低毒副作用作为一个较新的药物载体和研究领域，还有很多方面需要深入研究，譬如脂质体的稳定性较差，易发生氧化和药物泄露等质量问题。

影响脂质体物理化学稳定性的因素有：浓度、pH、添加剂、温度以及金属离子、
聚合物、电离辐射、光线、某些有机分子、表面电荷、温度、保存条件等。

如果是液体脂质体制剂，则属于热力学和动力学不稳定体系，易发生脂质体粒的聚集或破裂现象，也易滋生微生物等，解决方法可以在膜中加入少量带电荷的成分减低聚合，还可以通过加入适合的添加剂、除去金属离子、调节适宜的pH、控制适宜的储存温度而降低脂质体的沉淀；磷脂容易发生氧化、水解等反应导致脂质体颗粒发生破裂、聚集现象。

解决办法可以除去金属离子、不合适的有机分子，加入抗氧化剂，闭光、密闭保存而减低磷脂的氧化；还可通过调节适宜的pH、温度和在脂质体表面键入适宜的电荷、制备成冻干脂质体（或者长循环脂质体、前脂质体等）而减低膜材的水解。

尽管如此，瑕不掩瑜，随着新的制剂辅料的产生和制药技术的发展，脂质体的优势将更加显现。

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