适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立
大鼠Langendroff离体心脏局部缺血再灌注模型建立及功能评价
【 摘要 】 目的
建立 大鼠 Ｌ ａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｄ ｏ ｆ ｆ 离体 心脏局 部缺血 再灌 注模型 的方法并 进行功 ｉ ｓ ｔ ａ ｒ 大 鼠随 机 分 成 ２组 ， 对 照组 （ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， ｎ＝１ ２ ） 和模型组 （ ｍ ｏ ｄ ｅ ｌ ， ｎ＝１ ４ ） 。两 组 均 建 立 标 准 的 Ｌ ａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｄ ｏ ｆ ｆ 离 体 心脏 灌 注 模 型 ： Ｋ — Ｈ液持续灌注 （ ９ ５ ％ Ｏ ＋ ５ ％ Ｃ Ｏ 过 饱 和 ， 左心室插 入球囊压力 管 ） ， Ｋ — Ｈ液持续 灌注平衡 ２ Ｏ ｍｉ ｎ后 对 照 组 Ｋ— Ｈ液 持 续 灌 注 １ ０ ５ ｍ ｉ ｎ ； 模型组同对照组平衡 ２ ０ ｍｉ ｎ后 穿 线 结 扎 冠 状 动 脉 左 前 降 支 第 一 对 角 支 下 缘部位 ， 造成局部停灌 （ 缺血 ） ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 而 后 剪 断结 扎 线 复 灌 （ 再灌注 ） ７ ５ ｍ ｉ ｎ 。伊 文 思 蓝 、 Ｔ Ｔ Ｃ染 色观 察 心 肌 梗 死 、 缺
血 面积 ； 记 录 左 心 室 压 力 及 心 率 变化 过程 ， 比较 各 组 平 衡 ２ ０ ｍ ｉ ｎ 、 局部 缺血 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 、 再灌 １ ５ ｍ ｉ ｎ 、 再灌 ３ ０ ｍｉ ｎ 、 再 灌 ７ ５ ｍ ｉ ｎ的血 流 动 力 学 指 标 及 灌 流 液 中肌 酸 激 酶 （ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｅ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ， Ｃ Ｋ） 和乳 酸 脱 氢 酶 （ １ ａ ｃ ｔ ａ ｔ ｅ ｄ ｅ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ａ ｓ ｅ ， Ｌ Ｄ Ｈ）漏 出量 。 结 果 对 照组血供正常 ， 模 型组 局 部 缺 血 、 梗死 明显 ； 对照 组、 模 型 组 平 衡 末 心 肌 酶 学 及 血 流 动 力 学 各 参 数
离体和在体大鼠心肌细胞凋亡模型的建立
离体和在体大鼠心肌细胞凋亡模型的建立姚玲玲;黄晓伟;朱依纯【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2011(027)006【摘要】目的建立离体和在体心肌细胞凋亡模型.方法离体模型:原代培养大鼠心肌细胞进行饥饿处理24 h后,培养液换成Hank′s平衡液,同时进行缺氧处理,30 min后恢复到正常氧状态再培养2 h,固定,TUNEL染色,计数凋亡细胞;细胞总DNA 抽提,agrose凝胶电泳,观察DNA ladder的产生.在体模型:150 g左右的WKY大鼠麻醉,固定,气管插管,开胸,冠状动脉左前降支结扎30 min,再灌注2 h后,心脏取出,冰冻切片,进行TUNEL染色,观察危险区细胞凋亡.结果原代培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧处理引起大量心肌细胞凋亡,TUNEL染色阳性,DNA电泳有明显梯状条带,在体大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/再灌注造成心肌梗死,梗死周边危险区有大量凋亡细胞产生.结论离体细胞缺氧/复氧处理和在体大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/再灌注都能导致心肌细胞发生凋亡,这两种凋亡模型具有操作简单、成功率高等特点,可以用于心肌梗死机制的研究以及保护心肌药物的筛选.%Aim To establish a reliable and practic:al rat c:ardiomyocyte apoptosis model in vitro and in vivo. Methods In vitro cardiomyocyte apoptosis model: the neonatal SD rat cardiomyocytes were primarily cultured for 24 hours and the culture medium was changed to Hank's balance sodium medium, and the cells were treated with hypoxia for 30 minutes. and with normal oxygen for 2 hours. Then cells were fixed, staining with TUNEL and the apoptotic cells were measured; the total DNA was extracted and gel electrophoresis wasemployed for the observation of DNA ladder. In vivo cardiomyocyte apoptosis model: WKY rats about 150 g were anaesthetized. fixed. and ventilated with a rodent ventilator. A parasternal incision was made and myocardial ischemia was induced by passing a 6-0 silk suture beneath the left anterior descending artery. The suture was tightened over a piece of PE-20 tubing for 30 min and then released for 2 h. Detection of apoptotic cardiomyocytes was performed with TUNEL staining using an apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. Results TUNEL staining positive cells were observed in hypoxia/reoxygenation-treated cardiomyocytes,and DNA ladders were obvious. In theischemia/reperfusion treated WKY rate heart slices, TUNEL positive cells were observed compared with control group. ConclusionHypoxia/reoxygen-induced cardiomyocyte apoptosis in vitro and ischemia/reperfusion-induced cell apoptosis in vivo are reliable models inducing apoptosis.【总页数】3页(P879-881)【作者】姚玲玲;黄晓伟;朱依纯【作者单位】复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】R-332;R329.25;R336-332;R542.22【相关文献】1.大鼠活体心肌缺血再灌注损伤模型的建立与综合评估 [J], 邓宇珺;杨敏;谭卫萍;苏健;符永恒;谭宁;曾红科;单志新;林秋雄;李晓红;董小莉;余细勇2.离体大鼠心肌顿抑模型的建立 [J], 姚立农;柴伟;赵晖;杨永慧3.大鼠在体心肌缺血再灌注模型的建立 [J], 汪梦霞;廖锦华;马达;胡冬华;王成果;梁云洁;高兰;马爽;李雅兰4.大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的建立及其心功能和心肌细胞凋亡情况观察[J], 唐咏文;崔同涛;刘勇;王敏;郭涛;刘津;谭宁5.大鼠离体心肌细胞晚期“缺血”预处理模型的建立 [J], 韩君勇;陈运贞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄蜀葵花总黄酮研究进展_周雷
酸水解以及物理化学常数的测定，分别鉴定为槲皮 素 -3- 洋 槐 糖 苷、槲 皮 素 -3'- 葡 萄 糖 苷 (Quercetin3'-glucoside)、金丝桃苷 (Hyperin)、槲皮素 (Quercetin) 及杨梅素 (myricetin)。这是国内最早对黄蜀葵花的 研 究，后 王 先 荣 等 利 用 色 谱 和 分 部 结 晶 方 法 对 黄 蜀 葵 花 进 行 成 分 分 离，根 据 物 理 化 学 性 质 和 波 谱 学手段对化合物进行结构鉴定。结果又新发现 2 个黄酮醇单糖苷，分别鉴定为棉皮素 -3'-O-β- 葡 萄 糖 苷 (Gossypetin-3'-O-β-glucoside )、异 槲 皮 苷 (Isoquercetin) [7]。
第14卷 第6期 2012 年 6 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 14 No. 6 Jun .，2012
黄蜀葵花总黄酮研究进展
周雷
（南京中医药大学附属医院，江苏省中医院内分泌科，江苏 南京 210029）
摘 要 ：黄蜀葵花为锦葵科秋葵属植物黄蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic. 的干燥花，民间应用历史悠久。
D 法所测定的结果相对准确，所以 D 法值得推广。 采收时间的不同对黄蜀葵花总黄酮的含量会
有影响 [16]，黄蜀葵花的花期可分为花蕾期、开放期 和凋谢期。在不同的花期内采收，其总黄酮含量变 化很大，开放期的含量最高，凋谢期的含量最低，其 总黄酮含量约为开放期的 1/5。但在同一花期内任 一时间内采收，其总黄酮含量的变化不大。
心肌梗死的动物模型制作
心肌梗死的动物模型制作心肌梗死是一种严重的心血管疾病，其主要病理特征是冠状动脉的阻塞导致心肌缺血与坏死。
为了研究心肌梗死的发病机制和寻找可能的治疗方法，研究人员常常利用动物模型来模拟心肌梗死的发生。
下面，我将介绍一种常用的大鼠心肌梗死动物模型制作方法。
制作大鼠心肌梗死动物模型可以按照以下步骤进行：1.动物选择。
常用的实验动物有大鼠和猪。
由于大鼠的心血管解剖和生理特征与人类较为接近，同时成本较低，因此大鼠是一种常见的选择。
2.麻醉动物。
使用适量的麻醉剂，如异氟醚或七氟醚等，来使动物处于麻醉状态。
确保动物处于无痛苦的状态。
3.固定动物。
将动物固定在手术台上，以避免动物在手术过程中的移动。
4.体表消毒。
在手术区域进行局部消毒，以防止感染。
5. 做出胸骨切口。
在胸骨两侧做出1-2cm的胸骨切口，用手术器械将胸骨分开，暴露出心脏。
6.找到冠状动脉。
用吸引管或者类似的器械将心包囊抽吸，暴露出心脏表面。
紧邻左心室肌肉的左前降支是心肌梗死的常见发生区域。
7.梗死诱导。
用细导管或者相似的器械将一根可以封堵冠状动脉的丝线或者微球导入至冠状动脉中，使其堵塞。
这一步骤可以模拟冠状动脉的阻塞引发心肌梗死。
8.恢复心脏正常血流。
待梗死产生一段时间后（一般为30分钟-60分钟），再次将导管或器械取出，恢复冠状动脉的血流。
9.缝合胸骨。
将胸骨进行缝合，确保伤口能够愈合。
10.外科处理。
术后外科处理，如用抗生素进行预防性治疗，避免可能的感染。
研究人员可以通过观察心肌梗死后的心电图变化、心肌组织的病理切片等方式来评估心肌梗死的程度与发展。
总的说来，大鼠心肌梗死动物模型是一种常见的研究心肌梗死发病机制的实验模型。
通过制造大鼠心肌梗死动物模型，研究人员可以更好地模拟心肌梗死的发生，寻找新的治疗策略和探索其发病机制。
当然，在制作动物模型时，需要严格遵循相关伦理规范和动物保护法律法规，确保动物的利益和权益不受损害。
此外，动物模型只是研究的一部分，结合体外实验和临床数据，才能更全面地了解心肌梗死的病理机制及治疗方法。
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估1 对象与方法?1. 1研究对象清洁级雄性Spreague-Dawley (SC)大鼠20 只，体质量250〜300 g (275± 15. 3) g,由广州中医药大学实验动物中心提供。
随机分为假手术组和心肌梗死组。
1 .2 研究方法?1 . 2. 1 MI 模型的建立[2-3] 氯胺酮( 75 mg/kg )腹腔注射麻醉，经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间)，连接小动物呼吸机予以正压通气，潮气量3〜5 ml/100 g ，呼吸频率60次/min，吸呼比1? : ?1。
左侧胸部备皮，消毒手术区域，经胸骨左缘第4 肋间开胸，钝性分离肌肉，以眼科开睑器撑开肋间肌切口，暴露心脏，剪开心包，于肺动脉圆锥与左心耳之间距主动脉根部2~3 mm处，用7-0眼科无创缝合针，穿过前降支深部连同一小束心肌一并结扎。
根据心电图和心肌组织颜色确定冠脉结扎成功。
逐层缝合胸壁，自主呼吸恢复后拔出通气导管。
大鼠清醒后送动物房饲养,规律照明,自由进食和饮水。
术后连续3 d 予以青霉素40 万U 腹腔注射以预防感染。
假手术对照组除不结扎冠状动脉外，其余步骤相同。
1. 2. 2 超声心动图检查[4]3% 戊巴比妥钠( 45 mg/kg )腹腔注射麻醉，用Philips Sonos 5500型多功能超声诊断仪( S12探头，频率5~12 MHz),在胸骨旁以二维超声和M型超声测量左室收缩末径（LVSd、左室舒张末径（LVDd、舒张期左室后壁厚度（PWd、舒张期左室前壁厚度（AWd Ml组为梗死区室壁厚度）、左室射血分数（LVEF和短轴缩短率（FS）,分别计算梗死区变薄指数（BBZS即舒张期左室前壁厚度/后壁厚度）和非梗死区增厚指数（ZHZS即舒张期左室后壁厚度/前壁厚度）。
所有参数均在3 个连续的心动周期中进行测量并取平均值。
1．2．3 血流动力学检查[5]3%戊巴比妥钠（45mg/kg）腹腔注射麻醉，气管切开插管，保持呼吸道通畅。
大鼠心肌梗死模型建立方法选择及心电图表现
檵檵檵檵殝
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中国实验动物学报 2011 年 12 月第 19 卷第 6 期
Acta Lab Anim Sci Sin ， December ， 2011 ， Vol． 19. No． 6
spectively． There was no myocardial infarction and the survival rate was 100% in the sham operation group． ECG ： QRS-T wave displayed an intersection “M ” shape in the sham group and before left coronary artery ligation． The R wave and T wave fused into one large tent-like single wave after the left coronary artery ligation ，and without visible ST segment． Histopathological changes of myocardial infarction were seen at 4 weeks after operation． Conclusions tip ，and all ECG showed no visible ST segment in the rats． 【Key words 】 Rat ； Model ，myocardial infarction ； Electrocardiogram It is a novel method to establish myocardial infarct model that the suture is placed about 2 mm distal to the horizontal line of left atrial appendage
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估【摘要】目的建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死模型。
方法SD大鼠经氯胺酮麻醉后，经口人工呼吸，开胸结扎左冠状动脉前降支。
4周后行超声心动图、血流动力学和组织病理学检查。
结果①心电图和组织病理学检查证实，成功建立了大鼠急性心肌梗死模型，梗死面积40%~45%（平均42%）；②与假手术组比较，心肌梗死大鼠左室收缩末径、左室舒张末径和非梗死区增厚指数明显增加（P＜0．01），左室后壁、左室前壁、梗死区变薄指数、左室射血分数和左室短轴缩短率显著降低（P＜0．05，P＜0．01）；③心肌梗死大鼠动脉收缩压、舒张压、左室收缩压、左室内压最大上升和下降速率均低于假手术组（P＜0．01），心率和左心室舒张末压高于假手术组（P ＜0．01）；④两组大鼠左、右心室实际和相对重量以及胶原容积积分之间的差异有统计学意义（P＜0．01）。
结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简单、重复性好、结果可信。
【Abstract】Objective To develop a steady and reproducible myocardial infarction(MI) model in rats.Methods SD rats were anaesthetized with ketamine.After linking with respiration machine，left anterior decending coronary artery was ligated.Echocardiogram，haemodynamics and histopathology were done four weeks after ligation.Results ①The model of MI was established successfully and proved by electrocardiogram and histopathology.Infarct sizes were 40%~45%(average 42%).②Compared with sham operation group，MI rats had higher left ventricular systolic diameter，left ventricular diastolic diameter and non-infarcted region thickening index (P＜0．01)，and lower posterior wall diameter，anterior wall diameter，infarcted region thinningz index，left ventricular ejection fraction and fractional shortening (P＜0．05，P＜0．01).③Systolic blood pressure，diastolic blood pressure，left ventricular systolic pressure and the maximum rising and dropping rates of left ventricular pressure decreased，while heart rate and left ventricular end-diastolic pressure increased after MI.④There were significant differences in left ventricular actual weight，right ventricular actual weight，left ventricular relative weight，right ventricular relative weight and collagen volume fraction between sham operation group and MI rats (P＜0．01).Conclusion This experiment provided an easy way to establich the MI model，which was reproducible and credible.【Key words】Coronary artery;Myocardial infarction;Modelanimal;Rats心肌梗死（myocardial infarction，MI）是21世纪医学亟待解决的难题之一[1]。
langendorff检测指标
Langendorff检测指标是指在心脏离体灌流模型中，用于评估心脏功能和生理状态的一系列指标。
Langendorff技术是一种常用的实验方法，通过将小鼠、大鼠或其他动物的心脏取出，然后连接到灌流系统进行人工循环，以模拟心脏在体内的工作状态。
这种方法可以排除外界因素的干扰，全面评估心脏的功能和受到不同因素影响后的变化，是心脏生理和药理学研究中广泛应用的技术之一。
1. 心率Langendorff检测中，心率是一个重要的指标。
通过记录灌流心脏的搏动次数，可以了解心脏的基本节律和频率。
心率的改变常常反映了心脏受到某种药物或生理条件的影响，比如心率加快可能是由于交感神经兴奋或者心脏刺激物质的作用。
心率的监测是Langendorff检测不可或缺的一项指标。
2. 收缩压和舒张压Langendorff检测中还需要关注心脏的收缩压和舒张压。
通过监测心室压力曲线，可以了解心脏泵血功能的变化。
收缩压反映了心脏收缩时产生的最大压力，而舒张压则反映心脏在舒张期的压力。
这两个参数的变化不仅反映了心脏本身的功能状态，也可以反映出心血管系统的整体状况。
3. 心肌收缩力心肌收缩力是评估心脏机械功能的重要指标之一。
在Langendorff检测中，可以通过测量心室内压力和容积等参数，计算出心肌的收缩力指标，如+dp/dtmax（心肌最大升压速率）和dp/dtmin（心肌最大降压速率）。
这些指标可以客观反映心肌收缩力的强弱，进而评估心脏的机械泵血功能。
4. 冠脉灌注Langendorff检测中还需要关注心脏的冠脉灌注情况。
通过监测冠脉灌注压和冠脉血流，可以了解心脏供血情况。
冠脉是心脏的营养血管，其灌注情况直接影响心肌的供氧和营养情况。
通过评估冠脉灌注情况，可以间接反映心脏的代谢状态和对不同干预措施的敏感性。
Langendorff检测指标的全面分析可以帮助研究人员深入了解心脏的生理功能和对外界因素的反应，为心脏疾病的研究和药物治疗提供重要参考。
适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立
处 ， 结 扎 前 后 通 过 Ｍ Ａ多 导 生 理 记 录仪 连续 描 记 心 电 图 ； 后 再 次 开 胸 进 行 Ｌｎｅｄｒ 离 体 心 脏 灌 流 测 定 左 室 在 Ｐ ４周 ａｇｎｏ ｆ
心 功 能 和 心 肌组 织 病 理 学 检 查 ； 选 仅 开 关 胸 后 存 活 的 ｌ 另 Ｏ只 ｓ 大 鼠作 为 对 照 组 。 结 果 造 模 成 功 率 为 ６ ．ｏ Ｄ ２５ ％ （０１） 心 电 图动 态 监 测 在 冠 脉 结 扎 后 出 现 ｓ． 高 的融 合 波 ， ｉ 后 可 见 病 理 性 Ｑ波 ； １／６ ； ＴＴ抬 ３ ｒｎ Ｏａ ４周 后 Ｌｎｅｄｒ 离体 ａｇｎｏ ｆ 心 脏灌 流 装 置 系统 检 测 显 示 左 室 收 缩 压 峰 值 （ ｖ Ｐ 、 室 内 压 等 容 相 最 大 上 升 及 下 降 速 率 （＋ｄｌｔ ｘ Ｌｓ ）左 ｐｄ ｍａ ，一 ｄ， ｐ ＆ｍ ｘ 等 指 标 较 对 照 组 降 低 ， 室 舒 张 末 压 峰 值 （Ｖ Ｄ ） 反 之 ； 理 组 织 切 片 可 见 结 扎 区 域 心 肌 纤 维 排 列 紊 乱 、 ａ） 左 ＬＥＰ则 病 坏 死 心 肌 被 纤 维 组 织 取 代 。结 论 通 过 结 扎 左 冠 脉前 降 支 的 方 法 ， ４周 后 能 够 形 成 稳 定 的 适 用 于 Ｌｎｅｄｒ 离 体 ａｇｎｏ ｆ
ｓ ｐ ｌ ｆｍ ｏａｄｕ ．Ｅ ｅｔ ｃｒｉｇａ Ｅ ｕ ｐｙｏ ｙ ｒｉ ｃ ｍ ｌｃｒ ａｄｏｒｍ（ ＣＧ）ｗ ｒ ｅｆｒ ｄｂ ｔ ｅｏ ｅｌ ａｉｇａ ｄａｔｒｈ ｇｔｄｂ Ａ ｓｓ ｍ．Ｔ ｅ ｏ ｅ ｐ ｒ ｍｅ ｏｈｂｆｒ ｔ ｇｔ ｆ ｅｌ ａｅ ｙＭＰ ｙｔ ｅ ｏ ｅ ｈ ｉ ｎｎ ｅｔ ｉ ｅ ｈ
Ｗ ＡＮＧ ｉ・ ｉ Ｆ Ｊｎ ｙ ， ＡＮ ｉｍｉ Ｌ Ｕ ｏ ｇ ｍｉ Ｈｕ－ ｎ， Ｉ Ｚｈ ｎ － ｎ
运动预处理对心肌缺血再灌注损伤老龄大鼠心肌细胞自噬和凋亡的影响
运动预处理对心肌缺血再灌注损伤老龄大鼠心肌细胞自噬和凋亡的影响李宏玉;尹侠;王艳霞;李宇婷;朱路文;唐强【期刊名称】《康复学报》【年(卷),期】2022(32)2【摘要】目的:探讨运动预处理对心肌缺血再灌注损伤的老龄大鼠心肌细胞自噬蛋白及凋亡因子的影响。
方法:选择60只雄性SD老龄大鼠,采用随机数字表法分为对照组(Con组)、缺血/再灌注组(IR组)、运动预处理+缺血预适应组(EP+IPC组)、运动预处理+缺血预适应+生理盐水组(EP+IPC+saline组)、运动预处理+缺血预适应+自噬抑制剂组(EP+IPC+3-MA组),每组12只。
Con组与IR组不进行特殊运动干预,EP+IPC组、EP+IPC+saline组与EP+IPC+3-MA组接受运动预处理干预(采用电动动物实验跑台进行梯度运动训练,1次/d,5 d/周,共训练6周)。
此外,EP+IPC+saline组与EP+IPC+3-MA组再灌注时分别给予生理盐水和3-甲基腺嘌呤抑制剂(3-MA)。
采用Langendorff离体灌流系统建立大鼠离体心肌缺血/再灌注模型。
采用透射电镜观察心肌细胞自噬体;采用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡情况;采用Western blot法检测心肌缺血区Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax、Caspase-9、Bcl-2、Bcl-XL蛋白表达水平。
结果:(1)透射电镜观察结果:Con组观察到少量自噬溶酶体;IR组观察到较多自噬溶酶体及自噬小泡;EP+IPC组观察到少量自噬溶酶体,EP+IPC+saline组观察到少量自噬小泡;EP+IPC+3-MA组未观察到典型的自噬泡及自噬溶酶体。
(2)TUNEL阳性细胞比值结果:Con组见极少数TUNEL阳性细胞。
与Con组比较,IR组TUNEL阳性细胞比值明显升高(P<0.05);与IR组比较,EP+IPC、EP+IPC+saline组TUNEL阳性细胞比值明显降低(P<0.05);与EP+IPC、EP+IPC+saline组比较,EP+IPC+3-MA组TUNEL阳性细胞比值明显升高(P<0.05)。
左西孟旦对心力衰竭大鼠离体心脏的保护作用及机制研究
左西孟旦对心力衰竭大鼠离体心脏的保护作用及机制研究张小龙【摘要】目的：观察左西孟旦对心力衰竭大鼠离体心脏功能的影响,并探讨其作用机制。
方法采用腹主动脉缩窄法制作大鼠心衰模型,使用 Langendorff离体心脏灌流实验方法,观察左西孟旦对心力衰竭大鼠离体心脏功能的影响,运用不同阻断剂干预后,观察左西孟旦作用的变化。
结果左西孟旦可增强心力衰竭大鼠离体心脏功能,其心率减慢,LVSP LVDP升高,+dP/Dtmax升高,-dP/Dtmax降低,L NAME、Gli 预处理后,左西孟旦对心力衰竭心脏功能的作用减弱。
结论左西孟旦可以明显改善心力衰竭大鼠离体心脏功能,其作用可能与 NO的合成、KATP通道开放有关。
【期刊名称】《中西医结合心脑血管病杂志》【年(卷),期】2016(014)024【总页数】4页(P2896-2899)【关键词】左西孟旦;心力衰竭;离体心脏;心功能【作者】张小龙【作者单位】山西省心血管病医院太原 030024【正文语种】中文【中图分类】R541.4;R285.5慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)严重威胁着人类的健康，它的发病率呈逐年上升趋势，在中国，成年人心衰的患病率约为0.9%，随着老龄化社会的发展，人群中心衰患者人数不断增加。
它是缺血性心脏病、高血压病、心肌病、瓣膜性心脏病等各种病因所致心血管疾病发展的最终结局。
目前虽然在临床和基础研究方面对CHF的防治取得了一系列重大进展，但是CHF的患病率与死亡率不降反升，5年生存率仍然低于50%。
因此基于CHF的研究，特别是临床药物的研究仍然有重要的意义。
左西孟旦(levosimendan，Levo)是一种新型强心药物，它通过增加心肌肌钙蛋白对Ca2+的敏感性发挥增强心功能作用，临床中主要用于心脏功能衰竭的治疗和有高手术风险或左心室功能损伤病人的支持性治疗或心外科手术选择性治疗[1- 2]，但是无论基础还是临床研究，其对心脏作用靶点的研究较少。
大鼠心肌梗死模型的建立及梗死后心电生理和左室功能的变化
大鼠心肌梗死模型的建立及梗死后心电生理和左室功能的变化李金轶;钟国强;韦卓;许为炎;柯红红;宁宗;吴志福【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2009(17)6【摘要】目的建立具有稳定性高,重复性强,存活时间长的大鼠心肌梗死模型,探讨采用心电图(ECG)和心脏超声心动图(UCG)监测心梗后心电生理和左室功能变化的可行性.方法 Wistar大鼠经10%水合氯醛麻醉后,气管切开插管及连通呼吸机,开胸后结扎冠状动脉左前降支.于手术后4、8和12周行ECG检测和UCG检查,术后12周取出心脏行病理检查.结果采用本法建立大鼠心肌梗死模型,术后72h内大鼠存活率为83.3%,术后12周以上大鼠存活率为73.3%.术后4、8和12周ECG监测示心梗后PR间期,QRS时限,QT间期和QTc间期均较假手术组延长,同期行UCG监测示心梗后左室舒张末期内径和左室收缩末期内径显著增加,左室射血分数值和左室短轴缩短率值显著降低,12周后组织病理HE染色符合慢性心肌梗死的病理改变.结论本技术操作简单、创伤轻、成功率高,术后采用ECG和UCG可有效监测心梗后不同时期心电变化和左室功能变化.【总页数】7页(P419-423,插3-插4)【作者】李金轶;钟国强;韦卓;许为炎;柯红红;宁宗;吴志福【作者单位】广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院,广西心血管病研究所,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R542.22【相关文献】1.Tei指数评价大鼠心肌梗死模型左室整体功能变化 [J], 王曼;谢明星;黄恺;杨崇哲;黄丹2.应变及应变率成像评价心肌梗死后心力衰竭大鼠左室收缩功能 [J], 朱文晖;唐水娟;段星星3.急性心肌梗死急诊介入术后心肌Blush分级与左室功能恢复的研究 [J], 刘瑾春;郭晓燕;杨迅4.应变和应变率成像评价自体外周血干细胞移植术后心肌梗死患者左室收缩功能变化 [J], 张翔;张彤;李文;刘超;杨俊5.基于超声心动图技术评价食蟹猴急性心肌梗死模型左室结构和功能的变化 [J], 王成舟;杨倩;张才乔因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
哇巴因对大鼠心脏的毒性作用分析
哇巴因对大鼠心脏的毒性作用分析目的:1.观察美托洛尔对哇巴因致大鼠心律失常作用的影响,并探讨β受体阻断剂(β-blocker)应用于洋地黄类药物中毒的相关机制;2.应用langendorff 离体心脏灌流系统,对哇巴因抑制离体大鼠心脏功能的时反应量-效关系(Timed dose-response relationship,TDRR)进行了观察和分析。
方法:1.应用Langendorff灌流装置进行离体心脏灌流试验,正常SD大鼠随机分成5组:正常对照组,哇巴因模型组和4、20及100μmol/L美托洛尔干预组,每组8只动物;记录给入哇巴因后固定时间内各组自主发生的室性期前收缩PVB数目,室速及室颤的发生率,记录时间为60分钟。
2.在体麻醉实验使用股静脉注射给药,正常SD 大鼠随机分为5组:正常对照组,哇巴因模型组,和0.4mg/kg、2mg/kg、10mg/kg 美托洛尔干预组,每组8只动物;观察出现各种心律失常(VP、VT、BBB、VF)及心脏停搏(CA)出现的时间,并计算出现上述现象时哇巴因的累计用量。
3.利用Langendorff灌流装置进行离体心脏灌流试验,用台式灌流液将哇巴因配置为3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、100mol/L、300mol/L、1000mol/L 的6个浓度组,记录各浓度组左侧心室发展压(LVDP)和左侧心室舒张末压力(LVEDP)的变化曲线,记录时间为30分钟。
结果:1.离体心脏灌流实验中,统计60min内各组的室性期前收缩(PVB)数目,室速(VT)、室颤(VF)发生率,未发现美托洛尔干预组与哇巴因模型组在心律失常各指标之间存在显著差异(P>0.05);2.在体麻醉动物实验中,应用美托洛尔后可延长哇巴因致室性心律失常(二联律、短阵及持续性室性心动过速)出现的时间,但哇巴因致传导阻滞(束支阻滞及房室阻滞)的时间提前,室颤发生率显著减少,动物存活时间延长。
适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立
适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立2007年1月第17卷第1期中国比较医学杂志CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINEJanuary,2007V ol.17 N o.1研究报告适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立汪进益,范慧敏,刘中民(同济大学附属东方医院心胸外科,上海200120)【摘要】目的建立适用于Langendor ff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。
方法选用S prague-Dawley(S D)大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1Π3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendor ff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只S D大鼠作为对照组。
结果造模成功率为62150% (10Π16);心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30min后可见病理性Q波;4周后Langendor ff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值(LVSP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dpΠdtmax,-dpΠdtmax)等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值(LVE DP)则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。
结论通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendor ff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。
【关键词】Langendor ff灌流;离体心脏;心肌梗死;大鼠;模型,动物【中图分类号】Q95-33 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2007)0120022204Establishment of Langendorff Perfusion of the Isolated H eart afterAcute Myocardial I nfarction Model in R atsW ANGJin-yi,FAN Hui-min,LI U Zhong-min(Department of Cardiovascular and Thoracic Surgery of East H ospital A ffiliated T ongji University,Shanghai200120,China)【Abstract】Objective T o create a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the is olated heart after acute my ocardial in farction(AMI)by silk suture ligation for the research of stem cell.Method 16adult S prague-Dawley(S D)rats in m odel group were established by ligating the middle-distal1Π3segment of left anterior discending artery with8～0sutures to shut the blood supply of my ocardium.E lectrocardiogram(ECG)were per formed both before the ligating and after the ligated by MPA system.The cardiac function were observed by langendor ff per fusion of the is olated heart methods and histogram study with HE stain was carried out4weeks late to see whether there were any tisse necrosis and its extension.10adult S D rats without ligating coronary artery in control group.R esults The rate of establishing m odel success fully was62150%(10Π16).A fter ligation of left anterior discending artery,ECG displayed ST elevated continuously immediately and pathologic Q wave after ligating30min.Pathologic section suggested my ofibers chaotically arranged,necro-my ocardium were superseded by fibrous tissue.Meanwhile,The cardiac function indicated by these parametes of LVSP,LVE DP and±dpΠdtmax descend markedly after ligating4weeks late.Conclusion S ilk surure ligating is a goog method in creating a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the heart in4weeks after AMI,and the animal m odel w ould be conducive to the basic study on the treatment of stem cell for AMI.【K ey w ords】Langendor ff per fusion;Is olated heart;My ocardial in farction;Rats;M odels,animals[基金项目]国家自然科学基金资助项目(30471719)。
细胞移植研究用大鼠心肌梗死动物模型的建立
细胞移植研究用大鼠心肌梗死动物模型的建立汪进益;范慧敏;刘中民;符雪莲;王军臣;赵曙光;孔祥;卢伟【期刊名称】《实验动物与比较医学》【年(卷),期】2007(27)3【摘要】目的探索大鼠左冠状动脉前降支(LAD)结扎处理的适宜方法,建立适合细胞移植研究的稳定、可靠的急性心肌粳死(AMI)动物模型.方法 14只SD大鼠麻醉满意后,在动物呼吸机的支持下打开胸腔,于LAD中上1/3处结扎,并在结扎前后通过多外围设备转接器(MPA)生物信号分析系统连续监测心电图;4周后再次开胸取出心脏,利用Langendorff离体心脏灌流MPA系统检测左室收缩压(LVSP)左室舒张末压(LVEDP)左心室内压力上升及下降的最大变化速率(±dp/dtmax)等左室心功能指标;并测定心肌组织病理形态学、心肌梗死面积(MIS)等评价AMI模型的建立情况.另选仅开、关胸后存活的10只大鼠作为对照组.结果造模成功率为71.43%(10/14);心电图动态监测在LAD结扎后出现ST-T抬高的融合波,30min后可见Q波;4周后Langendorff离体心脏灌流MPA系统检测显示LVSP、±dp/dtmax等指标较对照组显著降低,LVEDP则明显升高(P＜0.01);病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、肌丝断裂溶解、细胞核固缩甚至碎裂、间质充血水肿、有炎性细胞浸润、坏死心肌被纤维组织取代:且MIS变化较恒定(44.38%±8.04%).结论通过结扎LAD,于4周后能够形成梗死部位和MIS稳定的AMI模型,适合于移植细胞再生修复梗死心肌的研究.【总页数】6页(P149-154)【作者】汪进益;范慧敏;刘中民;符雪莲;王军臣;赵曙光;孔祥;卢伟【作者单位】同济大学附属东方医院,心胸外科,上海200120;同济大学附属东方医院,心胸外科,上海200120;同济大学附属东方医院,心胸外科,上海200120;同济大学附属东方医院,病理科,上海200120;同济大学附属东方医院,病理科,上海200120;同济大学附属东方医院,心胸外科,上海200120;同济大学附属东方医院,心胸外科,上海200120;同济大学附属东方医院,心胸外科,上海200120【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.经大鼠脾动脉行肝细胞移植建立动物模型 [J], 冯渊;李德卫;杨均均2.大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估 [J], 雷娟;伍卫;薛声能;郑韶欣3.适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立 [J], 汪进益;范慧敏;刘中民4.建立SD大鼠胃左动脉肝细胞移植的动物模型 [J], 冯渊;彭勇;杨均均;段文涛5.建立适用于细胞移植研究的大鼠心肌梗死动物模型 [J], 汪进益;范慧敏;刘中民因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
16-哺乳类动物离体心脏灌流实验
实验三哺乳类动物离体心脏灌流实验一、实验目的和原理心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度（37℃）并充氧的修正洛氏液经主动脉根部灌流。
灌流液经冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，以维持心脏的节律性活动。
灌流液经冠状血管流入右心房，然后由腔静脉口及肺动脉口流出，在单位时间内的流出量即为冠状动脉血流量（冠脉流量）。
心脏活动可通过张力换能器进行记录，也可用压力换能器（心室内放置水囊）进行记录。
了解哺乳类动物心脏离体灌流方法（Langendorff氏法）和离体心脏冠脉血流量的测定灌流。
观察肾上腺素、乙酰胆碱对心脏活动及冠脉流量的影响。
二、实验动物大鼠三、实验器材与药品哺乳动物类手术器械一套，注射器，针头，线绳，鼠手术台，灌流液瓶，心脏Langendorff法灌流装置，恒温循环器，滑轮，烧杯，量筒，修正洛氏液，1:10000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱。
四、实验方法和步骤1．Langendorff灌流装置(图3-1)包括恒温、恒压灌流和供气三个部分。
图3-1 Langendorff法灌流实验装置图(1).修正洛氏液的配置：成分如下2000ml 原液 1000ml20%NaCl (ml) 45 9010%kCl (ml) 4.2 8.410%CaCl (ml) 2.4 4.85%NaHCO3 (ml) 3 6葡萄糖 (g) 2.5 5注意事项：先加蒸馏水(总体积90%左右)，再依次加入上述试剂，但加NaHCO3时应逐滴加入，并不断摇晃混匀，防止形成CaCO3沉淀，最后再加入蒸馏水，补足液体量。
(2).将灌流系统用胶管连接，灌流液瓶灌满灌流液。
调整灌流液瓶的高度使灌流压力达到实验要求，一般要求灌流液瓶中心管的下端距心脏的高度为70～90cm，可按心脏的大小而适当调整。
(3).混合气瓶（或球胆）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充气管，调节气瓶上的减压阀，使灌流液中的气泡连续且小而均匀。
(4).调节恒温循环器使心脏插管内的灌流液温度恒定在37℃左右。
大鼠心肌梗死后心力衰竭模型的建立和评估
大鼠心肌梗死后心力衰竭模型的建立和评估田颖;王江;李振魁;祝善俊;聂凌;宋熔【期刊名称】《心脏杂志》【年(卷),期】2006(18)4【摘要】目的建立大鼠心肌梗死后心力衰竭(心衰)模型,并进行评估,以提高存活率和成功率。
方法分批对160只大鼠行冠状动脉左前降支结扎手术,同时设48只假手术组,计算死亡率。
在4周时行血流动力学检查,检测心率(HR)、左心室舒张末压(LVEDP)、计算左室压力最大上升速率(+dp/dtm ax)和左室压力最大下降速率(-dp/dtm ax)。
结果4周时模型组心率、+dp/dtm ax和-dp/dtm ax绝对值均低于假手术组(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01),LVEDP则高于假术组(P<0.01)。
随着手术大鼠例数的增多,存活率得到提高(P<0.05)。
结论心梗后4周形成心衰模型,通过采取必要的措施,可以提高动物生存率。
【总页数】3页(P404-405)【关键词】动物模型;大鼠;心肌梗塞;心力衰竭;血流动力学;存活率【作者】田颖;王江;李振魁;祝善俊;聂凌;宋熔【作者单位】第三军医大学新桥医院心内科;兰州军区总院心内科【正文语种】中文【中图分类】R541.4【相关文献】1.大鼠心肌梗死后心力衰竭模型的建立及评价 [J], 李军;吕双红;薛剑;郭艳丽;于农;刘安恒;张孝忠2.卒中后抑郁大鼠模型的建立及评估 [J], 孙奕;张志珺;王少华;郭怡菁;隋毓秀3.大鼠脊髓全横断损伤后神经源性膀胱模型的建立及评估 [J], 元小红;贺丰;江泽辉;赵赫;叶超;伍绍明;于海川;李春根4.大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估 [J], 雷娟;伍卫;薛声能;郑韶欣5.大鼠局灶性脑缺血后适应动物模型的建立与评估 [J], 傅宏庆;卢炜;刘静;贾红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
介绍Langendorff离体心脏灌注装置在实验教学中的应用
介绍Langendorff离体心脏灌注装置在实验教学中的应用摘要】 Langendorff离体心脏灌流装置是一套恒温恒压、受外界干扰因素较少的科研、教学实验装置，此实验装置能够排除在体实验中机体的神经和体液因素对心脏的影响，可控制性强，可以复制出不同的实验模型，也可运用于生理荮理病理生化等科研和实验教学中,对培养学生综合运用各科所学的知识和学生创新动手能力有着重要的意义，应将此应用于实验教学中。
【关键词】Langendorff 离体实验教学应用Langendorff离体心脏灌注装置是一套为小动物（如家兔、大鼠和豚鼠）心脏灌流而设计的一套实验装置，此装置对于心脏的内、外科研究具有非常重要的意义，同时在生理、电生理、病理生理、药理以及生物化学研究中已得到广泛地应用，对学生知识的综合运用、激发和培养学生的创新和创造能力也有着重要的意义，应该应用于学生的实验教学中，本文主要介绍langendorff离体心脏灌注装置在实验教学中的应用及其意义。
1 Langendorff离体心脏灌注装置应用于实验教学的背景1.1 Langendorff离体心脏灌注装置的简介Langendorff离体心脏灌注装置是一套为小动物（如家兔、大鼠和豚鼠）心脏灌流而设计的一套实验装置，在离体心脏灌流系统中，心脏被保存在具有温度控制系统的浴槽中，通过不同的控制环境（如一定的灌注压力、温度、酸碱度等）及各种因素（如营养物质、缺血、缺氧及药物等）观察对心脏活动的影响，还可以观察对冠脉流量的影响等，研究心脏功能的生理、电生理、病理生理、生物化学和药理学实验，对心脏的内外科研究有着重要的意义。
1.2 Langendorff离体心脏灌注装置的现状及优势Langendorff离体心脏灌注装置在南方著名的大学（如四川大学等）已经运用于科研及学生的实验教学中，对离体心脏的生理、病理、药理及生物化学等方面的研究认识有了长足的进展，对学校的科研进展、新药研发及经济效益等方面发挥了巨大的作用，对学生的科研能力、动手能力以及创造能力有着不可铭述的功勋。
新型心肌梗死大鼠模型制备方法的建立和模型鉴定
新型心肌梗死大鼠模型制备方法的建立和模型鉴定裴之俊;李伏燕;陈义加;王俊杰;李薇;吴瑞敏;杨怡【摘要】目的：建立可用于制备心肌梗死大鼠模型的新方法。
方法异氟醚气体麻醉Sprague‐Dawley 大鼠后，钝性分离肋间肌，结扎左冠状动脉前降支，制备心肌梗死大鼠模型。
以仅穿刺不结扎左冠状动脉前降支的方法制备假手术大鼠模型。
术后采用小动物心电图仪、血流动力学分析仪、2，3，5‐氯化三苯基四氮唑（TTC）染色及苏木素‐伊红（HE）染色鉴定心肌梗死大鼠模型。
结果心肌梗死大鼠模型及假手术大鼠模型存活率均为80．0％。
心肌梗死模型组大鼠术后第2、7天心电图检查可见 ST 段明显抬高。
血流动力学检测结果显示，心肌梗死模型组大鼠颈总动脉收缩压和舒张压，左心室收缩压，以及左心室压力上升和下降最大速率均较假手术模型组均明显降低，心率和左心室舒张末压则明显增加（P＜0．05）。
TTC 染色显示梗死心肌与正常心肌色差明显，坏死心肌呈白色。
HE染色显示梗死心肌细胞肿胀、排列紊乱，出现空泡，甚至断裂，部分断裂心肌细胞间隙见炎症细胞浸润。
结论建立的方法效果理想且操作简单，适用于心肌梗死大鼠模型的制备。
%Objective To establish a new ,fast and efficient preparation methodof myocardial infarction model . Methods Sprag ue‐Dawley rats were anesthetized by using isoflurane gas ,then myocardial infarction models were prepared by ligation of ramus descendens anterior arteriae coronaria sinistrae ,after bluntly separation of intercostal muscle .Sham operation rat models were prepared by punctuation ,not ligation ,of ramus descendens anterior arteriae coronaria sinistrae .Small animalelectrocardiograph ,hemodynamic analyzer ,2 ,3 ,5‐triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining and hematoxylin‐eosin (HE) staining were used toidentify myocardial infarction models .Results Survival rates of myocardial infarction models and sham operation models were both80 .0% .Electrocardiograph anal‐ysis indicated that ST segment was raised apparently in myocardial infarction models on 2 and 7 days after operation . Hemodynamic detection indicated that diastolic blood pressure ,systolic blood pressure ,left ventricular systolic pres‐sure and max ascending and descending rate of left ventricular pressure in myocardial infarction models were lower than sham operation models ,but heart rate and heart ventricle end diastolic pressure were higher (P <0 .05) .TTC staining showed that the color of infracted myocardium was white ,which was obviously different with normal myo‐cardium ,HE staining showed that infracted cardiac muscle cells wereswelling ,disorderly arranged ,with cavity or e‐ven break ,and inflammatory cell infiltration could be found within intercellular spaces of fractured cardiac muscle cells .Conclusion Preparation method ,constructed in this research ,could be efficient and easily performed to estab‐lish myocardial infarction models .【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】3页(P937-939)【关键词】心肌梗死;动物模型;大鼠;冠状动脉【作者】裴之俊;李伏燕;陈义加;王俊杰;李薇;吴瑞敏;杨怡【作者单位】湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰 442000;湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰 442000;湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰 442000;湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰442000;湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰 442000;湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰 442000;湖北医药学院附属太和医院 PET 中心，湖北十堰 442000【正文语种】中文随着人们生活习惯的改变及胆固醇摄入量的增加，缺血性心血管疾病发病率逐年增加。
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2007年1月第17卷 第1期中国比较医学杂志CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINEJanuary,2007V ol.17 N o.1研究报告适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立汪进益,范慧敏,刘中民(同济大学附属东方医院心胸外科,上海 200120) 【摘要】 目的 建立适用于Langendor ff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。
方法 选用S prague-Dawley(S D)大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1Π3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendor ff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只S D大鼠作为对照组。
结果 造模成功率为62150% (10Π16);心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30min后可见病理性Q波;4周后Langendor ff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值(LVSP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dpΠdtmax,-dpΠdtmax)等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值(LVE DP)则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。
结论 通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendor ff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。
【关键词】 Langendor ff灌流;离体心脏;心肌梗死;大鼠;模型,动物【中图分类号】Q95-33 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2007)0120022204Establishment of Langendorff Perfusion of the Isolated H eart afterAcute Myocardial I nfarction Model in R atsW ANGJin-yi,FAN Hui-min,LI U Zhong-min(Department of Cardiovascular and Thoracic Surgery of East H ospital A ffiliated T ongji University,Shanghai200120,China)【Abstract】 Objective T o create a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the is olated heart after acute my ocardial in farction(AMI)by silk suture ligation for the research of stem cell.Method 16adult S prague-Dawley(S D)rats in m odel group were established by ligating the middle-distal1Π3segment of left anterior discending artery with8～0sutures to shut the blood supply of my ocardium.E lectrocardiogram(ECG)were per formed both before the ligating and after the ligated by MPA system.The cardiac function were observed by langendor ff per fusion of the is olated heart methods and histogram study with HE stain was carried out4weeks late to see whether there were any tisse necrosis and its extension.10adult S D rats without ligating coronary artery in control group.R esults The rate of establishing m odel success fully was62150%(10Π16).A fter ligation of left anterior discending artery,ECG displayed ST elevated continuously immediately and pathologic Q wave after ligating30min.Pathologic section suggested my ofibers chaotically arranged,necro-my ocardium were superseded by fibrous tissue.Meanwhile,The cardiac function indicated by these parametes of LVSP,LVE DP and±dpΠdtmax descend markedly after ligating4weeks late.Conclusion S ilk surure ligating is a g oog method in creating a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the heart in4weeks after AMI,and the animal m odel w ould be conducive to the basic study on the treatment of stem cell for AMI.【K ey w ords】 Langendor ff per fusion;Is olated heart;My ocardial in farction;Rats;M odels,animals[基金项目]国家自然科学基金资助项目(30471719)。
[作者简介]汪进益(1974-),男,博士,研究方向:离子通道与外科疾病、顽固性心衰的外科治疗及分子心脏病学。
[通讯作者]刘中民。
E-mail:zhongm in-liu@ 心肌梗死模型的建立为缺血性心肌病的研究提供了可能,在选择好实验动物和实验方法及保证实验正常进行的同时,选择合适的检测方法对心肌梗死模型制备的结果至关重要,要了解干细胞心肌移植对心肌梗死灶内的心肌或血管再生情况,组织病理学检查可达要求,但如果要了解对心功能的影响,那就需要进一步检测[1]。
本研究通过结扎左冠脉前降支的方法,建立稳定的大鼠急性心肌梗死动物模型,并于结扎前后利用MPA多导生理记录仪描记心电图,4周后进行离体Langendorff心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查,评价模型的构建情况,为研究干细胞移植对心肌梗死后的心功能变化提供基础。
1 材料与方法111 实验动物成年S prague-Dawley(S D)大鼠,雌雄不限,体重为(350±50)g[合格证号:SCXK(沪)200320002],购自上海西普尔2必凯实验动物有限公司,动物饲养环境为清洁级[饲养设备:SY XK(沪):200420005],上海中医药大学动物实验中心。
本研究遵循国家实验动物管理条例及国家实验动物管理实施细则。
112 模型制作模型组选用S D大鼠16只,用氯胺酮腹腔注射麻醉后,先行气管切开插管并接通微型动物呼吸机(第二军医大学生理学研究所生产,江湾Ⅰ型),待呼吸机参数调整好后(呼吸频率每分钟110～120次,吸与呼之比为1∶115),在胸骨左侧4、5肋间开胸,显露左冠动脉前降支,于其中远段1Π3交点处(从前降支的起始到心尖部拉一细线,三折后确定中远1Π3交点),以8～0proline线直接结扎,进针深度012～014mm。
逐层关胸,清醒后拔除气管插管,送回动物房精心饲养4周。
另选仅开关胸后存活的10只S D大鼠作为对照组。
113 评价方法11311 心电图和离体心脏指标的检测:将3根电极分别置于两上肢和右下肢,接MPA多导生理记录仪(上海奥尔科特生物科技有限公司)系统,在冠脉结扎前至冠脉结扎后连续描记心电图。
于4周后开胸经下腔静脉注入肝素(015mgΠkg),剪断上下腔静脉、肺动脉、主动脉(保留1cm左右)及心脏周围组织,迅速取出心脏置于4℃的K rebs-Henseleit(K-H)灌流液(NaCl11810mm olΠL、K Cl417mm olΠL、K H2PO4 112mm olΠL、MgS O4・7H2O112mm olΠL、CaCl2219mm olΠL、NaHC O3215mm olΠL、G licose1111mm olΠL、E DT A015mm olΠL,pH7138～7146)中,轻轻挤压心脏,排空心脏内残留的血液,立即将主动脉固定于Langendorff灌流装置(上海奥尔科特生物科技有限公司)插管固定器上的一个插管上,经三通开关接K-H灌流液,灌流液以95%O2和5%C O2充分饱和、灌流压约719K pa左右、灌流液温度为35℃～37℃左右。
从左室插入尖端带有水囊的导管,然后通过压力传感器,接MPA系统记录左心室最大收缩压峰值(LVPSP)和左室舒张末压峰值(LVE DP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dpΠdtmax,-dpΠdtmax)。
11312 病理组织切片:完成离体心脏指标的检测后,迅速取下心脏,进行心肌组织的病理学检查,观察梗死区域的病理变化(由专业人员完成)。
114 统计分析数据采用均数±标准差表示,利用S AS810软件进行统计学处理。
对照组和实验组采用组间t检验,差异显著性水平设为a=0105或者0101。
2 结果211 急性心肌梗死模型的建立情况本此实验的麻醉效果好,术中呼吸道分泌物少且无麻醉意外发生。
呼吸参数设定合适、呼吸机性能稳定。
本实验造模成功率为62150%(10Π16),由于不明原因的窦性停搏及室性心动过速致使心脏停跳而死亡2只,术中引起肺部损伤、气管切开出现的凝血块及分泌物引起呼吸道梗阻等导致呼吸衰竭而死亡的例数为3只,而术后肺部感染导致的死亡例数为1只。
因实验动物模型手术操作是在心脏不停跳的情况下进行冠脉结扎,易造成心脏损伤,对动物的创伤较大,严格的无菌操作和熟练的手术技能可减少动物的死亡率。