比色皿与分光光度计注意事项

玻璃比色皿和石英比色皿辨别、使用和清洗方法

光度分析法是最常用的定量分析方法之一，其主要特点是：(1)应用范围广泛。很多物质在紫外-可见光区有吸收，因此可借助于比色法进行测定。(2)适用的浓度范围广泛，从常量分析到痕量分析(经预富集后)均可实现。(3)灵敏度高，选择性好，精确度高，分析成本低，操作简便、快速。因此广泛应用于地质、冶金、化工、医学、食品、制药及环境监测等行业。

在光度法中，比色皿的选择、使用和维护对分析结果有着重要的影响。

比色皿选择与鉴别

比色皿的制造工艺有两种，一种是粘合剂粘合而成，另一种是高温熔融而成。比色皿的材料通常来源于石英、熔凝硅石和光学玻璃。玻璃比色皿对紫外线几乎全部吸收，吸光度非常大。而石英比色皿的吸光度则小得多。常用比色皿的形状有方形、矩形和圆筒形，容量一般为几毫升。也有用于少量试样的微型或超微型毛细管皿。另外还有高、低温、恒温比色皿。

比色皿有不同的光程长度，一般常用的有0．5、l、2、3、5cm ，选择哪种光程长度的比色皿，应视分析样品的吸光度而定。当比色液的颜色较淡时，应选用光程长度较大的如2cm、3cm比色皿；当比色液的颜色较深时，应选用光程长度较小的如0.5cm 、lcm比色皿，以使所测溶液的吸光度在0.1-0.7之间。

比色皿有方向性。有些比色皿上标有方向标记，使用时必须注意。无方向标记的比色皿应予以校正，校正时要先确定方向并作好标记，以减少测定误差。比色皿的校正方法是：将纯净的蒸馏水注入比色皿中，把其中吸收最小的比色皿的吸光度置为零，并以此为基准，测出其它比色皿的相对吸光度。测定比色液时，应将其吸光度减去比色皿的吸光度。同一组比色皿相互间的差异应小于测定误差在测定同一溶液时，吸光度差值应小于0.5％，否则应对差值进行校正。

比色皿的光程长度也需校正，校正时可将吸光度约为0.4的溶液分别注入校正皿和具有准确光程长度的标准比色皿中，测定吸光度。以标准比色皿的吸光度为1.00，求出校正比色皿吸光度的相对值作为该比色皿的校正系数。测定比色液时，可将所测得的吸光度乘以该皿的校正系数以得到实际吸光度值。

比色皿选择或使用不当,造成无法测量或引起测量误差的现象在实验中经常出现，这一问题又很容易被实验人员忽视。

紫外区的定义为190-400nm，石英比色皿可用于190-900nm，玻璃比色皿用于360-900nm，紫外区的一定要用石英比色皿，必须配置紫外/可见分光光度计，否则低波长段不能分析。

对于一般的非光学专业人员，用眼睛是不能分开石英比色皿和玻璃比色皿的。但两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大（绝对值）几十倍，如果把两个对磨，石英比色皿将很少被磨损，而玻璃比色皿磨损非常大。

由于石英比色皿的透光范围从0.12-4.5微米(120nm-450nm)，广泛的谱段范围内没有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4—4微米（400-4000nm），且有许多离子吸收峰。所以，石英比色皿要比玻璃比色皿优越的多，化验数据更准确、更可靠。

用手摸或者肉眼就能观察出来，只有光学技术人员凭经验“靠肉眼比较折光率差别”可以准确判定，他们肉眼观察微弱的离子吸收现象，靠经验评价也能区分。但是，对没有经验的人员来说，极易发生判定错误

方法1 石英比色皿上有一个Q字样(quartz石英)，而玻璃的上面有一个G字样(glass玻璃)，从字面上可以直接区分两种比色皿，如果字样已经没有啦，只能上机在紫外区实测啦，在紫外区透过率大是石英的，几乎没有透过率的是玻璃的。市面上卖的比色皿造型不是完全一样的，有的没有石英标识。可在紫外波长下检测空比色皿的吸光度，玻璃的吸光度要比石英的大。

方法2 将光度计的波长设定为250nm，样品室内不放任何物品，调零，然后将比色皿置于样品道一侧，吸光值小于0.07Abs的是石英材料，反之是玻璃材料。注：如果吸光值稍稍大于0.07Abs 的话，有可能也是石英材料的，只不过是杯子内壁没有洗净之故。

比色皿使用注意事项

比色皿一般为长方体，其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。在使用比色皿时，两个透光

面要完全平行，并垂直置于比色皿架中，以保证在测量时入射光垂直于透光面，避免光的反射损失，保证光程固定。使用时应注意以下几点:：

1、拿取比色皿时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面。同时注

意轻拿轻放，防止外力对比色皿的影响，产生应力后破损。

2、使用比色皿时应于测试前将待测液倒人比色皿洗涤三次(注意不要产生

气泡)

3、凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色皿中。

4、不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;。

5、当发现比色皿里面被污染后，应用无水乙醇清洗，及时擦拭干净。

6、不得将比色皿的透光面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比色皿的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附，然后再用镜头纸或丝绸擦拭。

7、比色皿中的液体，应沿毛面倾斜，慢慢倒掉，不要将比色皿翻转，直接口向下放在干净的滤纸上吸干剩余液，然后用蒸馏水冲洗比色皿内部倒掉（操作同上）避免液体外流，使第2次测量时不用擦拭比色皿，不致因擦拭带来的误差。

8、若有液体外溢，还有用好点的纸巾擦拭，最好是沿一个方向，不要来回得擦拭。

9、在使用时，每次装入参比液或样品液测量后，会将参比液或样品液倒入废液瓶。倒出时人们的习惯做法是：很随意地倒出参比液或样品液，这样参比液或样品液会流到比色皿的光面上，再次装入参比液或样品液后，我们会用滤纸或脱脂棉擦拭比色皿的光面，这样时间久了就会在比色皿的光面上留下划痕，划痕会影响测定值，就必须更换新的比色皿。好的方法是：两手捏住比色皿后，将参比液或样品液沿着比色皿的一个角倒入废液瓶，这时不要着急将比色皿离开废液瓶，而是顺势将比色皿的倒出角贴到废液瓶上，让比色皿里面的液体全部沿着这个角流出，这样，比色皿的光面上几乎不会粘有液体，也就不用再去用滤纸或脱脂棉擦拭，减少擦拭次数，这样就会延长比色皿的使用时间。

比色皿成组性测试

在测量时如对比色皿有怀疑,可自行检测，方法如下：