酶法富集脱脂米糠蛋白质的研究
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利 于灭 酶 ， 同时使蛋 白质 沉 淀 ） 沸 水 浴 ５ｒｉ ， 酶 ， ｎ灭 ａ 活 。冷却 至 室温 后 ， 心 （ ０ ／ ｎ ３ ｉ） 沉 离 １５ ０ ｒｍｉ ， ０ｒ ｎ 。 ａ
粉酶 等 。Ｓ ｉ ｈｈＦ Ｆ等人 用纤 维素 酶提 取脱脂 米糠 中
的蛋 白质 ［ ； ｒ ａ ｄ ｚＮ 等 人用 淀 粉 酶 处 理 了脱 】 Ｈｅｎ ｎ ｅ
科 生物 工程 有 限公 司 ； 高温 ａ淀 粉酶 （ ００ ０Ｕ／ ） 一 ２ ０ ｇ ，
购于无 锡杰 能科 生物工 程有 限公 司 。
１ ２ 实 验 方 法 ．
１ ２ １ 原 料 处 理 ．．
脱 脂米糠 超微 粉碎 ， １ ０目筛 。 过 ０
１ ２ ２ 检 测 方 法 ．．
搏和 饲 料工
２ ０Ｎ ４ ０１ ， ｏ．
ＣＥＲＥＡＬ ＆ Ｆ ＥＥＤ ｉ ＵＳＴ Ｙ ＮＤ Ｒ
一
酶 法 富 集 脱 脂 米 糠 蛋 白质 的研 究
沈 波 ， 慧娟 ， 张 张 晖 ， 晓娜 ， 郭 王 立
（ 南大学食品学院 ， 苏 无锡 江 江 ２４ ２ ） １ １ ２
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
摘 要 ： 究 了纤 维 素 酶 和 高 温 ａ淀 粉 酶 富 集 脱 脂 米 糠 中 的 蛋 白质 。 同 时 还 研 究 了超 微 粉 碎 辅 助 法及 提 取 植 酸 研 一
基 金 项 目 ： 品科 学 与 技 术 国家 重 点 实 验 室专 项 资 金 项 目 食 作者简介： 沈 波 （９ ８ ， ， 要 从 事 谷 物 功 能 因子 的研 究 。 １８ 一）男 主 通讯作者 ： 王 立 （９ ８ ， ， 教 授 ， 要从 事 谷物 功 能 因 子 及 功 能 性 色 素 的研 究 。 １ ７ 一）男 副 主
收 稿 日期 ：０ ９１ —５ 修 回 日期 ：０ ００ —５ ２ ０—０２ ； ２ １ １１
淀物 在 ６ ℃烘干后 ， 定蛋 白质含 量 。该 实验 做 了 ５ 测
平行 实验 。
１ ０ｇ脱 脂 米 糠 加 入 １ ０ ｍｌ 离 子 水 ， 拌 均 ０ 去 搅
匀 。用磷 酸氢 二 钠 和 柠檬 酸 缓 冲 溶 液 将 混 合 物 的
降低 ， 同时 也改变 了蛋 白质 的氨基 酸组 成和 等 电点 ， 这就使 米糠 蛋 白的提取 更加 困难 。米糠 蛋 白提取最
常见 的方法是 碱法 ， 碱法 简单 易行 ， 但是 高浓度 的碱 会使蛋 白质 的分子 发生交 联 和重组 ， ： 白质 的半 即 蛋
蛋 白质 测 定采 用 微 量凯 氏定氮 法 ； 肪测 定 采 脂 用索 氏抽 提法 ； 灰分测 定 采用 ５ ０Ｃ恒 重法 ； 分测 ５￣ 水 定采用 １ ５ ０ ℃恒重法 。 １ ２． 米糠 蛋 白质 的提 取 ． ３ １ ０ｇ脱 脂 米 糠 加 入 １ ０ ｍｌ 离 子 水 ， 拌 均 ０ 去 搅
这 就使米 糠 为食 品加 工 提供 价 格 低 廉 ， 质 量 的蛋 高 白质成 为可 能 。米 糠蛋 白含 有 ３ ～４ 的赖 氨酸 ，
脱 脂米 糠 ： 江苏徐 州产 ， 为米糠 经 浸 出法 制油后
得到 的副产 品 （干基 蛋 白质含量 １ ． ５ ） 化 学试 ４ １ ； 剂： 析纯； 分 纤维 素 酶 （ ００ ０Ｕ／ ） 购 于无 锡杰 能 １ ０ ｇ ，
米糠是 糙米 碾 白后 主要 的 副 产 品 ， 国 的年 产 我 量约 １０ ０万 ｔ ０ 。在 我 国 ， 糠 主 要 作 为饲 料 ， 分 米 部
用于制 油 ， 没有 被 充 分 利用 。米糠 中除 了油 脂 和 并
价值。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
淀粉外 ， 还含 有 １ ～ ２ 的蛋 白质 及 其 他 物 质 。 ４ ０
克 服 了谷 物蛋 白中赖 氨 酸是 限制 性 氨 基 酸 的缺 点 ， 同时米糠 蛋 白还 具 有 低过 敏 性 ， 米 糠 蛋 白 可 以成 使 为 婴幼儿 食 品的营养 添加 剂［ 。 １ ］
为 了充 分 的利 用 脱脂 米糠 ， 中 的蛋 白质 需 要 其 分 离或 富集 。由于 大 量二 硫 键 的存 在 和 聚 集 作 用 ， 大部分 米糠 蛋 白在普通 的水 相溶 剂里 不溶［ 。热 稳 ２ ］ 定后 的脱脂 米糠 ， 仅使 蛋 白质 的水溶 解 性 进 一 步 不
匀 。用 磷酸 氢 二 钠 和 柠檬 酸 缓 冲 溶 液 将 混 合 物 的
ｐ 值 调 为 ５ ０ 加入 ０ ４ｇ ４ ） 维素 酶 ，０ Ｈ ．， ． （ 纤 ５ ℃水
浴 加热 ２ｈ 同时 不断 搅拌 ， 拌 速 度 为 ３ ０ｒｒｉ。 ， 搅 ３ ／ ｎ ａ 反 应结 束后 ， ０ １ｍｏ／ １ ｐ 值 至 ４ ０ 有 用 ． ｌＬ ＨＣ 调 Ｈ ．（
对 富集 脱 脂 米 糠 蛋 白质 的 影响 。结 果 表 明 ： 理 后 的 脱 脂 米 糠 中的 蛋 白质 质 量 分数 接 近 ３ 。 处 Ｏ
关 键 词 ： 脂 米 糠 ； 法 ； 白质 脱 酶 蛋 中 图分 类 号 ： ２ ０ ＴＳ １ 文 献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ３ ２ ２ ２ １ ） ４ ０ ３ ０ １ ０ —６ ０ （ ０ ０ ０ —０ ３ — ３
脂米糠 ； ｓ ａｕｌｈ等人用 复合 糖酶 处理 了脱脂 Ａｎ ｈ ｒｌ ａ 米糠【 。鉴于脱 脂 米糠 中蛋 白质 的 水溶 性 不 好 ， ３ ］ 本 研究采 用纤 维 素酶 和 高 温 ａ淀 粉 酶 共 同处 理 了脱 一 脂 米 糠 ， 到 了 富 含 蛋 白 质 的 产 品 ， 高 其 使 用 得 提
胱 氨酸 和丝氨 酸形 成 了乙酰 脱 氢 丙 氨 酸 ， 与赖 氨 酸
的氨基形 成 了有毒 物质赖 丙氨 酸 。同时还 易发 生美 拉 德反应 ， 响蛋 白质 的色泽 ＿ 。因 此用 酶 辅 助 法 影 ３ ］ 来 富集或 分离米 糠蛋 白越来 越得 到重 视 。酶辅 助法 使用 的酶 主要有 纤维 素酶 、 半纤 维素 酶 、 果胶 酶 和淀
粉酶 等 。Ｓ ｉ ｈｈＦ Ｆ等人 用纤 维素 酶提 取脱脂 米糠 中
的蛋 白质 ［ ； ｒ ａ ｄ ｚＮ 等 人用 淀 粉 酶 处 理 了脱 】 Ｈｅｎ ｎ ｅ
科 生物 工程 有 限公 司 ； 高温 ａ淀 粉酶 （ ００ ０Ｕ／ ） 一 ２ ０ ｇ ，
购于无 锡杰 能科 生物工 程有 限公 司 。
１ ２ 实 验 方 法 ．
１ ２ １ 原 料 处 理 ．．
脱 脂米糠 超微 粉碎 ， １ ０目筛 。 过 ０
１ ２ ２ 检 测 方 法 ．．
搏和 饲 料工
２ ０Ｎ ４ ０１ ， ｏ．
ＣＥＲＥＡＬ ＆ Ｆ ＥＥＤ ｉ ＵＳＴ Ｙ ＮＤ Ｒ
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酶 法 富 集 脱 脂 米 糠 蛋 白质 的研 究
沈 波 ， 慧娟 ， 张 张 晖 ， 晓娜 ， 郭 王 立
（ 南大学食品学院 ， 苏 无锡 江 江 ２４ ２ ） １ １ ２
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
摘 要 ： 究 了纤 维 素 酶 和 高 温 ａ淀 粉 酶 富 集 脱 脂 米 糠 中 的 蛋 白质 。 同 时 还 研 究 了超 微 粉 碎 辅 助 法及 提 取 植 酸 研 一
基 金 项 目 ： 品科 学 与 技 术 国家 重 点 实 验 室专 项 资 金 项 目 食 作者简介： 沈 波 （９ ８ ， ， 要 从 事 谷 物 功 能 因子 的研 究 。 １８ 一）男 主 通讯作者 ： 王 立 （９ ８ ， ， 教 授 ， 要从 事 谷物 功 能 因 子 及 功 能 性 色 素 的研 究 。 １ ７ 一）男 副 主
收 稿 日期 ：０ ９１ —５ 修 回 日期 ：０ ００ —５ ２ ０—０２ ； ２ １ １１
淀物 在 ６ ℃烘干后 ， 定蛋 白质含 量 。该 实验 做 了 ５ 测
平行 实验 。
１ ０ｇ脱 脂 米 糠 加 入 １ ０ ｍｌ 离 子 水 ， 拌 均 ０ 去 搅
匀 。用磷 酸氢 二 钠 和 柠檬 酸 缓 冲 溶 液 将 混 合 物 的
降低 ， 同时 也改变 了蛋 白质 的氨基 酸组 成和 等 电点 ， 这就使 米糠 蛋 白的提取 更加 困难 。米糠 蛋 白提取最
常见 的方法是 碱法 ， 碱法 简单 易行 ， 但是 高浓度 的碱 会使蛋 白质 的分子 发生交 联 和重组 ， ： 白质 的半 即 蛋
蛋 白质 测 定采 用 微 量凯 氏定氮 法 ； 肪测 定 采 脂 用索 氏抽 提法 ； 灰分测 定 采用 ５ ０Ｃ恒 重法 ； 分测 ５￣ 水 定采用 １ ５ ０ ℃恒重法 。 １ ２． 米糠 蛋 白质 的提 取 ． ３ １ ０ｇ脱 脂 米 糠 加 入 １ ０ ｍｌ 离 子 水 ， 拌 均 ０ 去 搅
这 就使米 糠 为食 品加 工 提供 价 格 低 廉 ， 质 量 的蛋 高 白质成 为可 能 。米 糠蛋 白含 有 ３ ～４ 的赖 氨酸 ，
脱 脂米 糠 ： 江苏徐 州产 ， 为米糠 经 浸 出法 制油后
得到 的副产 品 （干基 蛋 白质含量 １ ． ５ ） 化 学试 ４ １ ； 剂： 析纯； 分 纤维 素 酶 （ ００ ０Ｕ／ ） 购 于无 锡杰 能 １ ０ ｇ ，
米糠是 糙米 碾 白后 主要 的 副 产 品 ， 国 的年 产 我 量约 １０ ０万 ｔ ０ 。在 我 国 ， 糠 主 要 作 为饲 料 ， 分 米 部
用于制 油 ， 没有 被 充 分 利用 。米糠 中除 了油 脂 和 并
价值。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
淀粉外 ， 还含 有 １ ～ ２ 的蛋 白质 及 其 他 物 质 。 ４ ０
克 服 了谷 物蛋 白中赖 氨 酸是 限制 性 氨 基 酸 的缺 点 ， 同时米糠 蛋 白还 具 有 低过 敏 性 ， 米 糠 蛋 白 可 以成 使 为 婴幼儿 食 品的营养 添加 剂［ 。 １ ］
为 了充 分 的利 用 脱脂 米糠 ， 中 的蛋 白质 需 要 其 分 离或 富集 。由于 大 量二 硫 键 的存 在 和 聚 集 作 用 ， 大部分 米糠 蛋 白在普通 的水 相溶 剂里 不溶［ 。热 稳 ２ ］ 定后 的脱脂 米糠 ， 仅使 蛋 白质 的水溶 解 性 进 一 步 不
匀 。用 磷酸 氢 二 钠 和 柠檬 酸 缓 冲 溶 液 将 混 合 物 的
ｐ 值 调 为 ５ ０ 加入 ０ ４ｇ ４ ） 维素 酶 ，０ Ｈ ．， ． （ 纤 ５ ℃水
浴 加热 ２ｈ 同时 不断 搅拌 ， 拌 速 度 为 ３ ０ｒｒｉ。 ， 搅 ３ ／ ｎ ａ 反 应结 束后 ， ０ １ｍｏ／ １ ｐ 值 至 ４ ０ 有 用 ． ｌＬ ＨＣ 调 Ｈ ．（
对 富集 脱 脂 米 糠 蛋 白质 的 影响 。结 果 表 明 ： 理 后 的 脱 脂 米 糠 中的 蛋 白质 质 量 分数 接 近 ３ 。 处 Ｏ
关 键 词 ： 脂 米 糠 ； 法 ； 白质 脱 酶 蛋 中 图分 类 号 ： ２ ０ ＴＳ １ 文 献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ３ ２ ２ ２ １ ） ４ ０ ３ ０ １ ０ —６ ０ （ ０ ０ ０ —０ ３ — ３
脂米糠 ； ｓ ａｕｌｈ等人用 复合 糖酶 处理 了脱脂 Ａｎ ｈ ｒｌ ａ 米糠【 。鉴于脱 脂 米糠 中蛋 白质 的 水溶 性 不 好 ， ３ ］ 本 研究采 用纤 维 素酶 和 高 温 ａ淀 粉 酶 共 同处 理 了脱 一 脂 米 糠 ， 到 了 富 含 蛋 白 质 的 产 品 ， 高 其 使 用 得 提
胱 氨酸 和丝氨 酸形 成 了乙酰 脱 氢 丙 氨 酸 ， 与赖 氨 酸
的氨基形 成 了有毒 物质赖 丙氨 酸 。同时还 易发 生美 拉 德反应 ， 响蛋 白质 的色泽 ＿ 。因 此用 酶 辅 助 法 影 ３ ］ 来 富集或 分离米 糠蛋 白越来 越得 到重 视 。酶辅 助法 使用 的酶 主要有 纤维 素酶 、 半纤 维素 酶 、 果胶 酶 和淀