10微生物学检验课稿PPT课件

蔗糖（sucrsoe）
海藻（trehalose）
纤维二糖（cellobiose）
蜜二糖（melibiose）
多糖类（（C6H10O5）3 ） 菊糖（inulin） 淀粉（starch）
肝糖（glycogen）
糊精（dextrin）
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糖类
名称
三元醇（C3H5（OH）3） 甘油（glycerol） 四元醇（C4H6（OH）4） 赤霉糖醇（erythitol） 五元醇（C5H7（OH）5） 核糖醇（adonitol） 六元醇（C6H7（OH）6） 阿拉伯胶醇（Arabitol）
甘露醇（mannitol）
半乳糖醇（dulcitol）
山梨醇（sorbitol）
环己六醇（（CHOH）8） 肌醇（inositol）
糖苷类
水杨苷（salicin）
七叶苷（aescukin）
松柏苷（.coniferin）
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（二）甲基红（MOR）试验 （三）V－P（Voges-Proskauer）试验 （四）β－半乳糖苷酶试验
常用培养基
基础培养基 选择性培养基 鉴别培养基
. 特殊培养基
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二、微生物接种与培养
（一）微生物接种
常用方法：涂布法、划线法、倾注法、点植法、 穿刺法和浸洗法等。
（二）微生物的培养
需养培养 厌氧罐法
加组织的培养基培养法
厌氧培养 焦性没食子酸法 共栖培养法
享盖特厌氧操作技术
二氧化碳培养法 .
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三、培养结果观察
二、蛋白质及氨基酸代谢试验
（一）靛基质（吲哚）试验 （二）硫化氢试验 （三）尿素酶 （四）氨基酸脱氢酶试验 （五）苯丙氨酸脱氨试验
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三、呼吸酶类试验
（一）硝酸盐还原试验 （二）氧化酶（细胞色素氧化酶）试验 （三）过氧化氢试验
三、显微镜直接计数法
比例计数法：将已知颗粒浓度的液体与一待测细胞浓度 的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自 的数目，然后求出未知菌液的细胞浓度。
血球计数板法：用来测定一定容积中菌 数的常规方法。
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第三节 培养检查
一、培养基的种类
培养基是适合于微生物生长发育需要的各种营养成分 配制而成的营养基质，可供微生物在其中生长繁殖。
（二）平板菌落计数法
取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在其凝
固前混合均匀，或涂布已凝固的固体培养基平板上。
保温培养后，从平板上（内）出现的菌落数乘上菌液
的稀释倍度，即可计算出原菌液的含菌数。
.Hale Waihona Puke 14五、一些新技术新方法
➢ 免疫扩散法 ➢ RIA ➢ ELISA和免疫传感器 ➢ ELISA双抗夹心法 ➢ PCR技术
片即可镜检。
将待观察的含菌液体滴在盖玻片上， 然后将其翻身，放置在凹孔载玻片上， 使液滴悬挂在凹孔室内。在进行不染 色标. 本检验时，一般用普通光学显微8
镜直接观察。
二、染色标本检查
染色标本能显示微生物的形态、排列、一定的构造
及某些细胞成分的性质及其分布的位置，可区别活 菌与死菌，可鉴别微生物的种类等。
（一）固体培养基上菌落形状观察
➢ 大小
➢ 形状
➢ 边缘
➢ 表面
➢ 隆起度
➢ 颜色及透明度
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（二）液体培养基内培养形状的观察
➢ 混浊度 ➢ 沉淀 ➢ 表面 ➢ 培养液的颜色以及是否产气等
（三）半固体培养基中菌落培养特性的观察 主要观察微生物需养与运动情况。
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四、培养计数法
（一）液体稀释法
对未知菌样作连续的10倍系列稀释。选择在适宜的3 个连续的稀释液中歌曲5ml试样，接种到3组共15支 装有培养液的试管中。经培养后，记录每个稀释度出 现生长的试管数，然后查MPN表，再根据样品稀释倍 数即可计算出活菌含量。
3.冷冻食品 融化后检验。
（三）罐头 1.密闭试验 2.膨胀试验 3.微生物检验
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第二节 显微镜检验
一、不染色标本检验
目的：观察微生物细胞在生活时期原有的形状、
大小和确定细胞能否运动等。
制片方法
压滴法 悬滴法
在载玻片上滴一滴生理盐水，再滴加少 许要观察的含菌液体或少量要观察的固 体培养物，使菌体均匀分布，盖上盖玻
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第四节 生化试验
一、糖类代谢试验
（一）糖发酵试验 不同的微生物可对各种糖类、醇类、糖苷类等进行
分解，但其分解能力和分解产物均因不同的微生物而 不同。
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常用于糖发酵试验的糖类、醇类和糖苷类：
糖类
名称
戊糖（C5H10O5）
阿拉伯糖（Arabinose）
木糖（xylose）
鼠李糖（rhamnose）
➢ 采样时，首先要了解采样食品的来源、生产时间、批 号、加工、贮藏、包装、运输等情况；
➢ 采样的器械和容器须灭菌后才可使用。采样时严格进 行无菌操作；
➢ 不得加防腐剂；
➢ 液体食品需搅拌均匀后采取，固体样品要在不同部位 采取，使样品尽量具有代表性；
➢ 取样后，应及时送检，最多不得超过4h。
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二、处理
己糖（C6H12O11） 葡萄糖（glucose） 果糖（fructose）
甘露糖（mannose）
半乳糖（galactose）
三糖类（（C8H10O5）3） 棉子糖（raffinose） 落叶松糖（melizitose）
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糖类
名称
双糖类（C12H22O11） 麦芽糖（maltose） 乳糖（lactose）
（一）固体样品 用无菌刀、剪或镊子称取不同部位样品10g，剪碎，
放入无菌容器内，加定量水，制成1：10混悬液，进 行检验。
（二）液体样品
1.原包装样品 用点燃的酒精棉秋消毒瓶口，再用消毒过的纱布将瓶 口盖上，开启后，用无菌吸管直接吸取。
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2.含二氧化碳的液体样品 同上方法开启后，使气体逸出后进行检验。
乳和乳制品
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蛋制品
鲜蛋
鸡全蛋粉、巴氏消毒全蛋粉、鸡蛋黄粉、 鸡蛋白片断
冰鸡全蛋、巴氏消毒的冰鸡全蛋、冰蛋黄、 冰蛋白
（二）液体样品 原包装瓶样品取整瓶，散装样品可用无菌吸管或匙采取。
冷冻液体食品，采取原包装，放入隔热容器内。 （三）罐头
根据厂别、商标、品种来源等分类进行采取原包装样品。
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（四）注意事项
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主要内容
第一节 采样 第二节 显微镜检验 第三节 培养检查 第四节 生化试验 第五节 血清学检验 第六节 动物试验 第七节 菌落总数测定 第八节 大肠菌群测定
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第一节 采样
一、采样
采样是从待鉴定的一大批食品中抽取小部分用于检 验的过程。采样必须具有代表性。
（一）固体样品 肉及肉制品
生肉及器脏 熟肉及灌肠类肉制品