羟脯氨酸检测试剂盒说明书

Waters Kairos氨基酸试剂盒维护和使用手册说明书

目录I. II. III.IV. 入门指南 a.处理要求b.为氨基酸分析设置自动移液平台c.准备Tecan Freedom EVO 100/4d.试剂制备e.校准品、质量控制标准品、内标和 AccQ•Tag 复溶说明f.试剂布局g.样品分发和条形码h.执行自动样品制备脚本V. 推荐的分析方法VI. 工作流程概述VII.订购信息I. 简介收货后请核对试剂盒清单，如果包装被打开、损坏，内容物缺失或超出有效期，请勿使用本产品。

如需订购替换试剂盒或部件，请联系当地的销售代表。

订购时请提供所需产品的产品部件号和批号。

Waters Kairos 氨基酸试剂盒 - 自动Waters AccQ•Tag 试剂。

NNO NH OOO简介保存和稳定性使用Kairos氨基酸分析试剂盒a.Kairos 氨基酸LC 分析方法b.Kairos 氨基酸MS 分析方法非常感谢您购买Waters™ Kairos™氨基酸试剂盒，此试剂盒仅供研究使用。

本文将介绍Kairos 氨基酸试剂盒(仅供研究使用)的常规维护和使用信息，以期协助您精准测定血浆和尿液样品中的氨基酸。

本文中的方法已经使用AccQ•Tag™衍生化试剂、ACQUITY™ UPLC™ I-Class PLUS 系统、Xevo™ TQ-S micro 和ACQUITY QDa™质谱检测器进行了验证，但我们仍建议您根据具体样品优化分析条件并确认分析结果是否准确，尤其是当样品不完全符合工作站及脚本要求时。

为了确保通用性，该试剂盒中所有试剂的量都经过相应扩大，可适应不同自动移液工作站的残留体积要求。

沃特世不提供有关自动化的咨询服务。

如果需要根据特定工作站的要求进行任何调整，建议您直接联系移液工作站供应商寻求帮助。

如果偏离了脚本或工作站要求，用户应自行确保结果准确度得到确认。

本维护和使用手册针对该方案的实施提供了十分详细的分步操作说明。

如需观看该方案的完整培训视频，请访问：/Kairos 。

小鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA Kit实验说明书

小鼠羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫试剂盒使用说明书
【产品编号】CSB-E08839m
【预期应用】ELISA 法定量测定小鼠血清、血浆、组织裂解液中 Hyp 含量。
【产品性能指标】
1、检测范围：7.8 ng/ml-500 ng/ml
2、灵敏度：1.95 ng/ml
3、精密度：批内差 CV%<8%，批间差 CV%<10%
3、生物素标记抗体工作液生物素标记抗体液按 1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如 10μl生物素标记抗体加
990μl生物素标记抗体稀释液，轻轻混匀，在临用前10分钟内配妥。
4、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液辣根过氧化物酶标记亲和素按 1:100 倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如
溶液后每隔一段时间观察一下显色情况以控制反应时间（比如每隔 10 分钟）。当肉眼可
见标准品前 3-4 孔有明显梯度蓝色，后 3-4 孔显色不明显时，即可加入终止液终止反应，
此时蓝色立刻变为黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。
7、底物溶液应为浅蓝色或无色，如果颜色严重变深则必须弃用。底物溶液易受污染，请避
辣根过氧化物酶标记亲和素
生物素标记抗体稀释液
有效期内2-8℃条件下最多可保存一个月。
辣根过氧化物酶标记亲和素
稀释液
样本稀释液
浓洗涤液
底物溶液
终止液
【所需试剂和器材】
标准规格酶标仪；高速离心机；电热恒温培养箱；干净的试管和离心管；容量瓶；
系列可调节移液器及吸头；多通道移液器；蒸馏水等
【样本采集及保存】
如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4、温育：为防止样本蒸发或污染，温育过程中酶标板必须覆上板贴，实验过程中酶标板应

唾液酸羟脯氨酸联合检测试剂盒在肿瘤诊治中的应用ppt课件

广谱
英国爱丁堡西部综合医院Sandeep等的一项新研究证实,甲状腺癌生存者发生第二原发肿瘤的危险可增加30%,其他肿瘤生存者的甲状腺癌危险亦增加。[J Clin Endocrinol Metab 2006, 91(5)∶ 1819] 该研究对欧洲、加拿大、澳大利亚和新加坡的13个基于人群的肿瘤登记库的数据进行了综合分析结果显示,在对39002例原发性甲状腺癌患者的5年随访期间,共发生了2821例第二原发肿瘤,标准化发病比(SIR)为1.31;许多第二原发肿瘤在甲状腺癌发病后1年内被诊断,主要为非黑素瘤皮肤癌、前列腺癌、肾癌、肾上腺肿瘤和非霍奇金淋巴瘤;小肠、结肠、直肠和乳腺等其他部位肿瘤的发病危险则随着随访时间的延长而增加。
初检（临界值筛查）
复检（动态值筛查）
结果处理
开单步棸：点击“检验申请单”---点击“TAM”检测室---点击“唾液酸、羟脯氨酸联合检测” 此项目需空腹抽血，生化管2毫升，标本送至门诊2楼病理科，每天都可以送标本，周五上午出结果。此项目在医保，农合，收费180元。建议45岁以上人群做常规筛查。
灵敏
寡糖序列
A
寡糖序列
B
寡糖序列
C
寡糖序列
D
BXTM 高分子载体
灵敏
灵敏
细胞破裂
分泌型标志物直接释放入血
BXTM检测的物质部分为分泌型TM。可在肿瘤细胞正常生长过程释放入血，易于在早期肿瘤血清中检测
常规肿瘤标志物多为胞内型和细胞表面型TM。需在肿瘤细胞坏死解体后释放入血，难以在早期肿瘤血清中检测到
16
100
123.1±26.8
14
87.5
135.7±31.4
16
100
从上述数据可见，对治疗后的癌症患者应用本试剂检测，可作为疗效动态观察指标和鉴别癌症复发转移指标。

脯氨酸含量检测试剂盒说明书

脯氨酸（Pro ）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0290规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体45 mL×1瓶（自备）4℃保存试剂二液体45 mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1．试剂一：自备冰乙酸。

2．标准品：脯氨酸10 mg ，临用前加入1 mL 蒸馏水，配成10 mg/mL 标准品。

产品说明：脯氨酸（Pro ）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro 含量显著增加。

Pro 增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。

因此，脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。

用磺基水杨酸（SA ）提取Pro ，加热处理后，Pro 与酸性茚三酮溶液反应生成红色，在520nm 测定吸光度。

技术指标：最低检出限：0.1791 μg/mL 线性范围：0.5-40 μg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器及用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰乙酸、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细胞、细菌或组织样本的制备：细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3秒，间隔10秒，重复30次），之后置沸水浴振荡提取10min ；10000g ，常温离心10min ，取上清，冷却后待测。

组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；之后置沸水浴振荡提取10min，10000g，常温离心10min，取上清，冷却后待测。

CellBiolabs羟脯氨酸检测试剂盒分析原理

CellBiolabs羟脯氨酸检测试剂盒分析原理羟脯氨酸是一种由不可逆的翻译后酶合成的氨基酸脯氨酸经脯氨酰羟化酶羟化。

羟脯氨酸几乎只存在于细胞中蛋白质胶原蛋白，位于重复三肽Gly-X-Y的Y位置。

通过允许胶原蛋白螺旋，羟脯氨酸有助于稳定胶原蛋白的结构。

除了胶原蛋白，在转录因子缺氧诱导因子（HIF1）上观察到脯氨酸的羟基化。

在正常氧气条件下，蛋白质EGLN1在脯氨酸564处羟基化HIF-1α，允许von Hippel-Lindau肿瘤抑制因子（pVHL）泛素化并导致靶向性通过蛋白酶体降解HIF-1。

由于羟脯氨酸仅存在于胶原蛋白以外的少数蛋白质中，因此羟脯氨酸已被用作量化胶原蛋白和/或明胶水平的标志物（部分胶原蛋白水解产生蛋白质和肽的混合物）。

据估计羟脯氨酸占胶原蛋白的13.5%。

此外，还使用了羟脯氨酸测量确定某些涉及胶原蛋白分解的疾病。

例如，增加了在佩吉特骨病患者的血清中测定了胶原蛋白。

此外，羟脯氨酸增加该水平与前列腺癌、骨转移、肝纤维化以及前列腺癌相关三聚氰胺和三聚氰酸引起肾毒性。

Cell Biolabs/羟脯氨酸检测试剂盒为检测提供了一种方便的比色方法从组织、血浆、血清或尿液酸水解物中提取总羟脯氨酸。

首先是未知将样品或羟脯氨酸标准加入96孔板中。

然后，加入氯胺T混合物添加以将羟脯氨酸转化为吡咯。

最后，4-（二甲氨基）苯甲醛（DMAB）将混合物（也被称为埃利希试剂）添加到与吡咯反应的孔中，以使其反应产生生色团（下图），并在540-560 nm处读取板的吸光度。

内容通过与预定值进行比较，确定未知样品中羟脯氨酸的含量羟脯氨酸标准曲线。

提供的试剂足以评估96次分析包括标准品和未知样品。

（分析原理）1. STA-670: Homocysteine ELISA Kit2. STA-671: S-Adenosylhomocysteine (SAH) ELISA Kit3. STA-672: S-Adenosylmethionine (SAM) ELISA Kit4. STA-674: Glutamate Assay Kit。

羟自由基测定试剂盒使用说明

羟自由基测定试剂盒使用说明货号：LA1950规格：50管/48样产品内容：试剂一：3%H2O2标准品贮备液0.5mL×1支，4℃保存3个月。

0.03%标准品应用液的配置：3%H2O2标准品贮备液：双蒸水=1：99稀释，现用现配。

试剂二：底物贮备液1mL×1支，4℃保存3个月。

底物应用液的配制：如果您的样本为抑制羟自由基，即测定管吸光度比对照管吸光度低，则底物反应液的配制：底物贮备液：双蒸水=1：99稀释，现用现配。

如果您的样本为产生羟自由基，即测定管吸光度比对照管吸光度高，则底物反应液的配制：底物贮备液：双蒸水=1：299稀释，现用现配。

试剂三：甲液贮备液2mL×1支，4℃保存3个月。

用时用双蒸水稀释至1：9稀释成应用液。

乙液7mL×2支，4℃保存3个月。

试剂三应用液的配制：甲液应用液与乙液等比列混合，按需配置，剩余的4℃保存。

试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存3个月。

用时加双蒸水稀释至100mL制备应用液，4℃保存。

若有结晶，则放置37℃水浴至全部溶解后再稀释。

试剂五：液体30mL×1瓶，避光4℃保存3个月。

试剂六：液体30mL×1瓶，避光4℃保存3个月。

试剂七：分析纯的冰乙酸自备。

显色剂的配制：试剂四应用液：试剂五：试剂六：冰乙酸=8:3:3:2，现用现配。

抑制羟自由基的物质如：血清（浆）、各种组织匀浆液、口服液等产生羟自由基的物质如：中性白细胞、某些药物、部分植物等。

产品简介：Fenton反应是最常见的产生羟自由基的化学反应，H2O2的量和Fenton反应产生的OH·量成正比，当给予电子受体后，用griess试剂显色，形成红色物质，其呈色与OH·的多少成正比列关系。

操作步骤：以上配制好的应用液，先在37℃水浴中温育3min，一下操作在37℃水浴中进行。

空白管标准管对照管测定管双蒸水（mL）0.40.20.20.03%H2O2标准应用液（mL）0.2底物应用液（mL）0.20.2样本（mL）0.2试剂三应用液（mL）0.40.40.40.4混匀，37℃反应1min（准确以秒表计时），从加完试剂三开始到1min结束，立即加入显色剂终止反应，一次只能做一个管子。

小鼠羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫分析试剂盒说明书

小鼠羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号：E0621m3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸标本的采集及保存1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

4. 组织匀浆：将动物的组织标本先用PBS洗涤，去除多余血液，匀浆化后放在20ml PBS中于-20℃放置过夜，第二天，经过二次反复冻融破膜，将匀浆物5000x g离心5分钟，取上清即可检测。

注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。

实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。

每孔加检测溶液A工作液100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

原料中羟脯氨酸含量的测定

原料中羟脯氨酸含量的测定1.材料和试剂1.1材料秦宝雪花牛牛蹄筋：陕西秦宝牧业有限责任公司。

秦宝普通育肥牛、雪花牛肺：陕西秦宝牧业有限责任公司。

秦宝雪花牛棒骨：陕西秦宝牧业有限责任公司。

1.2试剂所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或去离子水，或相同浓度的水。

1.2.1硫酸溶液[c(H2SO4)≈3mol/L]量取750mL水于2L的容量瓶中，在搅拌下缓慢加入320mL浓硫酸（ρ20=1.84g/mL）。

冷却至室温后用水定容。

1.2.3缓冲溶液（PH=6.8）包括下列组分：a）26.0g一水柠檬酸（C6H8O7·H2O）；b）14.0g氢氧化钠；c）78.0g无水乙酸钠[Na(CH3CO2)]。

用500mL水溶解上述试剂并转入1L的容量瓶中，加入250mL 正丙醇，用水定容。

该溶液于4℃暗处可稳定保存几周。

1.2.4氯胺T溶液称取1.41g三水·N-氯-对甲苯磺酰胺钠盐（氯胺T），用100mL 缓冲溶液溶解。

临用前配制。

1.2.5显色剂称取10.0g对甲氨基苯甲醛，用30mL高氯酸溶液[70%（质量分数）]溶解，缓慢加入65mL异丙醇。

临用前配制。

1.3羟脯氨酸标准溶液1.3.1标准储备液称取50mg4-羟基-α-吡咯甲酸（羟脯氨酸）于100mL容量瓶中，用水溶解，加一滴硫酸溶液（1.2.1），用水定容。

该溶液于4℃下可稳定存放1个月。

1.3.2标准工作液移取5.00mL上述标准储备液至500mL容量瓶中，用水定容。

分别吸取该溶液10.00mL、20.00mL、30.00mL、40.00mL于100mL容量瓶中，用水定容，所得标准工作液浓度一次为0.5µg/mL、1.0µg/mL、1.5µg/mL、2.0µg/mL。

临用前配制。

2.仪器和设备3.试样制备用刀将原料在冷冻时（0℃以下）切成小块（约0.5cm3，边长约为8mm）。

将切好的试样装入密封样品盒中，或用耐热塑料袋真空包装，70℃以上保温30min后，冷却。

羟脯氨酸的测定方法

1羟脯氨酸含量测定2羟脯氨酸标准曲线绘制3试剂的配制【6-7】[6] 李秋营,姚汝琳.细胞中羟脯氨酸的测定.山西医科大学学报.2001,32(6):558-559[7] David J Etherington, Trevor J Sims. Detection and Estimation of Collagen[J]. J Sci Food Agric, 1981,32:539-546柠檬酸缓冲液：柠檬酸钠120g、冰醋酸12mL、柠檬酸46g、氢氧化钠34g 溶解于蒸馏水中，调整pH 值至6.0，然后定容至1000mL。

0.05mol/L 氯胺T 溶液：称取氯胺T 7.05g，溶解于100mL 蒸馏水中，然后加入乙二醇独甲醚150mL，再加入250mL 柠檬酸缓冲液混合均匀。

对二甲基氨基苯甲醛: 试剂 A：取无水乙醇20mL，慢慢加入浓硫酸2.74mL；试剂B：取对二甲基氨基苯甲醛12.0g，慢慢加入无水乙醇40mL，水浴加热使其完全溶解并冷却至室温，然后将A 液慢慢加入B，混合均匀。

3.5mol/L 高氯酸溶液：取27mL 高氯酸，以蒸馏水定容到100mL。

羟脯氨酸标准曲线的绘制羟脯氨酸标准储存液：准确称取L-羟基脯氨酸标准品50mg，加入0.01mol/L 盐酸中溶解，稀释并定容到100mL，在冰箱中保存。

羟脯氨酸标准工作液：吸取羟脯氨酸标准储存液10mL到50mL 容量瓶中，用蒸馏水定容到50mL(临用前配)，浓度为100μg/mL。

4标准曲线绘制分别吸取羟脯氨酸标准工作液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5mL，用蒸馏水定容到50mL容量瓶中。

以蒸馏水为空白，分别吸取上述标准液1mL，加入1mL 柠檬酸缓冲液和1mL 0.05mol/L 氯胺T 溶液，室温(25 ℃) 氧化10min 后，加入高氯酸1mL(3.5mol/L)，放置10min，加入对二甲基氨基苯甲醛试剂1mL，在65℃水浴显色10min，冷却后在560nm处测吸光度。

绵羊羟脯氨酸（Hyp）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

绵羊羟脯氨酸（Hyp）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定绵羊血清、血浆、组织等样本中羟脯氨酸（Hyp）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中绵羊羟脯氨酸（Hyp）水平。

用纯化的绵羊羟脯氨酸（Hyp）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入绵羊羟脯氨酸（Hyp），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的绵羊羟脯氨酸（Hyp）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中绵羊羟脯氨酸（Hyp）含量。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

羟脯氨酸的测定方法

1羟脯氨酸含量测定2羟脯氨酸标准曲线绘制3试剂的配制【6-7】[6] 李秋营,姚汝琳.细胞中羟脯氨酸的测定.山西医科大学学报.2001,32(6):558-559[7] David J Etherington, Trevor J Sims. Detection and Estimation of Collagen[J]. J Sci Food Agric, 1981,32:539-546柠檬酸缓冲液：柠檬酸钠120g、冰醋酸12mL、柠檬酸46g、氢氧化钠34g 溶解于蒸馏水中，调整pH 值至6.0，然后定容至1000mL。

0.05mol/L 氯胺T 溶液：称取氯胺T 7.05g，溶解于100mL 蒸馏水中，然后加入乙二醇独甲醚150mL，再加入250mL 柠檬酸缓冲液混合均匀。

对二甲基氨基苯甲醛: 试剂 A：取无水乙醇20mL，慢慢加入浓硫酸2.74mL；试剂B：取对二甲基氨基苯甲醛12.0g，慢慢加入无水乙醇40mL，水浴加热使其完全溶解并冷却至室温，然后将A 液慢慢加入B，混合均匀。

3.5mol/L 高氯酸溶液：取27mL 高氯酸，以蒸馏水定容到100mL。

羟脯氨酸标准曲线的绘制羟脯氨酸标准储存液：准确称取L-羟基脯氨酸标准品50mg，加入0.01mol/L 盐酸中溶解，稀释并定容到100mL，在冰箱中保存。

羟脯氨酸标准工作液：吸取羟脯氨酸标准储存液10mL到50mL 容量瓶中，用蒸馏水定容到50mL(临用前配)，浓度为100μg/mL。

4标准曲线绘制分别吸取羟脯氨酸标准工作液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5mL，用蒸馏水定容到50mL容量瓶中。

以蒸馏水为空白，分别吸取上述标准液1mL，加入1mL 柠檬酸缓冲液和1mL 0.05mol/L 氯胺T 溶液，室温(25 ℃) 氧化10min 后，加入高氯酸1mL(3.5mol/L)，放置10min，加入对二甲基氨基苯甲醛试剂1mL，在65℃水浴显色10min，冷却后在560nm处测吸光度。

羟基脯氨酸说明书

羟基脯氨酸说明书一、产品概述羟基脯氨酸是一种重要的氨基酸补充剂，能够帮助促进身体的蛋白质合成和细胞再生，提高肌肉恢复和生长能力。

本说明书将详细介绍羟基脯氨酸的成分、用途、剂型、剂量和注意事项，以帮助用户正确使用本产品。

二、产品成分羟基脯氨酸主要成分包括羟基脯氨酸粉末、辅料（如胶囊、溶剂等），其中羟基脯氨酸粉末含量符合产品标签上所示。

三、产品用途羟基脯氨酸是一种重要的营养补充品，适用于以下情况：1. 体育锻炼者：可促进肌肉恢复，提高训练效果；2. 肌肉疲劳者：可缓解肌肉酸痛和疲劳感；3. 需要增加蛋白质摄入量的人群：可帮助补充蛋白质，促进身体健康；4. 需要维持肌肉质量的老年人：可减少肌肉流失，提高肌肉功能。

四、产品剂型及规格羟基脯氨酸目前主要有片剂、胶囊和粉剂等剂型。

不同剂型的羟基脯氨酸含量、包装规格和用法用量各有差异，请用户按照产品标签和说明书上的指导服用。

五、产品剂量羟基脯氨酸的剂量应根据个人情况而定，建议在医师或专业营养师的指导下使用。

一般情况下，推荐的剂量为每天1-3次，每次剂量为500-2000毫克。

具体剂量应根据个体身体状况、饮食习惯和运动强度等因素进行调整。

六、产品禁忌1. 对羟基脯氨酸过敏者禁用本产品；2. 未满18周岁的儿童禁用本产品；3. 孕妇、哺乳期妇女和正在怀孕计划的女性慎用；4. 有严重肾脏疾病的患者慎用或遵医嘱使用。

七、产品储存1. 请将羟基脯氨酸产品放置于阴凉干燥处，避免阳光直射；2. 请保持原包装完好，避免受潮；3. 请将产品放置于儿童难以触及的地方。

八、产品注意事项1. 请严格按照产品标签和说明书上的剂量和使用方法使用本产品；2. 请咨询专业医生或营养师的指导以了解个人适宜的剂量和使用频率；3. 本产品不能替代正常饮食，不可过量使用或长期使用；4. 使用过程中如有不适，请及时停用并就医；5. 请勿将本产品与其他保健品或药物混合使用，以免产生不良反应。

九、产品效果及副作用羟基脯氨酸作为氨基酸补充剂，能够帮助促进身体的蛋白质合成，提高肌肉恢复和生长能力，但效果因个人差异而异。

L-羟脯氨酸

用途说明
用途说明
在胶原蛋白中P-Hyp含量是决定其品质高低的标准。国际通用评判标准是P-hyp占胶原蛋白的比值，数值越接近13%人体皮肤及骨骼吸收转化率越高，品质就更佳。更好的帮助体内胶原蛋白的重建及弹性蛋白的再生和更新。
贮存条件
贮存条件
2-8°C保存
危险说明
危险说明
危险代码：Xi 危险等级：R36/37/38 安全等级：S24/25-36-26
L-羟脯氨酸
增味剂、营养强化剂
01 基本信息
03 物理参数 05 贮存条件
目录
02 性状描述 04 用途说明 06 危险说明
基本信息
L-羟脯氨酸，增味剂;营养强化剂。香味料。主要用于果汁、清凉饮料、营养饮料等;用作生化试剂。
ห้องสมุดไป่ตู้
基本信息
基本信息
中文名称： L-羟基脯氨酸中文别名： L-羟基脯氨酸;反式-4-羟基-L-脯氨酸，L-羟脯氨酸英文名称： H-Hyp-OH 英文别名： L-Hydroxyproline;trans-4-Hydroxy-L-proline 纯度： ≥99% CAS号： 51-35-4 分子式： C5H9NO3 分子量： 131.10
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性状描述
性状描述
白色结晶或结晶粉末。
物理参数
物理参数
熔点：274-275℃ 溶解度：H2O: 50 mg/mL 比旋光度：-74°～ -77°(c=5, H2O) 干燥损失：<0.2% 氯Cl：< 200 PPM 硫酸根SO4：< 200 PPM 氨离子NH4：< 200 PPM 铁Fe：< 10 PPM 折射率: -75.5 ° (C=4, H2O)

羟脯氨酸测定原理

羟脯氨酸测定原理羟脯氨酸（Hydroxyproline）是一种非常重要的氨基酸，在胶原蛋白中占有重要地位。

羟脯氨酸的含量可以作为评估胶原蛋白合成和降解的指标，因此，羟脯氨酸的测定具有重要的临床意义。

本文将介绍羟脯氨酸测定的原理及其应用。

羟脯氨酸的测定原理主要基于其与酚类物质反应生成紫色化合物的特性。

一般情况下，羟脯氨酸的测定方法主要有两种：色素法和高效液相色谱法。

色素法是羟脯氨酸测定的常用方法之一。

其原理是在碱性条件下，羟脯氨酸与酚类试剂发生缩合反应，生成有色产物。

这种反应是一种氧化还原反应，需要存在氧化剂的存在，常用的氧化剂有次氯酸钠和过氧化氢。

在碱性条件下，羟脯氨酸与酚类试剂发生缩合反应，生成的产物可以通过分光光度计测定其吸光度，从而计算出羟脯氨酸的含量。

高效液相色谱法是羟脯氨酸测定的另一种常用方法。

该方法利用高效液相色谱仪对样品进行分析。

在该方法中，首先将样品中的羟脯氨酸与特定的试剂进行反应，生成具有荧光的产物。

然后，将反应产物注入高效液相色谱仪中进行分离和检测。

通过测定峰面积或峰高的方式，可以计算出羟脯氨酸的含量。

羟脯氨酸的测定方法在临床和科研领域有着广泛的应用。

在临床上，羟脯氨酸的测定可以用于评估胶原蛋白合成的情况，对于一些与胶原蛋白代谢相关的疾病的诊断和治疗具有重要意义。

此外，羟脯氨酸的测定方法还可以用于评估食物中胶原蛋白的含量，对于食品安全和质量控制也有一定的应用价值。

在科研领域，羟脯氨酸的测定方法可以用于胶原蛋白的合成和降解研究。

通过测定羟脯氨酸的含量，可以评估胶原蛋白的合成速率和降解速率，进而研究胶原蛋白的代谢机制。

此外，羟脯氨酸的测定方法还可以用于评估某些药物对胶原蛋白合成和降解的影响，为新药的研发提供参考依据。

总结起来，羟脯氨酸是一种重要的氨基酸，在胶原蛋白代谢中起着关键作用。

羟脯氨酸的测定可以通过色素法和高效液相色谱法等方法进行。

这些方法不仅在临床上有着重要的应用价值，还在科研领域中发挥着关键作用。

羟脯氨酸试剂盒说明书

羟脯氨酸（Hydroxyproline，HYP）试剂盒说明书微量法100T/96S注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

测定原理：样品经水解产生游离的HYP，进一步被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。

通过测定样品水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。

自备实验用品及仪器：天平、烘箱、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、无水乙醇、异丙醇、6mol/L盐酸和蒸馏水。

试剂组成和配制：组织提取液：6mol/L盐酸，自备。

浓盐酸：H2O（V/V）= 1:1，室温保存。

细胞提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。

羟脯氨酸提取：1. 组织：称取约0.2g样品于玻璃管，加入2mL的组织提取液，置于110℃烘箱，水解6至12小时，用提取液定容至2mL，12000g，25℃，离心20min，取上清待测。

2. 细胞：取约500万个细胞，加入1mL的细胞提取液，于高压消毒器中15磅保持30min，自然降压后待测。

3. 血清游离羟脯氨酸提取：取0.1mL血清，加入0.5mL无水乙醇使蛋白质沉淀，8000g4℃离心5min。

将上清倒入另一个EP管，氮吹或沸水浴将乙醇挥发干。

冷却后再加入0.2mL50%异丙醇，充分溶解混匀待测。

测定操作表：1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至560nm，蒸馏水调零。

2、操作表对照管测定管样本（µL）60试剂一（µL）60 60混匀，室温静置20min试剂二（µL）60 60H2O（µL）180 120混匀，60℃，20min，取出后25℃静置15 min，取200µL于微量石英比色皿/96孔板中检测560nm处吸光值。

乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定——L(-)-羟脯氨酸含量测定法

乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定法—L(-)-羟脯氨酸含量测定羟脯氨酸含量测定法1主题内容与适用范围本方法规定了乳与乳制品制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定方法。

本方法适用于乳与乳制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定。

本方法通过对L(-)-羟脯氨酸含量的测定，可判定是否为动物水解蛋白。

2 引用标准) --羟脯氨酸含量测定L(--)GB9695.23-90 肉与肉制品L(3 原理试样经酸水解,释放出羟脯氨酸。

经氯胺T氧化,生成含有吡咯环的氧化物。

用高氯酸破坏过量的氯胺T。

羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物,在波长558nm处进行比色测定。

4 试剂所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或同等纯度的水。

4.1 氯化亚锡(GB638):0.75％溶液。

将氯化亚锡7.5g溶于500mL水中,再加入500ml浓盐酸(GB 622)。

4.2 盐酸(GB622):6mol/L溶液。

4.3 氢氧化钠(GB629);1mol/L、10mol/L溶液。

4.4 缓冲液:将50g柠檬酸,26.3g氢氧化钠和146.1g结晶乙酸钠(GB694)溶于水,稀至1L,此溶液与200mL水和300mL正丙醇混合。

4.5 氯胺T(HG3-972)溶液:将1.41g氯胺T,溶于10mL水中,依次加入10mL正丙醇和80mL缓冲溶液(用时现配)。

4.6 显色剂:称取10g对二甲氨基苯甲醛,用35mL高氯酸(GB623)溶解,缓慢加入65mL异丙醇。

4.7 L(-)-羟脯氨酸(C5H9NO3)标准溶液。

4.7.1 标准储备液500μg/mL:称取50.0mg/L(-)-羟脯氨酸用少量水溶解,加一滴6mol/L盐酸,定容至100mL容量瓶中。

4.7.2 标准工作液5μg/mL:吸取标准储备液5.00mL于500mL容量瓶中,定容。

5 仪器和设备5.1 实验室常规设备。

5.2 配有冷凝管的三角瓶:250mL。

5.3 恒温水浴。

液态乳与乳粉中L-羟脯氨酸的测定

液体乳与乳粉中L-羟脯氨酸的测定1原理试样经水解后，水解液中L-羟脯氨酸与丹磺酰氯在避光条件下衍生反应，生产具有荧光基团的稳定化合物，采用LC荧光检测器（激发波长330nm，发射波长530nm）检测，外标法定量。

2试剂盒材料2.1试剂2.1.1乙腈：色谱纯2.1.2丹磺酰氯2.1.3盐酸甲胺2.1.4无水乙酸钠2.1.5苯酚2.1.6盐酸：36-38%，摩尔浓度约为12mol/L2.1.7冰乙酸2.1.8无水碳酸钠2.1.9氢氧化钠2.2试剂配制2.2.1碳酸钠缓冲液（80mmol/L）：称取0424g无水碳酸钠，加水40ml溶解，用1mol/L盐酸调PH值至9.5，用水定容至50ml。

2.2.2蛋白水解剂：称取0.1g苯酚，置于100ml容量瓶，家盐酸50ml，用水定容至100ml。

2.2.3丹磺酰氯溶液（1.5mg/ml）：称取0.15g丹磺酰氯，用乙腈溶解并定容至100ml。

2.2.4盐酸甲胺溶液（20mg/ml）：称取2.0g盐酸甲胺，用水溶解并定容至100ml。

2.2.5氢氧化钠溶液：称取24.0g氢氧化钠，用水溶解并定容至50ml。

2.2.6乙酸钠缓冲溶液：准确称取0.820g乙酸钠，加适量的水溶解后，用冰乙酸调节pH值至4.8，用水定容至1000ml，过0.45μm的水相滤膜后使用。

2.3标准品2.3.1L-羟脯氨酸：CAS编号51-35-4，纯度大于等于99.0%。

2.4标准溶液的制备2.4.1L-羟脯氨酸标准储备液（1000mg/L）：准确称取L-羟脯氨酸50mg（精确至0.1mg）与50ml容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，摇匀后转移至密闭容器中，与4℃储存，保存期为3个月。

2.4.2L-羟脯氨酸系列标准工作液：移取适量L-羟脯氨酸标准溶液，用水配制成浓度分别为1、2、5、10、20、和50mg/L的系列标准工作液。

临用现配。

3仪器与设备3.1液相色谱仪：配有荧光检测器。

3.2分析天平：感量分别为1mg和0.01mg。

羟脯氨酸(HYP)检测

羟脯氨酸（HYP）检测
羟脯氨酸（Hydroxyproline，HYP）是亚氨基酸之一，是一种非必需氨基酸，是胶原组织的主要成分之一，且为胶原中特有的氨基酸。

利用羟脯氨酸在胶原蛋
白中含量最高这一特点，通过血液和尿液对羟脯氨酸的测定，可了解体内胶原
蛋白分解代谢情况，即可作为结缔组织分解情况指标。

此外，测定羟脯氨酸也
是了解骨吸收、骨代谢情况的指标。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测羟脯氨酸的含量变化。

此外，我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测服务，以满足您的不同需求。

HPLC和LC-MS测定羟脯氨酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 羟脯氨酸含量信息
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

LC-MS氨基酸测定项目样本报告，点击查看>。