转基因检测国家局培训教材(基因成分检测)

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转基因食品安全培训

转基因食品安全培训

公众对转基因食品的认知与态度
认知程度低
大部分公众对转基因食品的认 知程度较低,缺乏科学判断能
力。
支持者与反对者并存
公众对转基因食品的态度存在 分歧,支持者和反对者并存。
存在疑虑
由于信息不对称和误解,公众 对转基因食品存在疑虑和担忧 。
需要科学引导
政府和社会应加强对公众的科 普宣传,提高公众的科学素养
转基因微生物食品
如转基因酵母、转基因细 菌等,这些微生物被用于 生产食品添加剂、酶制剂 等。
转基因食品的发展历程
1983年
世界上第一例转基因植物 诞生,是一种含有抗生素 药类抗体的烟草。
1994年
美国Calgene公司研发的 转基因番茄上市,成为世 界上第一个商业化种植的 转基因食品。
2000年
全球转基因作物种植面积 达到5530万公顷,涉及18 个国家。
监管方式
监管方式包括现场检查、抽检、备 案审查等,监管部门应定期对转基 因食品进行风险评估和安全性评价 。
转基因食品的检测方法
1 2 3
检测机构
具备相应检测资质和条件的机构才能进行转基因 食品的检测,检测机构应具备相应的检测设备和 专业技术人员。
检测方法
检测方法包括分子生物学方法、免疫学方法、生 物信息学方法等,不同的检测方法适用于不同的 转基因食品和检测目的。
反对者观点
反对者则担心转基因食品可能对人类 健康和生态环境产生负面影响,如产 生新的过敏原和毒素,以及破坏生态 平衡等。
国际对转基因食品的管理
国际组织
国际上对转基因食品的管理由联合国粮食及农业组织、世界卫生组织和国际科学理事会等 组织负责协调。
各国政策
各国对转基因食品的管理政策存在差异,一些国家如美国和加拿大对转基因食品的监管较 为宽松,而一些欧洲国家如法国和奥地利则对转基因食品的进口和销售实行更严格的限制 。

实验3:农作物转基因成分检测

实验3:农作物转基因成分检测

实验三农作物转基因成份的检测---- PCR方法检测Bt玉米的外源基因实验目的:掌握CTAB法从转基因植物叶片提取DNA的原理和方法;掌握PCR扩增DNA的技术及原理,学习PCR的操作及PCR扩增仪的使用。

实验内容:1、采用CTAB法从植物叶片中提取基因组DNA,并进行琼脂糖凝胶电泳检测。

2、PCR检测转基因植物外源基因(启动子序列),扩增结果通过琼脂糖凝胶电泳检测。

实验仪器设备、试剂等用品仪器设备用品:恒温水浴锅,离心机,FastPrep细胞破碎仪,移液枪,离心管,吸头,电泳仪,电泳槽,PCR扩增仪试剂:CTAB,氯仿,异戊醇,无水乙醇,异丙醇,β-巯基乙醇,PCR试剂盒,引物(primer)第一部分植物基因组DNA的提取原理:CTAB法是一种快速简便的提取植物总DNA的方法:先将新鲜的叶片在液氮中研磨,破碎其细胞,然后加入CTAB分离缓冲液,将DNA溶解出来,再经氯仿-异戊醇抽提除去蛋白质,最后得到DNA。

核酸是生物有机体中的重要成分,在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。

核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类,在真核细胞中,前者主要存在于细胞核中,后者主要存在于细胞质及核仁里。

在制备核酸时,通过研磨破坏细胞壁和细胞膜,使核蛋白被释放出来。

分离得到核蛋白后,需进一步将蛋白等杂质除去,用含异戊醇的氯仿振荡核蛋白溶液,使其乳化,然后离心除去变性蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相和氯仿相中间,而DNA溶于上层水相。

用两倍体积95%乙醇溶液将DNA钠盐沉淀出来。

如果用酸性乙醇或冰乙酸来沉淀,得到的是游离的DNA。

反复使用上述方法多次处理DNA核蛋白溶液,就能将蛋白等杂质较彻底地除去,得到较纯的DNA 制品。

在DNA提取、制备的过程中,核酸极不稳定,许多因素可破坏其完整结构:①化学因素,核酸的结构在pH值4.0—11.0间较稳定,pH值在此范围外就会使核酸变性降解,故制备过程应避免过酸过碱。

转基因检测的主要技术方法及基本流程

转基因检测的主要技术方法及基本流程

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食品中的转基因成分检测技术

食品中的转基因成分检测技术

食品中的转基因成分检测技术随着科学技术的不断发展,转基因食品的出现引起了广泛关注。

作为一种新型食品,转基因食品是否安全成为了公众关注的焦点。

而食品中的转基因成分检测技术则成为了确保食品安全的重要手段。

本文将介绍食品中的转基因成分检测技术及其应用。

一、转基因食品的定义及特点转基因食品是通过人工手段将外源基因导入食品中的生物体,使其具有特定的性质。

转基因技术的出现给食品生产带来了许多优势,如提高产量、抗病虫害等。

然而,由于食品中的转基因成分可能对人体健康产生影响,因此转基因食品的检测成为了食品安全的重要环节。

二、食品中的转基因成分检测技术分类食品中的转基因成分检测技术主要分为两大类:基于DNA的检测技术和基于蛋白质的检测技术。

基于DNA的检测技术主要包括聚合酶链反应(PCR)技术、半定量PCR技术和实时定量PCR技术等。

这些技术可以通过扩增特定基因片段或序列来判断食品中是否存在转基因成分。

而基于蛋白质的检测技术主要包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)等。

这些技术可以通过检测特定蛋白质来判断食品中是否存在转基因成分。

三、食品中的转基因成分检测技术的应用食品中的转基因成分检测技术主要应用于以下几个方面:1.食品安全监管转基因食品作为一种新型食品,其安全性备受关注。

食品安全监管部门可以利用转基因成分检测技术对市场上的食品进行抽检,确保食品中的转基因成分符合规定的标准。

2.产品溯源转基因成分检测技术可以帮助生产企业实现对产品的溯源。

通过对原料和成品中的转基因成分进行检测,可以掌握产品生产过程中是否存在转基因成分,并追溯其来源,为企业的产品质量管理提供参考依据。

3.行业竞争力提升一些国家和地区对转基因食品有着不同的标准和要求。

通过转基因成分检测技术,食品企业可以对产品进行筛选,确保其符合市场要求,提升企业的竞争力。

四、食品中的转基因成分检测技术的挑战与展望尽管食品中的转基因成分检测技术存在许多优势,但也面临着一些挑战。

《转基因食品的检测及安全性评价》课程简介

《转基因食品的检测及安全性评价》课程简介

课程名称(中文):转基因食品的检测及安全性评价课程名称(英文):Detection and Risk Assessment of genetically modified (GM) Food学分数/学时数:2/40开课单位/开课学期:生物工程研究中心/三年级的第二学期课程类别:选修面向专业:生物防治与食品安全(必修)课程负责人:徐增富教授袁美妗讲师课程内容简介(中文):主要介绍转基因食品的检测方法及其安全性评价的原理、方法和实例; 并介绍了全球公众对转基因食品的认识、各国对转基因食品的管理法规、政策及发展趋势。

”转基因食品的检测及安全性评价”包括十三章。

第1章概述转基因生物和转基因食品研究和开发的历史、现状和发展趋势。

第2、3、4章分别具体介绍获得转基因微生物、转基因植物和转基因动物的方法,以及用这些转基因微生物和动植物为原料生产的各种食品。

第5章介绍转基因食品检测的原理和方法。

第6章介绍转基因食品安全性评价的内容及其方法。

第7章介绍各国对转基因食品的管理法规和政策。

第8章讨论目前转基因食品的检测及安全性评价研究中存在的主要问题及其对策。

课程内容简介(英文):Detection and Risk Assessment of genetically modified (GM) Food will introduce the analytical methods for the identification and determination of genetically modified organisms (GMOs) in food and food ingredients, and the principles, methods and examples for risk assessment of GM Food. Public opinion around the world on GM food, legislation on the authorization and labeling of GM food and the future of GM food will be included in this course. This course comprises eight chapters. In chapter 1, the history, current status and trends in detection and risk assessment of GM food will be outlined. Chapters 2, 3 and 4 will describe the methods to obtain transgenic microbes, plants and animals, and various food made from these GMOs. In chapter 5, the principles and methods for the detection of GMOs in food and food ingredients will be presented. Chapter 6 willdiscuss the theoretical and practical aspects of risk assessment of GM food. The legislation and regulatory system for GM food in different countries will be introduced in chapter 7. Finally, chapter 8 will address the problems and approaches related to the detection and risk assessment of GM Food.课程编号:33103856课程名称(中文):《鱼病学》课程名称(英文):Diseases of Fishes学分数/学时数:2/2开课单位/开课学期:生命科学学院/6课程类别:专业选修面向专业:生物科学课程负责人:吴金英,吕军仪课程内容简介(中文):鱼病学以鱼类形态学、鱼类组织学、鱼类生理学和鱼类免疫学为基础,涉及寄生虫学、微生物学、流行病学、病因学、毒理学、药物学和药理学等领域,是一门理论联系生产实际密切性强的综合性学科,直接为水产养殖和渔业生产服务的。

基因实验操作与安全知识的培训课程

基因实验操作与安全知识的培训课程

基因实验操作与安全知识的培训课程1. 课程介绍基因实验操作与安全知识的培训课程主要目的是为研究人员提供有关基因实验操作的基本知识和技能,以及实验室安全的基本原则和实践本课程将涵盖基因实验的基本步骤,包括基因的提取、纯化、扩增和分析,以及实验室安全的关键方面,包括个人防护、生物安全和化学安全2. 课程内容2.1 基因实验操作2.1.1 基因提取和纯化•实验原理和方法•实验步骤和操作技巧•实验结果的分析和解释2.1.2 基因扩增•PCR原理和操作步骤•扩增产物的分析和验证•扩增过程中的问题和解决方法2.1.3 基因分析•电泳分离和鉴定基因•序列分析和比对•表达分析和功能验证2.2 实验室安全2.2.1 个人防护•实验室服装和装备的选择和使用•实验操作中的安全措施和技巧•意外伤害的处理和紧急情况的应对2.2.2 生物安全•实验室生物安全的概念和原则•生物安全风险的评估和管理•生物安全实验室的设计和操作2.2.3 化学安全•化学品的分类和标识•化学品的储存和使用•化学品泄漏的处理和紧急情况的应对3. 课程安排本课程为期两天,每天分为理论和实践两部分•课程介绍和理论讲解(2小时)•基因提取和纯化的实验原理和方法(1小时)•基因提取和纯化的实验操作(4小时)•基因扩增的原理和操作步骤(1小时)•PCR实验操作(4小时)•基因分析的方法和技巧(1小时)•实验室安全的实践操作和演练(4小时)4. 课程目标通过本课程的学习,研究人员将能够:•理解和掌握基因实验的基本操作步骤和方法•识别和解决实验过程中的问题•遵守实验室安全的原则和实践•设计和执行安全的基因实验5. 课程费用本课程的费用为人民币2000元/人费用包括课程资料、实验材料和午餐住宿和交通费用自理6. 报名方式请将报名表格发送至以下邮箱:eml:******************请在邮件标题中注明“基因实验操作与安全知识的培训课程报名”7. 课程日期和地点课程日期:2023年4月10日至11日课程地点:XX大学生命科学学院实验室我们期待您的参与,共同学习基因实验操作与安全知识,提升实验室研究的质量和安全性1. 课程概述基因实验操作与安全知识的培训课程主要目的是为研究人员提供全面的基因实验技能和实验室安全管理知识本课程将深入介绍基因实验的各个环节,包括基因的提取、纯化、扩增和分析,同时强调实验室安全的重要性,涵盖个人防护、生物安全和化学安全等方面2. 课程内容2.1 基因实验技术2.1.1 基因提取与纯化•实验原理与方法•实验步骤与操作技巧•实验结果分析与解读2.1.2 基因扩增技术•PCR基本原理与操作步骤•扩增产物的分析与验证•常见问题与解决方案2.1.3 基因分析技术•电泳分离与鉴定基因•序列比对与分析•基因表达与功能验证2.2 实验室安全管理2.2.1 个人防护•实验室服装与装备的选择与使用•实验操作中的安全措施与技巧•意外伤害的处理与紧急情况的应对2.2.2 生物安全管理•实验室生物安全概念与原则•生物安全风险评估与管理•生物安全实验室设计与操作2.2.3 化学安全管理•化学品分类与标识•化学品储存与使用•化学品泄漏处理与紧急情况应对3. 课程安排本课程共计两天,每天包含理论与实践两部分内容•课程背景与理论讲解(2小时)•基因提取与纯化的实验原理与方法(1小时)•基因提取与纯化的实验操作(4小时)•基因扩增技术的原理与操作步骤(1小时)•PCR实验操作(4小时)•基因分析技术的方法与技巧(1小时)•实验室安全管理的实践操作与演练(4小时)4. 课程目标通过本课程的学习,研究人员将能够:•掌握基因实验的基本操作步骤与方法•解决实验过程中可能遇到的问题•遵循实验室安全原则与实践•设计并执行安全的基因实验5. 课程费用本课程费用为人民币2500元/人费用包括课程资料、实验材料、午餐及茶歇住宿与交通费用需自理6. 报名方式请将报名表格发送至以下邮箱:eml:******************请在邮件标题中注明“基因实验操作与安全知识的培训课程报名”7. 课程日期与地点课程日期:2023年5月15日至16日课程地点:YY大学生物科学与技术学院实验室我们期待您的参与,共同学习基因实验操作与安全知识,提高实验室研究的质量和安全性应用场合1.科研机构:适用于生物学、遗传学、医学等领域的研究人员,提高他们在基因实验操作中的专业技能和安全意识2.高等教育机构:针对生命科学、生物技术、医学等相关专业的本科生、研究生和教师,强化实验教学质量和安全规范3.制药企业:针对药物研发、生物技术等部门的员工,提升他们在基因实验操作中的技术水平和安全意识,以保证研发过程的安全性和有效性4.医疗机构:适用于从事基因检测、精准医疗等工作的医疗人员,加强他们在实际操作中的安全防护能力5.政府部门:针对从事生物安全和实验室管理的工作人员,提高他们在实验室安全监管方面的专业知识和实践能力注意事项1.严格遵循实验室安全规范:在实验操作过程中,必须遵守实验室安全规范,穿戴适当的个人防护装备,如实验室服装、手套、护目镜等2.充分准备和培训:参与培训的人员应在课程开始前熟悉基本的实验原理和操作流程,确保能够安全、准确地进行实验3.操作过程中的注意事项:–在进行基因提取、扩增和分析等实验操作时,应严格按照实验步骤和操作规程进行,避免人为错误–在处理危险化学品时,应遵循化学安全操作规程,防止化学品的泄漏和污染–在使用实验室设备时,应先了解设备的使用方法和操作规程,确保设备安全运行4.紧急情况应对:研究人员应熟悉紧急情况的应对措施,如发生化学品泄漏、生物安全风险等,能够迅速采取措施,降低风险5.生物安全和伦理考虑:在处理基因样本时,应遵守生物安全规定,防止病原体的传播和实验室感染同时,还要注意保护个人隐私和伦理问题6.持续学习和更新知识:基因实验操作和安全知识是不断发展的,研究人员应定期参加相关培训和研讨会,更新自己的知识和技能7.实验室环境管理:保持实验室的清洁和有序,合理布局实验区域,确保实验环境的安全生产条件8.记录和反馈:在实验过程中,应详细记录实验操作和结果,对于实验中出现的问题和异常情况,应及时反馈给导师或实验室负责人,共同分析和解决9.合规性和资质认证:参与培训的人员应具备相应的资质和合规性要求,如必要时需取得实验室安全操作证书10.实践与理论相结合:培训课程应注重实践操作与理论知识的相结合,通过实际操作演练,提高研究人员的安全操作技能和应急处理能力通过以上注意事项的遵循和应用场合的准确运用,可以确保基因实验操作与安全知识的培训课程能够有效地提升研究人员的安全意识和实验技能,从而保障实验室研究的质量和安全性。

【检验】植物及其产品转基因成份检测抽样及制样方法编制说明

【检验】植物及其产品转基因成份检测抽样及制样方法编制说明

【关键字】检验中华人民共和国出入境检验检疫行业标准植物及其产品转基因成份检测抽样和制样方法修订编制说明任务来源和工作情况根据国家认证认可监督管理委员会标准制(修)订计划(编号2010B207),由中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、国家质检总局动植物检疫实验所、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局共同负责中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1194-2003《植物及其产品转基因成份检测抽样和制样方法》的修订工作。

修订该标准是国家转基因重大专项课题《转基因生物抽样和精准检测技术》(课题编号2008ZX08012-001)的研究内容之一。

本标准修订工作组引用和参照了抽样检验国家标准系列中的部分标准、数据的统计处理和解释国家标准系列中的部分标准,系统研究了国内外相关标准和文献,针对性地研究了转基因产品检测的特点,总结SN/T1194-2003标准实施7年来的经验,按GB/T 1.1-2000《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则》的要求完成了修订工作。

修订本标准的目的和意义近年来,转基因植物培育取得突破,推出了一批新品种,在改善农作物品质、提高产量方面发挥了巨大作用。

然而,人们对转基因产品的安全性存在着很多的争论。

欧盟和一些国家相继出台了转基因产品管理法规,我国也实施《农业转基因生物安全管理条例》等管理办法。

转基因产品的检测是这些旨在保护生物和生态安全、维护消费者权益、促进贸易和经济健康发展的法规和政策的基本依据,其标准化将为制订、实施和改进这些法规和政策提供有力保证。

抽样和制样工作是检测工作的重要部分和基本前提,它的质量决定了检测结果的准确度。

如果不能得到具有代表性的样品,无论进行多么细致和精密的检测,其结果都无法表征总体的性质。

制订合理和可行的抽样和制样标准以获取具有代表性的样品,对规范转基因产品检测工作,保证检测质量和提高检测结果的可信度具有重要意义。

转基因产品的发展历史较短,许多问题都有待解决,抽样和样品制备方法也是该领域的重要问题。

检测转基因实验报告(3篇)

检测转基因实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过分子生物学技术检测转基因烟草植株中目标基因的整合和表达情况,验证转基因植株的遗传稳定性,为后续的转基因烟草的研究和应用提供科学依据。

二、实验材料1. 转基因烟草植株:含有目标基因的烟草再生植株。

2. 实验试剂:DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA分子量标准、限制性内切酶、连接酶、T载体、感受态细胞、质粒提取试剂盒等。

3. 实验仪器:PCR仪、凝胶成像系统、离心机、电泳仪、显微镜等。

三、实验方法1. DNA提取- 将转基因烟草植株的叶片剪成小块,使用DNA提取试剂盒提取总DNA。

2. PCR扩增- 设计特异性引物,针对目标基因进行PCR扩增。

- 将提取的DNA作为模板,进行PCR扩增。

3. 电泳检测- 将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察扩增条带。

4. 测序验证- 对扩增的特异性条带进行测序,验证其序列与目标基因的一致性。

5. Southern blot检测- 使用限制性内切酶酶切转基因烟草植株DNA和野生型烟草DNA。

- 将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,转移至硝酸纤维素膜上。

- 使用放射性同位素标记的目标基因探针进行杂交。

- 显影后观察杂交信号。

6. Northern blot检测- 提取转基因烟草植株RNA,进行反转录PCR,扩增目标基因mRNA。

- 将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,转移至硝酸纤维素膜上。

- 使用放射性同位素标记的目标基因探针进行杂交。

- 显影后观察杂交信号。

四、实验结果1. PCR扩增- 转基因烟草植株DNA的PCR产物在预期位置出现特异性条带,而野生型烟草DNA没有扩增产物。

2. 测序验证- 测序结果显示,扩增产物序列与目标基因序列一致。

3. Southern blot检测- 转基因烟草植株DNA的酶切产物与探针杂交后,在预期位置出现杂交信号,而野生型烟草DNA没有杂交信号。

4. Northern blot检测- 转基因烟草植株RNA的RT-PCR产物与探针杂交后,在预期位置出现杂交信号,而野生型烟草RNA没有杂交信号。

转基因食品安全检测

转基因食品安全检测

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3 转基因食品对生态的影响
转基因食品的重要原料之一是转基因农作物。 基因可通过杂交途径在生物群体中传播。转基因农作物的花粉与近缘种属的植物杂交,将基因转移到非转基因植物上。 转基因农作物在生产过程中,种子通过运输或昆虫、鸟类、野生动物携带等途径扩散到新的生态环境中,繁殖或将基因转移到其它植物上。
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GMO Food -2010
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4.2 加强转基因食品的安全检测
因此,应加强转基因食品安全检测方法的研究,并对可能的各个环节进行详细监督和管理。
4.2 加强转基因食品的安全检测
然而,转基因食品的生产需要对转基因生物进行加工,在加工过程中可除去DNA成份。
如含有除草剂基因的大豆加工出的的豆油经检测,不含目的基因DNA,而未精炼的豆油里仅有微量蛋白质。
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2.1 转基因食品是保障食品安全的重要环节
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GMO Food -2010
2 转基因食品的安全性
ห้องสมุดไป่ตู้
2.2 转基因食品的食用安全性
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转基因食品对人体健康的影响
一般来说,转基因食品是安全的,但如果长期食用转基因食品,对人体健康会产生那些不良影响呢?
GMO Food -2010
首先,转基因食品中潜在的过敏原对人体的影响。 食品过敏是指食品中含有某些能引起人产生不适反应的抗原分子,这些抗原分子主要为蛋白质,具有对T-细胞和B-细胞的识别区,可以诱导人免疫系统产生免疫球蛋白E抗体(IgE)。
转基因食品中还含有盐、油、糖和其他蛋白质,从而增加了食品中检测转基因成份的难度。
GMO Food -2010
我国1993年发布《基因工程安全管理办法》。

食品中转基因成分的快速检测技术

食品中转基因成分的快速检测技术

食品中转基因成分的快速检测技术食品作为人类日常生活中必不可少的重要物质,其安全问题一直备受关注。

为了确保食品的安全性和质量,许多国家都制定了严格的法律法规。

其中,关于转基因食品的检测难点较大,因为转基因成分难以被直接观察到。

为了解决这一难题,快速检测转基因食品中转基因成分的方法越来越受到人们的重视和关注。

一、转基因食物简介转基因,即基因工程技术,是指为了改善食品质量、提高作物产量、抗御病虫害等目的而人为对生物的遗传物质进行人工改造。

而转基因食品,也称基因改造食品,是指通过基因工程技术人为改变食材的遗传特性,使得其具有更好的品质、更高的产量或增加耐受病虫害的能力。

转基因食品在全球范围内被广泛种植和使用,例如玉米、大豆、小麦、马铃薯等作物都经过转基因技术改变了其遗传特性。

然而,随着转基因食品的广泛应用,一些人开始关注其安全性问题,有关转基因食品可能带来的健康风险引起了人们的关注。

二、转基因食品的安全性问题转基因食品的安全性问题是指转基因食品对人类健康可能造成的健康风险,这也是制定严格的转基因食品检测标准的重要原因。

转基因食品中会改变食材的遗传特性,可能会引起某些基因的失控,从而出现一些与传统食品不同的物质。

此外,转基因食品中可能存在的抗生素残留和对生态环境的影响等问题也备受关注。

因此,对于转基因食品的检测工作尤为重要。

三、转基因食品的快速检测技术目前,转基因食品的检测主要依靠实验室的手段,这样检测的过程非常复杂,需要耗费大量的时间和资源,以及对食品样品进行提取和处理的技术水平。

因此,快速检测转基因食品中转基因成分的方法越来越受到人们重视。

目前,已经出现了许多快速检测食品中转基因成分的技术。

这些技术大多基于生物技术、化学反应和光学测量等原理。

其中,PCR技术、电化学法技术以及纳米传感器技术等方法都是比较常用的快速检测方法。

(a) PCR技术PCR技术又称聚合酶链反应技术,是一种快速、敏感、简单、可重复的分子生物学技术。

SNT 1816-2013 转基因成分检测 番茄检测方法3976

SNT 1816-2013 转基因成分检测 番茄检测方法3976

转基因成分检测番茄检测方法1范围本标准规定了番茄及其制品中转基因成分常规PCR和实时荧光PCR检测方法。

本标准适用于对转基因番茄及其制品中转基因成分的定性检测。

2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.1 转基因产品检测通用要求和定义GB/T19495.2 转基因产品检测实验室技术要求GB/T19495.3 转基因产品检测核酸提取纯化方法SN/T1194 植物及其产品转基因成分检测抽样和制样方法3术语、定义和缩略语GB/T19495.1界定的术语、定义和缩略语适用于本文件。

4防污染措施检测过程中防止交叉污染的措施应符合GB/T19495.2中的规定。

5原理样品经过提取DNA后,针对转基因番茄内、外源基因的基因序列设计引物和探针,通过常规PCR或实时荧光PCR,检测其中是否含有各种内、外源基因,达到对番茄及其制品中有无转基因成分的判定。

6仪器和用具6.1仪器实时荧光PCR仪、基因扩增仪、电泳仪、电泳槽、超净工作台、电子天平(感量1mg)、凝胶成像仪、全温水浴、高速冷冻离心机、高压灭菌锅、制冰机、涡旋振荡器、纯水仪、低温冰箱、核酸蛋白分析仪、微型离心机、微波炉。

6.2用具微量可调移液器及配套枪头(0.1μL~2μL,2.5μL~10μL,2μL~20μL,10μL~100μL,50μL~200μL,100μL~1000μL)、PCR反应管、离心管(1.5mL和2mL)、研体。

6.3试剂除另有规定外,所有试剂均为分析纯或生化试剂,实验用水应符合GB/T6682中一级水的规格。

6.3.1样品提取试剂无水乙醇,异丙醇,三氯甲烷,异戊醇,乙酸钠,蛋白酶K,TE缓冲液:Tris 1.21g/L、Na-EDTA 0.372g/L,pH 8.0;CTAB裂解液:CTAB 20g/L、氯化钠81.9g/L,2-EDTA 7.5g/L,pH 8.0,高压灭菌,使用前加人终浓度为2%的β-Tris 12.1g/L、Na2巯基乙醇;RNase A:2mg/L。

转基因成分 (2)

转基因成分 (2)

转基因成分简介转基因成分是指通过基因工程技术将外源基因导入到目标生物体中,使其具有新的特性或功能。

转基因成分广泛应用于农作物育种、药物生产和工业产品制造等领域。

本文将介绍转基因成分的定义、应用、风险评估和监管等方面内容。

定义转基因成分是指将来自不同物种或同一物种的不同个体的基因导入到目标生物体中所得到的新组合。

这些基因可以来自动植物、动物、微生物等不同源,被添加到目标生物体的基因组中,并且在其后代中得以遗传。

转基因成分的引入可以使目标生物体具有新的性状或功能。

应用1.农作物育种:转基因成分广泛应用于农作物育种领域。

通过引入抗虫、抗病、耐旱、抗草料性等基因,可以使作物具有更强的抗逆能力和产量。

例如,转基因水稻引入了抗虫性基因Bt,使其能够抵抗水稻虫害。

2.药物生产:转基因成分在药物生产中也发挥着重要的作用。

通过将目标基因导入到细菌或酵母等微生物中,可以大量生产特定的蛋白质或药物。

例如,通过转基因技术,人类胰岛素可以在大肠杆菌中生产,用于治疗糖尿病。

3.工业产品制造:转基因成分也被应用于工业产品制造领域。

通过导入具有特殊功能的基因,可以生产出具有特殊属性的材料和化学品。

例如,通过转基因技术,可以生产出具有特殊性能的纤维素材料,用于制造强度更高的纸张和纺织品。

风险评估转基因成分虽然在农作物育种、药物生产和工业产品制造中获得了广泛应用,但其安全性仍然是一个需要关注的问题。

为了评估转基因成分的潜在风险,需要进行严格的风险评估。

1.潜在风险评估:在引入转基因成分之前,需要进行潜在风险评估。

这包括评估转基因成分对目标生物体的影响、转基因成分在环境中的传播和稳定性等因素。

通过实验和观察,可以评估转基因成分对生态系统的影响和潜在的生物安全风险。

2.食品安全评估:对于转基因食品,需要进行食品安全评估。

这包括评估转基因成分对人体健康的影响、转基因成分与其他物质之间的相互作用等因素。

通过动物实验和人体试验,可以评估转基因成分对人体的潜在风险和安全性。

转基因植物(农产品)中转基因成分的PCR检测

转基因植物(农产品)中转基因成分的PCR检测

转基因植物(农产品)中转基因成分的PCR检测芦春斌【摘要】转基因(植物)食品的安全性是科学界及公众普遍关心的问题.在转基因植物研究中,根据转基因植物所带有的转基因成分的DNA序列,设计引物对耐草铵膦转基因植物中转入的转基因成分进行了PCR分析,结果表明,采用PCR扩增对外源基因和遗传标记基因的分析方法灵敏、准确.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2006(025)001【总页数】3页(P1-3)【关键词】草铵膦耐性;转基因成分;PCR分析【作者】芦春斌【作者单位】暨南大学生殖免疫中心,广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】Q94转基因植物技术是将抗除草剂基因、抗病毒基因、抗虫基因等各种优良性状基因等遗传物质片段,导入植物中使其具备新的生物性状[1~5]的技术。

目前国内外已经得到100种以上转基因植物,其中玉米、大豆和棉花等转基因作物已经在世界各地大面积种植,其推广及种植对世界和我国的农业已做出很大的贡献。

长期以来,国际上都存在着转基因植物对人体和环境安全的争论。

欧美、日本、澳大利亚、俄罗斯、新加坡等已经设立专门机构,对每一项转基因的田间试验和成果发放进行逐个的审批,以立法或其它形式要求对转基因产品加贴标签,供消费者购买时参考,或以其它方式限制转基因产品的进口。

而我国检验检疫系统由于没有对转基因产品进行检测的统一标准,许多国外转基因产品没有检测直接进入我国,严重危害我国食品安全问题,也侵犯了公众的知情权和选择权。

近年来我国的大豆进口数量逐年增加,从2000年进口大豆1 040万t激增至2003年的2 000万t,而国产大豆产量约1 600万t。

根据美国有关的数据显示,销往中国的大豆占其总销售额的三分之一以上,而70%的美国大豆是转基因大豆。

转基因大豆大量进口直接影响我国的农产品生产发展,也影响国家经济利益和食品安全。

国务院于2001年5月发布了《农业转基因生物安全管理条例》,规定了在中国境内销售列入农业转基因生物目录的农业转基因生物,应当有明显的标识。

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主要内容
本标准方法规定了转基因产品检测的核酸定 性PCR方法,适用于种子、饲料、食品和环境 样品中转基因成分的定性检测。从以下五个方 面进行介绍: A.方法简介 B.检测目标物 C.检测体系 D.结果判定 E.结果表述
A.方法简介
• 普通PCR+电泳方法 原理 聚合酶链式反应(PCR)在反应缓冲液中,脱氧 核糖核酸、寡核苷酸引物在DNA聚合酶的作用下经循
• PVP法提取DNA、 CTAB法提取DNA
利用高浓度去垢剂在高温(55~65℃)条件下裂解细胞, 蛋白变性,释放出核酸,然后采用提高盐浓度及降低温度 的方法使蛋白质及多糖杂质沉 淀,得到水相中的核酸。
• 硅土法提取DNA
利用硅土对核酸的吸附作用,分离核酸。
转基因产品的检测策略 Strategy for GMO Detection
1.核酸提取纯化方法 2.定性检测方法 3.定量检测方法 4.可能产生误差的原因及消除 5.案例分析
1.核酸提取纯化方法
使用标准方法 GB/T 19495.3-2004 转基因产品检测 核酸提取纯化方法
核酸提取纯化方法
A B C 酚-氯仿法提取DNA PVP法提取DNA
(Polyvinylpyrrolidone,聚乙烯吡咯烷酮)
CTAB法提取DNA
(Cetyltrimethyle Ammonium Bromide,十六烷基三乙基溴化 铵)
D E •
硅土法提取DNA 胍-氯仿法提取DNA 建议使用商业试剂盒
核酸提取纯化方法
• 酚-氯仿法提取DNA、胍-氯仿法提取DNA
利用酚和胍使蛋白质变性,释放出核酸,同时抑制了DNase 的降解作用,保护核酸。 利用氯仿加速有机相与液相分层。
2
3 4 5 6 7 8
GB/T19495.2-2004
GB/T19495.3-2004 GB/T19495.4-2004 GB/T 19495.5-2004 GB/T19495.6-2004 GB/T19495.7-2004 GB/T19495.8-2004
二、以核酸为基础的检测方法介绍
主要内容
启动子
Promoter
增强子
Enhancer
基因Gene 转基因 transformation
终止子 Terminator
筛选 检测 Screen detection
筛选 检测 Screen detection
植物基因组Recipient genome
重组产生GMO
Recombinant Plant
第一批标识管理的转基因生物
(5大类17种)
大豆 玉米
油菜
棉花 番茄
种子,豆粒,豆粉,豆油, 豆粕 种子,玉米粒,玉米粉,玉 米油,玉米面 种子,油菜籽,菜籽油 种子 种子,新鲜番茄,番茄酱
转基因检测国家标准
序 号
1 标准号 GB/T19495.1-2004 国家标准名称 转基因产品检测 通用要求和定义 转基因产品检测 实验室技术要求 转基因产品检测 核酸提取纯化方法 转基因产品检测 核酸定性PCR检测方法 转基因产品检测 核酸定量PCR检测方法 转基因产品检测 基因芯片检测方法 转基因产品检测 抽样和制样方法 转基因产品检测 蛋白泳方法依据DNA分子 长度的不同加以分离。
A.方法简介
• 缺点:
作物种属检测 Taxon detection
Plant genome
Plant genome
品系特异性检测 Event Specific Detection
结构特异性检测 Construct Specific Detection
使用标准方法
GB/T 19495.4-2004
转基因产品检测 核酸定性PCR检测方法
2 0 0 9 年 不 同 国 家 转 基 因 作 物 种 植 面 积
1996年到2009年美国转基因作物的种植百分率
巴西、加拿大、中国、印度 转基因作物占作物种植面积的比例
从2008年的65%增加到2009年的71% 从2008年的86%增加到2009年的93%
棉花种植量减少,但仍为68%
从08年的80%增长到09年的87%
种植国家不断增多
25 25 21 20 13 12 9 10 6 17 22 23
商业化种植: 美洲、亚洲、 大洋洲、 欧洲、非洲 25国
15
5
0 1996 1998 1999 2000 2004 2005 2006 2008 2009
9
转基因作物种植比例
油 菜, 5 棉 花, 13
大 豆, 57 玉 米, 25
质检系统实验室技术能力培训教材
食品中转基因成分、真伪鉴别和过敏原及其成分检测
主要内容
• 食品中转基因成分检测 • 食品中过敏原及其成分检测 • 食品真伪鉴别(动物源性成分检测)
第一部分 食品中转基因成分检测
一、全球转基因作物种植情况 和有关法规介绍
全球转基因作物种植面积(1996-2009)
智利、挪威
韩国、马来西亚
日本、中国台湾、泰国
中国香港、美国、加拿大、阿根廷
自愿性标 识
5%
《农业转基因生物安全管理条例》
• 2001年5月23日,国务院发 布了第304号令《农业转基 因生物安全管理条例》
《农业转基因生物标识管理办法》 2002年颁布实施
标识的标注方法
转基因动植物(种子、种畜禽、水产苗木)和微生物, 直接标注“转基因××”。 转基因农产品的直接加工品,标准为“转基因XX加工品 (制成品)”或“加工原料为转基因XX” 用农业转基因生物或用含有农业转基因生物成份的产品 加工制成的产品,但最终销售产品中已不再含有或检测 不出转基因成分的产品标注为“本产品为转基因XX加工 制成, 但本产品中已不再含有转基因成分”或“本产品 加工原料中、 有转基因XX,但本产品中已经不再含有转 基因成分”
2009年
10
非转基因油菜
喷施草甘膦前
抗草甘膦油菜RT73
喷施草甘膦后
中国培育的转基因抗虫水稻Bt63介绍
母本对照
Bt63
转基因产品标识制度
标识类 别 标识阈 值
0 0.9% 强制性标 识 1% 2% 3% 5%
国家/地区 中国、印度、菲律宾、印度尼西亚 欧盟、爱尔兰、以色列
澳大利亚、新西兰、巴西、南非、斯洛文尼 亚、克罗地亚、捷克共和国、瑞士、俄罗 斯、沙特阿拉伯
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