纤维素分解菌的筛选公开课优质课件
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土壤中纤维素分解菌的分离剖析ppt课件
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制备菌悬液： 按照本专题课题1的稀释操作方法，将 选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大 倍数至106。 涂布平板： 将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1 mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液 涂布均匀，在30 ℃倒置培养，至菌落长出。 每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对 照。刚果红染色的具体操作步骤参照课本［资 料三］。
选择培养
梯度稀释
将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上
挑选单菌落
发酵培养
15
本课题知识小结:
16
根据用途分 选择培养基——在培养基中加入某种化学
物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所 需要的微生物的生长
鉴别培养基——在培养基中加入某种指示
剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 。 例如：伊红和美蓝,和大肠杆菌的代谢产物结 合,使菌落呈黑色（老教材说法：深紫色,带 有金属光泽）, 鉴别大肠杆菌
10
1.本实验的流程与课题2中的实验流程 有哪些异同？
答：本实验流程与课题2的流程的区别如 下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在 以尿素为惟一氮源的选择性培养基上，直接 分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤 维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选 择培养基上。其他步骤基本一致。
11
2.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素 分解菌？
13
5.为什么选择培养能够“浓缩”所需的微 生物？
答：在选择培养的条件下，可以使那些能 够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁 殖，而那些不适应这种营养条件的微生物 的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的 作用。
14
6.学完这个专题后,你能否总结出分离培养微生物 的一般方法?请用流程图表示.
制备菌悬液： 按照本专题课题1的稀释操作方法，将 选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大 倍数至106。 涂布平板： 将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1 mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液 涂布均匀，在30 ℃倒置培养，至菌落长出。 每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对 照。刚果红染色的具体操作步骤参照课本［资 料三］。
选择培养
梯度稀释
将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上
挑选单菌落
发酵培养
15
本课题知识小结:
16
根据用途分 选择培养基——在培养基中加入某种化学
物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所 需要的微生物的生长
鉴别培养基——在培养基中加入某种指示
剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 。 例如：伊红和美蓝,和大肠杆菌的代谢产物结 合,使菌落呈黑色（老教材说法：深紫色,带 有金属光泽）, 鉴别大肠杆菌
10
1.本实验的流程与课题2中的实验流程 有哪些异同？
答：本实验流程与课题2的流程的区别如 下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在 以尿素为惟一氮源的选择性培养基上，直接 分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤 维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选 择培养基上。其他步骤基本一致。
11
2.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素 分解菌？
13
5.为什么选择培养能够“浓缩”所需的微 生物？
答：在选择培养的条件下，可以使那些能 够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁 殖，而那些不适应这种营养条件的微生物 的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的 作用。
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6.学完这个专题后,你能否总结出分离培养微生物 的一般方法?请用流程图表示.
分解纤维素的微生物的分离pptx-2024鲜版
2024/3/27
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真菌类纤维素分解微生物
2024/3/27
木霉属（Trichoderma）
01
能够分泌多种纤维素酶，对纤维素的分解能力强。
青霉属（Penicillium）
02
部分种类具有分解纤维素的能力，产生葡萄糖等单糖。
曲霉属（Aspergillus）
03
一些种类能够分解纤维素，产生有机酸等代谢产物。
控制措施
使用无菌技术，包括无菌操作台、无菌培养基和接种工具；对接种环境进行定期消毒，保持环境清洁 。
2024/3/27
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分离效果不佳的原因分析
2024/3/27
培养基选择不当
可能导致目标微生物无法生长或生长缓慢 。
接种量不足
可能导致目标微生物在培养基上无法形成 可见的菌落。
培养条件不适宜
如温度、湿度、pH值等，可能导致目标 微生物无法生长或生长不良。
选择性培养基的组成
以纤维素为唯一碳源的培 养基，通过添加特定氮源 、无机盐、生长因子等物 质，促进目标微生物的生
长。
2024/3/27
培养条件
在适宜的温度、pH值、氧 气等条件下进行培养，使
目标微生物得以繁殖。
分离原理
利用目标微生物对纤维素 的分解能力，使其在选择 性培养基上形成明显的菌 落，从而与其他微生物区
2024/3/27
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操作步骤详解及注意事项提醒
3. 微生物分离与纯化
采用稀释涂布平板法或划线分离法等方法，将目标微生物从混合菌群中分离出来。
2024/3/27
通过多次划线或稀释涂布，获得纯化的单一菌落。
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操作步骤详解及注意事项提醒
01
土壤中纤维素分解菌的分离上课课件
8,(20分)某化工厂的污水池中, (20分 某化工厂的污水池中, 含有一种有害的, 含有一种有害的,难于降解的 有机化合物A 有机化合物A.研究人员用化 合物A 磷酸盐, 合物A,磷酸盐,镁盐以及微 量元素配制的培养基,成功地 量元素配制的培养基, 筛选到能高效降解化合物A 筛选到能高效降解化合物A的 细菌(目的菌) 细菌(目的菌).实验的主要步 骤如图所示.请分析回答问题: 骤如图所示.请分析回答问题:
3.在接种操作的过程中,不正确的是( C ) .在接种操作的过程中,不正确的是 A.要将接种环灼烧灭菌 . B.取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌 . C.将接种环伸入试管内,先接触长菌多的部位 .将接种环伸入试管内, D.接种后还要将管口灭菌加塞 . 4.高压蒸气灭菌的原理是( B ) .高压蒸气灭菌的原理是 A.高压使细菌 .高压使细菌DNA变性 变性 B.高压使细菌蛋白质凝固变性 . C.高温烫死细菌 . D.高温使细菌DNA变性 .高温使细菌 变性
2.纤维素酶 2.纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶, 纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少 包括三种组分,即C1酶(外切酶),CX酶(内切酶) 包括三种组分, 外切酶) 内切酶) 葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维 和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维 二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖 纤维二糖分解成葡萄糖. 二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖.
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛 (1)培养基中加入化合物 培养基中加入化合物A 培养基. 选 目的菌,这种培养基属于 选择性 培养基.
某化工厂的污水池中,含有一 某化工厂的污水池中, 种有害的, 种有害的,难于降解的有机化 合物A 研究人员用化合物A 合物A.研究人员用化合物A, 磷酸盐, 磷酸盐,镁盐以及微量元素配 制的培养基, 制的培养基,成功地筛选到能 高效降解化合物A的细菌( 高效降解化合物A的细菌(目的 菌).实验的主要步骤如图所 请分析回答问题:( :(北京 示.请分析回答问题:(北京 卷)
分解纤维素微生物的分离(40)PPT课件
倒平板
2.原理：
红色
素分解菌
.
刚果 纤维
5
三、实验设计 1.实验流程：
纤维素
纤维素
梯度稀释
.
6
选择培养基 涂布平板
透明圈
.
7
2.课题延伸： (1)为确定透明圈内的菌落是否是纤维素分解菌，需要进行发 酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有_液__体__发__酵__和 _固__体__发__酵__两种。 (2)纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解_滤__纸__等纤维 素后所产生的_葡__萄__糖__进行定量的测定。
200 mL培养基加入1 mL的 比例加入CR溶液→混匀→
1 mol/L的NaCl溶液 1 5mi n后 倒平板→接种后培养→出
倒掉NaCl溶液→出现透明圈
现透明圈
.
18
方法一
方法二
先培养微生物，再加入刚果红
区别
倒平板时就加入刚果红
进行颜色反应
显示出的颜色反应基本上是纤 操作简便，不存在菌落混
C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定
D.对纤维素分解菌进行定量测定
【解析】选B。得到鉴别培养基上形成的透明圈中的菌落只是
对分解纤维素的微生物进行初步筛选，为确定得到的是纤维素
分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验，并且进行纤维素酶
的测定。测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产
.
14
【解析】选A。纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三 种组分——C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶和CX酶将纤 维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解为葡萄糖。
.
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【变式训练】纤维素酶的测定方法一般是( )
2.原理：
红色
素分解菌
.
刚果 纤维
5
三、实验设计 1.实验流程：
纤维素
纤维素
梯度稀释
.
6
选择培养基 涂布平板
透明圈
.
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2.课题延伸： (1)为确定透明圈内的菌落是否是纤维素分解菌，需要进行发 酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有_液__体__发__酵__和 _固__体__发__酵__两种。 (2)纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解_滤__纸__等纤维 素后所产生的_葡__萄__糖__进行定量的测定。
200 mL培养基加入1 mL的 比例加入CR溶液→混匀→
1 mol/L的NaCl溶液 1 5mi n后 倒平板→接种后培养→出
倒掉NaCl溶液→出现透明圈
现透明圈
.
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方法一
方法二
先培养微生物，再加入刚果红
区别
倒平板时就加入刚果红
进行颜色反应
显示出的颜色反应基本上是纤 操作简便，不存在菌落混
C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定
D.对纤维素分解菌进行定量测定
【解析】选B。得到鉴别培养基上形成的透明圈中的菌落只是
对分解纤维素的微生物进行初步筛选，为确定得到的是纤维素
分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验，并且进行纤维素酶
的测定。测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产
.
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【解析】选A。纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三 种组分——C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶和CX酶将纤 维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解为葡萄糖。
.
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【变式训练】纤维素酶的测定方法一般是( )
高中生物23分解纤维素的微生物的分离ppt课件
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5.通过分离分解纤维素的微生物实验,对分解纤维素的微生物进行了初 步的筛选,这只是分离提纯的第一步。对分离的菌种作进一步鉴定还需 要进行( )。 A.发酵产纤维素酶的实验 B.提取纤维二糖的实验 C.浓缩纤维素分解菌的实验 D.提取葡萄糖的实验 解析:对纤维素分解菌的鉴定,常用的方法是对分离的菌种进行发酵产 纤维素酶的实验。 答案:A
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3.将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深? 提示:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人 工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约 10 cm 的 腐殖土壤中。 4.阅读教材第 29 页旁栏中的纤维素分解菌选择培养基的成分回答 下列问题。 (1)旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么? 提示:是液体培养基,因为配方中无凝固剂。 (2)这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果有,是如何进行选 择的? 提示:有选择作用,本配方中的唯一碳源是纤维素粉,所以只有能分 解纤维素的微生物才可以大量繁殖。
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(2)自然界中的纤维素是如何被利用的? 提示:自然界中的纤维素主要被土壤中的微生物分解利用。其余的 一部分被草食动物取食利用(实质上也离不开微生物的分解作用),一部 分作为能源被人类燃烧利用。
二、实验设计
1.实验流程:土壤取样→选择培养(来自步可省略)→梯度稀释→将样 品涂布到鉴别纤维素分解菌的选择培养基上→挑选产生透明圈的菌落。
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2.在加入刚果红的纤维素分解菌培养基中会出现透明圈,产生的透明圈 是( )。 A.刚果红与纤维素形成的复合物 B.刚果红与纤维二糖形成的复合物 C.纤维素分解后形成的葡萄糖导致的 D.以纤维素分解菌为中心形成的 解析:当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素复合物就无法形成, 培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 答案:D
5.通过分离分解纤维素的微生物实验,对分解纤维素的微生物进行了初 步的筛选,这只是分离提纯的第一步。对分离的菌种作进一步鉴定还需 要进行( )。 A.发酵产纤维素酶的实验 B.提取纤维二糖的实验 C.浓缩纤维素分解菌的实验 D.提取葡萄糖的实验 解析:对纤维素分解菌的鉴定,常用的方法是对分离的菌种进行发酵产 纤维素酶的实验。 答案:A
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3.将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深? 提示:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人 工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约 10 cm 的 腐殖土壤中。 4.阅读教材第 29 页旁栏中的纤维素分解菌选择培养基的成分回答 下列问题。 (1)旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么? 提示:是液体培养基,因为配方中无凝固剂。 (2)这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果有,是如何进行选 择的? 提示:有选择作用,本配方中的唯一碳源是纤维素粉,所以只有能分 解纤维素的微生物才可以大量繁殖。
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(2)自然界中的纤维素是如何被利用的? 提示:自然界中的纤维素主要被土壤中的微生物分解利用。其余的 一部分被草食动物取食利用(实质上也离不开微生物的分解作用),一部 分作为能源被人类燃烧利用。
二、实验设计
1.实验流程:土壤取样→选择培养(来自步可省略)→梯度稀释→将样 品涂布到鉴别纤维素分解菌的选择培养基上→挑选产生透明圈的菌落。
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2.在加入刚果红的纤维素分解菌培养基中会出现透明圈,产生的透明圈 是( )。 A.刚果红与纤维素形成的复合物 B.刚果红与纤维二糖形成的复合物 C.纤维素分解后形成的葡萄糖导致的 D.以纤维素分解菌为中心形成的 解析:当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素复合物就无法形成, 培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 答案:D
分解纤维素的微生物的分离知识点ppt精选课件
吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的 选择培养基中，以同样的方法培养到培养液 变混浊。
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6
刚果红染色法
方法一：先培养微生物，再加 入刚果红进行颜色反应
方法二：在倒平板时就加入刚 菌，还需要进行发__酵__产__纤__维__素__酶_ 实验，纤维素酶的发酵方法有 __液__体__ 发酵和__固__体__ 发酵。纤维素 酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸
_______________________________________________
__________________________. ④
_______________________________________________
___________________________. (2)预期实验结果结论：
课题3
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1
纤维素酶：
纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至 少包括三种组分，即CX酶、 C1酶和葡萄 糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二 糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
纤维素
C1酶 Cx酶
纤维二糖
葡萄糖 葡萄糖 苷酶
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2
4、纤维素酶活性的测定实验：
在2支20mL的试管中， 分别放入1×6cm的滤纸条， 再分别加入pH为4.8、物质 的量浓度为0.1mol/L的醋酸醋酸钠缓冲液10mL、11mL。 在加入10mL缓冲液的试管 中加入1mL纤维素酶 （70~80U/mL）。将二支试 管固定在50mL的锥形瓶中， 在摇床上以140r/min的转速 振荡反应1h，观察结果。
是否培养所有微生物的培养基中都需要 加生长因子？
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10
1、碳源
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6
刚果红染色法
方法一：先培养微生物，再加 入刚果红进行颜色反应
方法二：在倒平板时就加入刚 菌，还需要进行发__酵__产__纤__维__素__酶_ 实验，纤维素酶的发酵方法有 __液__体__ 发酵和__固__体__ 发酵。纤维素 酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸
_______________________________________________
__________________________. ④
_______________________________________________
___________________________. (2)预期实验结果结论：
课题3
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1
纤维素酶：
纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至 少包括三种组分，即CX酶、 C1酶和葡萄 糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二 糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
纤维素
C1酶 Cx酶
纤维二糖
葡萄糖 葡萄糖 苷酶
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4、纤维素酶活性的测定实验：
在2支20mL的试管中， 分别放入1×6cm的滤纸条， 再分别加入pH为4.8、物质 的量浓度为0.1mol/L的醋酸醋酸钠缓冲液10mL、11mL。 在加入10mL缓冲液的试管 中加入1mL纤维素酶 （70~80U/mL）。将二支试 管固定在50mL的锥形瓶中， 在摇床上以140r/min的转速 振荡反应1h，观察结果。
是否培养所有微生物的培养基中都需要 加生长因子？
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1、碳源
高中生物分解纤维素的微生物的分离优质示范课公开课一等奖课件省赛课获奖课件
2、其原理是：刚果红能够与纤维素形成 __红__色__复__合__物__，当纤维素被__纤__维__素__酶_分解后，
红色复合物无法形成，出现以_纤__维__素__分__解__菌__ 为中心的_透__明__圈___，能够通过与否产生透明圈 ___________________________ 来筛选纤维素分 解菌。
纤维素生物燃料： 最有但愿替代石油能源
科学家正致力于研究，如何将 农业废弃物、木材及生长更为快 速的草本植物，转化为种类繁多 的生物燃料（甚至是航空燃油）。
一、基础知识
1.纤维素
纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高 分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。
土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把 纤维素分解为葡萄糖，后再运用。
A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则阐明已筛
选出了纤维素分解菌
(三)、实验设计
土壤 取样
选择 培养
梯度 稀释
将样品涂 布到鉴别 培养基
挑选 菌落
什么 样的 环境
① 培养的目的? ②选择培养基的 特点?
纤维素：
棉花是自然 界中纤维素 含量最高的 天然产物；
纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植 物每年产生的纤维素超出70亿吨；分布植物的 根、茎、叶中；
1、在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素 的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素， 而人没有分解纤维素的能力。
2、农作物秸秆：米秸、麦秸、稻草、草、木屑 等富 含大量的纤维素，被运用的机会极少、效率低；
1U表达1个酶活力单位，是指在温度为25℃，其它反映条件， 如pH等，均为最适的状况下，在1min内转化1mmol的底物所 需的酶量。
红色复合物无法形成，出现以_纤__维__素__分__解__菌__ 为中心的_透__明__圈___，能够通过与否产生透明圈 ___________________________ 来筛选纤维素分 解菌。
纤维素生物燃料： 最有但愿替代石油能源
科学家正致力于研究，如何将 农业废弃物、木材及生长更为快 速的草本植物，转化为种类繁多 的生物燃料（甚至是航空燃油）。
一、基础知识
1.纤维素
纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高 分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。
土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把 纤维素分解为葡萄糖，后再运用。
A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则阐明已筛
选出了纤维素分解菌
(三)、实验设计
土壤 取样
选择 培养
梯度 稀释
将样品涂 布到鉴别 培养基
挑选 菌落
什么 样的 环境
① 培养的目的? ②选择培养基的 特点?
纤维素：
棉花是自然 界中纤维素 含量最高的 天然产物；
纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植 物每年产生的纤维素超出70亿吨；分布植物的 根、茎、叶中；
1、在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素 的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素， 而人没有分解纤维素的能力。
2、农作物秸秆：米秸、麦秸、稻草、草、木屑 等富 含大量的纤维素，被运用的机会极少、效率低；
1U表达1个酶活力单位，是指在温度为25℃，其它反映条件， 如pH等，均为最适的状况下，在1min内转化1mmol的底物所 需的酶量。
人教版 选修1 分解纤维素的微生物的分离 课件 (38张)
解析 纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三种组分——C1酶、CX酶和葡萄 糖苷酶，其中C1酶和CX酶将纤维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解为 葡萄糖。
(1)分解纤维素的细菌也能在不含纤维素但富含其他有机物的环境中生存。纤维素分 解菌分解纤维素只是为了利用纤维素作为碳源，其他有机物若可提供碳源，也可以 生存。 (2)纤维素酶一般不在微生物细胞内起作用。多数细胞不能直接吸收纤维素，一般来 说，纤维素酶都是分泌到细胞外分解纤维素的。
操作简单，不存在菌落混杂
缺点
操作繁琐，刚果红会使菌落之 有些微生物会降解刚果红，形成
间发生混杂
透明圈，与纤维素分解菌相混
学以致用 ·链接典例拓展
3.分析下表培养基的配方，请回答下面的问题：
纤维素分解菌的选择培养基
组分
含量
纤维素粉
5g
NaNO3 Na2HPO4·7H2O
KH2PO4 MgSO4·7H2O
方法一需要用NaCl溶液洗去培养基表面浮色后，再进行观察，方法二不需要。
(2)原理 纤维素＋刚果红→红色复合物
↓纤维素酶 纤维二糖和葡萄糖，不能和刚果红形成红色复合物
↓ 以 纤维素分解菌 为中心的透明圈
深化探究 ·解决问题疑难
1.如何设计实验证明纤维素酶能分解纤维素？ 提示 设计对照实验。取两支试管，分别加入等量的滤纸条和缓冲液，在一支试管 中加入纤维素酶，另一支试管中加入等量蒸馏水，振荡反应一段时间后，可观察到 加入纤维素酶的试管中滤纸条被水解，而加入蒸馏水的试管中滤纸条没有变化。 2.两种刚果红染色法中哪种染色法更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌？ 提示 方法一更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌。即先培养微生物，再加入刚果 红进行颜色反应，所显示的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二中有些 微生物具有降解色素的能力，它们在生长过程中会降解刚果红，也会使培养基上形 成透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
(1)分解纤维素的细菌也能在不含纤维素但富含其他有机物的环境中生存。纤维素分 解菌分解纤维素只是为了利用纤维素作为碳源，其他有机物若可提供碳源，也可以 生存。 (2)纤维素酶一般不在微生物细胞内起作用。多数细胞不能直接吸收纤维素，一般来 说，纤维素酶都是分泌到细胞外分解纤维素的。
操作简单，不存在菌落混杂
缺点
操作繁琐，刚果红会使菌落之 有些微生物会降解刚果红，形成
间发生混杂
透明圈，与纤维素分解菌相混
学以致用 ·链接典例拓展
3.分析下表培养基的配方，请回答下面的问题：
纤维素分解菌的选择培养基
组分
含量
纤维素粉
5g
NaNO3 Na2HPO4·7H2O
KH2PO4 MgSO4·7H2O
方法一需要用NaCl溶液洗去培养基表面浮色后，再进行观察，方法二不需要。
(2)原理 纤维素＋刚果红→红色复合物
↓纤维素酶 纤维二糖和葡萄糖，不能和刚果红形成红色复合物
↓ 以 纤维素分解菌 为中心的透明圈
深化探究 ·解决问题疑难
1.如何设计实验证明纤维素酶能分解纤维素？ 提示 设计对照实验。取两支试管，分别加入等量的滤纸条和缓冲液，在一支试管 中加入纤维素酶，另一支试管中加入等量蒸馏水，振荡反应一段时间后，可观察到 加入纤维素酶的试管中滤纸条被水解，而加入蒸馏水的试管中滤纸条没有变化。 2.两种刚果红染色法中哪种染色法更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌？ 提示 方法一更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌。即先培养微生物，再加入刚果 红进行颜色反应，所显示的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二中有些 微生物具有降解色素的能力，它们在生长过程中会降解刚果红，也会使培养基上形 成透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
分解纤维素混合株的筛选PPT
THANK YOU!
涂布到鉴别培养落，一般即为分解纤维素的菌 落。
四、扩大培养
培养基成分分析
培养基组成 纤维素粉 5g
NaNO3 1g
KCl 0.5g Na2HPO4.7H2O1.2g KH2PO40.9g MgSO4.7H2O0.5g
提供主要的营养物质 碳源
氮源、无机盐 无机盐
利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌株的原理：刚果红可以与纤维素形成
红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 纤维素分解菌株的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
二、菌株来源及筛选方法
棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物 木材、作物秸秆等也富含纤维素，木棉秸秆是一种特殊的秸秆，它具有普 通秸秆的一般特征，又具有类似木材的特殊特征，因此通过从棉田土壤中 筛选纤维素降解菌，继而与降解木质素的优势菌株白腐真菌相结合，最终 筛选出能够较好降解棉杆木质纤维素的菌系。
分解纤维素混合株的筛选
一、实验原理
纤维素：由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类
物质，纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，因为它们能够产生纤维素 酶。
纤维素酶：是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶
和葡萄糖苷酶。前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖 分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。
筛选方法：刚果红染色法 该方法可以通过颜色反应直接筛选。
三、实验设计
土壤取样 选择培养 梯度稀释
生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维 素分解菌的含量相对提高
增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需 要的微生物，只有以维生素为碳源的微生物才能大量繁殖。
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高效纤维素分解菌的筛选
如何找到并分离出高效分解纤维素的微生物呢？
PART 1
找到富含纤维素 分解菌的环境
高效纤维素分解菌的筛选
设法分离出纤 维素分解菌
挑菌纯化
扩大培养
哪里的纤维素分解菌比较多呢？
1号 树林里
2号 麦垛下
3号
牛粪
假设：麦垛下土壤中纤维素分解菌最多
畅言时间
方法一 后染色
方法二 刚果红加 入培养基
应用
能量的多级利用 加速物质循环
感谢聆听！
资料盒一
稀释倍数：10﹣4 30℃培养3d
1号
2号
3号
结论：三种样品中，麦垛下土壤中纤维素分解 菌含量最多。
想要寻找目的菌，应该到适宜其 生长的环境中去寻找。
自然选择
进化与适应观
人工选择？
选培养基
以纤维素为唯一碳源 ——使纤维素分解菌成为优势菌
分离出高效纤维素分解菌的实验方案 3min独立完成 组内交流讨论
资料盒二
富集后涂布 10﹣6 30℃培养3d
1号
2号
3号
兴趣小组在2号土样中挑选出降解能力较强的单菌落
从土壤中获取纤维素分解菌的一般方法
1、土壤取样 2、选择培养 3、梯度稀释 4、涂布到鉴 别培养基上 5、挑选产生透 明圈的菌落
进一步筛选
酶活力测定
比值大 透明圈面积
菌落面积
畅所欲言
PART 2
如何找到并分离出高效分解纤维素的微生物呢？
PART 1
找到富含纤维素 分解菌的环境
高效纤维素分解菌的筛选
设法分离出纤 维素分解菌
挑菌纯化
扩大培养
哪里的纤维素分解菌比较多呢？
1号 树林里
2号 麦垛下
3号
牛粪
假设：麦垛下土壤中纤维素分解菌最多
畅言时间
方法一 后染色
方法二 刚果红加 入培养基
应用
能量的多级利用 加速物质循环
感谢聆听！
资料盒一
稀释倍数：10﹣4 30℃培养3d
1号
2号
3号
结论：三种样品中，麦垛下土壤中纤维素分解 菌含量最多。
想要寻找目的菌，应该到适宜其 生长的环境中去寻找。
自然选择
进化与适应观
人工选择？
选培养基
以纤维素为唯一碳源 ——使纤维素分解菌成为优势菌
分离出高效纤维素分解菌的实验方案 3min独立完成 组内交流讨论
资料盒二
富集后涂布 10﹣6 30℃培养3d
1号
2号
3号
兴趣小组在2号土样中挑选出降解能力较强的单菌落
从土壤中获取纤维素分解菌的一般方法
1、土壤取样 2、选择培养 3、梯度稀释 4、涂布到鉴 别培养基上 5、挑选产生透 明圈的菌落
进一步筛选
酶活力测定
比值大 透明圈面积
菌落面积
畅所欲言
PART 2