蛋白酶 磷酸酶抑制剂
医学分子生物学-2 蛋白质的修饰与降解
蛋白质的修饰
概念：是指蛋白质翻译后进行共价修饰加工的过程， 通过一个或几个氨基酸残基加上修饰基团而改变 蛋白质的性质。
目的：调节蛋白质的活性，使蛋白质结构更为复杂， 功能更完善。
蛋白质的修饰
• 磷酸化修饰 • 脂基化修饰 • 甲基化修饰 • 乙酰化修饰 • 类泛素化修饰 • 巴豆酰化修饰
一、磷酸化修饰
• Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶（Ca2+ /calmodulin dependent protein kinaes, CaM-PK)
• cGMP依赖的蛋白激酶 (cGMP dependent protein kinase, PKG)
• DNA依赖的蛋白激酶（DNA dependent protein kinase, DNA-PK)
瘤细胞有抑thylation)修饰
概念：在甲基化转移酶催化下，甲基基团 由甲基S-腺苷甲硫氨酸转移至相应蛋白质 的过程。
甲基代替了氨基上的H原子，减少了氢 键的形成数量，甲基增加了空间阻力，影 响底物与蛋白质的相互作用。
蛋白质甲基化修饰的生物学作用
• 影响蛋白质之间的相互作用 • 蛋白质与RNA之间的相互作用 • 蛋白质的定位 • RNA加工 • 细胞信号转导
1.蛋白质丝氨酸、苏氨酸激酶
• cAMP依赖的蛋白激酶（cAMP dependent protein kinase, PKA)
• Ca2+/磷脂依赖的蛋白激酶（Ca2+ /phospholipid dependent protein kinase, Ca2+ /PL-PK)或蛋白激 酶C (protein kinase C, PKC)
• 蛋白激酶催化的磷酸基转移反应， • 是最常见，最重要的蛋白质翻译后修饰方
Thermo Scientific蛋白酶抑制剂
100mg
1515
78432
抑肽酶（Aprotinin）
25mg
1678
78433
抑氨肽酶（Bestatin）N-[(2S,3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰]-L-亮氨酸
（N-[(2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutyryl]-L-leucine）
可逆
1mg/ml(水)
胃酶抑素A（PepstatinA）
685.9
天冬氨酸蛋白酶
可逆
1mg/ml(甲醇)
PMSF (苯甲磺酰基氟化物)
174.2
丝氨酸蛋白酶
可逆
18mg/ml(甲醇)
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78431
AEBSF [4-(2-氨乙基)氟化苯磺酰•HCl]
10mg
2801
78435
亮抑蛋白酶肽（Leupeptin）
[(乙酰基-亮氨酰-亮氨酰-argininal) •半硫酸盐]
50mg
4317
78436
胃酶抑素A（PepstatinA）
25mg
2118
36978
PMSF (氟化苯基甲磺酰氟)
5mg
911
焦磷酸钠（Sodium
Pyrophosphate）
221.9
丝氨酸/苏氨酸磷酸酶
不可逆
65mg/ml(水)
E-64
357.4
半胱氨酸蛋白酶
不可逆
20mg/ml(1:1乙醇/水)
蛋白酶抑制剂与磷酸酶抑制剂种类及浓度
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明（此文中所说的与咱的不同之处在于：原矾酸钠使用之前需要活化，另外多加了一种β-磷酸甘油的磷酸酶抑制剂）本文详细总结了常用的：蛋白酶抑制剂：PMSF、 Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin 胃蛋白酶抑制剂、EDTA-Na2磷酸酶抑制剂：NaF氟化钠、Na3VO4原矾酸钠、Beta-glycerophosphate甘油磷酸钠、Na2P2O4焦磷酸钠等的溶液配制、贮存液与工作液浓度及保存条件。
一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在 -20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4× H2O:493.6 使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
蛋白酶抑制剂选择指南
蛋白酶抑制剂选择指南1 蛋白酶抑制剂选择指南抑制剂 工作浓度 分子量 抑制蛋白酶种类 稳定性AEBSF终浓度1mM MW:239.5不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制胰蛋白酶,糜蛋白酶,纤溶酶,凝血酶及激肽释放酶. 可溶于水,其pH7的水溶液在4o C可保持稳定1-2个月,在pH>8的情况下会发生缓慢水解Aprotinins 抑肽酶终浓度2ug/ ml MW:6512 可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制纤溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶,但不抑制凝血酶和Factor Xa。
非常稳定,当pH>12.8时失去活性,可溶于水(10mg/ml),-20o C下可长期保存Bestatin终浓度10uM MW:308.4 可逆的丙氨酰-氨基肽酶抑制剂, 工作液可保存一天,1mM的甲醇贮存液在-20o C可保存至少一个月E-64 Protease Inhibitor终浓度10uM MW:357.4 不可逆的半胱氨酸酸蛋白酶抑制剂,抑制半胱氨酸酸蛋白酶而不会影响其他酶的半胱氨酸残基,与小分子量的巯基醇如beta-巯基乙醇不会产生反应,具有高度特异性。
工作液在正常pH值下可保持稳定数天,1mM的水溶液在-20o C可保存几个月EDTA, 4Na终浓度10mM MW:380.2 金属蛋白酶的可逆性螯合物,可能同时影响其他金属依赖性生物过程。
其水溶液很稳定,其贮存液(pH8.5的0.5M 水溶液)在4o C可保存数月Leupeptin, 半硫酸盐 亮抑酶肽（亮肽素） 终浓度100uM MW:493.6 可逆的丝氨酸及半胱氨酸蛋白酶制剂,可抑制胰蛋白酶样蛋白酶及一些半胱氨酸蛋白酶如:Lys-C内切蛋白酶,激肽释放酶,木瓜蛋白酶,凝血酶,Cathepsin B及胰蛋白酶。
工作液的稳定期为数小时,贮存液(10mM水溶液)在4o C时稳定期为一周,-20o C时稳定期为一个月Pepstatin A 终浓度1uM MW:685.9 可逆的天冬氨酸蛋白酶,可抑制胃蛋白酶,Cathepain B&L,血管紧张肽原酶(renin)及以1mg/ml溶于甲醇,搅拌过夜可以1mg/ml溶于乙醇,333mg/ml溶于6N的蛋白酶抑制剂选择指南2抑肽素A 很多细菌来源的天冬氨酸蛋白酶,与蛋白酶有微弱的结合。
组织蛋白提取
鼠脑组织总蛋白提取一：蛋白提取1.脑组织称重，按照1：8（1g脑组织加8ml）的比例计算蛋白酶抑制剂的量(Aprotinin 、Pepstatin、NaF、Na3VO4、Leupeptin ，PMSF不稳定最后取出来加，都是1:100的稀释)和TNE的量，先在每个EP管中加入计算好的TNE再加蛋白酶抑制剂，每个ＥＰ管中加入３颗珠子，用匀浆器匀浆或用研磨棒研磨。
（蛋白酶抑制剂五种从-20拿到4度冰箱中溶解.各取100微升加入10毫升的TNE中（13层析柜中），TNE缓冲液（1.21g Tris,5.84g NaCl,0.37g EDTA/升），2.匀浆完毕后用枪头将混合好的溶液吸入EP管，一般大块组织加600微，小块加300微，4°离心14000转/min，20min。
3.取上清移入新EP管(最好离两次) ，溴酚蓝·甘油·SDS·巯基乙醇等组成samplebuffer（4X），Sample Buffer与蛋白比为3:1，在97度煮5分钟。
防止盖子开，最好用东西盖住。
始终在冰盒中操作，最后蛋白放入-80。
二：测蛋白浓度计算所需BCA的量，按MA:MB:MC=25：24：1的比例配好，每个孔总量为300ul,BSA:A-I各加150ul,Mix加150ul因BSA是溶解在NaCl，故加样时蛋白溶液和0.9%NaCl共加150ul(蛋白3ul,NaCl 147ul)注意加样时要加复孔。
酶标仪震荡5s37°孵育2小时Western Blot的有效检测下限为0.1-1ng蛋白提取可以分为三个步骤：第一步获取材料。
第二步分离目的细胞或组织成份并破碎。
细胞破碎的方法分为机械法和非机械法，机械法可以是振动、搅拌、研磨、压滤、超声、匀浆，非机械法可以是干燥、改变渗透压、冻融、酶解（纤维素酶、溶菌菌、蜗牛酶）等，不同来源的材料对于不同的处理方法耐受程度是不一样的，例如超声波可以很容易破碎动物细胞，但是破碎酵母细胞就困难许多。
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明转自:http://www.bioas/html/980.html在与蛋白相关的检测中，最关键的一步便是蛋白质的提取。
在提取的过程中，我们要经常加入以防止。
另外在磷酸化蛋白的研究过程中，也是必不可少的。
本文详细总结了常用的P MSF、 Leupep tin亮肽素、Aproti nin抑肽酶、Pepsta tin胃、EDTA-Na2等以及NaF氟化钠、Na3VO4原矾酸钠、Beta-glycer ophos phate甘油磷酸钠、Na2P2O4焦磷酸钠等的溶液配制、贮存液与工作液浓度及保存条件。
一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1m MLeupep tin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在 -20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4x 1/2 H2SO4× H2O:493.6使用：贮存浓度1m g/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aproti nin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
常见蛋白酶抑制剂
之袁州冬雪创作当前位置：生物帮> 实验技巧> 生物化学技术> 正文蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期：2012-06-13 来历：互联网标签：相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新停顿摘要 : 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解.在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解.以下罗列了5种常常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对分歧蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！Ibidi细胞灌流培养系统-摹拟血管血液活动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解.在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解.以下罗列了5种常常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对分歧蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度.由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀.在宝灵曼公司的目次上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表.常常使用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保管一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定，必须在每分离和纯化步调中加入新鲜的PMSF.EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液，pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解.胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管严重肽原酶，组织蛋白酶D和凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定，-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解.亮抑蛋白酶肽(leupeptin)1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和组织蛋白酶B;2)lOmg/ml溶于水;3)储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月;4)工作浓度0.5mg/ml.胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)1)抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;2)lOmg/ml溶于水，pH7~83}储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月;4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);5)防止反复冻融:6)在pH>12.8时失活.蛋白酶抑制剂混合使用35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂常常使用蛋白酶抑制剂表作者：青岚点击：次来历于-生物秀知道首页实验实验中心常常使用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度常常使用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度2014-06-09 23:01:02 来历：阅读次数：119 网友评论0 条[常常使用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度] 在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步即是蛋白质的提取.蛋白质的提取过程中，我们要常常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以防止蛋白质的降解.别的在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不成少的，本文总结了常常使用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteas [蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸]在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步即是蛋白质的提取.蛋白质的提取过程中，我们要常常加和蛋白酶抑制剂(pr otease inhibitor)以防止蛋白质的降解.别的在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不成少的，本文总结了常常使用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF，Le upeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3VO4 原矾酸钠，BETA-glycerophosph ate甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等.对这些蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保管都做了详细的说明.蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）.使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B溶解性：高度溶于水（1mg/ml）.4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM) Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性.不抑制凝血酶或因子X.溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，0.1 M，pH8.0）.pH约7-8的溶液在4℃可保管1周，分装保管在-20℃可至少保管6个月.防止反复冻融, pH>12.8的碱性环境可以使其灭活.分子量：6,512使用：贮存浓度:1mg/ml, 工作浓度：0.06–2.0 ug/ml(0.0 1–0.3 uM)Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织蛋白酶D，凝乳酶，许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml.4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保管1个月使用：贮存浓度：1mg/ml，使用浓度：0.7 μg/ml(1 μM) EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)使用：工作浓度：0.2–0.5 mg/ml(0.5–1.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8-9时再加入.磷酸酶抑制剂NaF氟化钠溶解性：溶于水使用：贮存液：5M 工作浓度：10-20mMNa3VO4 原矾酸钠溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矾酸钠.原矾酸钠需要颠末处理以后才干成为激活的矾酸钠,激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用.原矾酸钠变成激活的矾酸钠的过程是:100mM原矾酸钠激活储存液配制(1).取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄)(2).煮至无色(3).室温冷却(4).重调PH至10(5)重复（１）（２）（３）（４）直至溶液坚持无色，而且ＰＨ稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保管.使用：贮存液：100mM 工作浓度：1mMBETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠溶解性：溶于水使用：贮存液：100mM 工作浓度：25mMNa2P2O4 焦磷酸钠溶解性：溶于水贮存液：100mM, 工作浓度：1-2 mM关键词：蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸。
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明产品编号：C7610包装规格：50Assays产品组成:胞质提取Buffer55mL线粒体溶解Buffer5mL蛋白酶抑制剂60μL磷酸酶抑制剂300μLDTT60μL产品简介胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒提供独特的组份可以提取动物细胞及组织中的胞质蛋白和线粒体蛋白。
该方法先将完整的有活性的线粒体和胞质蛋白分离，再处理后获得高纯度的有活性胞质蛋白和变性的线粒体蛋白，不需要超速度离心，方法简单，可靠，快速。
可用于1D，2D电泳，Western Blot，Elisa等蛋白质实验。
提取的完整线粒体也可以经过活性溶解液处理，再用于免疫共沉淀，凋亡，细胞信号传导，能量代谢等生理学研究，或进行线粒体DNA提取，用于基因组学后续研究。
本试剂盒可以每次从1×107个培养细胞或200mg组织中提取所需要的蛋白质，可以使用50次。
产品特点1.整个实验过程大约只需要1小时左右。
2.可以从50×107个培养细胞或50×200mg组织中提取所需要的蛋白质或活性线粒体。
3.活性线粒体的提取量高，高效线粒体溶解Buffer提取的蛋白质，可以用于线粒体蛋白质组学研究。
4.不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件常温下运输，收到后将线粒体溶解Buffer、DTT和蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂于-20℃保存，胞质提取Buffer于2-8℃保存，保质期1年。
操作步骤1.收集不少于1×107细胞，用冷PBS（pH7.4）洗涤细胞两次，每次3000rpm（800g）离心5min；组织样本（200mg）尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，于冰上剪碎，再用冷PBS（pH7.4）洗涤三次。
2.在上述细胞或组织样本中加入1mL胞质提取Buffer（使用前每mL胞质提取Buffer加入1μL蛋白酶抑制剂，5μL磷酸酶抑制剂和1μL DTT），置玻璃匀浆器冰上均质30～50次，置于冰上冷却。
细胞分子生物学中的蛋白酶和蛋白酶抑制剂
细胞分子生物学中的蛋白酶和蛋白酶抑制剂蛋白酶是指一类可进一步水解蛋白质的酶，广泛存在于生物体内。
它们在许多生物学过程中起到关键作用，包括消化、免疫系统、细胞周期控制、基因转录和翻译等。
与蛋白酶一样，蛋白酶抑制剂也在细胞内发挥着重要作用。
本文将探讨蛋白酶和蛋白酶抑制剂在细胞分子生物学中的注意事项。
蛋白酶的分类几乎所有的生物体都使用溶菌酶结构域（LysM）蛋白酶和蛋白酶家族的一部分酸性蛋白酶家族，以水解他们的细胞壁和蛋白质。
许多蛋白酶结构域的功能被研究，包括蛋白聚合酶、核糖体、转录因子和其他蛋白质状态的维持。
蛋白酶启动方式许多蛋白酶必须先被激活才能正常运作。
一些蛋白酶的激活过程包括C端加工和N-糖基化，这些过程在合成后的蛋白质中不能被复制。
其他蛋白酶则可以在结构上可逆地被激活，例如信号酶的磷酸化和解磷酸化。
如何抑制蛋白酶活性蛋白酶抑制剂也是极其重要的，其中一些已用于人类和动物疾病的治疗。
有一些蛋白酶抑制剂是生物合成的（例如转化酶抑制剂和蛋白酶抑制剂），而其他则是化学合成的。
对于这些化学化合物的研究为生物医学研究提供了有用的指导。
存在的问题与挑战蛋白酶的功能广泛，与许多的生物学过程有关。
在蛋白酶的功能研究与涵盖它们的生化途径方面，存在一些挑战和问题。
例如，如何使用成像技术更好地观察蛋白酶活性以及识别蛋白酶中新的结构和反应机制。
同时，掌握蛋白酶和蛋白酶抑制剂的工作方式以及它们是如何控制生物学进程的也是至关重要的。
结论总之，蛋白酶和蛋白酶抑制剂在细胞分子生物学中发挥着极其重要的作用。
对它们的更好理解和掌握将为人类找到更好的治疗方法，并促进生物学的进步。
蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在-20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保存1个月。
分子量：685.9使用：贮存浓度1mg/ml，使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。
EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4℃稳定至少6个月分子量：372.24使用：工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8~9时再加入。
蛋白酶抑制剂成分
蛋白酶抑制剂成分蛋白酶抑制剂是一种可以抑制蛋白酶活性的化合物。
蛋白酶是一种酶类，它在细胞内起着非常重要的作用，可以分解蛋白质分子，使其成为更小的分子。
但是，在某些情况下，过多的蛋白酶活性会导致细胞内的蛋白质被分解得过快，从而对细胞造成伤害。
因此，蛋白酶抑制剂成分可以在一定程度上保护细胞免受蛋白酶的伤害。
目前，已经发现了很多种蛋白酶抑制剂成分，其中一些已经被广泛应用于医学和生物学领域。
以下是一些常见的蛋白酶抑制剂成分：1. 蛋白酶抑制剂-1（Protease Inhibitor-1）蛋白酶抑制剂-1是一种天然存在于人体中的蛋白质，它可以抑制多种蛋白酶的活性。
研究表明，蛋白酶抑制剂-1可以对多种疾病有治疗作用，如心血管疾病、肿瘤、炎症等。
2. 甲基硫代咪唑（Methylthioadenosine）甲基硫代咪唑是一种天然存在于人体中的化合物，它可以抑制多种蛋白酶的活性。
研究表明，甲基硫代咪唑可以对多种疾病有治疗作用，如肿瘤、炎症等。
3. 金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂（Staphylococcus aureus Protease Inhibitor）金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂是一种可以抑制金黄色葡萄球菌产生的多种蛋白酶的化合物。
这种化合物可以用于治疗金黄色葡萄球菌感染等疾病。
4. 蛋白酶抑制剂A（Protease Inhibitor A）蛋白酶抑制剂A是一种可以抑制多种蛋白酶活性的化合物。
研究表明，蛋白酶抑制剂A可以对多种疾病有治疗作用，如肿瘤、心血管疾病等。
5. 磷酸二酯酶抑制剂（Phosphodiesterase Inhibitor）磷酸二酯酶抑制剂是一种可以抑制多种磷酸二酯酶活性的化合物。
研究表明，磷酸二酯酶抑制剂可以对多种疾病有治疗作用，如心血管疾病、哮喘等。
总之，蛋白酶抑制剂成分具有广泛的应用前景，在医学和生物学领域都有着重要的作用。
未来，随着科学技术的不断发展，相信会有更多的蛋白酶抑制剂成分被发现，并用于治疗更多的疾病。
磷酸化试剂盒使用方法
磷酸化试剂盒使用方法
1. 组织总蛋白的提取：
- 在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF混匀，放置在冰上备用；
- 称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml 的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程需注意冰上操作；
- 将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4 ℃ 12000g 离心30min；
- 吸取上清至新的管中；
- 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
2. 细胞总蛋白的提取：
- 裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；
- 贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS 洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min；
- 悬浮细胞：4℃ 400g 离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；
- 裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃ 12000g离心30min；
- 将上清移入新的EP管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
请注意，在使用磷酸化试剂盒时，务必仔细阅读相关说明书和安全注意事项，严格按照操作步骤进行，以确保实验结果的准确性和安全性。
如果你还有关于磷酸化试剂盒使用的其他问题，请咨询专业人士。
roche cooktail蛋白酶成分
roche cooktail蛋白酶成分罗氏鸡尾酒（Roche鸡尾酒）是一种用于生物科学研究的常用试剂盒，其中包含多种蛋白酶。
蛋白酶是一类能够加速蛋白质降解的酶类分子，它们具有多种不同的功能和特性。
以下将介绍Roche鸡尾酒中常见的蛋白酶成分。
1.胰蛋白酶（Trypsin）：胰蛋白酶是一种消化酶，由胰腺分泌，用于在消化过程中分解蛋白质。
在Roche鸡尾酒中，胰蛋白酶被用于体外细胞培养中，用于细胞的离析和传代。
它能够通过剪切蛋白质的肽键来降解蛋白质分子。
2.胰蛋白酶抑制剂（Trypsin Inhibitor）：胰蛋白酶抑制剂是一种能够抑制胰蛋白酶活性的分子。
在Roche鸡尾酒中，胰蛋白酶抑制剂被用于停止胰蛋白酶的活性，从而控制蛋白质降解的过程。
3.蛋白激酶抑制剂（Protein Kinase Inhibitors）：蛋白激酶抑制剂是一类能够抑制蛋白激酶活性的分子。
在Roche鸡尾酒中，蛋白激酶抑制剂被用于研究细胞信号传导的过程。
它们能够干扰蛋白激酶的活性，从而影响细胞内信号传递通路。
4.磷酸酶抑制剂（Phosphatase Inhibitors）：磷酸酶是一类能够去磷酸化蛋白质的酶。
在Roche鸡尾酒中，磷酸酶抑制剂用于抑制磷酸酶活性，从而保持蛋白质磷酸化状态。
5.蛋白酶抑制剂混合物（Protease Inhibitor Cocktail）：这是Roche鸡尾酒中的一个重要成分，它由多种蛋白酶抑制剂组成，能够抑制多种蛋白酶的活性。
蛋白酶抑制剂混合物能够保护蛋白质免受蛋白酶降解的影响，从而保持蛋白质的稳定性。
Roche鸡尾酒中的这些蛋白酶成分在生物科学研究中发挥着重要作用。
它们能够帮助研究人员保护蛋白质的完整性，提高实验的可靠性和准确性。
另外，这些蛋白酶成分还能够用于调节细胞内的信号传导过程，从而揭示细胞生物学的各个方面。
需要注意的是，Roche鸡尾酒中的蛋白酶成分不能用于食品加工或药品制造。
它们仅限于科学研究中的使用，需要严格遵守实验室安全操作规程。
常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度
常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。
蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。
另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3VO4 原矾酸钠，BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等。
对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。
蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。
溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，+25℃时稳定至少9个月分子量：174.2使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B 溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，0.1M，pH8.0）。
pH约7-8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
WB实验方法学 - 副本
WB实验方法学1.溶液准备：RIPA裂解液（碧云天，货号P0013B）,使用前数分钟加入PMSF(终浓度为1m mol/L),蛋白酶抑制剂cocotail（Roche），磷酸酶抑制剂（武汉博士德）。
PMSF配制：称适量的PMSF，用异丙醇溶解，配制成100mmol/L的储存液，-20℃分装保存，临用时按1:100稀释到裂解液中混匀。
蛋白酶抑制剂配制：每一粒用1ml双蒸水溶解成储存液，-20℃分装保存，临用时按1:100稀释到裂解液中混匀。
磷酸酶抑制剂：每管用1ml双蒸水溶解成储存液，-20℃分装保存，临用时按1:100稀释到裂解液中混匀。
2.组织蛋白提取：组织称重，按照50ug组织：500ul裂解液将组织放入均浆套管中，置于冰水混合物均浆处理1min，冰浴反应30min，其中每隔5min混匀一次，在4℃条件下，12000~14000g离心15min。
取上清，即总蛋白。
3.细胞蛋白提取：去除培养液，按照6孔板每孔加入200ul裂解液，用细胞刮刀将贴壁细胞刮下来，将所有液体转移到预冷的1.5ml的EP管中,在4℃条件下，12000~14000g离心15min。
取上清，即细胞总蛋白.4.蛋白变性：用蛋白上样缓冲液按1:4(上样缓冲液工作液:蛋白样本)将样本在沸水中变性5min，分装,保存于-70℃.上样缓冲液（5*）储备液配制：A Trisbase 3.8g10%SDS 10ml甘油 10ml溴酚蓝 0.05g加50ml双蒸水混匀后用双蒸水定容至100ml。
B 巯基乙醇临用前将A与B按照3:1的体积混匀，即上样缓冲液工作液。
5.考马斯亮蓝G250测量蛋白浓度5.1 考马斯亮蓝的配制：取100mgG250溶于50ml 95%乙醇中，完全溶解后，加入100ml 85%H3PO4，摇匀后用双蒸水定容至1000ml，过滤，4℃避光保存。
5.2 标准曲线制备：a．BSA(1mg/ml):10mgBSA溶解于10ml双蒸水中。
蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X)
白酶、金属蛋白酶等)和磷酸酶(如丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶等)。适用于 Western Blot 和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。
使用方法： 1、蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物（50X），使用时分别按照 1:50 的比例加入到裂解液中，混 匀后即可使用。含有蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。 2、根据需要，0.05M 的 EDTA 也按照 1:50 的比例加入到裂解液中。
蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提ห้องสมุดไป่ตู้, 50X) 货号：P1264 规格：100T 保存：-20ºC 保存，有效期 12 个月。
产品组成：
产品名称 蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用，50X)
磷酸酶抑制剂混合物(50X) 0.05M EDTA, pH 8.0
规格
2×1mL 2×1mL 2×1mL
北京索莱宝科技有限公司
保存 -20ºC 避光
-20ºC RT
产品说明： 细菌提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而
影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的 有效方法。
本产品用于细菌蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋 白酶抑制剂/氨基肽酶抑制剂，以及丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。如用于检测金属 蛋白酶活性，则不宜添加 EDTA。以 1:50 的比例分别把蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X)和 0.05M EDTA 加入裂解液中，即可用于细菌蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。
组蛋白提取方法
2012
（IF=3.322）
● Pin Huan et al.
Comparative proteomic analysis of challenged Zhikong scallop (Chlamys
farreri): A new insight into the anti-Vibrio immune response of marine bivalves
pregnancy villous EVT's invasion function
Virology Journal
2011, 8:114
（IF=2.55）
● Weiwei Jianga, Bin Lia et al.
Artesunate in combination with oxacillin protect sepsis model mice challenged with lethal live
提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白质电泳、组蛋白修饰实验比如乙酰化、甲 基化、sumoylation 试剂和仪器
● 移液器、吸头
● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器
● 冰箱，冰盒
使用方法：
细胞总蛋白提取： 1. 提取液制备：每 500ul 冷的总蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物和 2ul 磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。 2. 取 5-10×106 个细胞①，在 4℃，1000rpm 条件下离心 5-10 分钟，小心吸取培养 基，尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 每 5×106 个细胞中加入 500ul 冷的总蛋白提取液，混匀后，在 4℃条件下振荡 15-20 分钟。 5. 在 4℃，14000rpm 条件下离心 15 分钟。
常用蛋白酶抑制剂
添加蛋白酶抑制剂是大多数细胞裂解和蛋白质提取的必要步骤。
蛋白质提取过程中，内源性蛋白酶会降解蛋白质，导致蛋白质产量的降低。
在裂解试剂中加入蛋白酶抑制剂，可防止提取蛋白的降解，确保在细胞裂解后获得蛋白质的产量。
蛋白酶抑制剂是生物或化学化合物，其作用是可逆或不可逆地结合蛋白酶。
大多数已知的蛋白酶属于四个进化上不同的酶家族之一，基于功能基团参与肽键的裂解。
一般情况下，蛋白提取过程中总是需要使用蛋白酶抑制剂。
大多数情况下，需使用几种不同抑制剂化合物的混合物（也称Cocktail,鸡尾酒），以确保蛋白质提取物在分析之前不会降解。
常见蛋白酶抑制剂
常见蛋白酶抑制剂活性组分
不可
常用蛋白酶抑制剂混合物组成
*EDTA影响蛋白活性时，需实验是否需要添加EDTA。
全蛋白抽提试剂盒
凯基全蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at 4℃ for one yearExpire date：一、 试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效。
获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。
二、 试剂盒组份组份 KGP250 （50 tests） KGP2100（100 tests）储存温度 Lysis Buffer 50 mL 100 mL 4℃磷酸酶抑制剂 250 μL 500μL -20℃蛋白酶抑制剂 50 μL 100 μL -20℃PMSF（100mM）500 μL 1000 μL -20℃L三、 操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入5 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。
冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入5μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。
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常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度
来源：原创，转载请注明发布时间：2009-10-20 查看次数：21
在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。
蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。
另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotin in抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，N a3VO4 原矾酸钠，BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等。
对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。
蛋白酶抑制剂
PMSF：
特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。
溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，+25℃时稳定至少9个月
分子量：174.2
使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mM
Leupeptin 亮肽素
特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月
分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6
C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6
使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)
Aprotinin抑肽酶
特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，0.1M，pH8.0）。
p H约7-8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512
使用：贮存浓度:1mg/ml, 工作浓度：0.06–2.0 ug/ml(0.01–0.3 uM)
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂
特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织蛋白酶D，凝乳酶，许多微生物酸性蛋白酶
溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保存1个月
分子量：685.9
使用：贮存浓度：1mg/ml，使用浓度：0.7 μg/ml(1 μM)
EDTA-Na2
特性：金属蛋白酶抑制剂
溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4℃稳定至少6个月
分子量: 372.24
使用：工作浓度：0.2–0.5 mg/ml(0.5–1.3 mM)，不需现用现配，在溶液p
H值调至8-9时再加入。
磷酸酶抑制剂
NaF氟化钠
溶解性：溶于水
分子量：41.99
使用：贮存液：5M 工作浓度：10-20mM
Na3VO4 原矾酸钠
分子量：183.91
溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矾酸钠.原矾酸钠需要经过处理以后才能成为激活的矾酸钠,激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用.原矾酸钠变成激活的矾酸钠的过程是:
100mM原矾酸钠激活储存液配制
(1).取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄)
(2).煮至无色
(3).室温冷却
(4).重调PH至10
(5)重复（１）（２）（３）（４）直至溶液保持无色，并且ＰＨ稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保存.
使用：贮存液：100mM 工作浓度：1mM
BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠
溶解性：溶于水
分子量：306.11
使用：贮存液：100mM 工作浓度：25mM
Na2P2O4 焦磷酸钠
溶解性：溶于水
分子量：265.9
贮存液：100mM, 工作浓度：1-2 mM。