SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量.
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(二)、蛋白质标准样品迁移率和待测样品分子量的计算 1、根据蛋白质分子量对数和电泳迁移率的关系,精确测量溴酚蓝和各种蛋白质迁移距离。把溴酚蓝迁移的距离定为d1,蛋白质把溴酚蓝迁移的距离定为d1,迁移距离定为d2,并以D1定为凝胶染色前迁移距离定为d2,并以D1定为凝胶染色前的长度,D2定为凝胶染色后的长度。的长度,D2定为凝胶染色后的长度。 2、根据公式:Rm =d2d1×D1D2计算各根据公式:Rm=d2d1×D1D2计算各种蛋白质的迁移率。
3、以标准蛋白质的迁移率为横座标,以其对以标准蛋白质的迁移率为横座标,应的分子量对数为纵座标,绘制标准曲线,应的分子量对数为纵座标,绘制标准曲线,可得到一条直线,然后根据未知样品的迁移可得到一条直线,率,在半对数座标图上查出其对应的分子量。在半对数座标图上查出其对应的分子量。
4、实验需多次重复。实验需多次重复。