残留溶剂方法开发流程1027

目录

1. 适用范围 (2)

2. 起草依据 (2)

3. 内容 (2)

3.1残留溶剂分析方法开发时间 (2)

3.2确定待测有机溶剂 (2)

3.3检测器的选择及相关参数优化 (2)

3.3.1 检测器的选择 (2)

3.3.2 FID参数优化 (3)

3.3.3 ECD参数优化 (3)

3.4供试品及对照品溶液溶剂的选择 (3)

3.5供试品溶液和对照品溶液浓度的确定 (4)

3.6进样方式的选择及优化 (4)

3.7 色谱柱的选择及相关参数优化 (4)

3.7.1 色谱柱的选择 (4)

3.7.2 载气流量与内径的选择 (5)

3.7.3 柱长的选择 (5)

3.7.4 液膜厚度的选择 (5)

3.7.5 柱温的选择和优化 (6)

3.8 分析方法的确认 (6)

3.8.1 系统适用性试验 (6)

3.8.2 专属性 (7)

3.8.3 准确度 (7)

3.8.4 小结 (7)

1.适用范围

本流程适用于采用气相色谱法测定残留溶剂的方法开发。

2.起草依据

化学药物残留溶剂研究的技术指导原则（2005.03）

ICH Q3C（R5）残留溶剂指导原则

USP通则<467>残留溶剂

中国药典2015版四部<9101>药品质量标准分析方法验证指导原则

中国药典2015版四部<0521>气相色谱法

3.内容

3.1残留溶剂分析方法开发时间

残留溶剂分析方法一般应在实验室中放之前基本确定。分析方法开发工作不宜过早开展，工艺涉及的溶剂种类无法基本确定，溶剂种类变化过多会造成工作重复，浪费资源；故建议最好在工艺基本成熟，涉及溶剂种类变化不大时开始该项工作，并结合工艺需求优化方法。

3.2确定待测有机溶剂

根据制备工艺确定待测有机溶剂的范围。通常应对制备工艺过程中使用的溶剂和重结晶溶剂，以及根据工艺特点要求的其它溶剂进行残留量的研究。

起始物料本身也可能带有残留溶剂，这些溶剂也有可能残留到最终的药品中，这也是必须要考虑的方面。还需要考虑工艺中大量使用的溶剂本身混有的少量有机杂质，比如工艺中涉及甲醇、、正己烷及丙酮等可能引入苯，相应的分析方法也应具备。另外，还应考虑起始物料、中间体、溶剂、试剂及最终产品可能发生降解，产生的碎片物质也可能是某种溶剂，或者是具有挥发性的有机小分子。

综上所述，需要考虑的已不仅是溶剂了，还包括任何来源的有机杂质、降解物质，它们与残留溶剂一样，具有挥发性，一般适用于气相色谱法检验。

3.3检测器的选择及相关参数优化

3.3.1 检测器的选择

常用的离子火焰化检测器（FID）对碳氢化合物相应良好，适合检测大多数

药物，对杂环化合物、甲醛、甲酸、水等无响应或响应较小；氮磷检测器（NPD）对含氮、磷元素的化合物灵敏度高；电子捕获检测器（ECD）适合于含卤素的化合物；质谱检测器（MS）能给出供试品中某个成分相应的结构信息，可用于结构确证。

本实验室配置了FID及ECD两种检测器，结合实际情况，本流程仅说明与其相关的参数优化。

ECD检测器温度一般250～350℃（至少高于柱温25℃）。尾吹气一般使用氮气或氩气-甲烷，不可使用氢气或氦气。

3.3.2 FID参数优化

a.在使用FID时，检测器温度一般应高于柱温，并不得低于150℃，以免水汽

凝结，通常为250～350℃。

b.载气的选择影响灵敏度，气体的分子量越高，灵敏度越高（如氮气比氦气灵

敏度稍高）。

c.增加氢气流量，灵敏度会上升到一个值，然后开始下降。一般设置30～

60mL/min，低于20mL/min可能会点火失败。实际值应由特定分析操作决定。

d.增加空气流量，灵敏度上升，然后稳定。应尽量选择稳定开始的流量，以节

约空气。一般设置为200～600mL/min。

e.“柱流量与尾吹气加和”推荐流量范围：20～30mL/min。流量过高，可能会

熄火。

特别说明：检测器的温度应至少高于柱温20～30℃，同时应兼顾样品的热稳定性。

3.3.3 ECD参数优化

3.4供试品及对照品溶液溶剂的选择

水中不含有机溶剂，干扰较少，且在FID检测器上，以水为溶剂时，各残留溶剂的灵敏度最高，故顶空进样通常以水为溶剂（溶液直接进样时，应考虑水对色谱柱寿命影响，尽量避免或者减小进样量）。对于非水溶性的药物，可采用DMF、DMSO或其他适宜溶剂，可加入一定量的水以增加检测的灵敏度。制备供试品的溶剂选择应兼顾供试品和待测有机溶剂在该溶剂中的溶解度。测定含氮

的碱性溶剂时，供试品溶液应不呈酸性，以免被测物与酸反应后不易汽化。且所用溶剂应不干扰待测有机溶剂的检测。若采用ECD，应避免含卤素的溶剂（如：二氯甲烷、氯仿、四氯化碳等）。应尽量选择价格低廉、易得、毒性小的溶剂，对照品溶液的溶剂应与供试品一致。

3.5供试品溶液和对照品溶液浓度的确定

配制供试品溶液的浓度应满足定量测定的需要，一般供试品取样量在0.1～1g之间。对照品溶液浓度一般配制为限度浓度。

3.6进样方式的选择及优化

一些基体复杂的不能直接进样的，而且沸点较低的待测物应首选顶空进样。

顶空温度应根据溶解供试品溶剂的特性及供试品中残留溶剂的沸点选择。以水为溶剂及测定低沸点残留溶剂时，顶空温度不宜超过85℃；测定沸点较高的残留溶剂时，通常选择较高的顶空温度；但此时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试品产生的挥发性热分解产物干扰测定结果。以DMSO为溶剂时，顶空温度不宜超过115℃。

顶空时间是要确保供试品溶液的气-液两相达到平衡，一般通过测定顶空时间与顶空气体浓度的浓度—时间曲线来确定。顶空时间不宜过长，一般为30～45分钟，如果超过60min，可能引起顶空瓶的气密性变差,导致定量的准确性降低。

顶空进样时间即为进样量。进样时间越长，进样量越大，灵敏度提高，但进样时间过长，峰型变宽，理论踏板数降低，应根据需求，选择适宜进样时间。

进样口温度应保证组分挥发，且不会分解。一般设置为略高于程序升温的最高温度。直接进样量一般不超过数微升，柱径越细，进样量应越少。

甲酰胺、2－甲氧基乙醇、2－乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等不适宜用顶空法测定。

3.7 色谱柱的选择及相关参数优化

3.7.1 色谱柱的选择

应根据相似相溶的原理选择色谱柱。毛细管柱有极性柱、非极性柱、弱极性柱和中等极性柱。常见色谱柱极性如下表：

类别固定相色谱柱型号非极性色谱柱100%二甲基聚硅氧烷HP-5，DB-1，OV-101，