梅毒实验室检测汇总
梅毒实验室检验PPT
样本处理
将采集的血液样本进行离心，分离出血清，用于后续的实验 检测。
实验操作步骤
抗原检测
利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或化学发光法等检测血清中的梅毒螺旋体抗原。
抗体检测
通过检测血清中的特异性抗体来判断是否感染梅毒，常用方法包括快速血浆反应素试验（RPR） 和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。
血清学检测
总结词
血清学检测是通过检测患者血清中的特异性抗体，用于诊断和监测梅毒的方法。
详细描述
血清学检测包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验。非螺旋体抗原试验包括快速血浆反应素试验（RPR）等， 用于初筛和疗效观察；螺旋体抗原试验包括梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）等，用于确诊和滴度测定。血清 学检测具有较高的敏感性和特异性，适用于大多数梅毒病例的检测。
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2024-01-11
梅毒实验室检验
目录
• 梅毒概述 • 梅毒实验室检验方法 • 实验室检验流程 • 实验室检验注意事项 • 实验室检验的应用与价值
01 梅毒概述
总结词
梅毒是一种由苍白（梅毒）螺旋体引起的慢性系统性性传播疾病，主要通过性接触 传播。
详细描述
鉴别诊断
与其他性传播疾病的鉴别 诊断，如淋病、尖锐湿疣 等。
在流行病学调查中的应用
流行病学调查
通过大规模的实验室检验，了解 梅毒的流行趋势和传播情况。
追踪传染源
通过检验患者的血液样本，追踪 传染源，防止疾病进一步传播。
在预防控制中的作用与价值
预防控制策略制定
基于实验室检验的数据， 制定和调整预防控制策略 。
梅毒实验室诊断技术
血清学检测法
快速血浆反应素（RPR） 环状卡片试验
临床意义： 1．RPR试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染 的 检查。 2．对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性别 为86%、100%和98%。 3. 可能有生物学假阳性（滴度常＜1:8）：急性发热性传 染病，妊娠，吸毒，胶原性疾病（SLE，类风关） 注意事项： 试验应在23～29℃环境中进行。
梅毒实验室诊断技术
黑河市疾病预防控制中心 胡丽欣
概述
梅毒是由苍白螺旋体（TP）引起的一种慢性性传播 疾病。本病临床表现复杂，可侵犯人体全身器官，既能产 生各种各样的症状和体征，又可多年无症状而呈潜伏状态 。梅毒主要通过性接触传播，也可以通过胎盘传播而发生 胎传梅毒。梅毒的实验室诊断方法主要有病原学检查法和 血清学检测法。
病原学检测法
镀银染色检查
操作步骤： 1. 涂片干燥：将标本涂于干净载玻片作一薄片， 于空气中自然干燥。 2．固定：用固定液将涂片固定2分钟～3分钟。 3．洗涤：用无水乙醇洗涤玻片上的油污。 4．媒染：加媒染剂于涂片上，微加热产生蒸汽， 染30秒。 5．银染：水洗，加银染液于涂片上，微加热产 生蒸汽，染30秒。 6．镜检：水洗、待干，用油镜检查。
血清学检测法
快速血浆反应素（RPR） 环状卡片试验
结果判读： 凝集反应强度分级： 3＋ ～ 4＋：圆圈内出现中到大的黑色絮状物， 液体清亮 2＋：圆圈内出现小到中的黑色絮状物， 液体较清亮 1＋：圆圈内出现小的黑色絮状物，液体 混浊 －：圆圈内仅见碳颗粒集于中央一点或 均匀分散
早期梅毒实验室检测方法的评价
早期梅毒实验室检测方法的评价梅毒是一种由螺旋体菌引起的性传播疾病。
它可以在许多器官和组织中定植，包括疣状腺、肝、骨髓和中枢神经系统。
因此，它可以表现出多种不同的症状和病理学特征。
梅毒病菌的感染通常以粘膜或皮肤可见的溃疡为起始，在早期阶段体内的抗体还不能被检测出来。
因此，在早期梅毒的诊断和治疗中，实验室检测就显得尤为重要。
本文将对早期梅毒实验室检测方法进行评价。
传统梅毒实验室检测方法传统的梅毒实验室检测方法包括暗视野显微镜检查 (DFM)、血清学检测、细菌培养和多重PCR检测等。
其中，•暗视野显微镜检查 (DFM)：通过显微镜观察梅毒螺旋体在暗视野显微镜下的运动，该方法检测敏感性较高，且可在白移植体上进行，但无法确定感染时间和恢复时间。
•血清学检测：血清学检测经常用于检测梅毒的抗体，有ELISA、IFA、TPPA、VDRL、TRS等。
血清学检测可以测出梅毒感染的体内抗体，即非特异性抗体和特异性抗体。
TPPA检测的敏感性和特异性很高，查出梅毒肯定诊断率高达 99.6%，但不适合体液检测。
•细菌培养：通过实验室细菌培养技术，培养出梅毒病菌从而进行检测。
细菌培养虽然能检测到梅毒病原体，可是很难培养出来，检测敏感性不高。
•多重PCR检测：PCR 技术可以在体液和组织标本中检测到梅毒病菌，并且实验室成果不受时间和治疗的影响，PCR结果仅为体液标本。
PCR法是一种很有前途的新技术，但现阶段并未被广泛采用。
可以看出，传统的梅毒实验室检测方法存在一些共性的弊端：缺乏多样性和准确性、易产生假阳性和假阴性结果，不能满足早期梅毒的诊断需要。
新型梅毒实验室检测方法随着医学技术和检测水平的不断提高，新型的梅毒实验室检测方法也不断涌现，具有更高的敏感性和准确性。
下面介绍几种新型检测方法：•病理学检查：通过患者的组织切片，使用补体结合试验(Complement fixation test, CFT)或者免疫组织化学染色(IHC)检测抗体或梅毒螺旋体，由于病毒容易定位损伤的部位，所以这种方法的敏感性和准确性都很高，但是病理检查需要采集人体自身组织进行检测，针对患者生理和心理造成的损伤较大。
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准诊断标准概述梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病。
实验室诊断是梅毒早期诊断的关键步骤之一。
本文将详细介绍梅毒实验室诊断的标准及相关内容。
血清学检测血清学检测方法在梅毒的实验室诊断中，血清学检测是常用的方法之一。
常见的血清学检测方法包括： 1. 血清梅毒螺旋体特异性抗体检测 2. 血清非特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测通常采用补体结合试验（RPR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法。
下面是具体的测试步骤： 1. 准备被测血清和梅毒螺旋体抗原。
2. 将被测血清与梅毒螺旋体抗原混合，并孵育一段时间。
3. 使用特异性试剂与抗原抗体复合物反应。
4. 观察反应结果，通常采用N样本与P样本比较的方法判断阳性与阴性。
非特异性抗体检测非特异性抗体检测包括补体结合试验（RPR）、荧光螺旋体抗体试验（FTA-ABS）等。
这些方法的测试步骤与梅毒螺旋体特异性抗体检测类似，只是检测的抗体种类不同。
碳诺林试验碳诺林试验也是梅毒实验室诊断中常用的方法之一。
这个方法的基本原理是将患者的血清与含有碳诺林颗粒的载玻片接触，通过观察颗粒聚集情况来诊断患者是否感染了梅毒。
其他实验室诊断方法除了血清学检测和碳诺林试验，还有其他实验室诊断方法可用于梅毒的诊断，例如PCR检测、组织培养等。
这些方法在梅毒的早期诊断、治疗及追踪感染情况方面发挥重要作用。
结语梅毒实验室诊断标准是梅毒诊断过程中的关键环节，其中血清学检测和碳诺林试验是常用的方法。
随着技术的不断进步，其他实验室诊断方法也越来越重要。
有关实验室诊断标准的研究仍在进行中，希望未来能有更准确、灵敏的诊断方法出现，为梅毒的早期诊断和治疗提供更好的支持。
梅毒实验室检测技术
梅毒IgM抗体（TP-IgM）
IgM抗体的产生是感染后的早期体液免疫应答反 应。IgM分子比IgG较大，所以IgM抗体不能通过胎盘 屏障。而母亲的IgG抗体可以通过胎盘屏障传给胎儿。 因此若在新生儿血中检测到IgG抗体不能作为先天梅毒 的诊断依据，而IgM抗体可为先天梅毒的诊断依据。
IgM抗体检测其特异性较高，但敏感性较低。因
TPPA试验结果判读
4+： 粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠 3+： 粒子光滑覆盖大部分底 2+：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环 1+： 粒子光滑集聚覆概孔底，周围有一明显细胞环 ±： 粒子沉集孔底，中央形成一小点 –： 粒子紧密沉积孔底中央
a:均为RPR阳性标本
29
ELISA/ CLIA
给予儿童先天梅毒 规范治疗和随访
婴 儿 3、 6月 龄 进 行 “非 梅 ”定 量 检 测 观 察 临 床 症 状
任 何 一 次 “非 梅 ”检 测 结 果 由阴转阳，或滴度
不下降反而上升
3次 检 测 结 果 均为阴性反应
每 3个 月 同 时 进 行 “非 梅 ”定 量 检 测 和 “TP”检 测
任何一次
疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得 到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器 的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光， 从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 ❖ 方法：（1）暗视显微镜检查
（2）镀银染色法 （3）核酸检测（血液标本？） 注：梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功， 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。
组织病理学检测 白细胞检测 蛋白检测
未经治疗的梅感染毒梅病毒螺人旋的体 自然病程
感染梅毒螺旋体
2-6周
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其临床表现多种多样，因此需要依靠实验室检测来进行确诊。
梅毒实验室诊断标准是指在临床诊断中，通过实验室检测方法来确定患者是否感染了梅毒。
本文将介绍梅毒实验室诊断的标准和方法，以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒患者。
1. 血清学检测。
梅毒的血清学检测是目前最常用的实验室诊断方法之一。
常见的血清学检测包括梅毒螺旋体抗体检测和非梅毒螺旋体抗体检测。
梅毒螺旋体抗体检测主要包括梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测，其中梅毒螺旋体特异抗体检测包括梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（MHA-TP）和梅毒螺旋体血清凝集试验（FTA-ABS）等。
非梅毒螺旋体抗体检测则包括非梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测，如梅毒螺旋体抗原检测和梅毒螺旋体DNA检测等。
2. 直接检测。
除了血清学检测外，梅毒的直接检测也是一种重要的实验室诊断方法。
直接检测包括梅毒螺旋体的显微镜检查、组织培养和核酸检测等。
其中，梅毒螺旋体的显微镜检查是通过显微镜观察患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体，是一种直接而快速的诊断方法。
组织培养则是将患者体液或病变组织进行培养，以寻找梅毒螺旋体的生长。
核酸检测则是通过PCR等方法检测患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体DNA，是一种高度敏感和特异的检测方法。
3. 其他检测方法。
除了上述的血清学检测和直接检测外，还有一些其他的实验室诊断方法可用于梅毒的诊断，如梅毒螺旋体的免疫组化检测、蛋白质多肽检测和生物传感器检测等。
这些方法在梅毒的诊断中起着一定的辅助作用，可以提高诊断的准确性和灵敏度。
总结。
梅毒实验室诊断标准是通过血清学检测、直接检测和其他检测方法来确定患者是否感染了梅毒。
这些实验室诊断方法各有优势和局限性，临床医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果综合判断，以提高梅毒的诊断准确性和治疗效果。
希望本文对临床医生在梅毒的实验室诊断方面有所帮助，提高对梅毒的诊断和治疗水平。
梅毒的实验室检查与技术规范
梅毒的实验室检查与技术规范概述梅毒（syphilis）是一种由螺旋体梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。
梅毒的及时检测和确诊对于治疗及防止梅毒的传播至关重要。
本文将探讨梅毒的实验室检查方法和相关的技术规范。
实验室检查方法血清学检测血清学检测是梅毒的首选检测方法，常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体凝集试验（non-treponemal tests）和梅毒螺旋体特异性试验（treponemal tests）。
非梅毒螺旋体凝集试验包括梅毒螺旋体血清检测（VDRL）和荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）。
这些试验通过检测抗体反应来判断是否感染梅毒，并可评估感染程度。
梅毒螺旋体特异性试验主要包括T. pallidum颗粒凝集试验（TP-PA）和ELISA试验。
这些试验可以进一步证实梅毒感染，并对阳性样本进行确认。
分子生物学检测分子生物学检测方法可以直接检测梅毒螺旋体的基因组或其特异性基因片段。
常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应（PCR）和DNA杂交试验。
PCR技术可在早期感染时检测到梅毒螺旋体的DNA，具有高度敏感性和特异性。
DNA杂交试验主要用于检测神经梅毒，可检测到T. pallidum在脑脊髓液中的存在。
细菌学检测细菌学检测是直接观察样本中是否存在活动的梅毒螺旋体。
常用的细菌学检测方法有暗视野显微镜检查、苏木精-伊红染色和螺旋体培养。
在显微镜下观察暗视野试验时，活动的梅毒螺旋体会显示出旋转的运动。
苏木精-伊红染色可以染出梅毒螺旋体的形态。
螺旋体培养可以将梅毒螺旋体培养出来，但是需要较长的培养周期，并且并非常规检测方法。
技术规范为确保梅毒实验室检查结果的准确性和可靠性，以下是一些常见的技术规范：1.实验室人员需接受充分的培训，熟悉各项检测方法和技术操作流程，并按照操作规程执行。
2.所有试剂和材料必须符合质量管理规范，并保持良好的保存和标识。
3.实验室必须建立完善的质量控制体系，包括使用标准品进行日常质控、参加外部质控项目以及进行内部质量评估。
2022梅毒实验室检测方法汇总(全文)
2022梅毒实验室检测方法汇总(全文)梅毒(syphilis )是一种全球分布的系统性性传播疾病，它的病原体是苍白密螺旋体(Treponema pallidum , TP )(又称梅毒螺旋体X人是梅毒的唯一传染源，感染后，既能产生各种各样的症状，又可多年无症状而呈潜伏状态。
患病后病程漫长，早期侵犯生殖器和皮肤，晚期侵犯全身各器官，并生多种多样的症状和体征，病变几乎能累及全身各个脏器。
在艾滋病出现之前，是最令人生畏的性传播疾病。
01、中国梅毒感染现状据统计，2010年至2020年,中国梅毒累计发病4832807例，累计死亡652 例。
2020年中国梅毒发病数量为464435例相比2019年减少了71384例；死亡人数为54例，相比2019年增长了12例。
2020年中国梅毒发病率为33.0831/10万，死亡率为0.0038/10万;2019年中国梅毒发病率为38.3677/10万,死亡率为0.003/10万。
---- 出生时不能诊断胎传梅毒的儿童，任何一次随访过程中非梅毒螺旋体血清学试验由阴转阳，或滴度上升，且梅毒螺旋体血清学试验阳性。
试验仍阳性。
梅毒螺旋体细长,5-15x0.1-0.2um，形似细密的弹簧，螺旋弯曲规则，平均8-14个，两端尖直。
电镜下显示梅毒螺旋体结构复杂,从外向内分为:夕卜膜（主要由蛋白质、糖及类脂组成）、轴丝（主要由蛋白质组成）、圆柱形菌体（包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物）,—般染料不易着色。
在光镜暗视野下，人们仅能看到梅毒螺旋体的折光性,其活动较强。
内鞭毛细胞膜外膜主要传播途径有:性传播、血液传播和母婴传播，临床表现分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒。
03、梅毒的实验室检测方法梅毒的确诊依据临床症状与实验室检测。
实验室检测分为以下几类:01、暗视野显微镜检查暗视野显微镜下，典型的梅毒螺旋体呈白色发光，其螺旋较密而均匀，平均814个。
运动规律,运动性较强，观察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。
梅毒实验室检测汇总PPT课件
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
? 原理（抗心磷脂抗体）：
? 人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的 一种类脂成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激 机体产生类脂质抗体（反应素）。
? 主要是IgM和IgG混合抗体。 ? 抗体产生时间
? 感染3周-4周，硬下疳出现1周-2周 ? 一般在感染后5～7周（或硬下疳出现后2～3周）产生。
应是真阳性还是假阳性。 ? 一旦这些试验呈阳性，则患者终身阳性。
方法特点
? 特异性强，敏感性高
?很少出现假阳性。据统计，在普通人群中， 有
1%的生物学假阳性发生。 ① 如系统性红斑狼疮患者血清可使 FTA-ABS 试验
呈假阳性反应，但大多数病例中螺旋体呈串株状 荧光。 ② 传染性单核细胞增多症，可能由于嗜异性抗体所 致，可使 TPHA呈假阳性。 ③麻风患者也可使特异试验呈阳性。
结果判断
? 1.观察加未致敏颗粒的第3孔，不出现凝集为 有效试验。
? 2. 观察凝集反应强度：分级如下。
4+：颗粒光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠。 3+： 颗粒光滑覆盖大部分孔底。 2+：颗粒光滑集聚覆盖孔底，周围有一颗粒环。 1+： 颗粒光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显颗粒 环。 ±：颗粒沉集孔底，中央形成一小点。 一：颗粒紧密沉积孔底中央。
孔内，第1孔100微升，第2～4孔各25微升。 3. 样本稀释：取血清25微升加至第1孔，混匀后取25微升至第
2孔，混匀后取25微升至第3孔，混匀后取25微升至第4孔， 混匀后弃去25微升。 4. 加对照液：第3孔加未致敏颗粒25微升，第4孔加致敏颗粒 25微升。 5. 混合：将反应板置振荡器振荡30秒。 6.反应：置有盖湿盒，孵育2 h，或放4℃冰箱过夜观察结果。
梅毒-实验室诊断
梅毒实验室诊断技术
目前主要有两种: 梅毒螺旋体检查 （病原学） 梅毒血清抗体检 测（血清学）
梅毒螺旋体检查--早期梅毒的最佳方法
诊断一期梅毒、二期梅毒
时，可取患者的渗出液或淋
巴结穿刺术得到的组织液，
在暗视野显微镜下观察螺旋
体的特征性形态和运动方式
检查方法
1．暗视野显微镜检查 2．免疫荧光染色
2、如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患 梅毒的可能性，这可能是由取材不当
或皮损处螺旋体数量不足，或患者使
用过抗菌素，损害已接近自然消退等
原因引起。可让患者复查及进行血清
学检查。
梅毒血清抗体检测
抗体出现的时间：
感染梅毒螺旋体，1～4周后出现抗体
抗体的分类：
非特异性反应素抗体--抗类脂质抗体 特异性抗体--抗梅毒螺旋体抗体
抗体的主要成分： IgM和IgG
梅毒血清学试验的分类
非梅毒螺旋体抗原血清试验 RPR TRUST 梅毒螺旋体抗原血清试验： TPPA ELISA
非梅毒螺旋体血清试验
抗类脂抗原的抗体
即是反应素 是机体对损害细胞和梅毒螺旋体表 面所释放的脂类物质的免疫反应 现在学术认为5-7周产生反应素 是IgM和IgG的混合体 未经治疗可长期存在，经正规治疗 后这种抗体减少转成阴性 是用心磷脂 卵磷脂和胆固醇作检 测抗原
梅毒螺旋体血清试验 敏感性和特异性均高 FTA-ABS操作繁复 需熟练 的技术人员和实验室的设 TPPA有试剂盒用作确诊试 验 价格比较贵不能用于大量人 群 患梅毒后终身阳性 不能用作 治疗后随访
非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应
定义:不存在梅毒感染 但血清学反应呈阳性 假阳性反应可分为 技术性假阳性 标本的采取 保存 运送和实验室操作的误差而 产生 可重复试验 即可证实为阴性 生物学假阳性 事实上不存在梅毒感染 而是其他非技术性因 素所产生的阳性反应 在“正常”的人群中发生率 约为1/4000
梅毒实验室诊断金标准
梅毒实验室诊断金标准
梅毒是一种由螺旋体属细菌梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。
实验室诊断梅毒的金标准包括以下几种方法：
1. 直接检测：通过显微镜观察梅毒螺旋体的存在。
常用的方法包括暗视场显微镜检查（dark-field microscopy）和免疫荧光染
色（immunofluorescence staining）。
2. 血清学检测：主要包括非特异性反应和特异性反应两个层次的检测。
- 非特异性反应：通过检测体液中的非特异性抗体来提供梅
毒感染的线索。
最常用的是非梅毒螺旋体抗原卡（Non-Treponemal Antigen Test），主要有梅毒假阳性试验（Rapid Plasma Reagin，RPR）和梅毒螺旋体试验（Venereal Disease Research Laboratory，VDRL）等。
- 特异性反应：通过检测体液中的特异性抗体来确认梅毒感
染的诊断。
最常用的是梅毒螺旋体抗原检测（Treponemal Antigen Test），主要有梅毒螺旋体颗粒血清试验（Treponema Pallidum Particle Agglutination Assay，TPPA）和梅毒螺旋体酶
联免疫吸附试验（Treponema Pallidum Enzyme Immunoassay，TP-EIA）等。
这些实验室诊断方法可以互相配合，提供梅毒感染的准确诊断
结果。
综合上述的非特异性反应和特异性反应的检测结果，并结合临床表现和流行病学史，可以得出梅毒的确诊结论。
梅毒实验室检测
其原理和成分与RPR试 验相同 用红色的甲苯胺红替 代了碳颗粒
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
RPR
TRUST
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、 敏感性和特异性较好。适用于大量人群的初筛。
经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗
效观察、判愈、复发或再感染的指征。
特异性梅毒血清试验假阳性的主要原因有自身免 疫病、心血管病、麻风、莱姆病、地方性密螺旋 体病及老年人等。
梅毒螺旋体抗原血清学试验的意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验初筛阳性标本的 确证试验。 梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA等梅毒螺旋体 抗体试验试验仍可阳性，故TPPA等试验阳性不
能作为疗效观察的指标。
克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物 与酶标记物结合，用酶联检测仪判定试验 阳性反应。
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
FTA-ABS试验是检测梅毒的“金标准”。其原
理是将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸
收剂（用Reiter螺旋体制备而成）吸收过的梅毒患者 血清形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FTIC） 标记的抗人免疫球蛋白，与抗梅毒螺旋体抗体结合， 形成荧光的抗原抗体复合物。在荧光显微镜下，螺旋
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染，应
结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
谢
ห้องสมุดไป่ตู้
谢
另外，TP破坏人体组织，使组织释放一种抗原性心磷脂酶 ，刺激机体产生反应素，在感染TP后5～7周或出现硬下 疳后2～3周转阳性。
梅毒血清学检测分类
(1)非梅毒螺旋体抗原血清学试验 ---非特异性梅毒抗体 (2)梅毒螺旋体抗原血清学试验 ---特异性梅毒抗体
梅毒的实验室诊断标准
梅毒的实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其诊断对于预防和治疗具有重要意义。
实验室诊断是梅毒诊断的重要手段之一，本文将介绍梅毒的实验室诊断标准，以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒。
一、血清学检测。
血清学检测是梅毒诊断的金标准之一。
包括非梅毒螺旋体抗体（非梅毒螺旋体特异性抗体）和梅毒螺旋体抗体（梅毒螺旋体特异性抗体）两种检测方法。
非梅毒螺旋体抗体包括非梅毒螺旋体血凝试验（Nontreponemal serologic test，如RPR试验）和梅毒螺旋体抗体包括梅毒螺旋体血凝试验（Treponemal serologic test，如TPPA试验）。
在实验室诊断中，通常要求首先进行非梅毒螺旋体抗体检测，如RPR试验，若结果阳性，则需进行梅毒螺旋体抗体检测，如TPPA试验，以确认诊断。
二、直接检测。
直接检测是指在患者临床症状出现后，通过镜检或PCR等方法直接检测患者体液中的梅毒螺旋体。
常用的直接检测方法包括血清暗视野显微镜检查、梅毒螺旋体DNA检测等。
直接检测方法能够更快速地确定患者是否感染了梅毒，对于早期感染的患者具有重要意义。
三、其他实验室检测。
除了血清学检测和直接检测外，还有一些其他实验室检测方法可辅助梅毒的诊断，如梅毒螺旋体培养、梅毒螺旋体分子生物学检测、梅毒螺旋体抗原检测等。
这些方法在实验室诊断中起着重要的辅助作用，能够提高梅毒诊断的准确性和灵敏度。
综上所述，梅毒的实验室诊断标准主要包括血清学检测、直接检测和其他实验室检测方法。
在临床实践中，医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果，综合判断患者是否感染了梅毒，以便及时进行治疗和干预。
希望本文能够帮助临床医生更好地理解梅毒的实验室诊断标准，提高梅毒的诊断水平，为患者的健康保驾护航。
梅毒的实验室检测及临床意义
梅毒的实验室检测及临床意义内容摘要：梅毒的实验室检测分病原学检测、过筛试验和确诊试验。
因检测方法较多，很多医护人员、甚至实验室人员也不能完全掌握。
为方便理解，以表格的形式总结了4种过筛试验和7种确诊试验的区别；以表格的形式总结了过筛试验与确诊试验不同结果的4种组合模式所对应的临床意义。
WHO推荐用VDRL和RPR方法（现临床常用TRUST方法代替）对血清进行过筛试验，出现阳性者用TPPA、TPHA （现临床常用TP-ELISA代替）等方法做确证试验，本文对这些试验作了重点介绍。
人体感染梅毒螺旋体3～6周后，可在患者血清中检出2种抗体，一种是针对螺旋体抗原的抗体，另一种是针对非螺旋体抗原（心磷脂）的抗体。
抗体又称为反应素。
梅毒的实验室检测分病原学检测、过筛试验和确诊试验。
一、病原学检测：材料：1.暗视野显微镜。
2.钝刀、无菌盐水、载玻片、盖玻片、注射器等。
方法： 1.取材：①皮肤粘膜损害部位取材：先在玻片上加无菌盐水1滴，用棉拭子擦去皮损部位污物，如有痂皮，可用钝刀除去，嘱患者用手挤压皮损周围，使组织液渗出，用钝刀轻轻地刮取组织液(避免出血)，将组织渗出液与玻片上无菌盐水混合，加盖玻片后镜检。
②淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用1m1注射器配12号针头，吸取0.25-0.5ml无菌盐水，以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再吸入注射器内，如此反复二三次，取少量淋巴液直接滴加于玻片上加盖片后镜检。
③羊膜穿刺术：梅毒孕妇的羊膜穿刺术应由专业人员操作，获得羊水直接滴加于玻片，加盖片后镜检。
2.显微镜检查：①打开暗视野显微镜，在聚光器上加一滴蒸馏水(湿式)。
②将玻片置于载物台上。
③上升聚光器使蒸馏水接触玻片的底部，先用 10倍物镜调焦，再用40倍物镜观察。
【结果】在暗视野显微镜下，如有发光的典型螺旋状梅毒螺旋体及特征性运动方式(旋转运动、伸缩移行、弯曲前行)为阳性结果。
二过筛试验（非梅毒螺旋体抗原试验）：检测针对心磷脂的抗体。
梅毒的实验室检查
梅毒血清反应的假阴性
• 1． 一期梅毒硬下疳：一般硬下疳 出现2-3周，机体才出现反应素，故 早期血清反应常呈阴性。
• 2． 感染梅毒立即治疗或晚期梅毒： 由于血清反应素低，出现阴性。
• 3． 二期梅毒假阴性；不到1%的二 期梅毒患者其未稀释的血清VDRL试 验呈阴性或弱阳性反应，而在高度 稀释后反而为阳性，即前带现象 （Prozone phenomenon），这是血 清中抗心磷脂抗体过多，抑制阳性 反应的结果。 • 4． 技术操作或抗原敏感性低出现 血清试验阴性。
• TP-ELISA利用酶的放大系统，提高 了检测灵敏度，甚至可以比TPPA能 更早地检测出梅毒螺旋体特异性抗 体。在梅毒螺旋体特异性抗体和非 特异性抗体中，特异性IgM抗体最早 出现，感染梅毒螺旋体后，机体启 动体液免疫即可产生；抗心磷脂抗 体是当组织被破坏释放心磷脂后才 产生。
• 梅毒螺旋体特异性IgG抗体出现时间 较晚，可终身存在，因此，TPELISA或TPPA阳性无法判断是初次感 染还是既往感染。抗心磷脂抗体可 在梅毒治愈后消失，用TRUST能判断 是新近感染还是既往感染。
• 感染梅毒后，心磷脂抗体出现晚于 特异性螺旋体抗体，晚期梅毒时此 类抗体又部分转阴。有报道，三期 梅毒病人非梅毒螺旋体抗原试验仅 有71%仍为阳性，而梅毒螺旋体抗体 检测几乎均为阳性。 • 因此，非梅毒螺旋体抗原试验不适 于诊断一、三期梅毒，潜伏期梅毒 也不敏感，而且有急慢性的生物学 假阳性和假阴性反应。
• 血清学试验用作先天性梅毒的辅助诊 断，其首要问题是将无症状感染婴儿 从非感染婴儿区别开来，这些婴儿的 母亲梅毒血清试验阳性，困难在于不 能将母亲体液免疫反应同婴儿的抗体 反应相区别，因为母亲的IgG可传递 给胎儿。另外由于IgG终身存在，所 以很难评价治疗结果。血清学诊断常 常又存在着假阳性。
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张国军（首都医科大学附属北京天坛医院实验诊断中心）写在课前的话梅毒是一种慢性、系统性疾病。
学员通过本课件的学习，要熟悉梅毒的定义、传播途径及临床分期；掌握不同时期梅毒的治疗方法；掌握梅毒实验室检测方法和梅毒免疫学反应；掌握梅毒血清学实验的原理、特点及各自优缺点；掌握先天性梅毒和神经梅毒的诊断方法。
一．梅毒概况及临床分期梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性、系统性性传播疾病。
人体受感染后，螺旋体很快播散到全身，可侵犯全身各组织与器官，临床表现多样，且时隐时显，病程较长。
梅毒早期主要侵犯皮肤及粘膜，晚期除侵犯皮肤、粘膜外，还可侵犯心脏血管系统及中枢神经系统等全身各个系统；另一方面，梅毒又可多年无症状而呈潜伏状态。
主要传播途径:性接触传染是最主要的传播方式；其次是垂直传播。
随着梅毒在人群中流行率升高，母婴垂直传播发生率日益上升，并伴随着包括诊断、治疗、阻断等在内的一系列问题；第三，输血传播。
输血传播曾经是梅毒重要的传播方式。
但随着血液筛查的广泛开展及输血的减少，梅毒经输血传播已很少发生。
但近年来，由于艾滋病的流行，梅毒仍然是输血安全的威胁。
临床分期：一期梅毒：主要表现为单个、无痛性的硬下疳，通常在感染梅毒螺旋体后3 - 4 周出现；二期梅毒：一期梅毒不经治疗，梅毒螺旋体在几周到几个月后会播散到血液中，引起二期梅毒。
二期梅毒的临床表现多样，常见发热、淋巴结病、弥漫性皮疹、生殖道或会阴湿疣等。
一、二期梅毒统称为早期梅毒；三期或晚期梅毒：在最初感染的数年至十数年后发生，可累及任何器官，常见梅毒瘤性梅毒、心血管梅毒以及神经梅毒。
隐性梅毒：无症状但梅毒血清学试验呈阳性。
分为早期隐性梅毒（病程一般在一年以内）和晚期隐性梅毒（病程一般在一年以上）。
二．梅毒的治疗非口服途径的青霉素可用于各期梅毒的治疗。
早期梅毒的治疗首选240 万单位苄星青霉素G单次肌肉注射。
对青霉素过敏者，替代治疗方案有强力霉素，口服，每次100 mg，每日2 次，持续2 周，或四环素，口服，每次500 mg，每日4 次，持续2 周。
早期隐性梅毒的治疗方案与早期梅毒相同。
晚期隐性梅毒的首选治疗方案为每周一次肌肉注射240 万单位苄星青霉素G，持续3 周；对青霉素过敏者，替代治疗方案有强力霉素，口服，每次100 mg，每日2 次，持续4 周，或四环素，口服，每次500 mg，每日4 次，持续4 周。
合并HIV感染、梅毒瘤性梅毒、心血管梅毒的治疗方案同晚期隐性梅毒相同。
神经梅毒治疗只能采用青霉素，静脉注射水溶性青霉素G，每4 小时300 - 400万单位，持续10 - 14 天，或肌肉注射普鲁卡因青霉素G，每天240 万单位，持续10 - 14 天，同时口服丙磺舒，每日500 mg，每日4 次，持续10 - 14 天。
孕妇的治疗只能采用青霉素，青霉素过敏者需经脱敏后再治疗。
早期梅毒应如何治疗？三．实验室检测暗视野显微镜检查法：是主要的梅毒病原学诊断方法,是最特异的一期梅毒检测方法。
取材部位以硬下疳为主，也可从宫颈、阴道、淋巴结等处取材。
阳性可确诊，阴性不能排除梅毒（需在3 周内不同的3 天采样检测，才能得出阴性结果）。
暗视野显微镜法诊断的准确性受操作者的经验、病灶中活螺旋体的数量以及口腔、肛门破损处存在的非致病性螺旋体等因素的影响。
镀银染色法：与暗视野检查法的临床意义基本相同。
该法利用梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色，再通过普通高倍显微镜进行观察。
直接免疫荧光法（DFA）：是目前国外采用较多的方法，其特异性及敏感性均优于暗视野显微镜检查法。
将特异性的抗梅毒螺旋体单克隆抗体用荧光素标记，如果标本中存在梅毒螺旋体，则通过抗原抗体特异性结合，在荧光显微镜下可见到发苹果绿色的梅毒螺旋体。
此法可区分梅毒螺旋体和其他非致病性或条件致病性螺旋体。
聚合酶链反应（PCR）：能对生殖器溃疡进行早期鉴别诊断，区分梅毒、生殖器疱疹和软下疳。
它又可分为PCR和RT-PCR。
PCR的设计主要针对编码梅毒螺旋特异性抗原和TpN47的DNA开放编码区，常见的引物有K03A、K04、47-1、47-2、47-3、47-4等。
由于在PCR中会偶然出现非特异的PCR产物而干扰结果，因此必须用特异性DNA探针进行DNA-DNA杂交来提高PCR的特异性及敏感性。
此外，由于TpN47的保守性，雅司螺旋体可产生类似的PCR产物，所以这种设计的PCR不能区分梅毒和雅司；但可以区分梅毒螺旋体和引博氏疏螺旋体，这就可以解决梅毒与莱姆病之间血清诊断中的免疫交叉的问题。
另外一种是RT-PCR，常见的设计是针对梅毒螺旋体的16s rRNA 366bp片段，这种方法污染少，特异性敏感性都比较高，但价格也较高。
PCR在梅毒持续感染中的诊断价值目前还没有一致的意见，理论上讲PCR可以查出死亡的TP，所以治疗后PCR阳性并不意味着治疗失败，但死亡的TP从机体内清除比较快（15-30 天），而存活的TP从机体内清除至少需120天，所以治疗数周后PCR阳性意味着持续感染的可能。
此外也有将PCR用于产前诊断和神经梅毒诊断的报道。
四．免疫学反应人类对梅毒没有先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，只能在受感染后产生感染性免疫。
已完全治愈的早期梅毒患者仍可再感染。
感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后可检出，早期梅毒治疗3 - 9 个月或晚期梅毒治疗2 年后，大部分病人IgM 可转阴，再感染时又出现阳性，所以IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现。
通常感染梅毒4 周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血液中可检到。
另一种具有抗体性质的物质叫反应素，是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。
反应素一般在感染后5 - 7 周，或下疳出现后2 - 3 周产生，经正规治疗后可以逐渐消失。
胎儿在宫内感染梅毒螺旋体后，胚胎的晚期6 - 9 个月时，已能合成IgM型抗体，出生后第3个月开始形成IgG型抗体；IgM抗体不能通过胎盘，而IgG型抗体能通过胎盘，如果在患儿血清中检出IgM是诊断先天性梅毒的有力的证据，但IgM阴性并不能排除先天性梅毒。
五．梅毒血清学试验（一）非特异性梅毒血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清试验是以心磷脂、卵磷脂以及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。
有以下四种试验，原理基本相同：①性病研究实验室玻片试验（VDRL）。
试剂需现配现用，并且要在显微镜下观察结果，故国内实验室很少采用。
但VDRL是诊断神经性梅毒最特异的血清学方法。
②不加热血清反应素试验（USR）。
试剂不需要现配现用，但仍然要在显微镜下观察结果，现在已很少使用。
③快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）。
在特制的纸片上进行，加入一定量特制炭粉，可使抗原抗体出现凝集，用肉眼可观察结果。
④甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）。
在试剂中以红色的甲苯胺红颗粒代替黑色的炭粉颗粒，使结果更容易观察。
本试验的缺点：特异性。
在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、结缔组织病、肿瘤、静脉吸毒者、老年人以及孕妇中均可出现反应素，所以此类试验有时会出现假阳性；敏感性。
感染梅毒后反应素的出现时间晚于特异性梅毒螺旋体抗体，因此非梅毒螺旋体抗原血清试验对一期梅毒的漏检率比较高。
RPR或TRUST有时出现弱阳性或阴性结果，而临床的二期梅毒检测需将患者血清稀释后做定量的试验，如果再出现阳性结果，则为抗体过量引起的“钩状效应”，大约1%-2%的二期梅毒病人可出现假阴性。
另外，晚期梅毒反应素转阴率较高，此类试验对隐性梅毒不太敏感，因此此类试验漏检较多。
本试验的优点：阳性患者往往是梅毒现症感染者，临床上即可开展治疗；该试验表现为滴度随成功的治疗而逐渐下降，可作为疗效观察的指标；价格低廉。
测定非梅毒螺旋体抗原血清试验的滴度进行疗效观察：①治疗成功：早期梅毒患者在治疗后6 个月内症状消失，并且非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度有至少4 倍下降。
晚期或隐性梅毒患者在治疗后12 - 24 个月内非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度有至少4 倍下降，说明治疗较成功。
②治疗失败：治疗后症状持续或重新出现；治疗后非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度反而上升4倍或以上；本试验初始滴度比较高（1:32 或以上），但在六个月内没有达到4 倍下降。
抗梅毒治疗失败的病人应考虑是否有合并HIV感染及神经梅毒可能性。
③血清固定。
经正规治疗后，梅毒患者非梅毒螺旋体抗原血清试验一般都会转为阴性，但是有约1% - 3% 的病人即使经足量抗梅治疗，非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度仍然可持续呈低滴度阳性，此现象称为血清固定，原因尚不清楚。
血清固定患者的滴度重又上升则提示再次感染梅毒。
（二）特异性梅毒血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验是用梅毒螺旋体作为抗原检测血清当中的抗螺旋体的IgM或者IgG抗体，其敏感性和特异性均高于非梅毒螺旋体抗原血清试验，但不能用作疗效观察的指标。
常用五种方法：荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验；梅毒螺旋体血球凝集试验；梅毒螺旋体明胶凝集试验；梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验；梅毒螺旋体快速诊断试验。
1.荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）：是所有螺旋体试验中最敏感的方法，特异性高，通常被认为是检测梅毒的“金标准”。
且该试验可分开检测IgM和IgG。
但是该法在技术操作上最困难，试验操作及结果判读都必须核实。
试验可靠性的关键是标准化的结果判断、高质量的荧光标记抗体及适当的稀释度。
由于实验室操作繁琐及主观判断经常会产生错误的结果，因此增加标记荧光标记染料的复染可以减低标准化过程中的错误，并增加其可读性及重复性。
由于该试验需要优质的荧光显微镜和技术熟练的操作人员，所以通常不被临床实验室作为常规方法进行开展。
2.梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）：原理是用超声裂解的梅毒螺旋体作为抗原，致敏经醛化、鞣化的羊或禽类红细胞，此致敏红细胞与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，可产生肉眼可见的凝集反应。
TPHA的优点：该法比FTA-ABS容易操作且稳定性好，敏感性除早期梅毒外与FTA-ABS相似，对大样本进行批量检测时，操作也较容易。
不足：由于红细胞具有生物活性，可能产生非特异性凝集，且保存的时间较短，批间差较大，所以在实际使用当中也存在一些问题。
目前国内使用的商品化TPHA试剂盒均没有通过国家批批检。
3.梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）：原理与TPHA的原理基本相同，但它以人工合成的惰性明胶颗粒代替TPHA中的红细胞作为载体，是TPHA的升级产品。
优点：试剂稳定，批间差小；结果判读更为清晰明确；敏感性和特异性较TPHA进一步提高；通过了国家的批批检。