实验八 罐头食品中锡含量的测定

实验十二 罐头食品中锡含量的测定

(苯芴酮比色法)

一、实验目的

1.掌握苯芴酮比色法测定重金属元素锡的基本原理与操作技术；

2.了解可见光分光光度计的结构及使用方法；

3.了解罐头食品中重金属元素锡的含量。

二、实验原理

样品经HNO 3-H 2SO 4消化后，破坏了有机化合物，并将部分Sn 2+→Sn 4+。在弱酸性(pH1.0~1.2)溶液中，Sn 4+与苯芴酮生成微溶性的橙红色络合物(λmax =490nm ), 在保护性胶体(动物胶)存在下进行比色测定, 与标准系列比较定量。反应式如下：

橙红色络合物(λmax =490nm )

干扰离子有Fe, Ge, Sb, Co, Ga 等，加入抗坏血酸和酒石酸均可掩蔽。

三、主要试剂和仪器

1.试剂—

①消化试剂—浓HNO 3+浓H 2SO 4

②调pH 试剂—1%酚酞(95%乙醇)+1:1氨水

③保护试剂—0.5%动物胶(临用时配制)

④掩蔽剂—1%抗坏血酸(临用时配制)+10%酒石酸

⑤1:9 H 2SO 4

⑥显色剂—0.01% 苯芴酮(甲醇配制)：称取0.010g 苯芴酮(2,3,7-三羟基-6-荧光酮)加少量甲醇及1:9 H 2SO 4数滴溶解，以甲醇稀释至100ml 。

⑦Sn 标准溶液—10μg/ml (1:9 H 2SO 4稀释)：精密称取0.1000g 金属锡(99.99%)，置于50ml 烧杯中，加10ml H 2SO 4，盖上表面皿，加热至锡完全溶解，移去表面皿，继续加热至产生浓白烟，冷却，慢慢加5ml 水，移入100ml 容量瓶中，用1:9 H 2SO 4多次洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，并用1:9 H 2SO 4稀释至100ml ，混匀即含锡1mg/ml 。使用时再以1:9 H 2SO 4稀释至含锡10μg/ml 。 O C 6H 5OH OH O H O +Sn 2 4+ pH1.0~1.2 Sn O C 6H 5O O O H O O

C 6H 5O O OH O +4H +

2.仪器—

①可见光分光度计

②具塞比色管，50ml

③容量瓶及K 氏烧瓶等常规玻璃器皿

四、测定方法—

1.样品处理

①将样品捣碎并搅拌均匀，称取适量样品 (5.00 g )入250~500mlK 氏烧瓶。 ②加入浓HNO 3 10～15ml 和浓H 2SO 4 5～10ml ，小火加热消化，待泡沫停止后即加大火力消化分解样品。

③当消化瓶内容物变棕色时即补加HNO 3(必要时)，至溶液透明或带黄色，颜色不再转深。继续加热数分钟到浓白烟逸出，冷却，加入20ml 重蒸馏水后继续加热至冒浓白烟（称为赶酸）。

④冷却后将K 氏烧瓶内容物转入25 m l 容量瓶中，加重蒸馏水稀释到刻度，摇匀。同时做试剂空白。

2.标准曲线制备

①精密吸取Sn 标准溶液(10μg/ml)0.0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0ml (含Sn 0, 2, 4, 6, 7, 10μg)分别入6个25ml 比色管。

②各加入0.5ml10%酒石酸、1d 酚酞，混匀后用1:1氨水调至淡红色。

③各比色管分别加入3ml 1:9 H 2SO 4、1ml0.5%动物胶及2.5ml1%抗坏血酸后，均加水至25ml ，混匀。

④再各加0.01%苯芴酮2ml ，混匀，1h 后用2 cm 比色皿于λmax =490nm 下分别测定各比色管吸光度A(0号管调零)并记录。

⑤以锡含量(μg/25ml)为横坐标，吸光度A 为纵坐标绘制A~c 标准曲线或计算直线回归方程。

3.样品测定

分别吸取样品消化液和试剂空白消化液各1~5ml 入25ml 比色管，均加入0.5ml10%酒石酸后同标准曲线绘制操作，分别测定样品消化液和空白消化液吸光度 (A, A 0)，于标准曲线上查出样品消化液和空白消化液中锡含量(c, c 0)。

五、计算

式中 c —测定用样品消化液中锡含量，μg

c 0 —测定用空白液中锡含量, μg

V 0—样品消化液总体积，25？100？ml

V —测定用样品消化液体积, 1.0~5.0ml

()()V

V m C -C mg/Kg 0010001000⨯⨯⨯=样品中锡含量

m—样品质量，g