第八章分子生物学常用技术的原理和应用与人类基因组学

第八章分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学

测试题

一、名词解释

1．分子杂交

2．Southern blotting

3．Northern blotting

4．Western blotting

5．dot blotting

6．DNA芯片技术

7．PCR

8．功能性克隆

9．转基因技术

二、填空题

1．Southern blotting用于研究、Northern blotting用于研究，Western blotting用于研究。

2．PCR的基本反应步骤包括、和三步。

3. 在PCR反应体系中，除了DNA模板外，还需加入、、和。

4．Sange法测序的基本步骤包括、、和。

5．目前克隆致病相关基因的主要策略有、、。

6．血友病第Ⅷ因子基因的首次克隆成功所采用的克隆策略是，而DMD致病基因的克隆所采用的克隆策略是。

三、选择题

A型题

1. 经电泳分离后将RNA转移到硝酸纤维素(NC)膜上的技术是：

A．Southern blotting B．Northern blotting

C．Western blotting D．dot blotting

E．in situ hybridization

2. 不经电泳分离直接将样品点在NC膜上的技术是

A．Southern blotting B．Northern blotting

C．Western blotting D．Dot blotting

E．in situ hybridization

3. 经电泳分离后将蛋白质转移到NC膜上的技术是

A．Southern blotting B.Northern blotting

C．Western blotting D．dot blotting

E．in situ hybridization

4. 经电泳后将DNA转移至NC膜上的技术是

A．Southern blotting B．Northern blotting

C．Western blotting D．Eastern blotting

E．in situ hybridization

5. PCR的特点不包括

A．时间短，只需数小时 B．扩增产物量大

C. 只需微量模板 D．用途非常广泛

E. 底物必须标记

6．用于PCR的DNA聚合酶必须

A．耐热 B．耐高压 C. 耐酸 D．耐碱 E. 耐低温

7．PCR反应过程中，模板DNA变性所需温度一般是

A．95 °C B．85 °C C．75 °C D．65 °C E．55 °C 8．PCR反应过程中，退火温度一般是

A．72 °C B．85 °C C．75 °C D．65 °C E．55 °C 9. PCR反应过程中，引物延伸所需温度一般是

A．95 °C B. 82 °C C．72 °C D．62 °C E．55 °C 10．PCR反应体系不包括

A. 模板DNA B．TaqDNA聚合酶

C. 上、下游特异性引物A、B D．ddNTP

E．含Mg2+的缓冲液

11．PCR的循环次数一般为

A．5～10次 B．10～15次 C．15～20次

D．20～25次 E．25～30次

12．PCR反应体系与双脱氧末端终止法测序体系不同的是缺少A．模板 B．引物 C. DNA聚合酶

D．ddNTP E．缓冲液

13．Sanger法测序不需要

A．Klenow小片段 B．引物 C. dNTP

D．标记dNTP E．ddNTP

14．Sanger法测序的基本步骤不包括

A．标记模板 B．模板一引物杂交 C．电泳

D．引物的延长与合成阻断 E．放射自显影直读图

15．Sanger法测序的四个反应体系中应分别加入不同的

A．模板 B．引物 C标记dNTP

D．DNA聚合酶 E. ddNTP

16．人类基因组计划的主要研究内容不包括

A．遗传图分析 B．物理图分析 C．转录图分析

D. 序列图分析 E．蛋白质功能分析

17．1996年，英国科学家克隆的Dolly羊所采用的技术是

A．转基因技术 B．核转移技术 C．基因剔除技术

D．肽核酸技术 E. 反义核酸技术

18．Maxam—Gilbert法与Sanger法测序的共同点是均需

A. 引物 B．Klenow大片段 C. ddNTP

D. 化学裂解试剂 E．电泳后放射自显影读图

19．Sanger法测序所得直读图像中，由终点至始点所读序列为A．待测DNA5¢到3¢的碱基序列

B．待测DNA3¢到5¢的碱基序列

C．待测DNA互补链3¢到5¢的碱基序列

D．待测DNA互补链5¢到3¢的碱基序列

E．引物5¢到3¢的碱基序列

20．PCR实验的特异性主要取决于：

A．DNA聚合酶的种类 B. 反应体系中模板DNA的量

C．引物序列的结沟和长度 D．四种dNTP的浓度

E. 循环周期的次数

21．基因剔除(knock out)的方法主要被用来研究

A．基因的结构 B．基因的功能 C. 基因的表达

D．基因的调控 E．基因的突变

22. 反义核酸作用主要是

A．封闭DNA B．封闭RNA C．降解DNA

D．降解DNA E．封闭核糖体的功能

23．有关Sanger法测序的叙述，不正确的是

A．只需标记一种dNTP

B. 一般应去除DNA聚合酶I的5¢到3¢外切酶活性

C．与dNTP相比阻断剂应尽可能的多