组织学绪论
组织学与胚胎学(绪论)
4. 理论联系实际，重视标本观察 理论来源于实践，科学的理论能指导实践。
组织学的实验，是在理论的指导下，借助显微镜 观察切片标本。学习正常的组织结构是为进一步 学习病理组织改变打基础的，要认真观察各种微 细结构及其比邻关系。
⑶ 涂片：将游离的细胞直接涂在玻片上染色，
如血液涂片。
⑷ 铺片：将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄
片，铺在载玻片上。
⑸ 磨片：将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成
薄片。
3. 其它常用特殊染色法
⑴ 镀银染色：如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银 溶液中，可将神经元染成棕黑色或棕黄色。
若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中， 再经5%甲醛液还原，能将网状纤维染成黑色，胶原纤 维呈褐色。
（hematoxylin –eosin staining）,简称H-E染色法。
苏木精为碱性染料，它的盐溶液带阳电荷， 能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫 兰色。伊红为酸性染料，它的盐溶液带阴电荷， 能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。
※何谓嗜碱性和嗜酸性？ 组织中的某些结构，易于被碱性染料着色的性
图10 免疫组织化学原理模式图
⑶呈色情况与
观察： ① 常用的荧
光素是异硫氰酸荧 光素发出黄绿色荧 光，四甲基异硫 氰酸罗丹明发出橙 红色荧光。 (见图1—4)
② 辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase， HRP）,它的底物是3，3′-二氨基联苯胺（DAB） 和H2O2。HRP能使DAB氧化形成棕黄色产物。
图：原位杂交(地高辛标记) 大鼠主动脉平滑肌细胞表达弹性蛋白mRNA，胞质呈综黄色。
组织学重点名词解释
第一章组织学绪论1、组织学（histology）:研究机体微细结构及其相关功能的科学。
2、组织（tissue）：由细胞和细胞外基质构成。
人体有四大组织——上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。
3、石蜡切片术（paraffin sectioning）：是一种常见的组织玻片的制作方法。
其步骤为：取材和固定→脱水和包埋→切片和染色→封片4、组织化学术（histochemistry）：为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理或技术，在组织切片中定性、定位地显示某种物质的技术。
第二章上皮组织1、上皮组织（epithelial tissue）：由密集排列的上皮细胞和极少量细胞间质构成的动物的基本组织，被覆在机体体表，或衬于机体内中空器官的腔面，以及体腔腔面。
依功能和结构的特点可将上皮组织分为被覆上皮、腺上皮。
2、极性（polarity）：细胞的不同表面在结构与功能上有明显的差异。
3、被覆上皮（covering epithelium）：覆盖在机体内外表面或中空性器官腔面的上皮组织。
4、腺上皮（glandular）：以分泌功能为主的上皮组织。
5、内皮（endothelium）分布在心、血管和淋巴管腔面的单层扁平上皮。
6、间皮（mesothelium）分布在胸膜、腹膜、心包膜表面的单层扁平上皮。
7、杯状细胞（goblet）形似酒杯，底部狭窄，含深染的核，顶部膨大，充满分泌颗粒。
8、腺（gland）以腺上皮为主的器官。
7、外分泌腺（exocrine gland）分泌物可经导管到达体表或器官体腔的腺体。
8、内分泌腺（endocrine gland）分泌物进入血液的腺体。
9、腺泡（acinus）：泡状腺、管泡状腺分泌部。
10、浆液性细胞（serous cell）：核为圆形，位于细胞偏基底部，基底胞质呈强嗜碱性染色，顶部胞质含许多嗜酸性的分泌颗粒，称酶原颗粒。
11、黏液性细胞（mucous cell）：核扁圆形，居细胞基底部；除在核周的少量胞质嗜碱性外，大部分胞质几乎不着色，成泡沫或空泡状。
组织学绪论
（一）名词解释1．组织学2．组织3．器官4．免疫组织化学5．细胞培养技术（二）填空1．研究人体微细结构及其相关功能的科学，称（1），又称（2）。
形态结构和生理功能相同或相近的细胞和细胞间质构成的细胞群体，称（3），人体由4个大的细胞群体构成，称4大（4），即（5）、（6）、（7）和（8）。
这些细胞群体按着一定的规律排列组合，形成了一个个具有一定形态结构和一定生理功能的结构，称（9）。
2．显微镜主要有两大类，即（1）和（2）。
光学显微镜下的长度单位是（3），观察的标本通常要制成（4），并进行（5）染色。
电子显微镜有两种一种叫（6），另一种叫（7），其长度单位是（8）。
（三）选择题从4个备选答案中选择一个正确答案1．孚尔根反应可以用来检测细胞内的A．蛋白质B．脂肪C．多糖D．脱氧核糖核酸2．过碘酸—Schiff反应可以用来检测组织中的A．DNA B．RNA C．多糖D．脂肪3．免疫组织化学技术的原理是A．免疫学B．化学C．物理学D．分子生物学4．核酸分子杂交技术的原理是A．分子生物学B．免疫学C．碱基配对D．组织化学（四）问答题1．何谓组织？人体有哪几种基本组织？2．试述免疫组织化学和免疫细胞化学技术的基本原理、主要用途和常用方法？答案：（一）名词解释1.组织学是研究人体的微细结构及其相关功能的一门科学，内容主要包括细胞、基本组织和器官组织。
组织学又称显微镜解剖学或微细解剖学。
2.组织:形态结构和生理功能相同或相似的细胞和细胞间质构成的具有一定形态结构和一定生理功能的细胞群体，称为组织。
构成人体的基本组织有4种，称四大基本组织，即上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织。
3.器官由四大基本组织按着一定的规律组成的、具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。
人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾等。
4.免疫组织化学：是应用免疫学原理，通过抗原与抗体的特异性结合，显示组织内和细胞内的抗体或抗原成份。
组织学绪论
甲基绿－派若宁反应同时显示DNA与RNA
甲基绿-派若宁反应
三、组织学的学习方法 1.理论联系实际 2.结构与功能的关系断面与立体的关系 4、建立动态变化的概念 5、善于总结，掌握规律
其他的组织学研究技术作为自学内容
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苏木精：为碱性染料
使细胞核和胞质内的核糖体着紫蓝色，称嗜碱性
伊红：为酸性染料
使多数细胞的细胞质着粉红色，称嗜酸性。
名词解释
嗜碱性：易被碱性染料着色的性质称嗜碱性。 嗜酸性：易被酸性染料着色的性质称嗜酸性。 中 性：与碱性或酸性染料亲和力都不强称中性
嗜碱性 嗜酸性
名词解释
嗜铬性：细胞经重铬酸盐处理后呈棕褐色，称嗜铬性
PAS阳性
原理： 多糖
PA 氧化
醛
Schiff
试剂
紫红色沉淀
酶类：
将具有酶活性的组织放入特定底物的溶液中孵育，
底物被酶水解或氧化为初级反应产物，再用捕捉 剂捕获该产物，形成镜下可见的有色沉淀物。
神经元ACP酶阳性
脂类：
苏丹Ⅲ染色，呈红色
锇酸固定染色，呈黑色
苏丹Ⅲ染色
锇酸固定染色
核酸： 福尔根反应显示DNA
组织(tissue): 由细胞和细胞外基质构成， 是构成器官的基本成分。 细胞外基质:包括纤维、基质和体液。
细胞
组织
纤维 细胞间质
基质
组织的类型(四种）
上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织
组织按一定方式组合构成器官。
若干功能相关的器官构成系统。
中空性器官 器官
实质性器官
中空性器官：管壁结构是分层的，学习时由 内向外分出管壁各层的结构。
组 织 学题典
试题第一章组织学绪论一、名词解释二、1、H.E染色2、组织学3、异染性5、超微结构6、组织二、填空题1、光镜结构是指光镜下观察到组织和细胞的微细结构；超微结构是指电镜可观察到或组织更细微的结构。
2、组织切片（光镜下）厚度一般是5~10 um，超薄切片（电镜下）厚度一般是50~80nm 。
3、Hematoxylin是一种碱性染液，使所染的结构着紫蓝色；Eosin是一种酸性染液，使所染的结构着红色。
6、扫描电镜用于观察组织，细胞或器官表面的立体结构；透射电镜用于观察细胞内部的超微结构。
7、细胞和组织的酸性物质或结构与硷性染料亲合力强者，称嗜碱性；而硷性物质或结构与酸性染料亲合力强者，称嗜酸性；若与两种染料的亲合力均不强者，称中性。
三、选择题1、关于细胞间质，下列哪项错误？ BA、是细胞产生的非细胞物质，包括基质和纤维B、血浆、淋巴液、组织液等体液不属于细胞间质C、不同组织的细胞间质成分不同D、细胞间质具有支持、联系、保护和营养细胞的作用E、参与构成细胞的微环境3、对苏木精亲合力强的结构是 DA、细胞膜B、细胞质C、细胞核膜D、细胞核E、脂滴4、对伊红亲合力强的结构是BA、细胞膜B、细胞质C、细胞核膜D、细胞核E、糖原5、光学显微镜的最高分辨率是 CA、 2 nmB、0.2 nmC、0.2 umD、2 umE、5 nm四、判断题1、组织是众多细胞由细胞间质组合在一起的细胞群体。
R2、细胞间质是由细胞产生的非细胞物质，具有支持、联系、保护、营养细胞的作用，并参与构成细胞生存的微环境。
R3、观察细胞内部的超微结构使用扫描电镜，观察细胞和组织的表面结构使用透射电镜。
W4、原位杂交是一种通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段，原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。
R5、组织切片所显示的是细胞、组织和器官的三维图象。
W第二章上皮组织一、名词解释1、连接复合体2、腺上皮3、细胞连接4、内皮5、腺泡6、微绒毛二、填空题1、上皮细胞游离面的特殊结构有微绒毛和纤毛。
01组织学绪论PPT课件
7.细胞培养术（cell culture） • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件 下进行培养；培养组织块或器官则称组织培 养术或器官培养术。 • 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、 形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的 影响。 • 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压 O2和CO2浓度、温度，控制污染。 • 用相差显微镜观察。
扫描电镜图，血细胞
3.组织化学和细胞化学术
组织化学(histochemistry)和细胞化学 (cytochemistry)术是用化学或物理反应原理 显示组织或细胞内某种化学成分，并对其 进行定位、定量及其相关功能的研究。将 该技术应用于游离细胞的样品，则称细胞 化学术。
组织化学术: 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化 学反应、并呈现某种颜色,在显微镜下可观察到
体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）
8. 组织工程（tissue engineering） 将组织学和材料学相结合，利用组织细胞
培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技 术。
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨 骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤 较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤 静脉性溃疡等疾病。
1）普通光学显微镜切片标本的制备方法
• 石蜡切片术(paraffin section): 取材、 固定、脱水、包埋、切片、脱蜡和 染色、封片。
苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining, HE染色法)：
嗜碱性(basophilia):苏木精为碱性染料,可使 细胞核内的染色质和胞质内的核糖体等结 构染成紫蓝色, 易被碱性染料着色的性质称 为嗜碱性。 嗜酸性(acidophilia):伊红为酸性染料,使细胞 质和细胞外基质中的成分染成粉红色,易被 酸性染料着色的性质称为嗜酸性。 中性
组织学与胚胎学重点知识总结-组织学与胚胎学笔记
组织学与胚胎学重点知识总结-组织学与胚胎学笔记组织学与胚胎学重点知识总结第1章组织学绪论1. 组织的概念和类型组织的概念：由形态相似、功能相近的细胞及细胞间质组成的结构。
组织的分类：上皮组织结缔组织肌组织神经组织2. 常用的石蜡切片技术：HE染色，嗜酸性，嗜碱性最常用的染色方法是H-E染色苏木精（碱性染料）：将嗜碱性物质（本身酸性）染成紫蓝色——细胞核中的DNA、RNA, 细胞质中的核糖体伊红（酸性染料）：将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色——细胞质、细胞外基质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网）这种用苏木精和伊红进行联合染色的方法称H-E 染色嗜碱性:易于被碱性染料着色的性质。
可被苏木精染成紫蓝色。
嗜酸性:易于被酸性染料着色的性质。
可被伊红染成红色。
第2章上皮组织1. P9 上皮特点细胞多、间质少极性无血管分布丰富的游离神经末梢3. P10 杯状细胞的分布、光镜特点和功能位置：肠道单层柱状上皮、呼吸道假复层纤毛柱状上皮形态：似高脚酒杯，底部狭窄，含深染的核，顶部膨大，充满粘原颗粒功能：分泌粘蛋白，与水结合成黏液，润滑和保护上皮4. P10 内皮与间皮的概念和光镜特点内皮：衬贴于心脏、血管和淋巴管腔面的单层扁平上皮间皮：分布于胸膜、腹膜、心包膜内表面的单层扁平上皮细胞呈多边形，胞核扁圆形，位于细胞中央垂直观：细胞扁平，中央有核处较厚，其余部分胞质很薄5. 被覆上皮的分类及各类上皮的结构特点1、单层扁平上皮：由一层扁平细胞组成，细胞呈不规则形或多边形，核椭圆形，位于细胞中央2、单层立方上皮：由一层近似立方形的细胞组成。
从上皮表面观察，细胞呈六角形或多边形；从垂直切面上，细胞呈立方形，核园，居中。
3、单层柱状上皮：由一层棱柱状细胞组成。
从表面观察，细胞呈六角形或多角形；在垂直切面上，细胞为柱状，核长椭圆形，常位于细胞近基底部。
4、假复层纤毛柱状上皮：由柱状细胞，梭形细胞，锥形细胞和杯状细胞组成，其中柱状细胞最多，表面有大量纤毛。
组织学与胚胎学笔记—绪论
组织学与胚胎学笔记一绪论1.组织学：是用显微镜技术研究机体微细结构及其相关功能的科学。
2.细胞：是机体形态结构、生理功能和生长发育的基本单位，由细胞膜、细胞质和细胞核三部分构成。
3.组织：由细胞群和细胞外基质构成，人体组织可归纳为四大基本组织，即上皮组织、缔组织、肌组织和神经组织。
4.器官：四大基本组织以不同的种类、数量和方式组合形成，具有一定的形态结构，并完成一定的生理功能。
5.系统：若干器官功能相关的器官构成，完成连续性生理活动。
6.胚胎学：是研究从受精卵发育为新生个体的过程及其机制的科学。
研究内容包括生殖细胞的发生、受精、胚胎发育、胚胎与母体的关系和先天畸形等。
7.HE染色：即苏木精-伊红染色，简称HE染色，是组织学中最常用的染色方法。
苏木精属于碱性染料，它可使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体染成紫蓝色;伊红属于酸性染料，它可使细胞质和细胞外基质中的成分染成红色。
组织结构易于被碱性染料（苏木精）着色的性质，称为嗜碱性，易于被酸性染料（伊红）着色的性质，称为嗜酸性。
第一章上皮组织上皮组织简称上皮，有密集排列的上皮细胞和极少量的细胞外基质组成。
按结构与功能特点分为以下几类：1被覆上皮：覆盖于身体表面，衬贴在体腔和有腔器官内表面。
2.腺上皮：主要行使分泌功能的上皮。
一、被覆上皮（一）、被覆上皮的共同特点细胞多，排列紧密，细胞外基质少；上皮细胞有极性，朝向身体表面或管腔面的一面称为游离面，与其相对的一面向着深部的结缔组织，称为基底面；上皮组织内一般没有血管，营养由结缔组织内的血管透过基膜供给。
（二）、被覆上皮的分类与结构分类依据：按照上皮细胞的层数和细胞（或表层细胞）的形态进行分类。
1.单层扁平上皮（单层鳞状上皮）：由一层扁平细胞组成,侧面观细胞扁平呈梭形。
衬贴在心、血管和淋巴管腔面的单层扁平上皮称内皮；分布在胸膜、腹膜和心包膜表面的单层扁平上皮称间皮。
此种上皮薄，有利于物质通透，并能保持器官表面光滑，减少摩擦。
01-组织学绪论
（四） 组织化学和细胞化学技术
组织化学（histochemistry）和细胞化学（cytochemistry） 组织化学（histochemistry）和细胞化学（cytochemistry）技 术是应用化学反应原理检测组织和细胞的化学成分并进行 定位和定量的技术。组织细胞中的糖类、脂类、蛋白质、 定位和定量的技术。组织细胞中的糖类、脂类、蛋白质、 核酸、酶等均可与相应试剂反应， 核酸、酶等均可与相应试剂反应，最后形成有色反应终产 物或电子致密物，应用光镜或电镜进行观察。 物或电子致密物，应用光镜或电镜进行观察。 糖类物质常用过碘酸-Schiff反应(PAS反应)显示（ 糖类物质常用过碘酸-Schiff反应(PAS反应)显示（图1-4）。 脂类常用苏丹染料、油红O 尼罗蓝等脂溶性染料染色。 脂类常用苏丹染料、油红O、尼罗蓝等脂溶性染料染色。
（六）原位杂交
原位杂交是一种在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术， 原位杂交是一种在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术， 敏感度高，特异性强，是当前分子生物学研究的重要手段。 敏感度高，特异性强，是当前分子生物学研究的重要手段。 原位杂交的原理是两条单核苷酸链通过碱基互补原则紧密 结合，形成稳定的杂交体。根据这一原理， 结合，形成稳定的杂交体。根据这一原理，用一条碱基序 列已知、经特定标记的核苷酸链为探针，与组织切片、 列已知、经特定标记的核苷酸链为探针，与组织切片、细 胞制备或染色体标本中的待检DNA或mRNA片段进行杂交， 胞制备或染色体标本中的待检DNA或mRNA片段进行杂交， 然后显示标记物， 然后显示标记物，从而获得待检核酸的分布和含量等信息 (图1-9) 。按照探针分子的性质，可将其分为cDNA探针、 按照探针分子的性质，可将其分为cDNA探针、 cRNA探针和寡核苷酸探针。 cRNA探针和寡核苷酸探针。
组织学绪论与上皮
变移上皮移行上皮示意图
器官收缩时：细胞层数较多
表层细胞 大立方形
中部细胞 多边形或倒梨状
基底细胞 立方或矮柱状
Transitional epithelium
Transitional epithelium 收缩状态
Transitional epithelium
器官舒张时：
舒张状态
细胞层数减少;细胞变扁
1 浆液性细胞：
LM： 核： 形态；位置： 胞质：基部；顶部：
EM： 粗面内质网 高尔基复合体 膜包分泌颗粒
具有蛋白质分泌细胞的典型超微结构特点
浆液性细胞透射电镜图
2粘液性细胞：
LM： 核： 形态；位置： 胞质：基部；顶部：
EM： 粗面内质网 高尔基复合体 粘原颗粒
粘液性细胞
透射电镜模式图
3 腺泡的分类： 浆液性腺泡： 粘液性腺泡： 混合性腺泡：
—终末网
纤毛电镜模式图
—细胞膜 —细胞质 —微管
——基体
纤毛横切面模式图
细胞膜 细胞质
微管
纤毛电镜模式图
二侧面的特化结构：
1 紧密连接：
结构 功能
tight junction
2 中间连接：
intermediate junction
3 桥粒：
desmosome
4 缝隙连接：
gap junction
2功能：
支持 连接及物质交换
基膜结构模式图 半桥粒 基膜
网状纤维 和基质
透明板 基板 网板
基膜光镜下假复层纤毛柱状上皮
———基膜 ——结缔组织
2 质膜内褶
plasma membrane infolding：
上皮细胞基部细胞膜 折向胞质形成的皱褶 它扩大了基底部的面 积;利于水和离子的 转运，内褶附近的胞 质中有许多纵形排列 的线粒体。
第1章--组织学绪论
第1 章组织学绪论一、选择题〔一〕A 型题1．不属于人体基本组织的是A. 上皮组织B. 结缔组织C. 脂肪组织D. 肌组织E. 神经组织2．下列关于组织的构成的叙述哪项是正确的？A. 细胞和无定形基质B. 细胞和细胞外基质C. 细胞和组织液D. 基质和纤维E. 基质、纤维和组织液3．组织学中最常用的制片技术是A. 石蜡切片B. 火棉胶切片C. 冰冻切片D. 涂片E. 铺片4．涂片普通合用于A. 上皮组织B. 骨组织C. 肌组织D. 神经组织E. 血液5．冰冻切片A. 是将组织块冷冻后用普通切片机进行切片的技术B. 最常用于骨组织C. 主要应用于血液D. 能较好地保存酶的活性E. 能较好地保存微细结构6．用于光镜观察的石蜡切片厚度普通是A. 1~2 μmB. 5~10 μmC. 50~80 μmD. 5~10 nmE. 50~80 nm7．在还原剂存在时被硝酸银染成黑色的结构具有A. 嗜银性B. 亲银性C. 嗜酸性D. 嗜碱性E. 中性8．普通光镜所能分辨的两点之间的最小距离是A. 0.2 mmB. 0.2 μmC. 0.2 nmD. 2.0 μmE. 2.0 nm9．光镜观察时,低倍镜下结构清晰,但高倍镜下看不见或者看不清晰,其原因常是A. 虹彩未打开B. 对光不好C. 载玻片太厚D. 盖玻片太厚E. 切片放反,盖玻片朝下10．观察活细胞的形态和生长时应该用A. 荧光显微镜B. 普通光学显微镜C. 暗视野显微镜D. 倒置相差显微镜E. 电子显微镜11．荧光显微镜技术中常使用的光源为A. 紫外线B. 红外线C. 荧光D. 激光E. 电子束12．透射电镜的最大分辨率约为A. 0.2 mmB. 0.2 μmC. 0.2 nmD. 2.0 μmE. 2.0 nm13．透射电镜术中常用的染色剂是A. 苏木精和伊红B. 甲基绿和派若宁C. 柠檬酸铅和醋酸铀D. 溴乙啶和吖啶橙E. 锇酸和油红O14．对于透射电镜术来说哪一点是错误的？A. 取材要新鲜B. 组织块不需要固定C. 需制备超薄切片D. 用重金属染色E. 在荧光屏上观察15．扫描电镜术主要用于观察A. 组织和细胞内部的微细结构B. 器官和细胞表面的立体微细结构C. 细胞断裂面的微细结构D. 各种细胞器的微细结构E. 细胞膜内蛋白质颗粒的分布16 ．PAS 反应显示的是组织和细胞内的A. 蛋白质B. 脂类C. 多糖D. 核糖核酸E. 脱氧核糖核酸17．显示组织和细胞内特殊的多肽或者蛋白质时应选用A. H-E 染色法B. PAS 反应C. 孚尔根〔Feulgen〕反应D. 免疫组织化学术E. 原位杂交术18．应用放射自显影研究细胞DNA 合成与增殖时,注入体内的物质常是3H 标记的A. 胸腺嘧啶核苷B. 亮氨酸C.胆固醇D. 抗体E. 抗原19．在体外长期保存活细胞时应选用A. 冷冻干燥B. 福尔马林固定C. 干冰内保存D. 甘油内保存E. 液氮内保存20．细胞株是A. 原代培养的细胞B. 传代培养的细胞C. 长期培养的细胞D. 贴壁培养的细胞E. 用某种单细胞或者细胞克隆培养成的纯细胞群体〔二〕B 型题A. 嗜酸性B. 嗜碱性C. 异染性D. 嗜银性E. 亲银性21．组织结构与碱性染料亲和力强22．组织结构被伊红染成红色23．组织结构与银离子结合且直接使其还原成银颗粒而被染成黑色24．组织结构被甲苯胺蓝染成紫红色A. 石蜡切片B. 冰冻切片C. 涂片D. 铺片E. 磨片25．检测酶活性常用26．观察骨和牙等硬组织常用27．检查液体材料如血液、胸水等常用A. 组织化学术B. 原位杂交术C. 流式细胞术D. 细胞培养术E. 扫描电镜术28．检测细胞内的DNA 或者mRNA29．研究各种理化因子对活细胞的影响30．对细胞的生物化学和生物物理特性进行快速定量测定〔三〕X 型题31．与苏木精亲和力强的结构或者化学成份有A. 细胞核B. 细胞质C. 细胞膜D. DNAE. RNA32 ．PAS 反应中使用的试剂是A. 稀盐酸B. 过碘酸C. 甲醛D. 乙二醛E. 希夫〔Schiff〕试剂33．细胞质嗜碱性常是因为其中含有丰富的A. 粗面内质网B. 滑面内质网C. 游离核糖体D. 溶酶体E. 高尔基复合体34．酶组织化学的特点是A. 属于酶催化其特异性底物的反应B. 直接或者间接生成不溶性的有色终产物C. 可反映酶在细胞内的定位D. 反应产物越多,表示酶的含量越多E. 既可用于光镜研究,也可用于电镜研究35．透射电镜术中通常使用的固定剂有A. 甲醛B. 多聚甲醛C. 戊二醛D. 酒精E. 锇酸36．能够显示DNA 的方法或者试剂有A. PAS 反应B. 孚尔根〔Feulgen〕反应C. 吖啶橙D. 甲基绿E. 派若宁37．免疫组织化学术中可用于标记抗体的物质有A. 荧光物质〔如异硫氰酸荧光素FITC〕B. 酶〔如辣根过氧化物酶HRP〕C. 金属〔如胶体金〕D. 放射性核素〔如3H 和35S〕E. 硝酸银38．应用原位杂交术可显示A. 基因在染色体上的定位B. 细胞内特定的mRNAC. 蛋白质的含量D. 蛋白质的降解速率E. 基因的转录活性39．进行体外细胞培养时应注意A. 严防微生物污染B. 培养液的 pH 和渗透压C. 培养液含适宜的营养D. 温度E. O 2 和 CO 2 的浓度40．可用于形态学定量分析的仪器有A. 透射电子显微镜B. 激光共聚焦扫描显微镜C. 显微分光光度计D. 图象分析仪E. 流式细胞仪二、名词解释1．组织2 ．H-E 染色法3．组织化学术4 ．PAS 反应5．原位杂交术6．细胞培养术三、问答题1．在进行 H-E 染色之前,普通还需对所取材的新鲜组织做哪些处理？2．组织结构和细胞对不同染料的结合特性有哪几种？3．与光镜术比较,透射电镜技术的主要特点有哪些？4．说明免疫组织化学技术检测组织和细胞内蛋白质抗原的基本原理和关键技术.5．常用的形态学定量分析方法有哪几种？简述其原理.附：参考答案一、选择题〔一〕 A 型题1. C2. B3. A4. E5. D6. B7. A8. B9. E10. D11. A12. C13. C14. B15. B16. C17. D18. A19. E20. E〔二〕 B 型题21. B 22. A 23. E24. C25. B26. E27. C28. B29. D30. C〔三〕 X 型题31. ADE 32. BE 33. AC34. ABCE 35. BCE 36. BCD37. ABC 38. ABE 39. ABCDE 40. BCDE二、名词解释1．组织是形态和功能相同或者相似的细胞组成的细胞群体,细胞间可有或者多或者少的细胞间质 〔或者称细胞外基质〕 .根据形态结构和功能,人体的组织可分为上皮组织、 结缔组织、 肌组织 和神经组织4 种基本类型. 由这些组织按一定的方式有机组合形成器官.2 ．H-E 染色法是组织学中最常用的染色方法.染色时使用苏木精和伊红；苏木精是碱性 染料,将细胞核染成蓝紫色；伊红是酸性染料,将细胞质和细胞外基质中的胶原纤维染成淡红 色.3．组织化学术是应用化学反应、物理反应或者免疫学反应等原理,在组织、细胞原位检测 组织或者细胞内化学成份,并对其进行定位、定量与相关功能研究的实验技术.凡是组织、 细胞内 的糖类、脂类、蛋白质、酶类和核酸等都可与相应试剂反应,最后形成有色反应终产物或者电子 致密物,应用光镜或者电镜进行观察.广义的组织化学术还包括免疫组织化学术、原位杂交术等.4 ．PAS 反应即过碘酸-Schiff 反应,是显示多糖的一种组织化学反应.其基本原理是过碘酸 将糖份子中的乙二醇基氧化为乙二醛基,后者再与 Schiff 试剂中的亚硫酸品红反应,形成紫红色不溶性反应产物,沉积于多糖存在的部位.根据反应产物的多少或者颜色的深浅〔或者光密度〕 可 对多糖进行半定量.5．原位杂交术是一种在组织、细胞原位进行核酸份子杂交的技术,用来研究某种基因在 染色体上的定位,或者编码某种蛋白质的DNA 或者 mRNA 在细胞内的表达.其原理是两条单核苷 酸链通过碱基互补原则密切结合,形成稳定的杂交体.根据这一原理,应用一条碱基序列已知 的、 并经特定标记 〔地高辛,生物素,放射性核素等〕 的核苷酸链作为探针,与细胞内待检 DNA 片段或者 mRNA 进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检核酸的分布和含量.6．细胞培养术是指利用一定的方法分离和纯化组织中某种细胞,制成单细胞悬液,在适当 条件下进行体外培养生长的技术.细胞培养必须在无菌环境下进行,培养液要有适当的营养物 质、生长因子、 pH 、渗透压、 O 2 和 CO 2 浓度、温度等.细胞培养术不仅可直接研究细胞的行为,如生长、 分化、 代谢、 形态和功能变化,还可研究各种理化因子〔如激素、 生长因子、 药物、 毒物、辐射等〕对细胞的影响, 同时也是现代份子生物学和重组DNA 技术的关键环节.三、问答题1．①要对取材的新鲜组织进行固定,即使用一定的固定剂使蛋白质凝固, 以防止组织自溶,保存组织的原有结构.②要将组织块包埋在有一定硬度的物质内, 以便将软的组织块切成薄片. 组织学中常用石蜡包埋.但在石蜡包埋前,需用酒精等使组织块脱水,再用二甲苯置换组织块中 的酒精〔透明〕 .③用切片机将组织蜡块切成适当厚薄的组织切片,使光线可以透过.最后进行 H-E 染色,使不同的组织、细胞结构具有不同的颜色,便于光镜观察.2．组织结构对不同染料的结合特性有：①与碱性染料亲和力强、易被染色的称嗜碱性. ②与酸性染料亲和力强、易被染色的称嗜酸性.③与酸性和碱性染料的亲和力都不强的称中性. ④某些结构成份如肥大细胞的胞质颗粒,当用蓝色染料甲苯胺蓝染色时呈紫红色,称为异染性. ⑤当用硝酸银染色时,有些组织结构可直接使银离子还原为银颗粒而呈黑色,称为亲银性；而有 些组织结构需加入银盐和还原剂才干显色,称为嗜银性.3．与光镜术比较,透射电镜术的特点有：①以电子发射器发射的电子束代替光线.②以磁 场代替玻璃透镜.③组织取材需快,组织块需新鲜,常用双醛〔多聚甲醛和戊二醛〕固定,并经锇 酸后固定.④由于电子束穿透力弱,组织块需切成超薄切片〔50~80 nm 〕.⑤用重金属盐〔柠檬 酸铅和醋酸铀〕代替普##学染料进行电子染色.⑥在荧光屏或者照片上观察结果, 以电子密度的高 低分辨各种结构.4．⑴免疫组织化学的基本原理是应用带有可见标记的特异性抗原-抗体反应,检测组织、 细胞中的抗原物质.⑵其关键技术是： ①抗体的制备： 分离纯化人或者动物的某种蛋白质,作为抗原注入另一种 动物体内,使该动物产生相应的多克隆抗体；或者制备单克隆抗体；②抗体的标记：常用的标记物有荧光染料如异硫氰酸荧光素〔FITC〕、酶类如辣根过氧化物酶〔HRP〕、重金属如胶体金等；④组织或者细胞制备：需保存尽量多的组织抗原与其抗原性..5．常用的形态学定量分析方法有：①显微分光光度测量术,以各种物质份子对光的选择性吸收为基础,在显微镜下对样品中的化学物质进行定量分析.②形态计量术,运用数学和统计学原理,对组织和细胞进行二维和三维的形态学测量；其中三维立体结构的研究又称体视学；目前多应用图象分析仪进行形态计量研究,方便、快速、准确.③流式细胞术,其原理是分离被检细胞,制成悬液,并进行荧光染色或者标记,然后使单细胞液流快速通过流式细胞仪的激光照射分析区,被检细胞产生不同的荧光信号并转变为电脉冲,分别输入计算机内贮存, 同时显示于示波器屏幕上,即可获得该细胞群体中不同类型细胞的有关数据.。
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第一章 绪论
1
组织学的研究内容和意义
2
组织学研究发展简史
3
组织学的学习方法
4
组织学常用的研究技术方法
组织学 （histology）
？
组织学 （histology）
研究正常人体微细
结构与其功能关系的 学科。
组织学研究内容
细胞
机体形态结构与功能的基本单位
组织
由形态结构相似、生理功能相近 的细胞和细胞间质有机组合而成
结缔组织
上皮组织
基本 组织
肌组织
神经组织
器官
由不同类型基本组织有机组合,具 有一定形态结构和特定生理功能
系统
由数个形态结构不同而生理功能相似的 器官有机组合,并完成某一连续生理功能
免疫系统 循文环字文系字统
文字 文字
消化系统
呼吸系统
脂肪细胞苏丹Ⅲ染色
脂肪细胞的石蜡切片（H-E染色）
冰冻切片法
取材、冷冻、切片、染色、封固
电子显微镜技术 electron microscope
分辨率：0.1~0.2nm 放大倍数：百万倍
学习方法
1
形态与功能的关系
2
动态与静态的关系
3
平面与立体的关系
4
理论与实践的关系
苏木精-伊红染色 （H-E染色）
染料名称
苏木精 （hematoxylin） 伊红(eosin)
酸碱性 碱性
酸性
易染色部位 细胞核、核糖体
细胞质、细胞外基质
颜色 蓝色
粉红色
嗜碱性 对碱性染料产生较强亲和力 嗜酸性 对酸性染料产生较强亲和力 中性 对酸性染料和碱性染料均产生较弱亲和力
特殊染色
银染色
普通光学显微镜技术 light microscope
切片法
石蜡切片法 冰冻切片法
非切片法
涂片 铺片 磨片
非切片法
血涂片
肠系膜铺片 骨磨片
切片法
石蜡切片的主要步骤
取材 新鲜组织 厚度不超过5mm为宜 固定 固定剂：甲醛、乙醇、丙酮 脱水 乙醇：70%、80%、95%、95%、100%、100% 包埋 包埋剂：石蜡、火胶棉、树脂 切片 5~10 µm的薄片 脱蜡 将切片中的石蜡脱去，便于染色 染色 苏木精-伊红染色 （H-E染色） 固封 中性树胶，便于观察和保存
神经系统
泌尿系统
感觉器官
文字
内分泌系统
组织学常用的技术方法
1
普通光学显微镜技术
2
特殊光学显微镜技术
3
电子显微镜技术
4
免疫组织化学技术
5
放射自普通光学显微镜技术 light microscope
分辨率： 0.2 µm 放大倍数：1000~1500 倍
切片法 切片法
切片法