外周血
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外周血染色体培养基
用途:染色体培养是染色体病诊断的必要手段。用外周血作短期培养是常规染色体分析的基本方法。迄今已发现的各种遗传病不下数千种,其中属于染色体异常所致者已达数百种,,已发现的先天性畸形、智力和功能发育不全、流产、死胎、不育以及某些恶性肿瘤的生成与发展都与染色体有关。因此研究染色体的情况显得非常重要。本公司生产的外周血染色体培养基用于细胞培养,是细胞遗传、免疫、放射效应、药物致畸等研究必备的培养基。
检测原理:将肝素抗凝全血或富含白细胞的血浆,接种到含有致有丝分裂原(常用者为植物血凝素,PHA)的细胞培养基中,PHA可刺激细胞DNA的复制,促进有丝分裂。经一段时间的培养后,加入秋水素碱或秋水仙胺(或长春花碱),以抑制纺锤体的形成和着丝粒分离,使细胞停止于分裂中期。作用一定时间后,收集细胞;低渗处理,以溶去红细胞并使细胞膨胀,使染色体分散;再经固定、制片、染色,显微镜下分析;必要时再显微摄影、放大、作细致的染色体计数、配对和结构观察。
自身优势:1分裂指数高(每个涂片能找到可供观察的分裂相不少于40个)2染色体形态清晰3质量稳定4配套有染色体核型分析及样本处理所必需的产品(1秋水仙素2低渗液3胰蛋白酶4吉姆萨染液5肝素),经国内众多细胞遗传室的应用,反馈信息良好。
使用中注意事项
1加入秋水仙素之前的操作必须保证严格无菌,如污染了杂菌,细胞培养即失败。但加入了秋水仙素以后的步骤,对无菌不作严格要求。因为加了秋水仙素以后再培养4-6小时即可,在这么短的时间内细菌不会大量生长以致于影响到染色体的观察。
2.加秋水仙素后继续处理2-4小时比较合适,如时间太短,标本中可分析的分裂象太少;如时间太长,分裂象虽多,但染色体多半缩得很短,着丝粒开始分离,不利于各染色体的鉴别。
3.收集细胞和低渗处理时,离心速度不宜过高,以免膨胀的细胞受压、破裂,染色体变形和不易打散。
4染色体分散好坏,加固定液固定是关键。一般应换固定液固定三次,中间可吸取少量在显微镜下检查以确定是否满意。
5.如要远距离运送标本,可将全血用无菌手续加到培养基中,保温37℃或常温下运送。如暂时不送亦可置冰箱中保存,但不宜超过12小时,收到标本后应立即置37℃孵育。
外周血细胞染色体图片
显微镜下观察到的染色体
正常女性染色体图